Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Medicine
Click here for the English version

Medicine

Intrastriatal Injektion af autologt blod eller Clostridial Collagenase som murine modeller af intracerebral blødning

Published: July 3, 2014 doi: 10.3791/51439
Automatic Translation
1, 1, 2, 3, 1,4, 1,2,4, 1,2
1Multidisciplinary Neuroprotection Laboratories, Department of Anesthesiology, Duke University, 2Department of Neurology, Duke University, 3Department of Radiology, Duke University, 4Department of Neurobiology, Duke University

Abstract

Intracerebral blødning (ICH) er en almindelig form af cerebrovaskulær sygdom, og er forbundet med betydelig morbiditet og mortalitet. Mangel på effektiv behandling og svigt af store kliniske forsøg med henblik på hæmostase og blodprop fjernelse demonstrere behovet for yderligere mekanisme drevet undersøgelse af ICH. Denne forskning kan udføres gennem de rammer, som prækliniske modeller. To murine modeller i populære brug omfatter intrastriatal (basalganglierne) injektion af enten autolog fuldblod eller Clostridium collagenase. Da hver model repræsenterer klart forskellige patofysiologiske funktioner i forbindelse med ICH kan vælges anvendelse af en bestemt model, baseret på, hvad aspekt af sygdommen, der skal undersøges. For eksempel autologt blod injektion mest nøjagtigt repræsenterer hjernens reaktion på tilstedeværelsen af ​​intraparenchymal blod, og kan bedst replikere lobar blødning. Clostridialt collagenase injektion mest præcist repræsenterer de sindkøbscenter fartøj brud og hæmatom evolution karakteristisk for dybe blødninger. Således hver modelresultater i forskellige hæmatom dannelse, neuroinflammatoriske svar, hjerneødem udvikling og neurobehavioral resultater. Robusthed af en påstået terapeutisk intervention kan bedst vurderes ved hjælp af begge modeller. I denne protokol, er induktion af ICH med begge modeller, øjeblikkelig postoperativ demonstration af skade, og tidlige postoperative pleje teknikker demonstreret. Begge modeller resulterer i reproducerbare skader, hæmatom mængder og neurobehavioral underskud. På grund af heterogenitet menneskelig ICH, er der behov for flere prækliniske modeller til grundigt at undersøge patofysiologiske mekanismer og afprøve mulige terapeutiske strategier.

Introduction

Intracerebral blødning (ICH) er en forholdsvis almindelig form for cerebrovaskulær sygdom med ca 40-50% af ramte patienter dør inden for 30 dage 1. Desværre er en lille forbedring er sket i dødeligheden i de sidste 20 år 2. Rapporter fra National Institutes of Health 3 og retningslinjer fra American Heart Association 4 understregede vigtigheden af at udvikle klinisk relevante modeller af ICH til at udvide forståelsen af patofysiologien og udvikle mål for nye terapeutiske tilgange.

Flere modeller eksisterer for at efterligne menneskelige ICH 5. Som forståelse af ICH patofysiologi modnes, er det blevet klart, at en bred vifte af modeller, kan benyttes til at undersøge forskellige aspekter af sygdommen. Tidligere anvendte modeller omfatter murine amyloidangiopati 6, intraparenchymal mikroballonsfyldstof isætning og inflation 7 og direkte arterieblodinfiltration 8,9. Lobar blødning fra amyloidangiopati er modelleret med anvendelsen af ​​transgene mus og udgør en særskilt ICH subtype. Mikroballonsfyldstof modeller efterligne akut masse fra dannelse af hæmatomer, men undlader at fange hjernens cellulære respons på tilstedeværelsen af ​​blod. Endelig direkte arteriel blod infiltration udsætter hjernen til arterielle pres fra den femorale arterie. Således Denne model efterligner arterielle tryk og tilstedeværelsen af ​​blod, men ikke udsætte hjernen til mikrovaskulære skader fra små blodkar brud. Endvidere har denne model i sagens natur stor variation. Interessant, spontant hypertensive rotter 10 udvikle spontan ICH som de bliver ældre. Undersøgelse af disse dyr efter ICH udvikling kan efterligne sygdommen i overværelse af en af ​​de store følgesygdomme som disponerer mennesker til ICH. Selv om disse andre modeller findes, intrastriatal injektion af Clostridium collagenase 11 eller instrastiatal injektion af enutologous fuldblod 12 er, i øjeblikket, bruges de to mest almindelige modeller i præklinisk ICH forskning.

ICH model udvælgelse bør ske på grundlag af formålet med den eksperimentelle spørgsmål, herunder arter udvælgelse og fremgangsmåde til at inducere dannelse af hæmatomer. For eksempel grise er store dyr med relativt store hvide substans i hjernen mængder sammenlignet med mus. Således er grisemodeller velegnet til at studere hvide substans patofysiologi efter hjerneblødning. I modsætning hertil hjerner gnaver er stort set grå materie, men transgene systemer gør gnavere nyttigt at vurdere molekylære mekanismer for skade og bedring efter hjerneblødning. Hver model har sine iboende styrker og svagheder (tabel 1), som bør overvejes nøje, før eksperimenter.

Følgende protokoller demonstrere de autologe blod og collagenase injektion modeller i mus. Disse modeller har hver især blevet oversat fra modeller, der oprindeligt er udviklet i rotter13,14 og tillade anvendelse af almindeligt tilgængelige transgen teknologi til at udforske molekylære mekanismer, der er forbundet med celledød efter hjerneblødning. Begge repræsenterer klart forskellige skade mekanismer fra menneskelig ICH, og begge har tydeligt forskellige udfald forventede i form af adfærdsmæssige og histologiske foranstaltninger. Således kan visse hypoteser egner sig til én model frem for den anden, men mange ideer kan kræve validering i begge modeller.

Tabel 1.. Sammenligning af karakteristika collagenase-og autologe blod injektion intracerebral blødning modeller.

Reproducerbarhed
Collagenase Injektion Blood Injektion
Brugervenlighed + + + + +
+ + + +
Kontrol af Blødninger Størrelse + + + + +
Blood Refluks + + +
Simulerer menneskelig sygdom + -
Enkelhed + + + +
Anvendelse i flere arter, + + + +

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Etik Erklæring: Denne protokol er blevet godkendt af Duke University Institutional Animal Care og brug Udvalg og følger alle retningslinjer for etisk brug af dyr.

1.. Forberedelse af udstyr

  1. Autoklaver de kirurgiske værktøjer forud for operationen.
  2. Desinficer stereotaktisk apparat med 70% ethanol.
  3. Tænd vandbad og holde vandtemperaturen ved 42 ° C.
  4. Opløs Type IV-S klostridial kollagenase i normalt saltvand i en koncentration på 0,075 U pr 0.4 pi.

2.. Collagenase Injection Model

  1. Musen nøjagtighed.
  2. Bedøver musen i en induktion kammer med 5% isofluran i 30% O 2/70% N2. Tilstrækkelig anæstesi signaleres efter ca 2 min, når mus respirations har bremset til 1 per sekund.
  3. Intubere luftrøret med en 30 mm 20 G intravenøst ​​kateter.
  4. Slut kateteret til engnaver ventilator og mekanisk ventilere lungerne med 1,6% isofluran i 30% O 2/70% N2 med en hastighed på 105 vejrtrækninger per minut med en afgiven tidalvolumen på 0,75 ml ..
  5. Barbere hovedbunden med en elektronisk barbermaskine. Når musen er bedøvet og intuberet, flytte den til en anden arbejdsstation til barbering og vendte derefter tilbage til den kirurgiske bænk.
  6. Fastgør hovedet i en stereotaktisk ramme, og niveau i hovedet med både koronale og sagittale sutur som referencepunkter.
  7. Påfør oftalmologiske salve til øjnene.
  8. Indsæt en rektal temperatur sonde. Oprethold rektal temperatur på 37,0 ± 0,2 ° C ved hjælp af en undervognen cirkulerende vandseng.
  9. Tør det kirurgiske område med betadin følges med 70% ethanol og gentag 3 gange.
  10. Lav en 1 cm midtlinie hovedbund snit og tør periosteum sideværts med en steril bomuld tippes applikator at eksponere bregma.
  11. Bor 1 mm diameter borehul 2,2 mm venstre latERELLE til bregma med en vandkølet boremaskine.
  12. Drej collagenase hætteglas 5 gange, vask derefter en 0,5 pi sprøjte med 25 G kanyle (knyttet til stereotaktisk ramme) med 0,5 pi collagenaseopløsning 5 gange (Efterlad 0,5 pi collagenaseopløsning i sprøjten efter sidste vask).
  13. Juster nålespidsen med borehul derefter bortvise 0,1 gl fra sprøjten og tørre nåleaffasningen med barberkniv at kassere.
  14. Ved hjælp af en mikromanipulator føres nålen 3 mm dybt til cortex og forlade ubevægelig i 30 sek.
  15. Injicer 0,4 pi over 90 sek.
  16. Reducer isofluran 1% og lade nålen ubevægelig i 5 min.
  17. Udbetal nål langsomt.
  18. Påfør 1 - 2 dråber 0,25% bupivacain subkutant og suturere huden.
  19. Sluk isofluran fordamper og fjerne musen fra stereotaktisk ramme.
  20. Lad musen til at genoprette spontan ventilation med efterfølgende trakeal extubation.
  21. Retur musen til en ren bur og give fri adgang tilmad og vand.

