מודלים עכבר מהונדסים ונוקאאוט של מחלות נוירולוגיות שימושיים לחקר התפקיד של גנים בנוירופיזיולוגיה נורמלית ולא נורמלית. מאמר זה מתאר שיטות שיכולים לשמש כדי לחקור הגברה לטווח ארוך, מנגנון תאי שעשוי בבסיס למידה וזיכרון, במהונדס ומפסיד יוצא, באופן חופשי מתנהג מודלים עכבר של neuropathology.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
הגברה לטווח ארוך של Perforant מסלול-משוננת gyrus סינפסה בחופשיות מתנהג עכברים
במאמר זה
סיכום
תקציר
מחקרים של הגברה לטווח הארוך של יעילות הסינפטית, תופעה הסינפטי פעילות תלויה שיש תכונות שהופכות אותו לאטרקטיבי לאחסון למידה ומידע פוטנציאלי מנגנון תאי בסיסי, כבר מזמן משמשים על מנת להבהיר את הפיסיולוגיה של מעגלים עצביים השונים בהיפוקמפוס, אמיגדלה , ומבנים הלימבית וקליפת מוח אחרים. עם זאת בחשבון, מודלים עכבר מהונדסים של מחלות נוירולוגיות מייצגים פלטפורמות שימושיות לנהל הגברה לטווח ארוך מחקרים (LTP) כדי לפתח הבנה טובה יותר של התפקיד של גנים בתקשורת הסינפטית נורמלית ולא נורמלית ברשתות עצביות מעורבות בלמידה, רגש ומידע עיבוד. מאמר זה מתאר שיטות לאמינות גרימת LTP בעכבר מתנהג בחופשיות. מתודולוגיות אלה יכולים לשמש במחקרים של מהונדס ונוקאאוט מתנהגים מודלים עכבר של מחלות ניווניות באופן חופשי.
מבוא
הפיתוח של טכנולוגיה כדי לתפעל את הגנים ייצר מודלים עכבר מהונדסים ונוקאאוט של כמעט כל מחלות ניווניות ונוירולוגיות. זו חייבה תרגום של טכניקות מחקר אלקטרו השתמשו בעבר במינים מכרסמים גדולים יותר למודל החיה בעכבר. טכניקת חקירה נוירופיזיולוגיות אחת כזו היא השימוש בהגברה לטווח ארוך (LTP) על מנת לבחון את יעילותם של קשרים סינפטיים בתוך הרשתות עצביות מעורבות בהפרעות נוירו שונות. פרוטוקול זה מתאר טכניקות לחקירת אלקטרו אמינה של LTP במתנהגים עכברים באופן חופשי. היתרון של פרוטוקול זה על פני אחרים הוא שהוא פשוט וקל ליישום, אלא הוא גם לא פחות יקר כפי שהוא אינו דורש לא את השימוש במערכות יקרות מבוקר מחשב דיסק קשיח זעירות ולא headstages טרנזיסטור....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
פרוטוקול זה הוא מתאים לעכברים של 3 וגיל 18 חודשים ומשקל גוף משוער של 30-50 גר '). ניתן להשיג עכברים מהמעבדה ג'קסון (בר הרבור, ME). כל הפרוטוקולים כירורגית וניסוי אושרו על ידי ועדת הטיפול בבעלי חיים ושימוש בטריניטי קולג' והיו בהתאם למדריך NIH לטיפול ושימוש בחי מעבדה.
1. הכנת בעלי החיים ופרוצדורות כירורגיות
- הכן קוקטייל הרדמה המכיל קטמין (25 מ"ג / מיליליטר), xylazine (2.5 מ"ג / מיליליטר) וacepromazine (0.5 מ"ג / מיליליטר). הזרק 1 מיליליטר / קילוגרם משקל גוף ברבע הימני התחתון של הבטן....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
טבלת 1 מציגה את הקואורדינטות לDG וMPP כמו בשימוש בפרוטוקול זה איור 1 א מציג את הסימונים למבני היעד בגולגולת;.. הראה גם הם את מיקומו של אלקטרודות קרקע והתייחסות איור 1 מדגים נציג עורר תגובת עקבות שניהם מראש וposttetanization באותה החיה. שים לב שposttetanization עורר תגובה היא גדולה יותר מאשר תגובת pretetanization אשר מעידה על LTP אינדוקציה 2. תרשים 1C ממחיש את השיטה המשמשת לכמת את משרעת התגובה. ואכן,
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
בפרוטוקול זה, יש לנו הפגין שיטה אמינה ופשוטה ללימוד LTP בDG בעכברים מתנהגים בחופשיות. בעוד שמחקרים רבים של LTP בחולדות ערה בוצעו 3,4, מעט מאוד שנערכו בעכברים ער בעיקר בשל המורכבות הטכנית שמציבה הנדל"ן המוגבל גולגולת בעכברים ובמשקל של headstages האלקטרודה ביחס למשקל הממוצע של עכברים 5. כמה מחקרים שהוכיחו LTP בDG במתנהגים עכברים מנוצלים גם מערכות אלקטרודה דיסק קשיחות זעירות או טרנזיסטור אפקט שדה צומת preamplifiers (JFET) משולב בheadstage אשר בהכרח מוסיפה ל.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
יש מחברים אין לחשוף.
תודות
המחברים מבקשים להודות הבא: ד"ר יוסף ברונזינו, ד"ר חמיס אבו Hassaballah, מר RJ אוסטין-LaFrance, והגב 'ג'סיקה Koranda.
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| קטמין (100 מ"ג/מ"ל) | Henry Schein | 10177 | |
| קסילזין (20 מ"ג/מ"ל) | Henry Schein | 33197 | |
| אצפרומזין (10 מ"ג/מ"ל) | Henry Schein | 2177 | |
| אבקת אקריליק דנטלית | Lang Dental Manufacturing Co. | 1330CLR | |
| נוזל אקרילי דנטלי | Lang Dental Manufacturing Co. | 1306CLR | |
| (0.127 מ"מ) | מכשירי דיוק עולמיים | TGW0515 | |
| צינורות היפודרמיים מנירוסטה (0.286 מ"מ) | World Precision Instruments | 832400 | |
| Flunixin (50 מ"ג/מ"ל) | Henry Schein | 14165 | |
| Epoxilyte | Superior Essex | EP 6001-M | |
| הכנסת חוט נירוסטה (0.2 מ"מ) | World Precision Instruments | 792900 | |
| מכשיר מסגרת סטריאוטקסי | Kopf Instruments | דגם 902 | |
| אזיקי אוזניים (כוסות אוזניים) | Kopf Instruments | דגם 921 | |
| ממריץ אלקטרופיזיולוגי | Astro-Med, Inc. | S88 | |
| B K Precision Corp. | 2542 | ||
| יחידת הבידוד הנוכחית | Astro-Med, Inc. | PSIU-6 | |
| World Precision Instruments, Inc. | DAM-50 | ||
| קומוטטור | פלסטיק אחד | SLC6 | |
| מקדחה דנטלית | 58650 |
מקורות
- Paxinos, G., Franklin, K. B. J. The mouse brain in stereotaxic coordinates. , Compact 2nd edn, Elsevier Academic Press. (2004).
- Bliss, T. V. P., Lomo, T. Long-lasting potentiation of synaptic transmission in the dentate area of the anesthetized rabbit following sti....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
