定位頭蓋内注入と<emインビボ></em多形性膠芽腫のマウスモデル系における腫瘍異種移植片の>生物発光イメージング
Summary
私たちは、ヌードマウスとその後シリアルの脳に人間の多形性膠芽腫細胞の正確な、定位注入のための統合方法を説明<em生体内で></em>イメージングは成長し、得られた異種移植片の治療に対する反応を監視することができます。
Abstract
多形性膠芽腫（GBM）は外科的切除、術後放射線療法とテモゾロミド療法1から構成される標準のトライ集学的治療にもかかわらず、ヒトでのみ14.6ヶ月の生存期間の中央値を持つハイグレード原発性脳腫瘍である。新しい治療法は明らかに生活の患者の生存率と品質を向上させるために必要とされる。より効果的な治療戦略の開発は、人間の病気を再現まだ腫瘍の成長や治療に対する反応を監視するためにシリアルイメージングを可能GBMの動物モデルによって支援されるであろう。本稿では、GBMの2のキーの臨床的特徴を再現腫瘍異種移植片を生じるヌードマウスの脳にバイオイメージング可能GBMの癌細胞の正確な定位注入のための私たちのテクニックを説明します。この方法では、再現性がある腫瘍をもたらし、順次内を監視するために生体内生物発光イメージングを可能にしながら、正確な解剖学的位置に配置されてい頭蓋の異種移植片の成長と治療3-5から応答。また、この方法は、低周術期の罹患率と死亡率を持つ動物での忍容性は良好である。
Protocol
Discussion
本稿で述べたマウスでは、がん細胞の定位注入の方法が合理的に再現可能な臨床神経膠芽腫膠2、6-8の浸潤および急速な成長パターンを再現腫瘍を発生させる。この手法は、特に匹敵する大きさと生物学的特性および特定の解剖学的位置で再現腫瘍が望まれている別の治療群に均等にマウスを階層化実験に適しています。私たちが説明する技術を用いて、腫瘍細胞の定位的注入はほと?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
我々は、彼らの専門的な支援のための博士アンドリューホランダー、サラ·デイビス、リー·シューマン、ティム·ジェンキンス、博士Xiangsheng Xuさんに感謝しています。私たちは、博士アンケネディのサポートを承諾。 BCBは、放射線生物トレーニンググラントC5T32CA009677でサポートされていました。 JFDは、医療科学者のためのバローズウェルカムキャリア賞（1006792）でサポートされていました。 JLBは、スーパークラスの助成金（5 R25 CA140116-03）でサポートされていました。我々は、その励ましと支援の研究が可能になる助けた博士スティーブ·ハーンを承認したいと思います。我々はまた、励ましや有益なコメントをペンシルベニアナノバイオインターフェースセンター（NBIC）博士とデニスディッシャー大学に感謝したいと思います。我々は彼らのMRIおよび生物発光/光中核施設の使用のためにペンシルベニア大学で小動物イメージング機能（SAIF）を認める。これらの技術は、米国立衛生研究所（RC1 CA145075とK08-NS076548によってサポートされていたプロジェクトの一環として開発された01）。
Materials
| Description | Supplier | Catalogue Number | Comments |
| Digital Just for Mouse Stereotaxic Instrument | Stoelting | 51730D | Stereotactic platform for mouse implantation |
| Ketamine/xylazine | Injectable anesthesia | ||
| Puralube Vet Ointment (ophthalmic) | Amazon.com | To prevent drying of the mouse’s eyes | |
| drill holder for the stereotactic platform | Stoelting | 51681 | |
| Micromotor Electric Drill | Stoelting | 51449 | For drilling through the skull |
| .45 mm carbide drill bit | Stoelting | 514551 | |
| Sterile cotton swabs | Fisher Scientific | 23-400-100 | |
| Glass bead dry sterilizer (Germinator 500) | Braintree Scientific | GER-5287 | To sterilize metal surgical instruments |
| Mouse rectal probe | Braintree Scientific | RET-3-ISO | Compatible with the temperature controller |
| Temperature Controller (TCAT-2DF) | Harvard Apparatus | 727561 | Temperature controller to maintain animal’s temperature during surgery |
| Small heating plate | Harvard Apparatus | 727617 | For use with temperature controller to warm mouse during surgery. The heating plate fits under the mouse on the stereotaxic platform. |
| Disposable Scalpels | BD Bard-Parker | 2015-11 | #10 scalpel |
| 10 microliter syringe | Hamilton | 7635-01 | For injection of tumor cells |
| 30 gauge needles, 1″ long, with flat point | Hamilton | Various | Must be compatible with the 10 μl syringe |
| Nanomite Programmable Syringe Pump | Harvard Apparatus | 704507 | Digital motorized syringe injector for stereotaxic device |
| Cellulose sterile surgical spear sponges | Ultracell | 40410 | To dry the surgical field |
| Bone wax | Ethicon | W31 | To seal the burr hole |
| Tissumend II synthetic absorbable tissue adhesive | Veterinary Products Laboratories | 3002931 | To seal the incision |
| Hot water pump with warming pad | Gaymar | TP-650 | Warms mice in post-operative period |
| IVIS Lumina II | Caliper Life Science | Bioluminescent imager | |
| D-Luciferin potassium salt | Gold Biotechnology | LUCK-1 | Luciferin for bioluminescent imaging |
References
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