3.. Autolog Blood Injection Model

  1. Følg trinene 2,1-2,11 for collagenase injektion model.
  2. Tegn 50 pi sterilt normalt saltvand i en pi sprøjte 30 G50.
  3. Slut mikroliter sprøjte med en 70 cm PE10 rør.
  4. Uddrive alle de normale saltvand fra mikroliter sprøjte ind i PE10 rør til helt de-luftslangen.
  5. Træk mikroliter sprøjte stempel ud 1 mm for at gøre en luftboble i den distale åbning af apparatet PE10 rør-mikroliter sprøjte for at undgå blanding af saltvand og blod under senere procedurer.
  6. Tør den distale centrale halearterien region af mus med 70% ethanol, og skære arterien med en barberkniv ved 0,5 til 1 cm til halespidsen.
  7. Collect 40 ul blod fra halen skåret i apparatet PE10 rør-mikroliter sprøjte. Bemærk: at heparin ikke anvendes i nålen, slanger eller mus.
  8. Fastgør mikroliter sprøjte på injeIndsatsen pumpe.
  9. Tilslut metalkanyle del af en 27 G kanyle til udgangen af ​​PE10 rør, og fastgør nålen til en mikromanipulator på stereotaktisk ramme.
  10. Udvise 2 pi blod ud af 27 G kanyle og tør nåleaffasningen med barberkniv at kassere.
  11. Juster nålespidsen med borehul og indsæt nål 3 mm dyb til cortex.
  12. Der indsprøjtes 35 pi autologt blod med en hastighed på 2 pi per min.
  13. Reducer isofluran 1% og lade nålen ubevægelig i 10 min.
  14. Udbetal p over 30 sek.
  15. Påfør 1 - 2 dråber 0,25% bupivacain subkutant og suturere huden.
  16. Sluk isofluran fordamper og fjerne musen fra stereotaktisk ramme.
  17. Lad musen til at genoprette spontan ventilation med efterfølgende extubation.
  18. Retur mus til et rent bur og tillade fri adgang til mad og vand.

