Avaliação Funcional da motilidade intestinal e inflamação da parede do intestino em Roedores: Análises em um modelo padronizado de Manipulação Intestinal
Summary
Íleo pós-operatório (POI) é uma complicação da cirurgia abdominal levando a um aumento da morbidade e permanência hospitalar prolongada. Porque estratégias profiláticas e terapêuticas faltam pesquisa intensificada é necessário. Por isso, estabeleceu um modelo de mouse padronizada e viável para o entendimento da fisiopatologia POI e estudar potenciais opções terapêuticas.
Abstract
Inflamação do tracto gastrointestinal é um motivo comum para uma grande variedade de doenças humanas. Modelos de pesquisa com animais são fundamentais na investigação do complexo celular e molecular da patologia intestinal. Embora a túnica mucosa é frequentemente o órgão de interesse em muitas doenças inflamatórias, trabalhos recentes demonstraram que a muscularis externa (ME) também é um órgão altamente imunocompetente que abriga uma densa rede de imunócitos residentes. 1,2 Estes trabalhos foram realizados dentro do padronizada modelo de manipulação intestinal (GI) que conduz à inflamação da parede do intestino, principalmente limitada à ME. Clinicamente isto leva a inflamação dismotilidade intestinal prolongada, conhecido como íleo pós-operatório (POI) que é uma complicação frequente e inevitável após cirurgia abdominal. 3 A inflamação é caracterizada pela libertação de mediadores pró-inflamatórios tais como IL-6, 4 ou IL-1β neurotransmissores ou inibitória como Nitric óxido (NO). 5 Posteriormente, os números enormes de imunócitos extravasate no ME, dominado por neutrófilos (PMN) e monócitos e, finalmente, manter POI. 2 com duração de dias, esta paralisia intestinal leva a um aumento do risco de aspiração, a translocação bacteriana infecciosas e complicações até sepsis e falência de órgãos múltiplos e causa um grande fardo econômico. 6
Neste artigo, demonstramos o modelo padronizado de mensagens instantâneas e avaliação in vivo do trânsito gastrointestinal (TGI) e colônico. Além disso, demonstramos um método para a separação do ME da túnica mucosa seguida de análise imunológica, que é crucial para distinguir entre as respostas inflamatórias nestes dois compartimentos de parede altamente Imunoactivas intestinais. Todas as análises são facilmente transferíveis para todos os modelos de outras pesquisas, afetando a função gastrointestinal.
Protocol
Discussion
Um estudo comparativo analisando diferentes níveis de IM (eventração intestino delgado por 10 min versus suavemente inspeção do intestino delgado através de dois aplicadores de algodão contra o IM com a evacuação do conteúdo do intestino delgado para o ceco) revelou uma correlação entre a extensão da manipulação cirúrgica e POI. Em comparação com os outros grupos IM apresentaram maior quantidade de leucócitos no ME (PNMS, macrófagos e mastócitos), resultando em POI prolongada e severa. 8.…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabalho foi financiado por doações do Deutsche Forschungsgemeinschaft (KA1270/3-1/2) e BONFOR (O-112,0040).
Materials
| Name of the reagent/Equipment | Company | Catalogue number |
| Ethilon 5/0 | Ethicon | 1666H |
| Cotton applicators | MaiMed | 71010 |
| arterial catheter | Vygon | 115-798 |
| 96 well plate (black) | Greiner Bio One | 655096 |
| glass ball (2 mm diameter) | Worf | available on request |
| Insect pins | Fine Science Tools | 26000-25 |
| Hanker Yates Reagent | Polyscience | 560694 |
| Aquatek | Merck | HC109850 |
| DMEM | Lonza | BE12-604 F |
| FITC-dextran (MW 70000) | Sigma Aldrich | 46945-500MG-F |
References
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