Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Medicine
Click here for the English version

Medicine

Intrastriatal Injeksjon av Autolog blod eller clostridial Collage som murine modeller av intracerebral blødning

Published: July 3, 2014 doi: 10.3791/51439
Automatic Translation
1, 1, 2, 3, 1,4, 1,2,4, 1,2
1Multidisciplinary Neuroprotection Laboratories, Department of Anesthesiology, Duke University, 2Department of Neurology, Duke University, 3Department of Radiology, Duke University, 4Department of Neurobiology, Duke University

Abstract

Intracerebral blødning (ICH) er en vanlig form for cerebrovaskulær sykdom og er forbundet med betydelig sykelighet og dødelighet. Mangel på effektiv behandling og svikt i store kliniske studier som tar sikte på hemostase og blodpropp fjerning demonstrere behovet for ytterligere mekanisme-drevet etterforskning av ICH. Denne forskningen kan utføres gjennom de rammer som følger av prekliniske modeller. To murine modeller i populær bruk inkluderer intrastriatal (basalgangliene) injeksjon av enten autolog fullblod eller clostridial collagenase. Siden, representerer hver modell distinkt forskjellige patofysiologiske funksjoner som er relatert til ICH, kan bruken av en bestemt modell velges basert på hvilke side av sykdommen som skal studeres. For eksempel, autologt blod injeksjon representerer mest nøyaktig hjernens respons på nærværet av intraparenchymal blod, og kan nærmest replikere Lobar hemorrhage. Clostridial collage injeksjon representerer mest nøyaktig de small fartøy ruptur og hematom evolusjon karakteristisk for dype blødninger. Dermed hver modellresultater i ulike hematom dannelse, neuroinflammatory respons, cerebral ødem utvikling, og neurobehavioral utfall. Robusthet av en påstått terapeutisk intervensjon kan best vurderes ved hjelp av begge modellene. I denne protokollen, er induksjon av ICH med begge modellene, umiddelbare postoperative demonstrasjon av skader, og tidlig postoperativ behandling teknikker demonstrert. Begge modellene resultere i reproduserbare skader, hematom volumer, og neurobehavioral underskudd. På grunn av heterogeniteten av human ICH, er flere prekliniske modeller for å utforske grundig patofysiologiske mekanismer og teste potensielle terapeutiske strategier.

Introduction

Intracerebral blødning (ICH) er en relativt vanlig form for cerebrovaskulær sykdom med ca 40-50% av pasienter som er rammet dø innen 30 dager en. Dessverre har liten forbedring blitt gjort i dødelighet i løpet av de siste 20 år to. Rapporter fra National Institutes of Health tre og retningslinjer fra American Heart Association fire understreket betydningen av å utvikle klinisk relevante modeller av ICH å utvide forståelsen av patofysiologien og utvikle mål for nye terapeutiske tilnærminger.

Flere modeller finnes å etterligne menneskelig ICH fem. Som forståelse av ICH patofysiologi modnes, har det blitt klart at en rekke modeller kan anvendes for å undersøke forskjellige aspekter av sykdommen. Tidligere brukte modeller inkluderer murine amyloid angiopathy 6, intraparenchymal microballoon innsetting og inflasjon 7, og direkte arteriell blodinfiltrasjon 8,9. Lobar blødning fra amyloid angiopati er blitt modellert med bruk av transgene mus og representerer en distinkt ICH subtype. Microballoon modeller etterligne akutt masseeffekt fra hematomdannelse men mislykkes i å fange hjernens cellulær respons på nærværet av blod. Endelig fag direkte arteriell blod infiltrasjon hjernen til arterielle press fra lårarterie. Dermed gjør denne modellen ligner arterielle press og tilstedeværelse av blod, men ikke utsett hjernen til mikrovaskulær skade fra små blodkar sprekker. Videre har denne modellen iboende høy variabilitet. Interessant, spontant hypertensive rotter 10 utvikle spontan ICH som de gamle. Studier av disse dyrene etter at ICH utvikling kan ligne sykdommen i nærvær av en av de store comorbidities predisponerende mennesker til ICH. Selv om disse andre modeller finnes, intrastriatal injeksjon av clostridial kollagenase 11 eller instrastiatal injeksjon av enutologous fullblod 12 er, for tiden, de to vanligste modellene som brukes i preklinisk ICH forskning.

