ووصف طريقة تصور وقياس هيكل 3 الأبعاد للالكبدي الوريد البابي أو الماوس القناة الصفراوية داخل الكبد. ويمكن أيضا هذه التقنية يلقي الراتنج يمكن تطبيقها على غيرها من أنظمة الأقنية أو الأوعية الدموية ويسمح لل<em> في الموقع</em> التصور أو الكمي للبنية سليمة لنظام التواصل.
في الهيئات، والهندسة المعمارية الصحيح للهياكل الأوعية الدموية والأقنية لا غنى عنه لمناسبة ظيفة فسيولوجية، وتشكيل وصيانة هذه الهياكل هي عملية عالية التنظيم. ويعتمد تحليل هذه الهياكل المعقدة 3-الأبعاد، إما بصورة كبيرة على الفحص 2-الأبعاد في الفرع أو على حقن صبغة الدراسات. هذه التقنيات، ومع ذلك، ليست قادرة على توفير التمثيل الكامل وقابلة للقياس الكمي للهياكل الأقنية أو الأوعية الدموية وهي تهدف إلى توضيح. بدلا من ذلك، طبيعة الأبعاد 3-يلقي راتنج البلاستيك يولد لقطة الدائمة للمنظومة ورواية وتقنية مفيدة على نطاق واسع لتصور وقياس الأبعاد 3-الهياكل والشبكات.
وهناك ميزة حاسمة للنظام الصب الراتنج هو القدرة على تحديد سليمة ومتصلة، أو التواصل وبناء وعاء دموي أو لاصق. هيكل الأوعية الدموية ودوكشبكات تل حاسمة من أجل وظيفة الجهاز، وهذه التقنية لديها القدرة على مساعدة دراسة شبكات الأوعية الدموية والأقنية في عدة طرق. ويمكن استخدام الصب الراتنج لتحليل مورفولوجيا العادي والعمارة الفنية للبنية اللمعية، وتحديد التغييرات تخلقية التنموية، وكشف الاختلافات المورفولوجية في العمارة الأنسجة الطبيعية بين الدول والمرض. وقد استخدمت الأعمال السابقة الصب الراتنج للدراسة، على سبيل المثال، العيوب المعمارية والوظيفية داخل نظام الصفراوية داخل الكبد الماوس القناة التي لم ترد في 2-تحليل الأبعاد 1،2 الهيكل، تغييرات في الأوعية الدموية في المخ لمرض الزهايمر نموذج الفأر 3 ، تشوهات في الوريد البابي بوابة ارتفاع ضغط الدم والتليف الكبدى الفئران 4، الخطوات التنموية في النضج اللمفاوي الفئران غير ناضجة والرئتين بين الكبار 5، تغييرات فورية الاوعية الدموية الدقيقة في كبد الفئران والبنكرياس والكلى واستجابة لإصابة في الكيميائية6.
هنا نقدم وسيلة لتوليد يلقي الراتنج الأبعاد 3-شبكة الأوعية الدموية أو الماوس الأقنية، مع التركيز بشكل خاص على الوريد البابي داخل الكبد والقناة الصفراوية. ويمكن تصور هذه يلقي بمسح أو تنقيع الأنسجة ويمكن بعد ذلك تحليل. ويمكن تطبيق هذه التقنية لنظام الأوعية الدموية أو أي تقريبا الأقنية وقابلا للتطبيق مباشرة إلى أي دراسة التساؤل في التنمية، وظيفة، والصيانة، أو إصابة بنية الأبعاد 3-الأقنية أو الأوعية الدموية.
وقد وصفت لنا أمثلة محددة عن الكيفية التي يمكن أن يلقي الوريد البابي داخل الكبد والقناة الصفراوية نظم في الكبد، ولكن يمكن تطبيق هذه التقنية لنظام الأقنية الأخرى تقريبا أي تعديلات أو الأوعية الدموية مع طفيفة. وقد أظهرت الأعمال السابقة جدوى هذه التقنية في أنواع متعددة?…
The authors have nothing to disclose.
وأيد هذا العمل من المنح المقدمة من المعاهد الوطنية للصحة (NIH) إلى SSH (R01-DK078640)، من معهد هوارد هيوز الطبي (HHMI) من خلال برنامج HHMI / فاندربيلت شهادة جامعية في الطب الجزيئي لTJW (GRDOT56006779)، في فاندربيلت السكري مركز البحوث والتدريب (P30-DK020593) ومرض الجهاز الهضمي فاندربيلت مركز أبحاث (P30-DK058404) توفير الخدمات الأساسية.
Name of reagent | Company | Catalog number | Comments |
PE10 polyethylene tubing | Fisher Scientific | 1417012P | |
5-0 surgical black braided silk | Roboz Surgical | SUT-15-1 | |
Steriject 32 G x 13 mm needle | Air-tite | TSK3213 | |
Spring scissors | Fine Science Tools | 15000-08 | |
Number 5 forceps | Fine Science Tools | 91150-20 | |
Mercox II kit | Ladd Research | 21247 | |
Benzyl alcohol | Fisher Scientific | 1816-04 | Only required for BABB-clearing |
Benzyl benzoate | MP Biomedicals, LLC | 154839 | Only required for BABB-clearing |
Phosphate-buffered saline (PBS) | |||
Modeling clay | |||
Scale | |||
Laboratory scissors | |||
15 ml cap polypropylene tubes | |||
4% paraformaldahyde | |||
15% potassium hydroxide (KOH) | Only required for maceration | ||
Razor blade | |||
100% methanol | |||
3 ml luer lock syringe |