4.. Sham Betjening

  1. Følg de samme procedurer for collagenase injection model, undtagen uden injektion efter indføring af kanylen.

5.. Post-kirurgi Care

  1. Injicer 0,5 ml normalt saltvand subkutant i aften af ​​den kirurgiske procedure på bagsiden af ​​dyrets hals.
  2. Give blødgjort mad med vand og gel mad i små plastikkrus placeret på gulvet i buret. Udskift mad dagligt i 7 dage.
  3. Check for vægttab, sårheling, og tegn på ubehag dagligt i 7 dage.
  4. Hvis inddrivelse intervaller større end 7 dage er påkrævet, kan sutur fjernelse udføres under lys inhaleret anæstesi (ca. 1% isofluran i 30% O 2/70% N 2), hvis det er nødvendigt.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Grund af forskelle i hæmatom dannelse (figur 1), er ipsilateral drejning vises umiddelbart efter vågne op til autolog blod injicerede mus og inden 2 - 4 timer efter collagenase injektion, som hæmatom ekspansion forekommer (figur 2). Fravær af ipsilateral drejning bør rejse bekymring for mangel på væsentlig skade. På det første indlæg skade dag, bør mus i begge modeller demonstrere væsentlige neurologiske underskud (Figur 3). På 24 timer efter injektion, ipsilaterale halvkugler viser stabile hæmatom mængder (Figur 4); yderligere 24 timer efter injektion, bør forventes hjerne vandindhold til at være 79,8 + 0,34% i collagenase-injicerede mus og 79,3 + 0,23% i autologe mus blod injiceres. Bør forventes at dødelighed kan forekomme mellem 10 - 25% af collagenase-injicerede mus og mindre end 10% af autologe mus blod injiceres. Uundgåelige død på grund af hæmatom volumen, cerebralt ødem og increased intrakranielt tryk opstår normalt inden for de første 24-48 timer efter intrastriatal injektion. Døden indtræffer efter 72 timer, kan ofte undgås med en ordentlig post-skade pleje (f.eks., Let adgang til blødgjort mad og vand). Funktionelle opsving begynder normalt med posten skade dag 2 med autologe mus blod-indsprøjtning inddrive betydeligt hurtigere end collagenasebehandlede injicerede mus.

Figur 1
Fig. 1. Serial magnetisk resonans billeddannelse af musehjerner sammenligner autologt blod og collagenase injektion modeller af intracerebral blødning. Efter intracerebral blødning induktion via venstre intrastriatal injektion af 35 pi autologt blod (A) eller 0,075 U Type IV-S klostridial kollagenase (B) 10-12 uger gamle C57/Bl6 hanmus, serial magnetisk resonans imaldring demonstrerer hæmatom ekspansion i collagenasebehandlede injicerede mus i forhold til stabil hæmatom dannelse i de autologe mus blod-indsprøjtning. Hæmatom mængder er 10,1, 23,1, 29,9 mm 3 ved 1, 6, og 12 timer efter collagenase injektion henholdsvis og 7,0, 5,8, 3,2 mm 3 ved 1, 6 og 24 timer efter fuldblod injektion, hhv. Klik her for at se en større version af dette tal.

Figur 2
. Figur 2. Hjørne turn test i mus 24 timer efter intracerebral blødning umiddelbart efter intrastriatal collagenase injektion i venstre basalganglierne, tilstedeværelse af forventet ipsilateral drejning reaktion i 10 -. 12 uger gammel C57/Bl6 hanmus betegner tilstrækkelig skade. Denne drejningbør ske umiddelbart efter betydelig skade i mus injiceret med autologt blod og inden 2 - 4 timers i collagenasebehandlede injicerede mus. Mus i begge modeller viste mere til venstre vender efter skade i forhold til skadede mus (** p <0,01, envejs ANOVA med post-hoc Scheffe test, n = 10/gruppe).

Figur 3
. Figur 3. rotarod ydeevne efter intracerebral blødning i mus Baseline og efter skaden rotorod ventetid på 10 -. 12 uger gammel C57/Bl6 hanmus i en uge efter venstre intrastriatal 35 pi autologt blod-, 0,075 U type IV-S klostridial collagenase-indsprøjtning eller simuleret operation (* p = 0,022; gentagne foranstaltninger ANOVA med post-hoc Scheffe test, F-værdi = 12,726, n = 10/gruppe). Mus vurderet via rotorod teste hver anden dag efter skaden for at undgå betydelig træning bias. </ P>

Figur 4
. Figur 4 Hæmatoxylin og eosin pletter af mus hjernen efter intracerebral blødning Mikrofotografier på 10 -. 12 uger gamle C57/Bl6 hanmus hjerner ved 24 timer efter venstre intrastriatal injektion af 35 pi autolog blod (højre) eller 0,075 U type IV-S Clostridium collagenase (til venstre). Hæmatom mængder er 20,2 mm 3 efter collagenase injektion og 6,4 mm 3 efter fuldblod injektion. Klik her for at se en større version af dette tal.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Trods nye prækliniske forskning og deraf følgende store kliniske forsøg for lovende lægemidler 15-18, er der ingen farmakologiske interventioner vist sig at forbedre resultatet i ICH, og pleje er stadig stort set støttende. Lister over mulige behandlinger kan genereres ved high throughput teknologier, såsom transkriptom og proteom arbejde. Mens disse teknologier fortsætter med at fremme vores viden af potentielle terapeutiske mål, frem og tilbage oversættelse af lovende mål kan bedst undersøges gennem brug af klinisk relevante prækliniske modeller 19-22. Sådanne modeller er nyttige, fordi de tillader hurtig gennemløb af udvalgte ansøgere, undersøgelse af mekanismer in vivo, billig undersøgelse af dosering, terapeutisk vindue, og andre parametre germane at udvikle kliniske forsøg 23-25. Mens åbenlyse fordele findes i at bruge prækliniske modeller, bør modellering forekomme i den mest klinisk relevant but logistisk muligt system til rådighed. Mens der findes modeller for 'højere' order dyr som primater, brug af mus til at modellere menneskelig sygdom giver en billig, high-throughput og kraftfulde teknologi til at undersøge patologiske mekanismer og terapeutiske virkninger. Omfattende transgene systemer giver mulighed for en endnu mere robust evaluering af mekanistiske veje og cellepopulationer involveret.

I øjeblikket to murine modeller er i almindelig brug: intrastriatal autologt blod eller collagenase injektion. Begge modeller er alsidige og nemme at bruge, i forhold til andre takts modeller. Begge modeller kan fremkalde ICH i forskellige hjerneområder 26, der muliggør vurdering af regionale løsninger; hæmatom volumen kan styres og ændres, giver mulighed for evaluering af mild, moderat og svær skade; og klinisk relevant fysiologi (f.eks., blodtryk, temperatur osv.), kan styres. Endelig, mens hver model blev oprindeligt udviklet irotten, begge er siden blevet oversat til mus for at tillade brugen af transgene systemer 21,24,25,27. Men hver model egner sig til undersøgelse af forskellige aspekter af ICH, som hver repræsenterer helt forskellige dele af ICH. Autologt blod-injektion kan genskabe hjernens reaktion på intraparenchymal blod eksponering. Således oprindelige masse påvirke og forskydningskræfter, milde inflammatoriske forandringer, apoptose, og blod resorption kan alle blive undersøgt 10,28. Endvidere har de seneste ændringer til denne model resulteret i evnen til at efterligne hæmatom ekspansion 29,30. Men denne model ikke påberåbe sig den del af vaskulær skade og / eller hæmatom udvidelse findes i den menneskelige sygdom. I modsætning hertil collagenase injektion tilføjer elementer af vaskulær brud, tidlig hæmatom ekspansion og øget neuroinflammatoriske effekt. Mens der findes åbenlyse bekymringer om kunstig bidrag collagenase til denne inflammatorisk effekt, er der en mangel på hård eforeligger stadig flere beviser for denne 31, og vores egne (upublicerede data) antyder, at collagenase isoleret ikke inducerer en markant inflammatorisk respons i cellekultur.

Fra et proceduremæssigt synspunkt begge modeller kræver begrænset dygtighed med mikrokirurgi, og dermed er let at lære for at opnå reproducerbare virkninger. Faldgruber skal undgås, omfatter: 1) invasion af dura eller skabe termisk hjerneskade ved boring, 2) eller penetration af ventrikulære system med nål indsættelse. Dural skade giver mulighed for tilbageløb af injektionsstof og intraventrikulære injektion resulterer i lidt at ingen intraparenchymal hæmatom dannelse. Desuden skal der udvises forsigtighed ved tilbagetrækning nål til ikke forstyrre nydannede / danner hæmatom. Dødeligheden må forventes i en vis procentdel af mus, men er direkte relateret til hæmatom størrelse og graden af ​​skade ønske; således kan dette resultat titreres ved injektionsstoffet volumen / koncentration.

Som med alle modeller, protocoler vil blive optimeret til brug med specifikke operatører. På grund af iboende variabilitet i alle in vivo systemer, kan erfaring med en bestemt model som en afgørende faktor for succes ikke overvurderes. En model karakteristiske egenskaber, operatør erfaring med en given model, outcome målinger af interesse, og logistiske faktorer må tages i betragtning, når du vælger den bedst mulige eksperimentelle model.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Stereotactic frame Stoelting Co. 51603
Probe holder with corner clamp Stoelting Co. 51631
Mini grinder Power Glide Model 60100002
0.5 μl syringe Microliter 86259 25 G needle
5 μl syringe Microliter 7637-01
30 G microliter syringe Microliter 7762-03
Syringe pump KD Scientific Model 100
Heat therapy water pump Gaymar Industries, Inc. Model# TP650
Circulating waterbed CMS Tool & Die, Inc.
Rodent ventilator Harvard Apparatus Model 683
Isoflurane vaporizer Drager Vapor 19.1
Air flowmeter Cole Parmer Model PMR1-010295
Induction chamber Self made
Otoscope Welch Allyn 22820
Intravenous catheter Becton-Dickinson 381534 20 G, 1.16 inch Insyte-W
Isoflurane Baxter Healthcare Corporation NDC10019-360-69
Collagenase Type IV-S Sigma C1889
Polyethylene tubing PE10 Becton-Dickinson 427401
27 G 1 1/4 inch needle Becton-Dickinson 305136
Surgical scissors Miltex 21-539
Forceps Miltex 17-307
Needle holder Boboz RS-7840
Monofilament suture Ethicon 8698 Size 5-0
Indicating controller YSI 73ATD

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Asch, C. J., et al. Incidence, case fatality, and functional outcome of intracerebral haemorrhage over time, according to age, sex, and ethnic origin: a systematic review and meta-analysis. Lancet Neurology. 9, 167-176 (2010).
  2. Qureshi, A. I., Mendelow, A. D., Hanley, D. F. Intracerebral haemorrhage. Lancet. 373, 1632-1644 (2009).
  3. Participants, N. I. W. Priorities for clinical research in intracerebral hemorrhage: report from a National Institute of Neurological Disorders and Stroke workshop. Stroke. 36, (2005).
  4. Morgenstern, L. B., et al. Guidelines for the management of spontaneous intracerebral hemorrhage: a guideline for healthcare professionals from the American Heart Association/American Stroke Association. Stroke. 41, 2108-2129 (2010).
  5. James, M. L., Warner, D. S., Laskowitz, D. T. Preclinical models of intracerebral hemorrhage: a translational perspective. Neurocrit Care. 9, 139-152 (2008).
  6. Winkler, D. T., et al. Spontaneous hemorrhagic stroke in a mouse model of cerebral amyloid angiopathy. J Neurosci. 21, 1619-1627 (2001).
  7. Sinar, E. J., Mendelow, A. D., Graham, D. I., Teasdale, G. M. Experimental intracerebral hemorrhage: effects of a temporary mass lesion. J Neurosurg. 66, 568-576 (1987).
  8. Mendelow, A. D., Bullock, R., Teasdale, G. M., Graham, D. I., McCulloch, J. Intracranial haemorrhage induced at arterial pressure in the rat. Part 2: Short term changes in local cerebral blood flow measured by autoradiography. Neurol Res. 6, 189-193 (1984).
  9. Bullock, R., Mendelow, A. D., Teasdale, G. M., Graham, D. I. Intracranial haemorrhage induced at arterial pressure in the rat. Part 1: Description of technique, ICP changes and neuropathological findings. Neurol Res. 6, 184-188 (1984).
  10. Sang, Y. H., Su, H. X., Wu, W. T., So, K. F., Cheung, R. T. Elevated blood pressure aggravates intracerebral hemorrhage-induced brain injury. J Neurotrauma. 28, 2523-2534 (2011).
  11. Krafft, P. R., et al. Modeling intracerebral hemorrhage in mice: injection of autologous blood or bacterial collagenase. J Vis Exp. , (2012).
  12. Sansing, L. H., et al. Autologous blood injection to model spontaneous intracerebral hemorrhage in mice. J Vis Exp. , (2011).
  13. Rosenberg, G. A., Mun-Bryce, S., Wesley, M., Kornfeld, M. Collagenase-induced intracerebral hemorrhage in rats. Stroke. 21, 801-807 (1990).
  14. Nath, F. P., Jenkins, A., Mendelow, A. D., Graham, D. I., Teasdale, G. M. Early hemodynamic changes in experimental intracerebral hemorrhage. J Neurosurg. 65, 697-703 (1986).
  15. Anderson, C. S., et al. Rapid blood-pressure lowering in patients with acute intracerebral hemorrhage. N Engl J Med. 368, 2355-2365 (2013).
  16. Clark, W., Gunion-Rinker, L., Lessov, N., Hazel, K. Citicoline treatment for experimental intracerebral hemorrhage in mice. Stroke. 29, 2136-2140 (1998).
  17. Mayer, S. A., et al. Efficacy and safety of recombinant activated factor VII for acute intracerebral hemorrhage. N Engl J Med. 358, 2127-2137 (2008).
  18. Mendelow, A. D., et al. Early surgery versus initial conservative treatment in patients with spontaneous supratentorial lobar intracerebral haematomas (STICH II): a randomised trial. Lancet. , (2013).
  19. James, M. L., Blessing, R., Bennett, E., Laskowitz, D. T. Apolipoprotein E modifies neurological outcome by affecting cerebral edema but not hematoma size after intracerebral hemorrhage in humans. J Stroke Cerebrovasc Dis. 18, 144-149 (2009).
  20. James, M. L., Blessing, R., Phillips-Bute, B. G., Bennett, E., Laskowitz, D. T. S100B and brain natriuretic peptide predict functional neurological outcome after intracerebral haemorrhage. Biomarkers. 14, 388-394 (2009).
  21. James, M. L., Sullivan, P. M., Lascola, C. D., Vitek, M. P., Laskowitz, D. T. Pharmacogenomic effects of apolipoprotein e on intracerebral hemorrhage. Stroke. 40, 632-639 (2009).
  22. James, M. L., et al. Brain natriuretic peptide improves long-term functional recovery after acute CNS injury in mice. J Neurotrauma. 27, 217-228 (2010).
  23. Indraswari, F., et al. Statins improve outcome in murine models of intracranial hemorrhage and traumatic brain injury: a translational approach. J Neurotrauma. 29, 1388-1400 (2012).
  24. Laskowitz, D. T., et al. The apoE-mimetic peptide, COG1410, improves functional recovery in a murine model of intracerebral hemorrhage. Neurocrit Care. 16, 316-326 (2012).
  25. Lei, B., et al. Interaction between sex and apolipoprotein E genetic background in a murine model of intracerebral hemorrhage. Translational Stroke Research. 3, (2012).
  26. Lekic, T., et al. Evaluation of the hematoma consequences, neurobehavioral profiles, and histopathology in a rat model of pontine hemorrhage. J Neurosurg. 118, 465-477 (2013).
  27. Nakamura, T., et al. Intracerebral hemorrhage in mice: model characterization and application for genetically modified mice. J Cereb Blood Flow Metab. 24, 487-494 (2004).
  28. Yang, D., et al. Statins Protect the Blood Brain Barrier Acutely after Experimental Intracerebral Hemorrhage. J Behav Brain Sci. 3, 100-106 (2013).
  29. Rynkowski, M. A., et al. A mouse model of intracerebral hemorrhage using autologous blood infusion. Nature Protocols. 3, 122-128 (2008).
  30. Wang, J., Fields, J., Dore, S. The development of an improved preclinical mouse model of intracerebral hemorrhage using double infusion of autologous whole blood. Brain Research. 1222, 214-221 (2008).
  31. MacLellan, C. L., et al. Intracerebral hemorrhage models in rat: comparing collagenase to blood infusion. J Cereb Blood Flow Metab. 28, 516-525 (2008).

Tags

Medicine intracerebral blødning mus præklinisk autolog blod collagenase neurovidenskab slagtilfælde hjerneskade basalganglierne
Intrastriatal Injektion af autologt blod eller Clostridial Collagenase som murine modeller af intracerebral blødning
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Lei, B., Sheng, H., Wang, H.,… More

Lei, B., Sheng, H., Wang, H., Lascola, C. D., Warner, D. S., Laskowitz, D. T., James, M. L. Intrastriatal Injection of Autologous Blood or Clostridial Collagenase as Murine Models of Intracerebral Hemorrhage. J. Vis. Exp. (89), e51439, doi:10.3791/51439 (2014).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter