Denne protokol beskriver isolationen af adipose-afledte stromaceller fra lipoaspirate og oprettelsen af en 4 mm kritisk størrelse calvarial defekt at evaluere skelet regenerering.
Kraniofaciale skeletal reparation og regenerering har løftet om de novo vævsdannelse gennem en celle tilgang under anvendelse af stamceller. Adipøst-afledte stromaceller (ASC'er) har vist sig at være kraftigt et multipotente stamceller stand til at undergå osteogent, chondrogene, adipogeniske og myogen differentiering. Mange undersøgelser har undersøgt det osteogene potentiale af disse celler in vivo med anvendelse af forskellige stilladselementer biomaterialer til cellulær afgivelse. Det er blevet påvist, at ved anvendelse af et osteokonduktivt, hydroxyapatit-coatede poly (mælke-co-glycolsyre) (HA-PLGA) skelet podet med ASC, en kritisk størrelse calvarial defekt, en defekt, der er defineret ved sin manglende evne til at undergå spontan healing over levetiden af dyret, effektivt kan udvise robust ossøse regenerering. Dette in vivo-model viser grundlag af translationelle fremgangsmåder til formål at regenerere knoglevæv – det cellulærekomponent og biologisk matrix. Denne metode tjener som en model for den endelige kliniske anvendelse af en progenitorcelle til reparation af en specifik vævsdefekt.
Da isoleringen af adipose-afledte stromaceller 2 fra lipoaspirate, er disse celler blevet differentieret i en lang række af cellulære afstamninger. Fedtvæv er fra mesodermale oprindelser og derfor vil multipotente adipøst afledte stromaceller sandsynligvis være mest effektive med anvendelsen mod en mesodermal cellelinie. Evnen til at generere skeletvæv er især kritisk i betragtning af den mangel på donorer sites for et autotransplantat og de iboende begrænsninger i syntetisk materiale, herunder…
The authors have nothing to disclose.
Vi vil gerne takke Dr. George Commons og Dr. Dean Vistnes for deres støtte og samarbejde med vores forskning. Dette arbejde er støttet af National Institute of Dental og kraniofacial Forskningsbevillinger 1 R21 DE019274-01, R01EB009689 og RC2 DE020771-02, Oak Foundation og Hagey Laboratoriet for Pediatric regenerativ medicin til MTL Dr. Hyun er støttet af Saint Joseph Mercy Hospital GME .
Name of the reagent: | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
Lipoaspirate Harvest | |||
PBS | Gibco | 10010-023 | |
Hank’s Balanced Salt Solution | Cellgro | 21-023-CV | |
Collagenase | Sigma | C6885-500MG | |
Cell Strainer 100 μm | BD Falcon | 352360 | |
Steri-top 500 ml .22 μm filter | Millipore | SCGPT05RE | |
Calvarial Defect | |||
Z500 Brushless MicromotorsUM50C | NSK | NSKZ500 | |
Circular Knife 4.0 mm | Xemax Surgical | CK40 |