Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Medicine
Click here for the English version

Medicine

Intrastriatal Injektion av autologt blod eller Clostridial kollagenas som musmodeller av intracerebral blödning

Published: July 3, 2014 doi: 10.3791/51439
Automatic Translation
1, 1, 2, 3, 1,4, 1,2,4, 1,2
1Multidisciplinary Neuroprotection Laboratories, Department of Anesthesiology, Duke University, 2Department of Neurology, Duke University, 3Department of Radiology, Duke University, 4Department of Neurobiology, Duke University

Abstract

Intracerebral blödning (ICH) är en vanlig form av cerebrovaskulär sjukdom och förknippas med betydande morbiditet och mortalitet. Brist på effektiv behandling och misslyckande av stora kliniska studier som syftar till hemostas och koagulera borttagning visar behovet av ytterligare mekanism driven utredning av ICH. Denna forskning kan utföras genom den ram som prekliniska modeller. Två musmodeller i populär användning inkluderar intrastriatal (basala ganglierna) injektion av antingen autologt helblod eller clostridial kollagenas. Eftersom representerar varje modell helt olika patofysiologiska funktioner som är relaterade till ICH, kan väljas användning av en viss modell som bygger på vilken aspekt av sjukdomen är att studeras. Till exempel autologt blod injektion representerar mest korrekt hjärnans svar på närvaron av intraparenkymal blod, och kan närmast replikera lobära blödning. Clostridial kollagenas injektion representerar de mest noggrantgalleria kärl bristning och hematom evolution karakteristisk för djupa blödningar. Således varje modell resulterar i olika hematom, neuroinflammatoriska respons, cerebralt ödem utveckling och neurobehavioral resultat. Robusthet av en påstådd terapeutisk intervention kan bedömas bäst med båda modellerna. I detta protokoll, är induktion av ICH med båda modellerna, omedelbara postoperativa demonstration av skada, och tidiga postoperativa vårdteknik demonstreras. Båda modellerna resulterar i reproducerbara skador, hematom volymer och neurobehavioral underskott. På grund av den heterogena mänskliga ICH, finns flera prekliniska modeller som krävs för att grundligt undersöka patofysiologiska mekanismer och testa potentiella terapeutiska strategier.

Introduction

Intracerebral blödning (ICH) är en relativt vanlig form av cerebrovaskulär sjukdom med cirka 40-50% av drabbade patienter som dör inom 30 dagar 1. Tyvärr har liten förbättring skett i dödligheten under de senaste 20 åren 2. Rapporter från National Institutes of Health 3 och riktlinjer från American Heart Association 4 betonade vikten av att utveckla kliniskt relevanta modeller av ICH att utöka förståelsen av patofysiologi och utveckla mål för nya terapeutiska metoder.

Flera modeller finns för att efterlikna den mänskliga ICH 5. Som förståelse för ICH patofysiologi mognar, har det blivit uppenbart att en mängd olika modeller kan användas för att undersöka olika aspekter av sjukdomen. Tidigare använda modeller inkluderar murina amyloid angiopati 6, intraparenkymal mikroballonger insättning och inflationen 7, och direkt arteriellt blodinfiltration 8,9. Lobar hemorragi från amyloidangiopati har modellerats med användning av transgena möss och representerar en distinkt ICH undertyp. Mikroballonger modeller härma akut masseffekt från hematombildning men misslyckas med att fånga hjärnans cellulära svar på närvaron av blod. Slutligen utsätter direkt arteriellt blod infiltration hjärnan till artärtryck från lårbensartären. Således innebär denna modell härmar artärtryck och förekomst av blod men inte utsätta hjärnan för mikrovaskulära skador från små blodkärl brista. Vidare har denna modell inneboende hög variabilitet. Intressant, spontant hypertensiva råttor 10 utvecklar spontan ICH som de gamla. Studie av dessa djur efter ICH utveckling kan efterlikna sjukdomen i närvaro av en av de stora sjukdomstillstånd som predisponerar människor till ICH. Även om dessa andra modeller finns, intrastriatal injektion av Clostridial kollagenas 11 eller instrastiatal injektion av enutologous helblod 12 är, för närvarande, de två vanligaste modellerna som används inom preklinisk ICH forskning.

ICH modellval bör göras utifrån syftet med den experimentella frågan, inklusive val av arter och metod för att framkalla hematom. Till exempel grisar är stora djur med relativt stora vita substansen i hjärnan volymer jämfört med möss. Således är svin modeller lämpade för att studera vita substansen patofysiologi efter ICH. Däremot gnagare hjärnor är i stort sett grå substans, men transgena system gör gnagare lämpligt att utvärdera molekylära mekanismer för skada och återhämtning efter ICH. Varje modell har sina inneboende styrkor och svagheter (tabell 1), som bör övervägas noga innan experiment.

Följande protokoll visar de autologa blod och kollagenas injektion modeller i möss. Dessa modeller har var och översatts från modeller som ursprungligen utvecklats i råttor13,14 och tillåta användning av allmänt tillgängliga transgen teknik för att undersöka molekylära mekanismer som förknippas med celldöd efter ICH. Båda representerar helt olika skademekanismer från mänsklig ICH, och båda har helt olika förväntade utfallet i termer av beteende-och histologiska åtgärder. Således kan vissa hypoteser lämpar sig för en modell över den andra, men många idéer kan kräva godkännande i båda modellerna.

Tabell 1. Jämförelse av egenskaper hos kollagenas-och autologa blod injektion intracerebral blödning modeller.

Reproducerbarhet
Kollagenas Injektion Blod Injektion
Lättanvänd + + + + +
+ + + +
Kontroll av blödning Storlek + + + + +
Blod Reflux + + +
Simulerar Human Disease + -
Enkelhet + + + +
Användning i flera arter + + + +

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Etik uttalande: Detta protokoll har godkänts av Duke University Institutional Animal Care och användning kommittén och följer alla riktlinjer för etisk användning av djur.

1. Beredning av utrustning

  1. Autoklav de kirurgiska verktygen före operation.
  2. Desinficera stereotaktisk apparat med 70% etanol.
  3. Slå på vattenbadet och hålla vattentemperaturen vid 42 ° C.
  4. Lös typ IV-S, Clostridium-kollagenas i normal saltlösning vid en koncentration av 0,075 U per 0,4 pl.

2. Kollagenas Injection Model

  1. Väg musen.
  2. Bedöva musen i en induktion kammare med 5% isofluran hos 30% O 2/70% N2. Adekvat anestesi signaleras efter ca 2 minuter då mus andetag har avtagit till 1 per sekund.
  3. Intuberas luftstrupen med en 30 mm 20 G intravenös kateter.
  4. Anslut katetern till engnagare ventilator och mekaniskt ventilera lungorna med 1,6% isofluran hos 30% O2 / 70% N2 vid en hastighet av 105 andetag per minut och som kan leverera tidalvolym av 0,75 ml ..
  5. Raka hårbotten med ett elektroniskt rakapparaten. När musen är sövda och intuberas, flytta det till en annan arbetsstation för rakning och återvände sedan till den kirurgiska bänken.
  6. Fäst huvudet i en stereotaktisk ram och nivellera huvudet med både koronalt och sagittal sutur som referenspunkter.
  7. Applicera oftalmologiska salva till ögonen.
  8. Sätt i en rektal temperatursond. Bibehåll rektal temperatur vid 37,0 ± 0,2 ° C med användning av en underreds cirkulerande vattensäng.
  9. Torka det kirurgiska området med Betadine följt med 70% etanol och upprepa tre gånger.
  10. Gör en 1 cm mittlinje hårbotten snitt och torka benhinnan i sidled med en steril bomullspinne för att avslöja bregma.
  11. Borra 1 mm diameter borrhål 2.2 mm kvar latmänna till bregma med en vattenkyld borr.
  12. Rotera kollagenas flaska 5 gånger, sedan tvätta en spruta 0,5 l med 25 G nål (fäst vid stereotaktisk ram) med 0,5 pl kollagenas lösning 5 gånger (Lämna 0.5 l av kollagenas lösning i sprutan efter sista tvätten).
  13. Rikta nålspets med borrhålet sedan utvisa 0.1 l från sprutan och torka nål avfasning med rakblad för att göra sig av med.
  14. Med hjälp av en mikromanipulator, avancera nålen 3 mm djup till cortex och lämna stilla i 30 sekunder.
  15. Injicera 0,4 pl under 90 sek.
  16. Minska isofluran till 1% och lämna nålen orörlig under 5 min.
  17. Dra nålen långsamt.
  18. Applicera 1-2 droppar av 0,25% bupivakain subkutant och sutur i huden.
  19. Stäng av isofluran Vaporizer och ta bort musen från den stereotaktiska ramen.
  20. Låt musen för att återställa spontan ventilation med efterföljande trakeal extubation.
  21. Återgå musen till en ren bur och tillåta fri tillgång tillmat och vatten.

3. Autolog blod Injection Model

  1. Följ stegen 2,1-2,11 för kollagenas injektionsmodellen.
  2. Rita 50 l sterilt koksaltlösning i en pl spruta 30 G 50.
  3. Anslut mikroliter spruta med en 70 cm PE10 rör.
  4. Utvisa all normal saltlösning från mikroliter sprutan i PE10 rör för att helt de-luftslangen.
  5. Dra mikroliter sprutkolven ut 1 mm för att göra en luftbubbla i den distala öppningen av PE10 rör-mikroliter spruta apparat för att undvika blandning av salt och blod under senare förfaranden.
  6. Torka den distala central svansartären regionen av mus med 70% etanol, och skars artären med en rakkniv vid 0,5 till 1 cm från svansspetsen.
  7. Samla 40 pl av blod från svansen skära in i PE10 rör-mikroliter spruta apparat. Notera: att heparin inte används i nålen, rör, eller mus.
  8. Fäst mikroliter sprutan till injeInsatser pump.
  9. Anslut metallkanyldelen av en 27 G nål till slutet av PE10 rör, och fäst nålen till en mikromanipulator på den stereotaktiska ramen.
  10. Häll 2 l av blod av 27 G nål och torka nål avfasning med rakblad för att göra sig av med.
  11. Rikta nålspets med burr hål och sätt in nålen 3 mm djupt till cortex.
  12. Injicera 35 ul av autologt blod i en takt av 2 | il per min.
  13. Minska isofluran till 1% och lämna nålen orörlig under 10 min.
  14. Dra nålen över 30 sek.
  15. Applicera 1-2 droppar av 0,25% bupivakain subkutant och sutur i huden.
  16. Stäng av isofluran Vaporizer och ta bort musen från den stereotaktiska ramen.
  17. Låt musen för att återställa spontan ventilation med efterföljande extubation.
  18. Återgå musen till en ren bur och tillåta fri tillgång till mat och vatten.

4. Sham Operation

  1. Gör på samma sätt för kollagenas injection modell, utom utan injektion efter nål insättning.

5. Post-kirurgi Care

  1. Injicera 0,5 ml normal koksaltlösning subkutant på kvällen av det kirurgiska ingreppet på baksidan av djurets hals.
  2. Ge avhärdat mat med vatten och gel mat i små plastmuggar som placeras på golvet i buren. Ersätt mat dagligen under 7 dagar.
  3. Kontrollera om viktminskning, sårläkning, och tecken på obehag dagligen under 7 dagar.
  4. Om återhämtning intervall större än 7 dagar krävs, kan sutur avlägsnande utföras under lätt inhaleras anestesi (ca 1% isofluran i 30% O 2/70% N2), om det behövs.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

På grund av skillnader i hematom (figur 1), är ipsilaterala svarvning visas omedelbart efter vakna för autolog blod injicerade möss och inom 2-4 timmar efter kollagenas injektion, som hematom expansionen sker (Figur 2). Avsaknad av ipsilaterala svarvning bör höja oro för avsaknaden av betydande skada. På det första inlägget skadedagen, bör möss i båda modellerna visar betydande neurologiska bortfall (Figur 3). Vid 24 h efter injektion, ipsilaterala hemisfärerna visa stabila hematom volymer (fig 4); vidare, 24 timmar efter injektionen, bör förväntas hjärn vattenhalt vara 79,8 + 0,34% i kollagenas-injicerade möss och 79,3 + 0,23% i autologa blod injicerade möss. Bör förväntas Dödlighet att inträffa mellan 10 - 25% av kollagenas-injicerade möss och mindre än 10% av autologa blod-injicerade möss. Oundvikliga död på grund av hematom volym, hjärnödem, och increaSED intrakraniella trycket uppträder vanligen inom de första 24 - 48 timmar efter intrastriatal injektion. Döden inträffar efter 72 timmar kan ofta undvikas med korrekt efter skada vård (t ex., God tillgång till avhärdat mat och vatten). Funktionell återhämtning inleds vanligen med post skada dag 2 med autologa blod injicerade möss som återhämtar sig betydligt snabbare än kollagenas-injicerade möss.

Figur 1
Figur 1. Serial magnetisk resonanstomografi av mushjärnor jämför autologt blod och kollagenas injektion modeller av intracerebral blödning. Efter intracerebral blödning induktion via vänster intrastriatal injektion av 35 pl autologt blod (A) eller 0,075 U typ IV-S clostridial kollagenas (B) i 10-12 veckor gamla C57/BL6 hanmöss, seriell magnetisk resonans imåldrande visar hematom expansion i kollagenas-injicerade möss jämfört med stabil hematom i autologa blod injicerade möss. Hematom volymerna 10,1, 23,1, 29,9 mm 3 vid 1, 6, och 12 h efter kollagenas injektion, respektive, och 7,0, 5,8, 3,2 mm 3 vid 1, 6 och 24 h efter helblod injektion, respektive. Vänligen klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figur 2
. Figur 2 Hörn sväng test i möss 24 timmar efter intracerebral blödning Tas omedelbart efter intrastriatal kollagenas injektion i vänstra basala ganglierna, förekomst av förväntade ipsilateral vänd svar i 10 -. 12 veckor gamla C57/BL6 hanmöss betecknar tillräcklig skada. Denna vridningbör ske omedelbart efter betydande skada i möss injicerade med autologt blod och inom 2-4 timmar i kollagenas-injicerade möss. Möss i båda modellerna visade mer vänstersvängar efter skada jämfört med oskadade möss (** p <0,01, envägs ANOVA med post-hoc Scheffe test, n = 10/grupp).

Figur 3
. Figur 3 Rotarod prestanda efter intracerebral blödning i möss Baslinje och efter skade rotorod latenser av 10 -. 12 veckor gamla C57/BL6 möss av hankön för en vecka efter vänster intrastriatala 35 il autologt blod-, 0,075 U typ IV-S, Clostridium-kollagenas-injektion eller simulerad operation (* p = 0,022; upprepade mätningar ANOVA med post-hoc Scheffe test, F-värde = 12,726, n = 10/grupp). Möss bedöms via rotorod testa varannan dag efter skada för att undvika betydande utbildning partiskhet. </ P>

Figur 4
. Figur 4 hematoxylin och eosin fläckar av mushjärna efter intracerebral blödning Mikrofotografier av 10 -. 12 veckor gamla C57/BL6 manliga mushjärnor vid 24 h efter vänster intrastriatal injektion av 35 | il autologt blod (höger) eller 0,075 U typ IV-S, Clostridial kollagenas (vänster). Hematom volymerna är 20,2 mm 3 efter kollagenas injektionen och 6,4 mm 3 efter helblod injektion. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Trots nya preklinisk forskning och resulterande stora kliniska prövningar för lovande terapi 15-18, det finns inga farmakologiska interventioner visat att förbättra resultatet i ICH, och omsorg är i stort sett positiva. Listor med möjliga behandlingar kan genereras med hög genomströmning teknik, såsom transcriptomic och proteomik arbete. Även om dessa tekniker fortsätter att förbättra vår kunskap om potentiella terapeutiska mål, framåt och bakåt översättning av lovande mål kan bäst undersökas genom användning av kliniskt relevanta prekliniska modeller 19-22. Sådana modeller är användbara eftersom de tillåter snabb genomströmning av utvalda kandidater, undersökning av mekanismer in vivo, billig undersökning av dosering terapeutiskt fönster, och andra parametrar relevant för utveckling av kliniska försök 23-25. Medan uppenbara fördelar finns med att använda prekliniska modeller, bör modellering ske i den mest kliniskt relevanta but logistiskt genomförbart system som finns tillgängligt. Medan modeller finns för "högre" beställ djur som primater, användning av möss för att modellera mänskliga sjukdomar ger en billig, hög genomströmning, och kraftfulla teknik för att undersöka patologiska mekanismer och terapeutiska effekter. Införliva transgena system möjliggör en ännu mer robust utvärdering av mekanistiska vägar och cellpopulationer inblandade.

För närvarande två musmodeller är i allmänt bruk: intrastriatal autologt blod eller kollagenas injektion. Båda modellerna är mångsidiga och enkla att använda, relativt andra strokemodeller. Båda modellerna kan framkalla ICH i olika hjärnområden 26, som möjliggör utvärdering av regionala åtgärder; hematom volymen kan kontrolleras och ändras, vilket möjliggör utvärdering av mild, måttlig och svår skada; och kliniskt relevant fysiologi (t ex., blodtryck, temperatur, etc.) kan kontrolleras. Slutligen, medan varje modell utvecklades ursprungligen iråtta, båda har sedan översatts till möss för att tillåta användning av transgena system 21,24,25,27. Emellertid lämpar varje modell själv till studiet av olika aspekter av ICH, som vardera representerar distinkt olika komponenterna av ICH. Autolog blodinjektion kan återskapa hjärnans reaktion på intraparenkymal blodexponering. Således ursprungliga massan påverkar och skjuvkrafter, milda inflammatoriska förändringar, apoptos, och blod resorption kan alla studeras 10,28. Vidare har nyligen gjorda modifieringar av denna modell resulterade i förmågan att härma hematom expansions 29,30. Men denna modell inte åberopa den del av kärlskada och / eller hematom utbyggnad finns i den mänskliga sjukdomen. Däremot kollagenas injektion adderar elementen i vaskulär bristning, tidig expansion hematom och förstärkt neuroinflammatoriska effekt. Medan uppenbara farhågor finns om artefaktuella bidrag kollagenas till denna inflammatorisk effekt, det finns en brist på hårt evidence för denna 31 och våra egna data (opublicerade) tyder på att kollagenas i isolering inte inducerar en markerad inflammatoriskt svar i cellkultur.

Ur processuell synvinkel, båda modellerna kräver begränsad skicklighet med mikrokirurgi och därmed lätt lärt sig att erhålla reproducerbara effekter. Fallgropar som bör undvikas är: 1) invasion av dura eller skapa termisk hjärnskada vid borrning, 2) eller penetration av den ventrikulära systemet med nål insättning. Dural skada tillåter återflöde av injicerings, och intraventrikulär injektion ger liten eller ingen intraparenkymal hematom. Vidare måste man vara försiktig när nålen tillbakadragande för att inte störa nybildade / bildar hematom. Dödligheten är att vänta på en viss procent av möss, men är direkt relaterad till hematom storlek och graden av skada önskas; alltså, kan detta resultat titreras med injicerings volym / koncentration.

Som med alla modeller, protokoler kommer att optimeras för användning av specifika operatörer. På grund av normala variationer i alla in vivo-system, kan upplevelsen med en viss modell som en nyckelfaktor för framgång inte överskattas. En modells särdrag, operatör erfarenhet med en viss modell, utfallsmått av intresse, och logistiska faktorer måste alla beaktas vid valet av bästa möjliga experimentella modell.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Stereotactic frame Stoelting Co. 51603
Probe holder with corner clamp Stoelting Co. 51631
Mini grinder Power Glide Model 60100002
0.5 μl syringe Microliter 86259 25 G needle
5 μl syringe Microliter 7637-01
30 G microliter syringe Microliter 7762-03
Syringe pump KD Scientific Model 100
Heat therapy water pump Gaymar Industries, Inc. Model# TP650
Circulating waterbed CMS Tool & Die, Inc.
Rodent ventilator Harvard Apparatus Model 683
Isoflurane vaporizer Drager Vapor 19.1
Air flowmeter Cole Parmer Model PMR1-010295
Induction chamber Self made
Otoscope Welch Allyn 22820
Intravenous catheter Becton-Dickinson 381534 20 G, 1.16 inch Insyte-W
Isoflurane Baxter Healthcare Corporation NDC10019-360-69
Collagenase Type IV-S Sigma C1889
Polyethylene tubing PE10 Becton-Dickinson 427401
27 G 1 1/4 inch needle Becton-Dickinson 305136
Surgical scissors Miltex 21-539
Forceps Miltex 17-307
Needle holder Boboz RS-7840
Monofilament suture Ethicon 8698 Size 5-0
Indicating controller YSI 73ATD

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Asch, C. J., et al. Incidence, case fatality, and functional outcome of intracerebral haemorrhage over time, according to age, sex, and ethnic origin: a systematic review and meta-analysis. Lancet Neurology. 9, 167-176 (2010).
  2. Qureshi, A. I., Mendelow, A. D., Hanley, D. F. Intracerebral haemorrhage. Lancet. 373, 1632-1644 (2009).
  3. Participants, N. I. W. Priorities for clinical research in intracerebral hemorrhage: report from a National Institute of Neurological Disorders and Stroke workshop. Stroke. 36, (2005).
  4. Morgenstern, L. B., et al. Guidelines for the management of spontaneous intracerebral hemorrhage: a guideline for healthcare professionals from the American Heart Association/American Stroke Association. Stroke. 41, 2108-2129 (2010).
  5. James, M. L., Warner, D. S., Laskowitz, D. T. Preclinical models of intracerebral hemorrhage: a translational perspective. Neurocrit Care. 9, 139-152 (2008).
  6. Winkler, D. T., et al. Spontaneous hemorrhagic stroke in a mouse model of cerebral amyloid angiopathy. J Neurosci. 21, 1619-1627 (2001).
  7. Sinar, E. J., Mendelow, A. D., Graham, D. I., Teasdale, G. M. Experimental intracerebral hemorrhage: effects of a temporary mass lesion. J Neurosurg. 66, 568-576 (1987).
  8. Mendelow, A. D., Bullock, R., Teasdale, G. M., Graham, D. I., McCulloch, J. Intracranial haemorrhage induced at arterial pressure in the rat. Part 2: Short term changes in local cerebral blood flow measured by autoradiography. Neurol Res. 6, 189-193 (1984).
  9. Bullock, R., Mendelow, A. D., Teasdale, G. M., Graham, D. I. Intracranial haemorrhage induced at arterial pressure in the rat. Part 1: Description of technique, ICP changes and neuropathological findings. Neurol Res. 6, 184-188 (1984).
  10. Sang, Y. H., Su, H. X., Wu, W. T., So, K. F., Cheung, R. T. Elevated blood pressure aggravates intracerebral hemorrhage-induced brain injury. J Neurotrauma. 28, 2523-2534 (2011).
  11. Krafft, P. R., et al. Modeling intracerebral hemorrhage in mice: injection of autologous blood or bacterial collagenase. J Vis Exp. , (2012).
  12. Sansing, L. H., et al. Autologous blood injection to model spontaneous intracerebral hemorrhage in mice. J Vis Exp. , (2011).
  13. Rosenberg, G. A., Mun-Bryce, S., Wesley, M., Kornfeld, M. Collagenase-induced intracerebral hemorrhage in rats. Stroke. 21, 801-807 (1990).
  14. Nath, F. P., Jenkins, A., Mendelow, A. D., Graham, D. I., Teasdale, G. M. Early hemodynamic changes in experimental intracerebral hemorrhage. J Neurosurg. 65, 697-703 (1986).
  15. Anderson, C. S., et al. Rapid blood-pressure lowering in patients with acute intracerebral hemorrhage. N Engl J Med. 368, 2355-2365 (2013).
  16. Clark, W., Gunion-Rinker, L., Lessov, N., Hazel, K. Citicoline treatment for experimental intracerebral hemorrhage in mice. Stroke. 29, 2136-2140 (1998).
  17. Mayer, S. A., et al. Efficacy and safety of recombinant activated factor VII for acute intracerebral hemorrhage. N Engl J Med. 358, 2127-2137 (2008).
  18. Mendelow, A. D., et al. Early surgery versus initial conservative treatment in patients with spontaneous supratentorial lobar intracerebral haematomas (STICH II): a randomised trial. Lancet. , (2013).
  19. James, M. L., Blessing, R., Bennett, E., Laskowitz, D. T. Apolipoprotein E modifies neurological outcome by affecting cerebral edema but not hematoma size after intracerebral hemorrhage in humans. J Stroke Cerebrovasc Dis. 18, 144-149 (2009).
  20. James, M. L., Blessing, R., Phillips-Bute, B. G., Bennett, E., Laskowitz, D. T. S100B and brain natriuretic peptide predict functional neurological outcome after intracerebral haemorrhage. Biomarkers. 14, 388-394 (2009).
  21. James, M. L., Sullivan, P. M., Lascola, C. D., Vitek, M. P., Laskowitz, D. T. Pharmacogenomic effects of apolipoprotein e on intracerebral hemorrhage. Stroke. 40, 632-639 (2009).
  22. James, M. L., et al. Brain natriuretic peptide improves long-term functional recovery after acute CNS injury in mice. J Neurotrauma. 27, 217-228 (2010).
  23. Indraswari, F., et al. Statins improve outcome in murine models of intracranial hemorrhage and traumatic brain injury: a translational approach. J Neurotrauma. 29, 1388-1400 (2012).
  24. Laskowitz, D. T., et al. The apoE-mimetic peptide, COG1410, improves functional recovery in a murine model of intracerebral hemorrhage. Neurocrit Care. 16, 316-326 (2012).
  25. Lei, B., et al. Interaction between sex and apolipoprotein E genetic background in a murine model of intracerebral hemorrhage. Translational Stroke Research. 3, (2012).
  26. Lekic, T., et al. Evaluation of the hematoma consequences, neurobehavioral profiles, and histopathology in a rat model of pontine hemorrhage. J Neurosurg. 118, 465-477 (2013).
  27. Nakamura, T., et al. Intracerebral hemorrhage in mice: model characterization and application for genetically modified mice. J Cereb Blood Flow Metab. 24, 487-494 (2004).
  28. Yang, D., et al. Statins Protect the Blood Brain Barrier Acutely after Experimental Intracerebral Hemorrhage. J Behav Brain Sci. 3, 100-106 (2013).
  29. Rynkowski, M. A., et al. A mouse model of intracerebral hemorrhage using autologous blood infusion. Nature Protocols. 3, 122-128 (2008).
  30. Wang, J., Fields, J., Dore, S. The development of an improved preclinical mouse model of intracerebral hemorrhage using double infusion of autologous whole blood. Brain Research. 1222, 214-221 (2008).
  31. MacLellan, C. L., et al. Intracerebral hemorrhage models in rat: comparing collagenase to blood infusion. J Cereb Blood Flow Metab. 28, 516-525 (2008).

Tags

Medicin intracerebral blödning mus preklinisk autologt blod kollagenas neurovetenskap stroke hjärnskada basala ganglierna
Intrastriatal Injektion av autologt blod eller Clostridial kollagenas som musmodeller av intracerebral blödning
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Lei, B., Sheng, H., Wang, H.,… More

Lei, B., Sheng, H., Wang, H., Lascola, C. D., Warner, D. S., Laskowitz, D. T., James, M. L. Intrastriatal Injection of Autologous Blood or Clostridial Collagenase as Murine Models of Intracerebral Hemorrhage. J. Vis. Exp. (89), e51439, doi:10.3791/51439 (2014).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter