Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Biology
Click here for the English version

Biology

Семя пальто постельных принадлежностей Анализ чтобы Генетически Путешествуйте Published: November 9, 2013 doi: 10.3791/50732
Automatic Translation
1, 1
1Département de Botanique et de Biologie Végétale, Université de Genève

Summary

Мы представляем процедуру, чтобы собрать семена пальто постельных принадлежностей анализа (АДА) от Arabidopsis семян THALIANA. АДА было показано, что мощным инструментом для изучения генетически и в пробирке, как контроль эндосперма всхожесть семян в покоящихся семян и в ответ на легких киев. АДА, в принципе, применимого в соответствии с любой ситуации, когда эндосперм подозревается влиять эмбрионального развития.

Abstract

Arabidopsis эндосперм состоит из одного слоя клеток, окружающего из эмбриона и играть существенную роль для предотвращения прорастания покоящихся семян или, что из nondormant семян, облученных дальнего красного (FR) светового импульса. В целях дальнейшего разобраться в молекулярно-генетических механизмов, лежащих в основе прорастания репрессивный активность, оказываемое эндосперма, "семенной оболочки постельные принадлежности" анализ (АДА) был разработан. АДА представляет собой процедуру вскрытия физического разделения семенных оболочек и эмбрионов из семян, что позволяет контролировать рост эмбрионов на основной слой семенных оболочек. Примечательно, что АДА воссоздает прорастание репрессивные мероприятия кожуры в контексте покоя семян и FR-зависимого контроля всхожести семян. Поскольку АДА позволяет комбинаторной использование покоя, nondormant и генетически модифицированных семян пальто и эмбриональных материалов, генетических путей, контролирующих прорастание и специально опсплуатации в эндосперме и зародыше можно разрезать. Здесь мы подробно процедуру, чтобы собрать SCBA.

Introduction

В зрелых семян Arabidopsis, семенной оболочки состоит из семенной кожуры, внешний слой мертвых тканей материнского происхождения, и эндосперма, один слой клеток живой ткани непосредственно окружающий зародыш 1. Эндосперм и эмбрион являются производными от отдельных событий оплодотворения: эндосперм триплоидный ткани с двумя материнской и отцовской один генома, тогда как эмбрион является диплоидным ткани с одной материнской и одной отцовской генома 2.

Основной функцией традиционно назначается эндосперма в том, что из питательной ткани. Тем не менее, она становится все более очевидным, что эндосперм также играет центральную роль для контроля прорастание семян. Это понятие стало первым очевидным в случае покоя, черта выставлены вновь произведенных семян. Покоящихся семян не в состоянии прорасти, несмотря на наличие благоприятных условий прорастания. Семена теряют покой после периода созревания и стать nondormanт, т.е. они прорастут при воздействии благоприятных условий прорастания. Во многих видов растений, в том числе модель завода Arabidopsis, семенной оболочки абсолютно необходимо для предотвращения прорастания покоящихся семян с удаления пальто семян вызывает эмбриональную рост и озеленение 3,4. В Arabidopsis, Bethke соавт. Отметили, что всхожесть осталась репрессированных после удаления семенной кожуре при сохранении эндосперм, окружающий эндосперм 5. Эти наблюдения сильно указали, что эндосперм ткань в семенной оболочки, оказывающей репрессивный деятельность на эмбрион. Однако эксперименты по удалению пальто семян не обязательно помочь выяснению природы прорастания репрессивной деятельности, предоставленную кожуры, ни определять гены, которые реализуют его.

Мы недавно представила семенной оболочки кроватей анализа (АДА), где семена пальто и эмбрионы физически разделены, но держал в тесном ProxiMity так что прорастание репрессивная деятельность обеспечивается эндосперма поддерживается 6. АДА позволяет комбинаторной использование покоя, nondormant, и генетически модифицированных семян пальто и эмбриональных материалов. В результате, генетические контролирующие пути прорастание и конкретно работает в эндосперме и зародыше можно разрезать. АДА был использован в контексте покоя, чтобы показать, что эндосперм освобождает фитогормонов абсцизовой кислоты (ABA) в направлении эмбриона подавить его рост 6. Кроме того, мы могли бы использовать SCBA определить сигнальные пути, работающих в эндосперме и эмбриональных тканей содействовать покоя.

Роль эндосперма контролировать всхожесть еще более укрепилась, рассматривая случай nondormant семян, подвергшихся воздействию импульса дальнего красного (FR) света. Раннее на набухания FR световой импульс, как известно, ингибируют прорастание 7,8. Когда семена пальто были удалены из семян импульс FR светане смог препятствовать прорастанию, сильно предполагая, что эндосперм также может подавлять прорастание семян nondormant 9. Примечательно, что АДА также могут быть использованы для резюмировать FR-зависимое ингибирование прорастания. Это позволило показать, что, что FR-зависимое ингибирование прорастания семян также процесс, включающий ABA освобождение от эндосперма 9. Кроме того, АДА позволило выявить различные светло-сигнальных путей, работающих в эндосперме и зародыше, чтобы контролировать nondormant прорастание семян в ответ на легких киев 9,10.

АДА поэтому быть надежным методом для изучения функции эндосперма в контексте контролем прорастания семян. Это также является мощным инструментом для оценки в пробирке ли гены подозреваемых контролировать всхожесть работать в эндосперме, эмбриона или обеих тканях. Здесь мы подробно различные шаги, необходимые для сборки SCBA.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

После того, как собран АДА, рост зародышей контролируется в течение нескольких дней. Поэтому перед процедурой семян рассечение и монтаж SCBA, нужно стерилизовать семена, чтобы избежать будущих загрязнений, которые могут помешать надлежащую оценку влияния семян пальто материала на эмбрионального развития.

1. Семя Стерилизация

  1. Налейте 50-60 мкл зрелых и сухих семян Arabidopsis в 1,5 мл микроцентрифужных трубки и подготовить 70%-ный раствор этанола.
  2. Добавить 1 мл 70% раствора этанола в микроцентрифужных трубки, содержащей семена и встряхивают при комнатной температуре в течение 10 мин при 1200 оборотах в минуту в Вортекс.
  3. Центрифуга трубки микроцентрифужных в течение 3 сек при 4000 х г концентрировать семена в нижней части трубки.
  4. Аспирируйте 70%-ный раствор этанола с использованием всасывающий наконечник вакуумного осторожно, оставляя семена в нижней части трубки микроцентрифужных.
  5. Добавить 1 мл стерильной дистиллированной воды до T он микроцентрифужных трубки еще содержащей семена.
  6. Взболтать при комнатной температуре в течение 10 мин при 1200 оборотах в минуту.
  7. Центрифуга трубки микроцентрифужных в течение 3 сек при 4000 х г концентрировать семена в нижней части трубки. Аспирируйте воды супернатант с помощью всасывающего наконечника вакуумного осторожно, оставляя семена в нижней части трубки.
  8. Добавить 1 мл стерильной воды дистиллированной воде в микроцентрифужных трубки, содержащей все еще семена. Убедитесь, что поток воды однородно приостанавливает семена внутри трубки. Цель здесь состоит, чтобы избежать дальнейшего встряхивая, чтобы сохранить целостность семян.
  9. Пусть семена осесть под действием силы тяжести в нижней части трубки, оставляя трубку еще в течение 30 сек. Аспирируйте воды супернатант с помощью всасывающего наконечника вакуумного осторожно, оставляя семена в нижней части трубки.
  10. Повторите четыре раза шаги 1,8 - 1,9. Общая процедура стерилизации занимает около 30 мин.

2. Семя Покрытие

ontent "> Все последующие этапы выполняются в шкафу с ламинарным потоком для сохранения стерильных условиях.

  1. Подготовка чашек Петри пластины (диаметр 100 мм, высота 20 мм), содержащих 30 мл среды для прорастания получены путем обработки в автоклаве раствор, содержащий 4,3 г / л Мурашига и Скуга в 2,5 мМ 2 - (N-морфолино) этансульфоновой кислоты (MES-КОН , рН 5,7) и 0,8 г / л агара. Пусть решение остыть в водяной бане при 50 ° С перед заливкой его в посудомоечной чашку Петри.
  2. Добавить 200 мкл стерильной дистиллированной воды в пробирку, содержащую семена. Ресуспендируют семена и передавать их на поверхности прорастания среде с использованием стандартного пипетку с наконечником в 1 мл.
  3. Удалить воду, окружающую семена на поверхности прорастания среды с использованием наконечника вакуумного всасывания.
  4. Оставьте чашку Петри, содержащую семена без крышкой внутри шкафу с ламинарным потоком в течение 2 часов для дальнейшей сушки. Закройте чашку Петри с крышкой и дать постоять под ламинарногошкаф течь в течение приблизительно 90 мин, так что около 4 часов прошло с момента начала процедуры семян стерилизации (шаг 1.2).

3. Семя Рассечение

Следующие шаги требуют работы с стереомикроскопом расположенной внутри ламинаре кабинета. Дюмон щипцы № 5 с усеченными (т.е. тупой) советов значительно облегчает обработку семян (рис. 1А).

  1. Подготовьте новый Петри пластину, содержащую 30 мл среду для прорастания. Местонахождение на поверхности среды двух наложенных друг на друга прямоугольных стерильных работ Ватман 3 мм (1,5 см х 1,0 см; рис. 1б, шаг 1). Ватман 3 мм бумагу стерилизуют в автоклаве.
  2. Трансфер семена на бумагах ватман 3мм с использованием стерильного пинцета (рис. 1В, шаг 2).
  3. Держите индивидуальный семя к бумаге Ватман 3ММ, слегка нажав семя помощью расположенных рядом тупые кончики усеченных щипцов (
  4. Обрежьте семенной оболочки (Testa и эндосперм) семени с помощью иглы шприца (например, U100 инсулин шприц + 1 мл шприц, 0,33 мм (29 г) х 12,7 мм) (Фигура 1В, этап 4). Форма Arabidopsis семян эллипсоидной и рекомендуется сократить семенной оболочки вдоль длинной полу-главной оси как можно ближе к месту, где семядоли соединены с корешка (т.е. от радикальной чаевые). Это помогает безопасного освобождения эмбриона в следующем шаге процедуры вскрытия.
  5. Нажмите семя к бумаге Ватман 3ММ помощью расположенных рядом тупые кончики усеченных щипцов (рис. 1б, шаг 5). Этот шаг релизы эмбрион из кожуры через отверстие, созданной в шаге 3.4 (рис. 1В, шаг 6). Рекомендуется, чтобы применить толчок на семени где наконечник из семядоли в ближе к кончику корешка (т.е. далеко фром открытие).

4. Ассамблея кожуры Постельные принадлежности анализ (АДА)

См. обсуждение для правильного выбора числа семенных оболочек и эмбрионов.

  1. Подготовьте новый Петри пластину, содержащую 30 мл среду для прорастания. Местонахождение на поверхности среды стерильными прямоугольный кусок (3,5 см х 5,0 см) из сетки нейлона (рис. 2, этап 1).
  2. Во избежание повреждения, эмбрионы и семенных оболочек могут быть перемещены на поверхность металлических краев пинцетом, осторожно подталкивая их помощью иглы шприца (рис. 2, шаг 2). Эмбрионы передачи и семенных оболочек на нейлоновую сетку (рис. 2, шаг 3).
  3. Соберите круглое и один слой семенных оболочек, используя притупилось щипцов и иглу убедившись, что семена пальто, как гораздо ближе близости, как это возможно (рис. 2, шаг 4). Попробуйте выставить как можно больше семенной оболочки открытие порожденнаяигла вверх. Этот шаг не был систематически проходят. Тем не менее, это может увеличить эффективность дыхательных аппаратов с к диффузии вещества, ингибирующие рост эмбриона, как ожидается, непосредственно диффундировать по направлению к эмбриона, а не от него.
  4. Поместите эмбрионов в виде круглого один слой на центре пальто кровати семян собранных в шаге 4.3 (рис. 2, этап 5). Убедитесь, что эмбрионы, как гораздо ближе близости, как это возможно.
  5. Инкубируйте SCBAs при непрерывном освещении (40 мкмоль / м 2 с ЕС) в 20-21 ° С. В случае, когда импульс FR используется задержать прорастание, собрать SCBA при нормальном свете, применить FR импульса, как описано 9 и оставить чашку Петри в темноте.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Предыдущие работы показали, что мутантные семена неспособны синтезировать GA были неспособны прорастать в результате накопления высокой ABA в семенах 11,12. Тем не менее, неспособность прорастают требуется семенной оболочки с ее удаление вызывает эмбриональную 13 роста. Это четко указывает, что эндосперм семян, неспособных синтезировать GA выпускает ABA блокировать эмбрионального развития. Поэтому мы ожидаем, семена пальто не способны синтезировать GA, чтобы блокировать рост эмбрионов в SCBA отличие семенных оболочек, неспособных синтезировать ГВ и ABA. Здесь мы используем ГА1-21 (Солка вставки линия Salk_109115) мутантные семена, несущие вставку Т-ДНК разрушения гена ГА1 (вступление AT4G02780) кодирования ЛОР-copalyl дифосфатную синтазы, что очень важно для GA биосинтеза 14 (SALK_109115 вставки линии в GA1 (Кол. экотип) есть ссылка в базе данных Солка сигнал 15 ( http://signal.salk. Образование /).

В соответствии с ранее полученными результатами 13, ГА1-21 мутантные семена не могли прорасти 80 часа после набухания (рис. 3, Панель 1). В отличие и далее в соответствии с ранее полученными результатами 13, удаление пальто семян срабатывает ГА1-21 рост эмбриона (рис. 3, панель 2) если ABA не присутствовал в среде (рис. 3, панель 3).

Панель 4 на рисунке 3 было принято 80 часа после набухания и показывает SCBA с ГА1-21 эмбрионов на ложе из 80 ГА1-21 семенных оболочек. В соответствии с нашей гипотезой, ГА1-21 мутантных семян пальто заблокировали рост ГА1-21 эмбрионов.

Предыдущие работы показали, что в покоящихся семян семенной оболочки синтезирует и выделяет ABA к эмбриона в результате конститутивной экспрессии GA-отклика фактора DELLA RGL2, что способствует накоплению ABA в впиталСемена 6,11. В условиях, когда синтез Г.А. блокируется DELLA фактором RGL2 конституитивно накапливается и способствует накоплению ABA 11. Отсутствие RGL2 и синтез АБК в ГА1-21 семенных оболочек Поэтому ожидается, позволит рост ГА1-21 эмбрионов в SCBA. Чтобы проверить эту гипотезу, мы использовали aba2-1 мутантный аллель (Col экотипа), дефицитный по синтезу ABA в результате точечной мутации в гене, кодирующем Xanthosin дегидрогеназы (AT1G52340) и вставки rgl2-14 Т-ДНК линии (Salk_027654, Col экотип) 16.

Рисунок 1
Рисунок 1. Порядок семян вскрытия. А) Схема описания, как сделать укороченные щипцы для семян вскрытия. Пинцет может быть усечен помощью ножниц или клещи. Когда щипцы закрыт расположенных рядом усеченные советы Шоу. л.д. крышка поверхность размером примерно семени B) Шаг 1: два бок о бок прямоугольных стерильных работ ватман 3мм укладывают на блюдо чашку Петри, содержащей MS твердую среду. Шаг 2: семена переносятся на поверхность Whatman работах 4 ч после набухания. Шаг 3: процедура вскрытия требуется проведение семя против Ватманы используя укороченные щипцы. Шаг 4: игла шприца используется для резки семенной оболочки, как показано на рисунке. Шаги 5 и 6: расположенных рядом кончики закрытых щипцов используются аккуратно введите эмбрион из кожуры через сайт разреза.

Рисунок 2
Рисунок 2. . Порядок сборки семенной оболочки постельных принадлежностей анализа Шаг 1: прямоугольный кусок нейлоновой сетки укладывают на блюдо чашку Петри, содержащей MS твердую среду. Шаг 2 и 3: расчлененный эмбрионов и семени пальто нежноперемещается к краям пинцетом с помощью иглы шприца перед передачей их на нейлоновой сетки. Шаг 4 и 5: Сборка круглую и один слой семенных оболочек и утилизировать эмбрионов в виде круглого один слой на центре собранной кожуры кровати.

Рисунок 3
Рисунок 3. Представитель результаты с семенным материалом, не в состоянии синтезировать GA. Кожуры постельные принадлежности анализ с использованием семян пальто и эмбрионов расчлененные от GA1 (ГА1-21) мутантные семена, не в состоянии синтезировать GA. Панели показать растительный материал, как описано на рисунке 80 ч после набухания.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Процедура семенной оболочки постельные принадлежности анализ (АДА), описанный здесь, в принципе применимы к любому обстоятельствах, когда Arabidopsis всхожесть семян блокируется (или задержки) и где эндосперм подозревается реализовать этот арест. Последнее может быть подтверждено путем удаления семенной оболочки (семенная и эндосперм) и замечая, что эмбриональные рост продолжается быстрее по отношению к наблюдаемому при эмбрионы окружены семенной кожуры. Всхожесть может быть заблокирован в ответ на конкретных экологических физических параметров (например, потенциальных воды или качества света) или в конкретных генетических фонов (например отсутствие синтеза ГА, как и в GÀ1 мутантов, см. рисунок 3).

Там нет общих правил, касающихся количества семенных оболочек и эмбрионов, которые будут использоваться для дыхательных аппаратов. Это зависит от партии семян (и в частности ее свежести) и тип эксперимента должны быть выполнены. Поэтому очень важно, чтобы Adjusт количество расчлененного материала для каждого конкретного случая, контролируя рост на зародышах на ложе из семенных оболочек на ежедневной основе. Однако, как правило, несколько семян пальто необходимы при высокой спящие Arabidopsis экотипы используются. Ниже приведены типичные количества семенных оболочек и эмбрионов, которые были успешно использованы при сборке SCBAs:

АДА с покоя семенного материала 6:
* Свежеубранных (т.е. в состоянии покоя) Кабо-Верде Остров экотип (ХВН): Использование 10 эмбрионов, и 20 семян пальто.

* Свежеубранных Ландсберг (Лер) Семена: Использование 10 эмбрионов и 80 семян пальто.

АДА в отсутствии гиббереллина (GA) биосинтез (рис. 3):
* Семена GA1 мутантные (Колумбия - Col - Экотип): Используйте 10 эмбрионов и 80 семенных оболочек.

* дикого типа Col семена с 10 мкМ паклобутразол (ингибитор биосинтеза GA) в среду для прорастания: Использование 10 эмбрионс и 100 семенных оболочек. Добавить паклобутразол, когда среда охлаждается до 50 ° С перед заливкой в ​​чашке Петри.

АДА после импульса дальнего красного (FR) света 9:
* Используйте 12 эмбрионов и 100 семенных оболочек.

Единственное ограничение технике SCBA в том, что это требует терпения и ловкость для того, чтобы быстро собрать расчлененные семян материалы при этом не убив эмбрионов. Опытный исследователь может анализировать 100 семян в 20-30 мин. Тем не менее, менее опытные пользователи, возможно, потребуется 1 час и ожидать эмбриональных ущерб. Насколько нам известно, не существует до сих пор никаких альтернативных методов для изучения роли эндосперма для контроля всхожести семян.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Авторы заявляют, что они не имеют конкурирующие финансовые интересы.

Acknowledgments

Эта работа была поддержана грантами от Швейцарского национального научного фонда и государством Женеве.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Thermomixer Comfort Eppendorf AG 5355 000.011 Eppendorf AG, Hamburg, Germany
Vacusafe Comfort INTEGRA Biosciences AG 158 310 Integra Biosciences AG, Zizers, Switzerland
Petri dish plate (100 mm x 20 mm) Greiner Bio-One GmbH 664 102 Greiner Bio-One GmbH, Frickenhausen, Germany
Murashige and Skoog Sigma-Aldrich M5524 Sigma-Aldrich, St Louis, MO, USA
MES Sigma-Aldrich M3671 Sigma-Aldrich, St Louis, MO, USA
Agar (plant agar) Duchefa Biochemie B.V. P1001 Duchefa Biochemie, Haarlem, Netherlands
Dumont forceps #5 Fine Science Tools GmbH 11251-10 Fine Science Tools GmbH, Heidelberg Germany
Syringe needle BD Micro-Fine 324827 BD, Franklin Lakes, NJ USA
Nylon mesh (SEFAR NYTEX) SEFAR AG 03-50/31 Sefar AG, Heiden, Switzerland
Growth chamber CLF Plant Climatics Percival I-30BLLX CLF plant Climatics, Wertingen, Germany
Paclobutrazol Sigma-Aldrich 46046 Sigma-Aldrich, St Louis, MO, USA

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Debeaujon, I., Leon-Kloosterziel, K. M., Koornneef, M. Influence of the testa on seed dormancy, germination, and longevity in Arabidopsis. Plant Physiol. 122, 403-414 (2000).
  2. Baroux, C., Spillane, C., Grossniklaus, U. Evolutionary origins of the endosperm in flowering plants. Genome Biol. 3, reviews1026 (2002).
  3. Debeaujon, I., Lepiniec, L., Pourcel, L., Routaboul, J. -M. Seed development, dormancy and germination. , Blackwell Publishing. 25-43 (2007).
  4. Finch-Savage, W. E., Leubner-Metzger, G. Seed dormancy and the control of germination. New Phytol. 171, 501-523 (2006).
  5. Bethke, P. C., et al. The Arabidopsis aleurone layer responds to nitric oxide, gibberellin, and abscisic acid and is sufficient and necessary for seed dormancy. Plant Physiol. 143, 1173-1188 (2007).
  6. Lee, K. P., Piskurewicz, U., Tureckova, V., Strnad, M., Lopez-Molina, L. A seed coat bedding assay shows that RGL2-dependent release of abscisic acid by the endosperm controls embryo growth in Arabidopsis dormant seeds. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 107, 19108-19113 (2010).
  7. Reed, J. W., Nagatani, A., Elich, T. D., Fagan, M., Chory, J. Phytochrome A and Phytochrome B Have Overlapping but Distinct Functions in Arabidopsis Development. Plant Physiol. 104, 1139-1149 (1994).
  8. Shinomura, T., et al. Action spectra for phytochrome A- and B-specific photoinduction of seed germination in Arabidopsis thaliana. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 93, 8129-8133 (1996).
  9. Lee, K. P., et al. Spatially and genetically distinct control of seed germination by phytochromes A and B. Genes Dev. 26, 1984-1996 (2012).
  10. Lee, K. P., Lopez-Molina, L. Control of seed germination in the shade. Cell Cycle. 11, 4489-4490 (2012).
  11. Piskurewicz, U., et al. The gibberellic acid signaling repressor RGL2 inhibits Arabidopsis seed germination by stimulating abscisic acid synthesis and ABI5 activity. Plant Cell. 20, 2729-2745 (2008).
  12. Piskurewicz, U., Tureckova, V., Lacombe, E., Lopez-Molina, L. Far-red light inhibits germination through DELLA-dependent stimulation of ABA synthesis and ABI3 activity. EMBO J. 28, 2259-2271 (2009).
  13. Debeaujon, I., Koornneef, M. Gibberellin requirement for Arabidopsis seed germination is determined both by testa characteristics and embryonic abscisic acid. Plant Physiol. 122, 415-424 (2000).
  14. Sun, T. P., Kamiya, Y. The Arabidopsis GA1 locus encodes the cyclase ent-kaurene synthetase A of gibberellin biosynthesis. Plant Cell. 6, 1509-1518 (1994).
  15. Alonso, J. M., et al. Genome-wide insertional mutagenesis of Arabidopsis thaliana. Science. 301, 653-657 (2003).
  16. Rook, F., et al. Impaired sucrose-induction mutants reveal the modulation of sugar-induced starch biosynthetic gene expression by abscisic acid signalling. Plant J. 26, 421-433 (2001).

Tags

Биологии растений выпуск 81 технологии промышленности и сельского хозяйства науки о жизни (общее) управления прорастания семян кожуры эндосперма пок Дальний красный свет АБК гиббереллинов факторов DELLA
Семя пальто постельных принадлежностей Анализ чтобы Генетически Путешествуйте<em&gt; Экстракорпоральное</em&gt; Как эндосперма управления прорастания семян в<em&gt; Арабидопсис</em
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Lee, K. P., Lopez-Molina, L. A Seed… More

Lee, K. P., Lopez-Molina, L. A Seed Coat Bedding Assay to Genetically Explore In Vitro How the Endosperm Controls Seed Germination in Arabidopsis thaliana. J. Vis. Exp. (81), e50732, doi:10.3791/50732 (2013).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter