Summary
Nanopartiklar, såsom halvledare kvantprickar (QDs) kan användas för att skapa fotoaktiverbara medel för anti-mikrobiella medel mot cancer tillämpningar. Denna teknik visar hur vatten-lösa kadmium (CdTe) QDs, konjugat dem till ett antibiotikum, och utföra en bakteriell inhiberingsanalys baserad på tillväxtkurvor och platträkning.
Abstract
Kvantprickar (QDs) är fluorescerande halvledare nanopartiklar med storleksberoende emissionsspektra som kan exciteras av ett brett urval av våglängder. QDs har lockat ett stort intresse för avbildning, diagnostik och terapi på grund av sin ljusa, stabil fluorescens 1,2 3,4,5. QDs kan konjugeras till en mängd olika biologiskt aktiva molekyler för att binda till bakterie-och däggdjursceller 6.
QDs görs också undersökts i stor utsträckning som cytotoxiska medel för riktad döda bakterier. Uppkomsten av multiresistenta bakteriestammar har snabbt blivit en allmän hälsa kris, särskilt i fallet med gramnegativa patogener 7. På grund av den välkända antimikrobiella effekten av vissa nanomaterial, särskilt Ag, det finns hundratals studier som undersöker toxiciteten hos nanopartiklar för bakterier 8. Bakteriella studier har utförts med andra typer av halvledare nanopartiklar också, especially TiO 2 9,10-11, men även ZnO 12 och andra, inklusive CuO 13. Vissa jämförelser av bakteriestammar har utförts i dessa studier, vanligen jämföra en gramnegativ stam med en grampositiv. Med alla dessa partiklar, är mekanismerna i toxicitet hänföras till oxidation: antingen photogeneration av reaktiva syrespecies (ROS) genom partiklarna eller direkt frisättning av metalljoner som kan orsaka oxidativ toxicitet. Även med dessa material, resultat från olika studier varierar kraftigt. I några studier Gram positiva testet stammen är enligt uppgift mer känslig än den gramnegativa 10, i andra är det tvärtom 14. Dessa studier har blivit väl omdömet 15.
I alla nanopartiklar studier kan partikel sammansättning, storlek, ytkemi, prov åldrande / nedbrytning och våglängd, makt och varaktighet ljusexponeringen alla dramatiskt påverka resultaten. Dessutom synthesis biprodukter och lösningsmedel måste anses 16 17. High-throughput screening-tekniker som behövs för att kunna utveckla nya effektiva nanomedicin medel.
CdTe QDs ha antimikrobiella effekter enbart 18 eller i kombination med antibiotika. I en tidigare studie visade vi att koppling av antibiotika för att CdTe kan öka toxiciteten för bakterier men minska toxicitet för däggdjursceller, på grund av minskad produktion av reaktiva syreradikaler från konjugat 19. Även om det är osannolikt att kadmium-innehållande föreningar kommer att godkännas för användning i människor, kan sådana beredningar användas för desinfektion av ytor eller sterilisering av vatten.
I detta protokoll, ger vi en enkel metod för solubilisering CdTe QDs med merkaptopropionsyra (MPA). De QDs är klar att använda inom en timme. Vi också visa att kopplas till ett antimikrobiellt medel.
Den andra delen av protokolletvisar en 96-brunnars bakteriell hämning analys med användning av de konjugerade och okonjugerade QDs. Den optiska densiteten avläses under många timmar, vilket medger effekterna av QD addition och ljusexponering som skall utvärderas omedelbart samt efter en återhämtningsperiod. Vi illustrerar också en mikroorganismer för att kvantifiera bakteriell överlevnad.
Protocol
1. QD Solubilisering
Detta är en metod lämplig för CdTe. Liknande metoder kan användas med andra typer av QDs såsom InP / ZnS 20 och CdSe / ZnS 21.
- Framställ en lösning av CdTe QDs i toluen vid 15 pM (optisk densitet = 2,5 i det första excitontoppen).
- Överför 200 pl detta bestånd i en glasflaska. Använd inte plast!
- Tillsätt 800 pl toluen, 1 ml 200 mM boratbuffert (pH 9) och 2 | il av 11,5 M merkaptopropionsyra (MPA).
- Förslut flaskan och skaka den kraftigt i 30-60 sekunder.
- De vattenhaltiga och organiska lösningsmedel faserna separerar spontant. Den vattenhaltiga fasen blir färgen på QDs. För att undvika toluenskiktet, ta bort den och kasta den. Sedan överföra den vattenhaltiga fasen till ett rent kärl.
- Rena de solubiliserade QDs genom tvättning / filtrering fyra gånger med hjälp av en 500 pl, 10000 molekylviktgräns centrifug filter. Filtren ska varacentrifugerades vid 3000 xg under 13 minuter. Under åtminstone de sista två tvättningar, tvätta med den önskade slutliga bufferten.
- Efter den slutliga tvätten, suspendera de tvättade QDs i 50 mM boratbuffert vid det önskade pH och förvara vid 4 ° C. De kommer att vara stabil under 1-2 veckor.
- Mät absorbans och emissionsspektra att uppskatta koncentrationen baserat på publicerade formler 22.
Representativa resultat: Figur 1 visar en bild av CdTe QDs under UV-lampan belysning, och emissionsspektra före och efter vatten solubilisering och visade försumbar ändring från locket utbyte. De storlek värdena är kärndiametern mätt med elektronmikroskopi.
2. QD Konjugering till antibiotika
Denna del av protokollet är tillämpligt på alla negativt laddade vatten-solubiliserat nanopartiklar, inklusive de flesta kommersiella QDs, partiklar metall, och mer 19.
- Vilken molekyl som helst kommer att fungera som eithER själv-monterar till de negativt laddade solubiliserade QDs, eller som har en reaktiv grupp som kan vara konjugerade, såsom en primär amin. I detta exempel använder vi polymyxin B (PMB), som är positivt laddad och själv monterar utan behov för konjugering reagenser. Upplösa PMB i H2O vid 60 | iM. (Om den antibiotiska som väljes är ej löslig i H2O, löses i DMSO eller etanol vid en koncentration av 0,1-1 mM). Detta kommer att bli en 10x lösning (i H 2 O) eller en 100x lösning (i lösningsmedel).
- Beräkna hur mycket QD lösning du behöver för de bakteriella toxicitet experiment. För en 96-brunnsplatta med 0,3 ml per brunn i kvadruplikat, är 0,5 ml av 200 nM konjugat som behövs. Framställa två rör innehållande 100 | il av 1 | iM kvantprickar i 50 mM boratbuffert.
- Om koppling till en primär amin, framställa en 19 mg / ml (100 mM) lösning av 1-etyl-3-[3-dimetylaminopropyl] karbodiimid-hydroklorid (EDC) i H2O EDC i lösning är inte stabil, Använda omedelbart och kasta resten.
- Tillsätt 50 pl av den 10x antibiotikalösning (i H2O) eller 5 ^ il av 100x lösning (i lösningsmedel) till konjugatet röret. För PMB: CdTe konjugering vid molförhållandet 30:1, tillsätt 50 | il av 60 | iM PMB. Tillsätt H2O eller lösningsmedel till QD endast kontrollrör.
- Om det behövs, tillsätt 1 pl av EDC stamlösning till konjugatet röret.
- Ta upp konjugatet volym till 0,5 ml med lämplig buffert (boratbuffert eller PBS och inga amin-innehållande buffertar såsom tris, eftersom de kommer att inhibera EDC).
- Sköld rör från ljus med aluminiumfolie och lägg på en nutator eller rocker för 1 timme. Om aggregering inträffar, upprepas konjugering med lägre koncentrationer av antibiotikumet. Titrera koncentration uppåt tills partiklarna inte aggregat.
- Tvätta konjugaten genom att passera genom ett lämpligt filter. 10 tusen molekylviktsgräns fungerar för de flesta antibiotika, men inte för proteiner eller antikroppar. Beroende på molekylen, kan olika metoder användas för att uppskatta antalet av antibiotiska molekyler per QD: absorbans eller fluorescens-spektroskopi, gelelektrofores, eller Fourier-transform infraröd spektroskopi (FTIR).
Representativa resultat. I detta exempel är PMB konjugering kännetecknas av förändringar i QD emissionsspektrum. Figur 2 visar spektra för CdTe QDs med PMB tillsats.
3. Framställning av bakterier för 96-brunn-skärm; Bestämning av antibiotikum IC 50
Detta gäller för nästan vilken bakteriestam odlas i lämpligt medium 18. Den exakta längden av tid av registreringarna bör fortsätta beror på bakteriell tillväxt. I vårt exempel använder vi Escherichia coli odlas i lysogeni buljong (LB) medium.
- För att välja lämpliga QD konjugatkoncentrationer är det viktigt att känna tillIC 50 av antibiotikumet som skall konjugeras, och om de QDs enbart är toxiska. Detta bör påbörjas 2 dagar före konjugeringen experimentet. På kvällen, utsäde 10 ml för bakterietillväxt medium från en ny koloni, med rätt steril och biosäkerhet teknik.
- Nästa dag, 1-2 timmar före experimentet, fylla var och en av brunnarna i en klar-bottnad 96-brunnsplatta med en nästan maximal mängd tillväxtmedium. Med hjälp av en multikanalpipett, utsäde varje brunn med 1-50 il bakteriekultur (koncentrationen kommer att bero på hur snabbt den speciella stam växer och kommer att behöva kalibreras genom ditt laboratorium).
- Sätt plåten på plattan läsaren och ställ in den att läsa var 10 minuter för 2 timmar vid en bestämd våglängd (vanligtvis 600 nm). Övervaka plattan så att bakterierna inte växer alltför tät för snabbt.
- När cellerna allt når OD = 0,1-0,15, ta bort plattan från plattan läsaren och stoppa inspelningen.
- Lägg läkemedel ensam och QDs ensam påolika koncentrationer i åtminstone triplikat. Använda en sida av plattan som en "mörk" kontroll och en halv som skall belysas. Ett förslag till layout ges i figur 3. Halterna bör spänner över ett brett nog för sortiment till att omfatta en koncentration som hämmar bakterierna mycket lite, och en som dödar dem alla.
- Skärma "mörkt" sidan av plattan med aluminiumfolie. Exponera den andra sidan till en lampa vid den önskade våglängden. Vi använder en anpassad 96-brunnars, 440-nm lampa tillverkad av 2,4 mW lysdioder (figur 4) och bestråla under 30-60 min. De svarta plattor med tydliga bottnar kan skydda de oexponerade bakterier från ströljus. En tom kolumn kan även användas mellan exponerade och FN-exponerad sidor.
- Efter ljusexponering, placera plattan i plattläsare och registrera OD 600 var 10: e minut under 5-12 timmar beroende på tillväxthastigheten. Hålla temperaturen <32 ° C om det är möjligt att undvika uttorkning av kulturerna.
- Rita tillväxtkurvornavid en vald tidpunkt mot log [koncentrationen] och bestämma IC50 av antibiotikumet med Hill-ekvationen:
där H är Hill-koefficienten, y är högst den högsta punkten av tillväxt (idealt på en platå), och y min är den noll-punkten, även helst på en platå. Det är osannolikt att QDs enbart visar mycket toxicitet för cellerna vid de använda koncentrationerna, så ett värde kommer inte bestämmas.
Representativa resultat. I slutet av inspelningen perioden kommer klara brunnar visar komplett celldöd, och en gradient av celltäthet ska synas längs ökande koncentrationer av läkemedlet. Bakterierna skall uppvisa S-formade tillväxtkurvor (figur 5 A), platsen för den högsta platå kommer att variera mycket från stam till stam och också beror på temperaturen. En given tidpunkt kan varavalts som representant och de värden som ritas mot log [antibiotika] för att ge IC 50 (Figur 5 B). För att utvärdera QD toxicitet, överlevnad jämfört Log [QD] kan också ritas, men för att uppnå betydande bakteriedödande med QDs enbart är sällsynt (Figur 5 C).
4. Framställning av bakterier för 96-brunn-skärm med antibiotisk / QDs
- Dagen före försöket, utsäde 10 ml av kultur från en ny koloni i lämplig rikt medium, med ett korrekt steril och biosäkerhet teknik. Den QD-antibiotika konjugatet bör vara beredda på denna dag, om det inte är mycket instabil.
- 1-2 timmar före experimentet, fylla var och en av brunnarna i en klar-bottnad 96-brunnsplatta med en nästan maximal mängd tillväxtmedium. Med hjälp av en multikanalpipett, utsäde varje brunn med 1-50 pl bakteriekultur.
- Sätt plåten på plattan läsaren och ställ in den att läsa var 10 minuter för 2 timmar vid samma våglängd som i del 3.
- När cellerna allt når OD = 0,1-0,15, ta bort plattan från plattan läsaren och stoppa inspelningen.
- Tillsätt QD konjugat vid olika koncentrationer i åtminstone fyra exemplar. Använda en sida av plattan som en "mörk" kontroll och en halv som skall belysas. Ett förslag till layout ges i figur 6. En bakterie-bara kontrollremsan alltid bör inkluderas i fall problem med kulturen, temperatur, etc. påverkar tillväxtbetingelser. En enda remsa av läkemedlet endast och QD endast bör också inkluderas för att garantera att de matchar kontrollplattan gjorts tidigare. Resten av brunnarna är avsedda för konjugat för att möjliggöra god statistik.
- Skärma "mörkt" sidan av plattan med aluminiumfolie. Exponera den andra sidan till en lampa vid den önskade våglängden.
- Efter ljusexponering, placera plattan i plattläsare och registrera OD 600 var 10: e minut under 5-12 timmar. Håll temperaturen <32 ° C om möjligt att undvika drying av kulturerna.
Representativa resultat. Kombinationen av QDs och antibiotiska kan vara mindre toxiska än enbart antibiotika; lika toxiska, eller mer toxiskt. Detta kan kvantifieras med hjälp av tillväxtkurvorna och IC50 mätningar. Figur 7 visar ett exempel på konjugat som lika toxiska såsom antibiotikum enbart, och ett exempel på konjugat som är mer toxiska.
5. Plate Count
- Välja en eller flera brunnar hos den behandlade 96-brunnars platta som skall användas för seriespädningar och koloniräkning.
- Göra en serieutspädning av var och en av de valda bakteriella prov med PBS eller saltlösning (0,9% NaCl). Överföra 20 | il av den bakteriella lösning och späd med 180 | il koksaltlösning, ändrar pipettspetsen, blanda och överföra 20 | il av utspädda bakteriella lösning till 180 | il koksaltlösning. Upprepa 6 gånger.
- Tag 10 pl från varje spädning och platta på en lämplig fasta medier platta. Alla 8 koncentrationer av ett prov kan vara placerades på en 10 cm runt petriskål, men rektangulära rätter är att föredra eftersom det är lättare att rada upp saker.
- Låt det torka på bänken i 15 minuter. därefter inkubera vid lämplig temperatur för era bakterier i 16 timmar.
- Räkna kolonier och beräkna kolonibildande enheter (CFU) enligt (# kolonier x spädningsfaktor) / volym pläterade = CFU / ml.
Figur 8 visar en platta exempel CFU.
6. Representativa resultat
Figur 1. CdTe QDs. (A) Åtta beredningar av CdTe QDs belyses med en UV-stav (365 nm). (B) Absorbans-och emissionsspektra hos fem utvalda storlekar före och efter vatten-solubilisering. De streckade linjerna är spektra i toluen, de heldragna linjerna är i vatten.
files/ftp_upload/3969/3969fig2.jpg "/>
Figur 2. Spektralanalys och gelanalys av QD-PMB-konjugat. Orange-emitterande CdTe QDs användes för detta exempel, effekterna på andra typer av QDs kommer att behöva utvärderas för varje experiment. (A) Normal absorbans (grå linje) och emissionsspektra (svart linje) av QDs före konjugering av PMB och emissionen (streckad linje) efter tillsats av 160 molekvivalenter PMB. (B) Förhållande mellan förhållandet av PMB och QD emissionsintensiteten (kvadrater) och toppvåglängden plats (trianglar).
Figur 3. Föreslagna plattan layout för kontroll tillväxt plåt. Ett brett spektrum av PMB och QD koncentrationer representeras. Hälften av plattan bestrålas (markerat blått), och en identisk halv skyddas från ljus. Klicka härför att se större bild.
Figur 4. Custom 96-LED lampa för en enhetlig skylt bestrålning, visar utseendet av och på. En typisk bärbar UV-lampa kan också användas, men kommer inte att täcka hela plattan likformigt.
Figur 5. Exempel resultat för kontroll epifysplattan. (A) Representativa bakteriella tillväxtkurvor med olika läkemedelskoncentrationer, från 0 slutföra celldöd. De öppna symboler är PMB endast koncentrationer ges, de fasta symbolerna CdTe-PMB utan bestrålning och den halvfyllda symboler CdTe-PMB med strålning. Bestrålning hade ingen effekt på de PMB-bara prover, så dessa kurvor var utelämnade för tydlighets skull. Alla PMB-CdTe konjugat är 30:1 PMB: QD nyckeltal. (B) Tomter värderingar tillväxtkurvan på 200 minuter mot log [PMB] och passar till Ekv. (1). Att fortsROL för effekterna av ljus, är en kurva görs med antibiotika endast 30 minuter av ljus exponering. (C) Bakteriell överlevnad vid 200 min mot QD koncentration, CdTe QDs. Viss toxicitet ses med ljus exponering, men för lite för att bestämma ett IC 50 värde. Klicka här för att visa en större bild .
Figur 6. Förslag på konjugat provplattan. Den blå-markerade halvan av plattan skall utsättas för ljus och unhighlighted halv skyddas. Klicka här för att visa en större bild .
Figur 7. Exempel resultat konjugat testplattan. Tillväxtkurva värden vid 200 min var PLotted och passform ekvation. (1). (A) CdTe-PMB konjugat visar ökad toxicitet under PMB ensam. (B) Guld nanopartiklar Au-PMB konjugat inte visar någon ökad toxicitet under PMB ensam.
Figur 8. Exempel på en CFU platta. E. coli sådda i en 96-brunnars platta behandlades med QD-PMB med eller utan bestrålning under 30 min. inkuberades sedan vid 32 ° C under 4 timmar. Seriespädningar av varje bakteriell prov gjordes med saltlösning och 10 pl av 100 X till 10 X 7 spädningar ströks ut på agarplattor. Plattorna inkuberades vid 37 ° C och kolonierna räknades efter 16 timmar. Plattan visar utspädningarna längs raderna som anges, kolumnerna är: (A) 0,06 M PMB + 2 nM CdTe, (B) 0,12 M PMB + 4 nM CdTe (C) 0,2 M PMB + 6,7 nM CdTe, (D) 0,06 iM PMB + 2 nM CdTe bestrålas, (E) 0,12 M PMB + 4 nM CdTe bestrålas, (F) 0,2 M PMB + 6,7 nM CdTe stråldiated.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Nanopartiklar utgör en lovande metod för skapandet av nya antimikrobiella medel. Tillväxtkurva analys är ett sätt att övervaka bakteriecell densitet som skiljer aktivt växande celler från tillväxt-inhiberade celler. När den kombineras med platträkningar möjliggör det för en grundlig analys av antibiotika potentialen hos en konjugat. Den 96-brunnsformat tillåter relativt hög genomströmning variationer av koncentrationen och andra tillstånd såsom ljusexponering, den senare är avgörande för ljus-aktiverade medel såsom kvantprickar. Många variationer på detta grundläggande synsätt är möjliga, vilket gör det en mångsidig metod för nanotoxicology.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Inga intressekonflikter deklareras.
Acknowledgments
Detta arbete har finansierats av NSERC Individual Discovery-programmet, NSERC / CIHR Collaborative Health Research Program (CHRP) och NSERC CREATE kanadensiska Astrobiologi Training Program (CATP).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Borate Buffer Component #1 | Fisher | Boric acid A-74-1 | |
| Borate Buffer Component #2 | Sigma-Aldrich | Sodium Tetraborate B9876 | |
| MPA | Sigma-Aldrich | M5801 | |
| Vivaspin 500 | GE Healthcare | 28-9322 | Various MWCO available |
| Glass vials | Fisher | 03-338C | |
| EDC | Sigma-Aldrich | E6383 | |
| Polymyxin B | Sigma-Aldrich | P1004 | |
| Bacterial growth medium (LB) Component #1 | Fisher | NaCl S271 | |
| Bacterial growth medium (LB) Component #2 | BD | Tryptone 211705 | |
| Bacterial growth medium (LB) Component #3 | BD | Yeast Extract 211929 | |
| Lamp for light exposure | Custom | ||
| Clear-bottom 96-well plates | Fisher | 07-200-567 or 07-200-730 | |
| Fluorescence spectrometer | Molecular Devices | ||
| Absorbance plate reader | Molecular Devices | ||
| BactoAgar for solid media | Bioshop | AGR001.1 | |
| Petri dishes round | Fisher | 08-75-12 | |
| Petri dishes rectangular | Fisher | 08-757-11A |
References
- Michalet, X. Quantum dots for live cells, in vivo imaging, and diagnostics. Science. 307, 538-544 (2005).
- Jamieson, T. Biological applications of quantum dots. Biomaterials. 28, 4717-4732 (2007).
- Asokan, S. The use of heat transfer fluids in the synthesis of high-quality CdSe quantum dots, core/shell quantum dots, and quantum rods. Nanotechnology. 16, 2000-2011 (2005).
- Chan, W. C. W. Luminescent quantum dots for multiplexed biological detection and imaging. Curr. Opin. Biotechnol. 13, 40-46 (2002).
- Chan, W. C. W., Nie, S. M. Quantum dot bioconjugates for ultrasensitive nonisotopic detection. Science. 281, 2016-2018 (1998).
- Biju, V., Itoh, T., Ishikawa, M. Delivering quantum dots to cells: bioconjugated quantum dots for targeted and nonspecific extracellular and intracellular imaging. Chem. Soc. Rev. 39, 3031-3056 (2010).
- Boucher, H. W. Bad bugs, no drugs: no ESKAPE! An update from the Infectious Diseases Society of America. Clin. Infect. Dis. 48, 1-12 (2009).
- Morones, J. R. The bactericidal effect of silver nanoparticles. Nanotechnology. 16, 2346-2353 (2005).
- Mitoraj, D. Visible light inactivation of bacteria and fungi by modified titanium dioxide. Photochemical & Photobiological Sciences. 6, 642-648 (2007).
- Fu, G., Vary, P. S., Lin, C. T. Anatase TiO2 nanocomposites for antimicrobial coatings. J. Phys. Chem. B. 109, 8889-8898 (2005).
- Chung, C. J., Lin, H. I., Tsou, H. K., Shi, Z. Y., He, J. L. An antimicrobial TiO2 coating for reducing hospital-acquired infection. J. Biomed. Mater. Res. B. Appl. Biomater. 85, 220-224 (2008).
- Nair, S. Role of size scale of ZnO nanoparticles and microparticles on toxicity toward bacteria and osteoblast cancer cells. J. Mater. Sci. Mater. Med. 20, Suppl . 1. S235-S241 (2009).
- Heinlaan, M., Ivask, A., Blinova, I., Dubourguier, H. C., Kahru, A. Toxicity of nanosized and bulk ZnO, CuO and TiO2 to bacteria Vibrio fischeri and crustaceans Daphnia magna and Thamnocephalus platyurus. Chemosphere. 71, 1308-1316 (2008).
- Rincon, A. G., Pulgarin, C. Use of coaxial photocatalytic reactor (CAPHORE) in the TiO2 photo-assisted treatment of mixed Escherichia coli and Bacillus subtilis and the bacterial community present in wastewater. Catal. Today. 101, 331-344 (2005).
- Neal, A. L. What can be inferred from bacterium-nanoparticle interactions about the potential consequences of environmental exposure to nanoparticles. Ecotoxicology. 17, 362-371 (2008).
- Kovochich, M. Comparative toxicity of C60 aggregates toward mammalian cells: role of tetrahydrofuran (THF) decomposition. Environ. Sci. Technol. 43, 6378-6384 (2009).
- Hoshino, A. Physicochemical properties and cellular toxicity of nanocrystal quantum dots depend on their surface modification. Nano Letters. 4, 2163-2169 (2004).
- Dumas, E. M., Ozenne, V., Mielke, R. E., Nadeau, J. L. Toxicity of CdTe Quantum Dots in Bacterial Strains. IEEE Trans. NanoBiosci. 8, 58-64 (2009).
- Park, S., Chibli, H., Wong, J., Nadeau, J. L. Antimicrobial activity and cellular toxicity of nanoparticle-polymyxin B conjugates. Nanotechnology. 22, 185101 (2011).
- Cooper, D. R., Dimitrijevic, N. M., Nadeau, J. L. Photosensitization of CdSe/ZnS QDs and reliability of assays for reactive oxygen species production. Nanoscale. 2, 114-121 (2010).
- Pong, B. K., Trout, B. L., Lee, J. Y. Modified ligand-exchange for efficient solubilization of CdSe/ZnS quantum dots in water: A procedure guided by computational studies. Langmuir. 24, 5270-5276 (2008).
- Narayanaswamy, A., Feiner, L. F., Meijerink, A., Zaag, P. J. vander The effect of temperature and dot size on the spectral properties of colloidal InP/ZnS core-shell quantum dots. Acs Nano. 3, 2539-2546 (2009).
