Summary

Evaluación funcional de la motilidad intestinal y la inflamación de la pared intestinal en roedores: Análisis de un modelo estandarizado de manipulación intestinal

Published: September 11, 2012
doi:

Summary

El íleo postoperatorio (POI) es una complicación de la cirugía abdominal que lleva a una mayor morbilidad y una estancia hospitalaria prolongada. Como las estrategias profilácticas o terapéuticas faltan intensificación de la investigación es necesaria. Por lo tanto, se estableció un modelo de ratón estandarizado y factible para investigar la fisiopatología de la PDI y estudiar posibles opciones terapéuticas.

Abstract

Inflamación del tracto gastrointestinal es una razón común para una variedad de enfermedades humanas. Los modelos animales de investigación son fundamentales en la investigación del complejo celular y molecular de la patología intestinal. Aunque la túnica mucosa es a menudo el órgano de interés en muchas enfermedades inflamatorias, las obras recientes demostraron que la muscular externa (ME) es también un órgano altamente inmunocompetente que alberga una densa red de inmunocitos residentes. 1,2 Estos trabajos se realizaron dentro de la estandarizado modelo de manipulación intestinal (MI) que conduce a la inflamación de la pared del intestino, principalmente limitada a la ME. Clínicamente esta inflamación conduce a la alteración de la motilidad intestinal prolongado, conocido como el íleo postoperatorio (POI), que es una complicación frecuente e inevitable después de la cirugía abdominal. 3 La inflamación se caracteriza por la liberación de mediadores proinflamatorios tales como IL-6 4 o neurotransmisores IL-1β o inhibidora como Nitric óxido (NO). 5 Posteriormente, un tremendo número de inmunocitos extravasarse en el ME, dominado por los neutrófilos polimorfonucleares (PMN) y monocitos y finalmente mantener POI. Lasting para 2 días, esta parálisis intestinal conduce a un aumento del riesgo de aspiración, la translocación bacteriana y complicaciones infecciosas hasta sepsis y fallo de órganos múltiples y causa una alta carga económica. 6

En este manuscrito se demuestra el modelo normalizado de mensajería instantánea y evaluación in vivo de tránsito gastrointestinal (GIT) y el tránsito colónico. Además se demuestra un método para la separación de la EM a partir de la túnica mucosa seguido de análisis inmunológico, que es crucial para distinguir entre las respuestas inflamatorias en estos compartimentos de pared ambos altamente inmunoactivos intestinales. Todos los análisis son fácilmente transferibles a los otros modelos de investigación, que afecta la función gastrointestinal.

Protocol

1. Animales Hombre C57BL6 / J ratones con un peso medio de 25 g se obtuvieron de Harlan Winkelmann (Borchen, Alemania). Todos los experimentos se realizaron de acuerdo con la ley federal acerca de la protección de los animales. Los principios del cuidado de los animales de laboratorio fueron seguidos. Los animales se mantuvieron en una luz de 12-hr / oscuridad ciclo y provisto de roedor comercialmente disponible chow y agua del grifo ad libitum. Animales deben ser alojados por lo men…

Discussion

Un estudio comparativo de análisis de los diferentes niveles de IM (eventración intestino delgado durante 10 min versus suavemente inspección del intestino delgado usando dos aplicadores de algodón versus IM con la evacuación del contenido del intestino delgado en el ciego) reveló una correlación entre la magnitud de la manipulación quirúrgica y PDI. En comparación con los otros grupos IM mostraron la mayor cantidad de leucocitos en el ME (PNMS, macrófagos y mastocitos) que resulta en POI prolongada y severa….

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Este trabajo fue apoyado por becas de la Deutsche Forschungsgemeinschaft (KA1270/3-1/2) y BONFOR (O-112.0040).

Materials

Name of the reagent/Equipment Company Catalogue number
Ethilon 5/0 Ethicon 1666H
Cotton applicators MaiMed 71010
arterial catheter Vygon 115-798
96 well plate (black) Greiner Bio One 655096
glass ball (2 mm diameter) Worf available on request
Insect pins Fine Science Tools 26000-25
Hanker Yates Reagent Polyscience 560694
Aquatek Merck HC109850
DMEM Lonza BE12-604 F
FITC-dextran (MW 70000) Sigma Aldrich 46945-500MG-F

References

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Cite This Article
Vilz, T. O., Overhaus, M., Stoffels, B., Websky, M. v., Kalff, J. C., Wehner, S. Functional Assessment of Intestinal Motility and Gut Wall Inflammation in Rodents: Analyses in a Standardized Model of Intestinal Manipulation. J. Vis. Exp. (67), e4086, doi:10.3791/4086 (2012).

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