Summary
यह लेख एक कपाल अस्थायी कपालोच्छेदन का उपयोग करने में मध्यम प्रमस्तिष्क धमनी के समीपस्थ भागों को देखने खिड़की के माध्यम से चूहा मस्तिष्क धमनियों visualizing के लिए एक विधि का वर्णन है (
Abstract
एक कपाल विंडो के निर्माण एक तरीका है कि 1-3 मस्तिष्क के cortical सतह पर संरचनाओं के प्रत्यक्ष दृश्य की अनुमति देता है. इस तकनीक को कई चूहा मस्तिष्क overlying स्थानों में किया जा सकता है, लेकिन सबसे अधिक आसानी से आसानी से सुलभ ललाट या पार्श्विका हड्डियों पर एक कपालोच्छेदन बनाने से बाहर किया जाता है. सबसे अधिक बार, हम संयोजन में इस तकनीक का इस्तेमाल किया है endothelin-1 ischemic स्ट्रोक के बीच मस्तिष्क धमनी रोड़ा मॉडल के साथ मध्यम प्रमस्तिष्क धमनी पोत व्यास में परिवर्तन समीपस्थ एमसीए के निकट है कि मस्तिष्क पैरेन्काइमा में endothelin-1 के इंजेक्शन के साथ होते यों 4, 5. आदेश में endothelin -1 प्रेरित MCAO के दौरान एमसीए के समीपस्थ भाग कल्पना करने के लिए, हम एक चूहे खोपड़ी (1 चित्रा) के पार्श्व पहलू पर अस्थायी हड्डी के माध्यम से एक कपाल खिड़की बनाने के लिए तकनीक का उपयोग करें. सेरेब्रल धमनियों या तो ड्यूरा बरकरार या dura छिन्न और retra के साथ देखे जा सकते हैंcted. सबसे अधिक, हम endothelin 1 प्रेरित MCAO के बाद से दृश्य के दौरान ड्यूरा बरकरार vasoconstricting पेप्टाइड मस्तिष्क पैरेन्काइमा में प्रसव शामिल छोड़ दें. यह के ड्यूरा दवा वितरण के लिए कल्पना वाहिकाओं पर सीधे काटकर अलग कर देना की जरूरत नजरअंदाज. यह प्रोटोकॉल का वर्णन कैसे एक कपाल एक कदम वार फैशन में मस्तिष्क धमनियों कल्पना, खिड़की के रूप में कैसे क्षमता इस विधि से संबंधित नुकसान के कई से बचने के लिए के रूप में अच्छी तरह से बनाने के लिए.
Protocol
इस प्रोटोकॉल संस्थागत पशु की देखभाल और फ्लोरिडा के विश्वविद्यालय में उपयोग समिति (IACUC) द्वारा अनुमोदित किया गया था और के अनुपालन में है "देखभाल के लिए गाइड और प्रयोगशाला पशु का प्रयोग" (8 संस्करण, नेशनल एकेडमी ऑफ साइंसेज, 2011).
सामग्री
- पशु: आठ सप्ताह पुराने, पुरुष, Sprague Dawley चूहों (चार्ल्स नदी फार्म, Wilmington, MA, संयुक्त राज्य अमेरिका) सर्जरी के समय में 250-300 ग्राम वजन.
- संज्ञाहरण
- अभिश्वसन संज्ञाहरण प्रणाली (VetEquip इंक, Pleasanton, CA, संयुक्त राज्य अमरीका)
- Isoflurane चतनाशून्य करनेवाली औषधि (बैक्सटर फार्माक्युटिक्स, Deerfield, आईएल, संयुक्त राज्य अमरीका)
- Stereotaxic प्रणाली (डेविड Kopf उपकरण, Tujunga, सीए, संयुक्त राज्य अमेरिका)
- छोटे जानवर stereotaxic प्रणाली
- चूहों के लिए गैर टूटना कान सलाखों
- चूहों के लिए गैस संज्ञाहरण सिर धारक
- तापमान विनियमन
- बैट-12 microprobe थर्मामीटर (विश्वप्रेसिजन उपकरण, Inc, Sarasota, FL, संयुक्त राज्य अमेरिका)
- टी / पम्प, TP600 थर्मल (कंबल Gaymar इंडस्ट्रीज इंक,, पार्क बागवानी, NY, संयुक्त राज्य अमरीका)
- सर्जिकल उपकरणों
- Metzenbaum कैंची, आईरिस संदंश, बुलडॉग क्लैंप retractors, 26 गेज beveled सुई, Bovie दाग़ना किट (विश्व प्रेसिजन उपकरण इंक, Sarasota, FL, संयुक्त राज्य अमरीका) के साथ 10 μl सिरिंज
- ड्रिल Micromotor (Stoelting, लकड़ी डेल, आईएल, संयुक्त राज्य अमेरिका)
- 0.8 मिमी दौर ड्रिल बर (Roboz सर्जिकल उपकरण कं इंक,, Gaithersburg, एमडी, संयुक्त राज्य अमरीका)
- STORZ बॉन suturing संदंश (Bausch और Lomb, इंक, रोचेस्टर, NY, संयुक्त राज्य अमरीका)
- शल्य चिकित्सा की आपूर्ति
- 3.0 नायलॉन सीवन (ओएसिस, Mettawa, आईएल, संयुक्त राज्य अमरीका)
- कपास swabs, Puralube आँख मरहम (फिशर साइंटिफिक, Pittsburg, फिलीस्तीनी अथॉरिटी, संयुक्त राज्य अमेरिका)
- सर्जिकल अंक और स्ट्रिप्स (Medtronic Xomed इंक, Jacksonville, FL, संयुक्त राज्य अमेरिका)
- इलेक्ट्रिक बाल कतरनी (Oster, प्रोविडेंस, आरआई, संयुक्त राज्य अमरीका)
- Endothelin 1 (अमेरिकन पेप्टाइड, Sunnyvale, सीए, संयुक्त राज्य अमेरिका)
- 2% (Agrilabs, सेंट जोसेफ, एमओ, यूएसए) chlorhexidine
- विज़ुअलाइज़ेशन उपकरण
- सर्जिकल माइक्रोस्कोप (Seiler साधन और विनिर्माण, सेंट लुइस, MO, संयुक्त राज्य अमरीका)
- Sony hdr-sr12 हैंडीकैम (सोनी, Minato, टोक्यो, जापान)
- फाइबर ऑप्टिक प्रकाशक (TechniQuip कार्पोरेशन, लिवरमोर, सीए, संयुक्त राज्य अमेरिका)
- पोत व्यास के मापन
- VLC मीडिया प्लेयर (पेरिस, फ्रांस)
- छवि जम्मू सॉफ्टवेयर (ImageJ 1.42q सॉफ्टवेयर, अमेरिका के राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान, बेथेस्डा, एमए, संयुक्त राज्य अमरीका)
1. पूर्व शल्य कदम
- सर्जरी से पहले, चूहों पानी और कृंतक चाउ के लिए स्वतंत्र पहुँच के साथ 12:12 / प्रकाश अंधेरे चक्र के तहत रखे जाते हैं.
- संज्ञाहरण 4 100% ओ 2 एक प्रेरण कक्ष में गैस का मिश्रण में isoflurane% के साथ प्रेरित है.
- कौआ सिर के n बिजली बाल कतरनी के साथ मुंडा है.
- चूहे एक शोषक ऑपरेटिंग तापमान नियंत्रित (थर्मल कंबल) सतह और सिर stereotactic गैस चतनाशून्य करनेवाली औषधि चेहरा मुखौटा की नियुक्ति के साथ शुरू तंत्र में रखा गया है पर झूठ बोल पैड पर एक प्रवण स्थिति में रखा गया है.
- अगला, कान सलाखों डाला और कड़ी कर दी गई है.
- प्रक्रिया संज्ञाहरण के दौरान 2 100% हे 2 गैस मिश्रण में isoflurane% के साथ बनाए रखा है.
- नेत्र स्नेहक मरहम दोनों आंखों के लिए लागू किया जाता है, और पलकें शल्य प्रक्रिया के दौरान आंख desiccation को रोकने के लिए बंद हो जाती हैं.
- एक गुदा तापमान जांच के लिए 37 ± 0.5 ° सी. के एक निरंतर पशु कोर तापमान बनाए रखने के लिए डाला जाता है
- Anesthetized stereotaxic डिवाइस में मजबूती से आयोजित चूहे के सिर के साथ शल्य चिकित्सा के क्षेत्र chlorhexidine और नमक तीन बार बारी के साथ शुद्ध है.
2. पूर्व कपाल विंडो तैयारी
ontent "> एक कपाल विंडो बनाने से पहले, चूहे अन्य आवश्यक हार्डवेयर के आरोपण से किसी भी प्रयोगों के लिए तैयार किया जाना चाहिए और किसी भी आवश्यक शल्य प्रक्रिया प्राप्त करना चाहिए इस प्रोटोकॉल के लिए, हम पहले endothelin 1 (- एट के लिए एक गाइड प्रवेशनी प्रत्यारोपित किया. 1) प्रेरित MCAO के रूप में एक साथी नामक प्रकाशन में दिखाया "endothelin-1 प्रेरित चूहा में लेजर डॉपलर flowmetry मार्गदर्शन के साथ ischemic स्ट्रोक के लिए मध्य सेरेब्रल धमनी रोड़ा मॉडल."3. कपाल खिड़की के निर्माण
एक गाइड प्रवेशनी या प्रयोग के लिए आवश्यक उपकरणों की नियुक्ति के बाद, एक कपाल विंडो के लिए सीधे एक स्ट्रोक की प्रक्रिया के दौरान मध्यम प्रमस्तिष्क धमनी के समीपस्थ भाग कल्पना करने के लिए बनाया जाता है.
- सबसे पहले, कैंची temporalis मध्यवर्ती शुरू करने और laterally काम मांसपेशी overlying त्वचा को काटकर अलग कर देना करने के लिए किया जाता है.
- temporalis मांसपेशी electrocautery का उपयोग bisected है और फिर visua 3.0 नायलॉन सीवन का उपयोग करने से मुकर गया लौकिक हड्डी के स्क्वैमस भाग lize.
- एक लगभग 3-4 मिमी वर्ग की कक्षा के लिए अस्थायी लांगुलिय और गाल की हड्डी का प्रक्रिया के आधार पर बेहतर हड्डी के स्क्वैमस भाग पर तैयार की है, के रूप में यह अस्थायी हड्डी के बंद को दर्शाता है.
- एक ड्रिल करने के लिए धीरे - धीरे हड्डी के रेखांकित टुकड़ा काट टेम्पोरल हड्डी से मुक्त करने के लिए प्रयोग किया जाता है. देखभाल ड्रिल करने के लिए बहुत अधिक दबाव लागू करने के बाद से यह संभव है ड्यूरा या प्रमस्तिष्क प्रांतस्था नुकसान से बचने के लिए लिया जाना चाहिए.
- बाँझ खारा के साथ लगातार rinses के लिए शल्य चिकित्सा क्षेत्र के दृश्य में सुधार और खोपड़ी के रोकने के overheating करने के लिए प्रदर्शन कर रहे हैं.
- एक ढीला कोने में शुरू, temoporal हड्डी का टुकड़ा ध्यान से ठीक चूहे दांतेदार संदंश का उपयोग करते हुए ड्यूरा के साथ जुड़े किसी वाहिकाओं आँसू नहीं यकीन कर हटा दिया जाता है.
- ड्यूरा बरकरार रह गया है और मलबे दूर rinsed है बाँझ खारा का उपयोग.
4. प्रमस्तिष्क धमनी कसना की रिकॉर्डिंग
तम्बू "> प्रदर्शित करने के लिए कैसे वास्तविक समय ET-1 प्रेरित MCAO के दौर से गुजर रहा है एक चूहा है कि में छवियों पर कब्जा करने के लिए इस प्रोटोकॉल के लिए प्रयोग किया जाता है.- Vasoactive यौगिकों के आवेदन करने से पहले, एक आधारभूत वीडियो को कम से कम 1 मिनट के लिए दर्ज किया जाना चाहिए. ET-1 के लिए प्रेरित MCAO, आधारभूत रिकॉर्डिंग सुई एक बार मस्तिष्क पैरेन्काइमा में उतारा गया है लेकिन इंजेक्शन एट-1 के लिए पहले किया जाता है.
- सिरिंज पंप इंजेक्शन के लिए शुरू कर दिया है और 1 घंटे के लिए या वांछित endpoint तक दर्ज की गई. सुई वीडियो रिकॉर्डिंग के दौरान जगह में छोड़ दिया है क्रम में फोकल हवाई जहाज़ की गड़बड़ी को रोकने के.
- चूहे गहरा anesthetized और euthanized एक अनुमोदित इस प्रक्रिया का अनुसरण प्रोटोकॉल के अनुसार होना चाहिए.
5. छवि विश्लेषण
पोत व्यास visualized एमसीए के किसी भी हिस्से के लिए निर्धारित किया जा सकता है. एक उदाहरण के रूप में, हम एमसीए की एक शाखा का उपयोग करने के लिए समय बिंदुओं पर एट एक इंजेक्शन से पहले और बाद में पोत व्यास उपाय करेंगे. एसटीआईवीडियो से करूँगा फ्रेम 1 मिनट VLC मीडिया प्लेयर (VideoLAN) का उपयोग कर के अंतराल पर कब्जा कर रहे हैं.
- VLC खिलाड़ी स्थापित है और खोला.
- तो उपकरण और वरीयताओं का चयन करके, सेटिंग के तहत "सभी" के लिए बदल जाता है "दिखाएँ सेटिंग्स."
- "वीडियो मेनू" बाईं ओर पट्टी में विस्तार किया है और "उत्पादन मॉड्यूल" का विस्तार किया है तो. "दृश्य फिल्टर" दृश्य वीडियो फिल्टर मेनू लाने के लिए चुना जाता है.
- "दृश्य" फ़ाइल नाम उपसर्ग के लिए बॉक्स में टाइप किया जाता है.
- एक निर्देशिका पथ उपसर्ग में परिभाषित किया गया है. यह वह जगह है जहाँ अभी भी फ्रेम बच रहे हैं.
- एक रिकॉर्डिंग अनुपात अभी भी फ्रेम पर कब्जा करने के वांछित दर के आधार पर चुना जाता है. यदि एक वीडियो प्रति सेकंड 29 तख्ते, तो "1749" (29 फ्रेम / सेकंड x 60 सेकंड / मिनट) पर कब्जा कर लिया गया था बॉक्स में दर्ज किया जाना चाहिए, को बचाने के लिए एक अभी भी फ्रेम हर 1 मिनट. सभी परिवर्तन तो बच रहे हैं.
- वांछित वीडियो तो VLC खिलाड़ी में खोला जाता है के लिए स्वचालित रूप से अभी भी हर 1 मिनट में एक बार फ्रेम को बचाने.
- पोत व्यास तो इन का उपयोग कर मापा जाता हैछवियाँ. सबसे पहले, ImageJ सॉफ्टवेयर (एनआईएच) खोला है.
- तो अभी भी फ्रेम है कि आप उपाय करेंगे ImageJ खोल रहे हैं.
- "विश्लेषण" मेनू का चयन करके माप सेट "फिर खोला और सभी बक्से अनियंत्रित हैं.
- अगला, सीधी रेखा उपकरण का चयन किया जाता है.
- कुंजीपटल शॉर्टकट "Ctrl +" के रूप में की जरूरत में ज़ूम करने के लिए इस्तेमाल किया जाता है और एक लाइन सीधा पोत पोत व्यास को मापने के पथ के लिए रखा गया है.
- अंत में, पोत लंबाई का विश्लेषण "मेनू का चयन और फिर" उपाय "(Ctrl + M) पोत लंबाई प्राप्त करने के द्वारा प्राप्त की है.
- इस प्रक्रिया में कम से कम तीन बार दोहराया जाता है और प्रत्येक मापा प्रत्येक अभी भी फ्रेम में मापा पोत के लिए औसत.
- प्रत्येक समय बिंदु पर पोत व्यास आधारभूत पोत व्यास normalized है, इतना है कि तुलना कई चूहों उपयोग किया जा सकता है. ऐसा करने के लिए, सूत्र वर्तमान व्यास / व्यास आधारभूत x 100% का उपयोग करने के लिए प्रत्येक पोत% आधारभूत व्यास की गणना.
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Representative Results
अभी भी कब्जा कर लिया वीडियो शो से लिया छवियों कि प्रमस्तिष्क धमनी व्यास में परिवर्तन के बाद एट -1 इंजेक्शन आसानी से हो सकता है इस कपाल खिड़की तकनीक (2 चित्रा) के उपयोग की सराहना कर सकते हैं. ET 1-इंजेक्शन के मिनट के भीतर, पोत को कसना शुरू हो जाएगा. अंततः जहाजों कल्पना करने के लिए मुश्किल हो सकता है और मस्तिष्क के ऊतकों पीला हो जाएगा. के बारे में 20 मिनट के बाद एट-1 के प्रभाव को कम करने और वाहिकाओं को चौड़ा करना शुरू करने के लिए, धीरे - धीरे लौटने के बारे में 45 मिनट के बाद आधारभूत व्यास करेंगे. अधिक स्पष्ट वाहिकासंकीर्णन होता है कि इसके अलावा, cortical सतह ET 1-प्रशासन के बाद पीला हो जाता है. यह संभव है कि एक calibrated खुर्दबीन लजीला व्यक्ति के साथ पोत व्यास में पूर्ण परिवर्तन की गणना अगर वांछित. कई चूहों के बीच तुलना के लिए हम पोत व्यास में रिश्तेदार परिवर्तन है कि एक प्रक्रिया के दौरान होता है की गणना. इन मापों ImageJ सॉफ्टवेयर (एनआईएच) का उपयोग करते हुए प्रदर्शन कर रहे हैं. फिर एक रिलायंस एनर्जी का प्रतिनिधित्व ग्राफवाहिका व्यास में समय पर ative परिवर्तन तो (3 चित्रा) का निर्माण किया जा सकता है.
चित्रा 1. अस्थायी कपालोच्छेदन के स्थान का आरेख इस चित्र बाईं पूर्वकाल उन्मुख के साथ चूहे खोपड़ी का कंकाल शारीरिकी दर्शाया गया है. temporalis मांसपेशी पार्श्व खोपड़ी रिज के साथ अपने मूल है. यह पेशी इस रिज से अलग किया जाना चाहिए और bisected क्रम में टेम्पोरल हड्डी के स्क्वैमस भाग कल्पना. एक लगभग 3-4 मिमी कपालोच्छेदन यह सिर्फ कक्षा के पीछे है और गाल की हड्डी का प्रक्रिया के आधार पर बेहतर स्थान पर किया जा सकता है के रूप में यह अस्थायी हड्डी के बंद को दर्शाता है. बड़े तीर लिए कपालोच्छेदन प्रदर्शन स्थान का संकेत. 3 छोटे तीर एमसीए और अपनी शाखाओं से संकेत मिलता है. सभी धमनियोंइस स्थान में होगा एमसीए और धमनियों की शाखाओं दोनों उनकी उपस्थिति गैर कपटपूर्ण और vasoactive यौगिकों के लिए संवेदनशीलता के द्वारा नसों से प्रतिष्ठित किया जा सकता है.
चित्रा 2. एट एक इंजेक्शन से पहले, एट एक इंजेक्शन के बाद, और reperfusion के बाद छोड़ दिया पर कपाल खिड़की शुरू., एमसीए शाखाओं के एक प्रतिनिधि छवि के रूप में एक कपाल खिड़की के माध्यम से देखा दिखाया गया है. धमनियों उनके morphology द्वारा की पहचान किया जा सकता है. अपेक्षाकृत सीधे एमसीए नीचे बाएँ क्षेत्र में प्रवेश करती है और इस छवि में एक प्रमुख शाखा बिंदु है. इन तस्वीरों में अन्य जहाजों को जो उनके गहरे टोन और कपटपूर्ण उपस्थिति से पहचाना जा सकता है मस्तिष्क नसों हैं. रोड़ा धमनियों के दौरान तेजी से कसना और ऊतक पीला हो जाएगा. धीरे धीरे, धमनी को फैलाने और आधारभूत व्यास को वापस आ जाएगी.
चित्रा 3. प्रतिनिधि पोत व्यास समय पर एक ही आधारभूत चूहे प्रतिशत व्यास के लिए समय के साथ गणना की जा सकती है, सरल फार्मूला, वर्तमान / व्यास आधारभूत व्यास x 100% का उपयोग कर. यह किसी भी vasoactive यौगिक के साथ किया जा सकता है.
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Discussion
सारांश में, इस कपाल खिड़की तैयारी तकनीक बहुत बहुमुखी है के रूप में यह मामूली संशोधनों के 4, 5 के साथ कई प्रयोगों की जरूरतों को पूरा करने के लिए परिवर्तित किया जा सकता है. उदाहरण के लिए, हम सफलतापूर्वक विशिष्ट MCA लेजर डॉपलर flowmetry का उपयोग करने के लिए एक प्रमस्तिष्क धमनी एक कपाल खिड़की (मक्का एपी 2009 और 2011) के माध्यम से कल्पना पर सीधे ध्यान केंद्रित शाखाओं में मस्तिष्क में रक्त के प्रवाह की निगरानी की. इसके अलावा, ड्यूरा छिन्न के साथ एक इसी तरह की तैयारी vasoactive यौगिकों के सामयिक प्रशासन के साथ इस्तेमाल किया जा सकता है vivo संवहनी जेट स्नान 3 में एक बना. कई कारकों को ध्यान में रखा जाना चाहिए जब एक कपाल खिड़की की तैयारी के क्रम में इस तकनीक के लिए विफलता की दर कम है. इन कारकों में से कई के लिए मस्तिष्क धमनियों के अच्छा दृश्य प्राप्त करने के लिए संबंधित हैं. सबसे पहले, जब देखभाल कपालोच्छेदन ड्रिल बिट के साथ इतना है कि यह overlying ड्यूरा या रक्त वाहिकाओं नहीं बाधित कर रहे हैं लिया जाना चाहिए. यह सबसे अच्छा पूरा किया हैबाँझ खारा के साथ लगातार washes से मलबा हटाने के लिए और खोपड़ी शांत. दूसरा, हड्डी टुकड़ा धीरे उठाया किया जाना चाहिए जब यह हटा दिया जाता है. अगर टुकड़ा आसानी से दूर खींच नहीं करता, तो ड्रिल बिट दूर अधिक हड्डी में कटौती करने के लिए इस्तेमाल किया किया जाना चाहिए. अन्त में, खून या सी.एस.एफ. की छोटी मात्रा में आसानी से इस प्रक्रिया के दौरान कपाल विंडो के रूप में परिवर्तन कर सकते हैं. प्रदर्शन कपालोच्छेदन खोपड़ी में एक खोलने कि बड़ा से दृश्य के लिए आवश्यक है प्रदान करता है. इसलिए, यह आसान है जमते से तरल पदार्थ को रोकने के लिए शल्य साइट के आश्रित भाग में कई शोषक स्पंज जगह. इन स्पंज के रूप में की जरूरत है अगर देखभाल के लिए शल्य चिकित्सा उपकरणों के साथ खिड़की नहीं बाधा डालती करने के लिए प्रयोग किया जाता है बदला जा सकता है.
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Disclosures
ब्याज की कोई संघर्ष की घोषणा की.
Acknowledgments
इस काम अमेरिकन हार्ट एसोसिएशन ग्रेटर दक्षिण पूर्व (09GRNT2060421) संबद्ध, अमेरिकन मेडिकल एसोसिएशन, और फ्लोरिडा नैदानिक और translational विज्ञान संस्थान के विश्वविद्यालय से अनुदान द्वारा समर्थित किया गया. एडम मक्का / एनआईएच NINDS, एनआरएसए predoctoral साथी (F30 NS +०,६०,३३५) है. रॉबर्ट Regenhardt उच्च रक्तचाप में फ्लोरिडा इन दोनों क्षेत्रों ट्रेनिंग प्रोग्राम के विश्वविद्यालय (T32 HL 083,810) से predoctoral फेलोशिप समर्थन प्राप्त है.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Inhalation anesthesia system | VetEquip Inc., Pleasanton, CA, USA | 901806 | |
| Isoflurane anesthetic | Baxter Pharmaceutics, Deerfield, IL, USA | 1001936060 | |
| Small animal stereotaxic system | David Kopf Instruments, Tujunga, CA, USA | 900 | |
| Non-rupture ear bars, rat | David Kopf Instruments, Tujunga, CA, USA | 957 | |
| Rat gas anesthesia head holder | David Kopf Instruments, Tujunga, CA, USA | 1929 | |
| BAT-12 microprobe thermometer | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | BAT-12 | |
| T/PUMP, Thermal blanket | Gaymar Industries, Inc., Orchard Park, NY, USA | T/PUMP, TP600 | |
| Metzenbaum Scissors | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 501254 | |
| Iris forceps | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 15915 | |
| Bulldog clamp retractors | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 14119-G | |
| 10 μl syringe 26-gaugue | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | SGE010RNS | |
| Bovie, high temperature cautery kit | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 500392 | |
| Rat tooth forceps 0.12 | Stotz | E1811 | |
| Micromotor drill | Stoelting, Wood Dale, IL, USA | 51449 | |
| 0.8 mm round drill bur | Roboz Surgical Instrument Co., Inc., Gaithersburg, MD, USA | RS-6280C-1 | |
| STORZ Bonn suturing forceps | Bausch and Lomb, Inc., Rochester, NY, USA | ||
| Nylon Suture, size 3.0 | Oasis, Mettawa, IL, USA | MV-663 | |
| Cotton swabs | Fisher Scientific, Pittsburg, PA, USA | 22-029-488 | |
| Puralube eye ointment | Fisher Scientific, Pittsburg, PA, USA | NC0138063 | |
| Electric hair clippers | Oster, Providence, RI, USA | 78005-301 | |
| ET-1 diluted to 80 μM concentration in PBS | American Peptide, Sunnyvale, CA, USA | 88-1-10A | |
| Chlorhexidine, 2% | Agrilabs, St. Joseph, MO, USA | 1040, Rev. 6-06, NAC No.: 10580322 | |
| Surgical microscope | Seiler Instrument and Manufacturing, St. Louis, MO, USA | Evolution xR6 | |
| Sony Handycam | Sony, Minato, Tokyo, Japan | HDR-SR12 | |
| Fiber optic illuminator | TechniQuip Corp., Livermore, CA, USA | FO1–150 | |
| VLC media Player | (Paris, France) | ||
| Image J software | U.S. National Institutes of Health, Bethesda, MA, USA |
References
- Levasseur, J. E., Wei, E. P., Raper, A. J., Kontos, A. A., Patterson, J. L. Detailed description of a cranial window technique for acute and chronic experiments. Stroke. 6, 308-317 (1975).
- Baumbach, G. L., Dobrin, P. B., Hart, M. N., Heistad, D. D. Mechanics of cerebral arterioles in hypertensive rats. Circ. Res. 62, 56-64 (1988).
- Regrigny, O., et al. Effects of melatonin on rat pial arteriolar diameter in vivo. Br. J. Pharmacol. 127, 1666-1670 (1999).
- Mecca, A. P., O'Connor, T. E., Katovich, M. J., Sumners, C. Candesartan pretreatment is cerebroprotective in a rat model of endothelin-1-induced middle cerebral artery occlusion. Exp. Physiol. 94, 937-946 (2009).
- Mecca, A. P., et al. Cerebroprotection by angiotensin-(1-7) in endothelin-1-induced ischaemic stroke. Exp. Physiol. 96, 1084-1096 (2011).