ICH modellvalg bør gjøres basert på formålet med eksperimentelle spørsmål, herunder arter utvalg og metode for å indusere dannelse av hematomer. For eksempel, griser er store dyr med relativt store hvite substansen hjernevolum sammenlignet med mus. Således blir svin-modeller egnet for å studere hvit substans patofysiologien følgende ICH. I kontrast, gnager hjerner er stort sett grå materie, men transgene systemer gjør gnagere nyttig å vurdere molekylære mekanismer for skader og restitusjon etter ICH. Hver modell har sin iboende styrker og svakheter (Tabell 1), noe som bør vurderes nøye før eksperimentering.

De følgende protokoller demonstrere autologt blod og kollagenase injeksjon modeller i mus. Disse modellene har hver blitt oversatt fra modeller som opprinnelig ble utviklet i rotter13,14 og tillate bruk av allment tilgjengelig transgen teknologi for å utforske molekylære mekanismer knyttet til celledød etter ICH. Begge representerer svært ulike skademekanismer fra menneskelig ICH, og begge har tydelig forskjellig forventet resultat i form av atferdsmessige og histologiske tiltak. Dermed kan enkelte hypoteser egner seg til en modell over den andre, men mange ideer kan kreve validering i begge modellene.

Tabell 1. Sammenligning av egenskapene til collagenase-og autologe blod injeksjon intracerebral blødning modeller.

Reproduserbarhet
Kollagenase Injection Blood Injection
Enkel bruk + + + + +
+ + + +
Kontroll av Blødning Size + + + + +
Blood Reflux + + +
Simulerer menneskelig sykdom + -
Enkelhet + + + +
Bruk hos flere arter + + + +

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Etikk Uttalelse: Denne protokollen er godkjent av Duke University Institutional Animal Care og bruk komité og følger alle retningslinjer for etisk bruk av dyr.

En. Utarbeidelse av utstyr

  1. Autoklav de kirurgiske verktøy før operasjonen.
  2. Desinfiser stereotactic apparat med 70% etanol.
  3. Slå på vannbad og holde temperaturen ved 42 ° C.
  4. Oppløs-type IV-S clostridial kollagenase i normal saltoppløsning ved en konsentrasjon på 0.075 U per 0,4 mL.

2. Kollagenase Injection Model

  1. Vei musen.
  2. Anesthetize musen i en induksjons kammer med 5% isofluran i 30% O 2/70% N 2. Tilstrekkelig anestesi signaliseres etter ca 2 min når muse respirations ha redusert til en per sekund.
  3. Intubere luftrøret med en 30 mm 20 G intravenøst ​​kateter.
  4. Koble kateteret til engnager ventilator og mekanisk ventilere lungene med 1,6% isofluran i 30% O 2/70% N 2 med en hastighet på 105 åndedrag per minutt med en levert tidevolum på 0,75 ml ..
  5. Barbere hodebunnen med en elektronisk barbermaskin. Når musen er bedøvd og intubert, flytte den til en annen arbeidsplass for barbering og deretter tilbake til den kirurgiske benken.
  6. Fest hodet i en stereotaktisk ramme, og vatre hodet med både koronale og sagittal suturen som referansepunkter.
  7. Påfør ophthalmic salve til øynene.
  8. Sett inn en rektal temperatur probe. Oppretthold rektal temperatur på 37,0 ± 0,2 ° C ved hjelp av et understell sirkulerende vannseng.
  9. Tørk det kirurgiske området med Betadine fulgt med 70% etanol og gjenta 3 ganger.
  10. Lag en 1 cm midtlinjen skalp snitt og tørk periosteum sidelengs med en steril bomull-tipped applikator å avsløre bregma.
  11. Drill 1 mm diameter Burr hull 2,2 mm igjen latEral å Bregma med en vannavkjølt drill.
  12. Roter collagehette fem ganger, deretter vaske en 0,5 mL sprøyte med 25 G nål (festet til stereotaktisk ramme) med 0,5 mL kollagenaseoppløsning fem ganger (Leave 0,5 mL av kollagenaseoppløsning i sprøyten etter siste vask).
  13. Rett nålespissen med Burr hull deretter utvise 0,1 mL fra sprøyte og tørk nål bevel med barberhøvel å forkaste.
  14. Ved hjelp av en mikromanipulator, fremme nål 3 mm dypt til cortex og la urørlig i 30 sek.
  15. Injisere 0,4 mL over 90 sek.
  16. Reduser isofluran til 1% og la nålen urørlig i 5 min.
  17. Trekk nålen sakte.
  18. Påfør 1-2 dråper av 0,25% bupivakain subkutant og sutur huden.
  19. Slå av isofluran vaporizer og fjerne mus fra den stereotaktisk ramme.
  20. Tillate musen til å gjenopprette spontan ventilasjon med påfølgende tracheal extubation.
  21. Returner musen til et rent bur og tillate fri tilgang tilmat og vann.

Tre. Autolog blod Injection Model

  1. Følg trinnene 02.01 til 02.11 for collagenase injeksjon modell.
  2. Tegn 50 mikroliter sterilt normalt saltvann i en 30 G 50 mL sprøyte.
  3. Koble mikroliter sprøyte med en 70 cm PE10 rør.
  4. Evakuer all fysiologisk saltvann fra mikroliter sprøyte inn PE10 rør til fullstendig de-luftslange.
  5. Trekk mikroliter sprøytestemplet ut 1 mm for å få en luftboble i den distale åpningen av PE10 slange-mikroliter sprøyteapparat for å unngå blanding av salt-og blod under senere prosedyrer.
  6. Tørk av distal sentrale halen arterie regionen av musen med 70% etanol, og kutte pulsåren med en barberhøvel på 0,5 til 1 cm til haletipp.
  7. Utlevering av 40 pl av blod fra hale kuttet i PE10 rør-mikroliter sprøyteapparat. Merk: at heparin ikke er i bruk i nærheten av nålen, produksjonsrør, eller en mus.
  8. Fest mikroliter sprøyte på injeDette skjer pumpe.
  9. Koble metallkanyle parti av en 27 G nål til enden av PE10 slange og feste nålen til en mikromanipulator på stereotaktisk ramme.
  10. Utvise 2 mL av blod ut av 27 G nål og tørk nål bevel med barberhøvel å forkaste.
  11. Rett nålespissen med Burr hull og sette inn nål 3 mm dype til cortex.
  12. Injisere 35 mL av autologt blod med en hastighet på 2 mL per min.
  13. Reduser isofluran til 1% og la nålen urørlig i 10 min.
  14. Uttak p over 30 sek.
  15. Påfør 1-2 dråper av 0,25% bupivakain subkutant og sutur huden.
  16. Slå av isofluran vaporizer og fjerne mus fra den stereotaktisk ramme.
  17. Tillate musen til å gjenopprette spontan ventilasjon med påfølgende extubation.
  18. Returner musen til et rent bur og tillate fri tilgang til mat og vann.

4. Sham Operation

  1. Følg de samme prosedyrene for collage injection-modellen, bortsett fra uten injeksjon etter nålestikk.

5. Post-kirurgi omsorg

  1. Injisere 0,5 ml vanlig saltoppløsning subkutant i kveld av den kirurgiske prosedyren på baksiden av dyrets nakke.
  2. Gi myknet mat med vann og gel maten i små plastkopper som er plassert på gulvet i buret. Bytt maten daglig i 7 dager.
  3. Sjekk for vekttap, sårheling, og tegn til ubehag daglig i 7 dager.
  4. Ved utvinning intervaller på mer enn 7 dager er nødvendig, kan sutur fjerning utføres under lett inhalert anestesi (ca. 1% isofluran i 30% O 2/70% N 2), om nødvendig.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

På grunn av forskjeller i hematomdannelse (figur 1), blir ipsilaterale vende vist umiddelbart etter våkne for autolog blod injiserte mus og i løpet av 2 - 4 timer etter injeksjon kollagenase, som hematom ekspansjon forekommer (figur 2). Fravær av ipsilaterale vende bør heve bekymring for fravær av betydelig skade. På det første innlegget skade dagen, bør mus i begge modellene viser signifikante nevrologiske underskudd (figur 3). På 24 timer etter injeksjonen, ipsilaterale halvkuler viser stabile hematom volumer (figur 4); videre, i 24 timer etter injeksjonen, hjerne vanninnhold bør forventes å være 79,8 + 0,34% i kollagenaseklassene-injisert mus og 79,3 + 0,23% i autologe blod-injisert mus. Dødelighet bør forventes å oppstå mellom 10 - 25% av kollagenaseklassene-injisert mus og mindre enn 10% av autologe blod-injisert mus. Uunngåelig død på grunn av hematom volum, hjerneødem, og øktsed intrakranielt trykk oppstår vanligvis i løpet av den første 24 - 48 timer etter intrastriatal injeksjon. Døden inntreffer etter 72 timer kan ofte unngås med riktig etter skade omsorg (f.eks., Klar tilgang til myknet mat og vann). Funksjonelle utvinning generelt begynner med post skader dag 2 med autologe blod-injisert mus utvinne betydelig raskere enn kollagenaseklassene-injisert mus.

Figur 1
Figur 1. Serial magnetic resonance imaging of mus hjerner sammenligne autologt blod og kollagenase injeksjon modeller av intracerebral blødning. Etter intracerebral blødning induksjon via venstre intrastriatal injeksjon av 35 pl autologt blod (A) eller 0.075 U-type IV-S clostridial kollagenase (B) i 10 - 12 uker gamle C57/Bl6 hannmus, serie magnetisk resonans imaldring demonstrerer hematom ekspansjon i kollagenaseklassene-injisert mus sammenlignet med stabil hematom dannelse i de autologe blod-injisert mus. Hematom volumer er 10,1, 23,1, 29,9 mm tre på 1, 6, og 12 timer etter collagenase injeksjon, henholdsvis, og 7,0, 5,8, 3,2 mm tre på 1, 6 og 24 timer etter fullblod injeksjon, henholdsvis. Vennligst klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Fig. 2
. Figur 2 Corner turn test i mus 24 timer etter intra blødning Tatt umiddelbart etter intrastriatal collagenase injeksjon i venstre basalgangliene, tilstedeværelse av forventet ipsilaterale vende respons i 10 -. 12 uke gamle C57/Bl6 hannmus betegner tilstrekkelig skade. Dette vendebør skje umiddelbart etter betydelig skade i mus injisert med autolog blod og innen 2 - 4 timer i kollagenaseklassene-injisert mus. Mus i begge modellene viste mer venstresvinger etter skade i forhold til uskadde mus (** p <0,01; enveis ANOVA med post-hoc Scheffé test, n = 10/group).

Figur 3
. Figur 3 Rotarod ytelse etter intracerebral blødning i mus Baseline og etter skade rotorod ventetider på 10 -. 12 uke gamle C57/Bl6 hannmus i en uke etter venstre intrastriatal 35 mL autolog blod-, 0.075 U Type IV-S clostridial collagenase-injeksjon , eller humbug drift (* p = 0,022; gjentatte tiltak ANOVA med post-hoc Scheffé test, F-verdi = 12,726; n = 10/group). Mus vurderes via rotorod teste annenhver dag etter skaden for å unngå betydelig opplæring bias. </ P>

Figur 4
. Figur 4 hematoxylin og eosin flekker av mus hjernen etter intracerebral blødning Mikrofotografier av 10 -. 12 uker gamle C57/Bl6 mannlige mus hjerner på 24 timer etter at venstre intrastriatal injeksjon av 35 mL autolog blod (høyre) eller 0,075 U Type IV-S clostridial collagenase (til venstre). Hematom volumer er 20,2 mm 3 etter collagenase injeksjon og 6,4 mm 3 etter fullblod injeksjon. Vennligst klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Til tross for fremvoksende preklinisk forskning og resulterende store kliniske studier for lovende legemiddel 15-18, er det ingen farmakologiske intervensjoner vist seg å forbedre resultatet i ICH og omsorg fortsatt i stor grad støttende. Lister over mulige behandlingsformer kan være generert av høy gjennomstrømning teknologier, for eksempel transcriptomic og proteomikk arbeid. Mens disse teknologiene fortsetter å fremme vår kunnskap om potensielle terapeutiske mål, fremover og bakover oversettelse av lovende mål kan være best undersøkt gjennom bruk av klinisk relevante prekliniske modeller 19-22. Slike modeller er nyttige fordi de tillater rask gjennomstrømming av utvalgte kandidater, undersøkelse av mekanismene in vivo, billig etterforskning av dosering, terapeutisk vindu, og andre parametere germane å utvikle kliniske studier 23-25. Mens åpenbare fordeler foreligger ved bruk av prekliniske modeller, bør modellering oppstå i den mest klinisk relevant bUT logistisk mulig system er tilgjengelig. Mens modellene finnes for 'høyere' ordre dyr som primater, bruk av mus for å modellere menneskelige sykdom gir en rimelig høy gjennomstrømning, og kraftig teknologi for å undersøke patologiske mekanismer og terapeutiske effekter. Innlemming transgene systemer åpner for en enda mer robust evaluering av mekanistiske trasé og cellepopulasjoner involvert.

Foreløpig to murine modeller er i vanlig bruk: intrastriatal autologt blod eller collagenase injeksjon. Begge modellene er allsidig og enkel å bruke, i forhold til andre taktsmodeller. Begge modellene kan indusere ICH i ulike hjerneområder 26, slik at evaluering av regionale tiltak; hematom volum kan kontrolleres og endres, noe som åpner for vurdering av mild, moderat og alvorlig skade; og klinisk relevant fysiologi (f.eks. blodtrykket, temperatur, etc.) kan styres. Til slutt, mens hver modell ble opprinnelig utviklet irat, som begge er blitt oversatt til mus for å tillate bruk av transgene systemer 21,24,25,27. Imidlertid gir hver modell seg til studiet av ulike aspekter av ICH, som hver representerer distinkt forskjellige komponenter av ICH. Autolog blod-injeksjon kan gjenskape hjernens respons på intraparenchymal blodeksponering. Dermed innledende masse påvirke og skjærkrefter, milde betennelsesforandringer, apoptose, og blod resorpsjon kan alle bli studert 10,28. Videre har nyere modifikasjoner av denne modellen førte til evnen til å etterligne hematom ekspansjon 29,30. Men denne modellen ikke påberope komponenten av vaskulær skade og / eller hematom utvidelse finnes i den menneskelige sykdom. I kontrast, legger collagenase-injeksjon elementer av vaskulær ruptur, tidlig hematom ekspansjon, og forbedret neuroinflammatory effekt. Mens åpenbare problemer eksisterer om kunstig bidraget av kollagenase til denne inflammatorisk effekt, er det en mangel på hardt evidence for denne 31, og våre egne (upubliserte) data tyder på at collage isolert ikke induserer en markert inflammatorisk respons i cellekultur.

Fra en prosessuell ståsted, begge modellene krever begrensede ferdigheter med mikrokirurgi, og dermed er lett lært, slik som å oppnå reproduserbare effekter. Fallgruver som må unngås er: 1) invasjon av dura eller skape termisk skade hjernen når du borer, 2) eller penetrasjon av ventrikkel system med nålestikk. Dural skade åpner for reflux av injectant, og intraventriklulære injeksjon resulterer i liten eller ingen intraparenchymal hematom dannelse. Videre må man være forsiktig på nål uttak til ikke forstyrre nydannede / forming hematom. Dødeligheten er å forvente i en viss prosentandel av mus, men er direkte relatert til hematom størrelse og grad av skade ønsket; således, kan dette resultat kan titreres ved injectant volum / konsentrasjon.

Som med alle modeller, proprotokoller blir optimalisert for anvendelse av bestemte torer. På grunn av iboende variabilitet i alle in vivo-systemer, kan erfaring med en bestemt modell som en nøkkelfaktor for suksess ikke overdrives. En modell egenart, operatørerfaring med en gitt modell, utfallet beregninger av interesse, og logistiske faktorer må alle bli tatt i betraktning ved valg av best mulig eksperimentell modell.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Stereotactic frame Stoelting Co. 51603
Probe holder with corner clamp Stoelting Co. 51631
Mini grinder Power Glide Model 60100002
0.5 μl syringe Microliter 86259 25 G needle
5 μl syringe Microliter 7637-01
30 G microliter syringe Microliter 7762-03
Syringe pump KD Scientific Model 100
Heat therapy water pump Gaymar Industries, Inc. Model# TP650
Circulating waterbed CMS Tool & Die, Inc.
Rodent ventilator Harvard Apparatus Model 683
Isoflurane vaporizer Drager Vapor 19.1
Air flowmeter Cole Parmer Model PMR1-010295
Induction chamber Self made
Otoscope Welch Allyn 22820
Intravenous catheter Becton-Dickinson 381534 20 G, 1.16 inch Insyte-W
Isoflurane Baxter Healthcare Corporation NDC10019-360-69
Collagenase Type IV-S Sigma C1889
Polyethylene tubing PE10 Becton-Dickinson 427401
27 G 1 1/4 inch needle Becton-Dickinson 305136
Surgical scissors Miltex 21-539
Forceps Miltex 17-307
Needle holder Boboz RS-7840
Monofilament suture Ethicon 8698 Size 5-0
Indicating controller YSI 73ATD

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Asch, C. J., et al. Incidence, case fatality, and functional outcome of intracerebral haemorrhage over time, according to age, sex, and ethnic origin: a systematic review and meta-analysis. Lancet Neurology. 9, 167-176 (2010).
  2. Qureshi, A. I., Mendelow, A. D., Hanley, D. F. Intracerebral haemorrhage. Lancet. 373, 1632-1644 (2009).
  3. Participants, N. I. W. Priorities for clinical research in intracerebral hemorrhage: report from a National Institute of Neurological Disorders and Stroke workshop. Stroke. 36, (2005).
  4. Morgenstern, L. B., et al. Guidelines for the management of spontaneous intracerebral hemorrhage: a guideline for healthcare professionals from the American Heart Association/American Stroke Association. Stroke. 41, 2108-2129 (2010).
  5. James, M. L., Warner, D. S., Laskowitz, D. T. Preclinical models of intracerebral hemorrhage: a translational perspective. Neurocrit Care. 9, 139-152 (2008).
  6. Winkler, D. T., et al. Spontaneous hemorrhagic stroke in a mouse model of cerebral amyloid angiopathy. J Neurosci. 21, 1619-1627 (2001).
  7. Sinar, E. J., Mendelow, A. D., Graham, D. I., Teasdale, G. M. Experimental intracerebral hemorrhage: effects of a temporary mass lesion. J Neurosurg. 66, 568-576 (1987).
  8. Mendelow, A. D., Bullock, R., Teasdale, G. M., Graham, D. I., McCulloch, J. Intracranial haemorrhage induced at arterial pressure in the rat. Part 2: Short term changes in local cerebral blood flow measured by autoradiography. Neurol Res. 6, 189-193 (1984).
  9. Bullock, R., Mendelow, A. D., Teasdale, G. M., Graham, D. I. Intracranial haemorrhage induced at arterial pressure in the rat. Part 1: Description of technique, ICP changes and neuropathological findings. Neurol Res. 6, 184-188 (1984).
  10. Sang, Y. H., Su, H. X., Wu, W. T., So, K. F., Cheung, R. T. Elevated blood pressure aggravates intracerebral hemorrhage-induced brain injury. J Neurotrauma. 28, 2523-2534 (2011).
  11. Krafft, P. R., et al. Modeling intracerebral hemorrhage in mice: injection of autologous blood or bacterial collagenase. J Vis Exp. , (2012).
  12. Sansing, L. H., et al. Autologous blood injection to model spontaneous intracerebral hemorrhage in mice. J Vis Exp. , (2011).
  13. Rosenberg, G. A., Mun-Bryce, S., Wesley, M., Kornfeld, M. Collagenase-induced intracerebral hemorrhage in rats. Stroke. 21, 801-807 (1990).
  14. Nath, F. P., Jenkins, A., Mendelow, A. D., Graham, D. I., Teasdale, G. M. Early hemodynamic changes in experimental intracerebral hemorrhage. J Neurosurg. 65, 697-703 (1986).
  15. Anderson, C. S., et al. Rapid blood-pressure lowering in patients with acute intracerebral hemorrhage. N Engl J Med. 368, 2355-2365 (2013).
  16. Clark, W., Gunion-Rinker, L., Lessov, N., Hazel, K. Citicoline treatment for experimental intracerebral hemorrhage in mice. Stroke. 29, 2136-2140 (1998).
  17. Mayer, S. A., et al. Efficacy and safety of recombinant activated factor VII for acute intracerebral hemorrhage. N Engl J Med. 358, 2127-2137 (2008).
  18. Mendelow, A. D., et al. Early surgery versus initial conservative treatment in patients with spontaneous supratentorial lobar intracerebral haematomas (STICH II): a randomised trial. Lancet. , (2013).
  19. James, M. L., Blessing, R., Bennett, E., Laskowitz, D. T. Apolipoprotein E modifies neurological outcome by affecting cerebral edema but not hematoma size after intracerebral hemorrhage in humans. J Stroke Cerebrovasc Dis. 18, 144-149 (2009).
  20. James, M. L., Blessing, R., Phillips-Bute, B. G., Bennett, E., Laskowitz, D. T. S100B and brain natriuretic peptide predict functional neurological outcome after intracerebral haemorrhage. Biomarkers. 14, 388-394 (2009).
  21. James, M. L., Sullivan, P. M., Lascola, C. D., Vitek, M. P., Laskowitz, D. T. Pharmacogenomic effects of apolipoprotein e on intracerebral hemorrhage. Stroke. 40, 632-639 (2009).
  22. James, M. L., et al. Brain natriuretic peptide improves long-term functional recovery after acute CNS injury in mice. J Neurotrauma. 27, 217-228 (2010).
  23. Indraswari, F., et al. Statins improve outcome in murine models of intracranial hemorrhage and traumatic brain injury: a translational approach. J Neurotrauma. 29, 1388-1400 (2012).
  24. Laskowitz, D. T., et al. The apoE-mimetic peptide, COG1410, improves functional recovery in a murine model of intracerebral hemorrhage. Neurocrit Care. 16, 316-326 (2012).
  25. Lei, B., et al. Interaction between sex and apolipoprotein E genetic background in a murine model of intracerebral hemorrhage. Translational Stroke Research. 3, (2012).
  26. Lekic, T., et al. Evaluation of the hematoma consequences, neurobehavioral profiles, and histopathology in a rat model of pontine hemorrhage. J Neurosurg. 118, 465-477 (2013).
  27. Nakamura, T., et al. Intracerebral hemorrhage in mice: model characterization and application for genetically modified mice. J Cereb Blood Flow Metab. 24, 487-494 (2004).
  28. Yang, D., et al. Statins Protect the Blood Brain Barrier Acutely after Experimental Intracerebral Hemorrhage. J Behav Brain Sci. 3, 100-106 (2013).
  29. Rynkowski, M. A., et al. A mouse model of intracerebral hemorrhage using autologous blood infusion. Nature Protocols. 3, 122-128 (2008).
  30. Wang, J., Fields, J., Dore, S. The development of an improved preclinical mouse model of intracerebral hemorrhage using double infusion of autologous whole blood. Brain Research. 1222, 214-221 (2008).
  31. MacLellan, C. L., et al. Intracerebral hemorrhage models in rat: comparing collagenase to blood infusion. J Cereb Blood Flow Metab. 28, 516-525 (2008).

Tags

Medisin intracerebral blødning mus preklinisk autolog blod collagenase nevrovitenskap hjerneslag hjerneskade basalgangliene
Intrastriatal Injeksjon av Autolog blod eller clostridial Collage som murine modeller av intracerebral blødning
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Lei, B., Sheng, H., Wang, H.,… More

Lei, B., Sheng, H., Wang, H., Lascola, C. D., Warner, D. S., Laskowitz, D. T., James, M. L. Intrastriatal Injection of Autologous Blood or Clostridial Collagenase as Murine Models of Intracerebral Hemorrhage. J. Vis. Exp. (89), e51439, doi:10.3791/51439 (2014).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter