Summary
Дрозофилы полезны в изучении генетических или экологических манипуляций, которые влияют на поведения, такие как спонтанной двигательной активности. Здесь мы опишем протокол, который использует мониторы с инфракрасными лучами и анализа данных программного обеспечения для количественного спонтанной двигательной активности.
Abstract
Дрозофилы была использована как отличный модельного организма для изучения окружающей среды и генетические манипуляции, которые влияют на поведение. Одним из таких поведение стихийно двигательную активность. Здесь мы опишем наш протокол, который использует Drosophila населения мониторы и системы слежения, что позволяет непрерывный мониторинг спонтанной двигательной активности мух в течение нескольких дней за один раз. Этот метод прост, надежен и цель и может быть использован для изучения влияния старения кожи, пола, изменения в калорийности пищи, помимо наркотиков, или генетических манипуляций, которые имитируют человеческие болезни.
Introduction
Плодовые мушки, дрозофилы, были использованы в качестве ценного модельного организма для изучения механизмов, лежащих сложные поведения, такие как обучение и память, социальное взаимодействие, агрессии, наркомании, сна, сенсорной функции, ухаживания и спаривания 1,2. Один поведение, которое было изучено с помощью нескольких протоколов является спонтанным двигательную активность. Отрицательный geotaxis был одним из первых методов, разработанных для измерения Drosophila активность, и этот протокол включает измерение процент мух, которые достигают определенного высоту флакона после мухи встряхивали в нижней части контейнера 1,3. Этот способ имеет преимущества быть простой, недорогой, и так как он не требует никакого специального оборудования она может быть выполнена в любой лаборатории. Он был использован в качестве ценного инструмента отбора для изучения влияния различных генетических манипуляций на лету мобильности 3. Тем не менее, пришло время и трудоемкийй имеет возможность смещения из-за переменной сотрясением флаконов и человека записей.
Метод отрицательный geotaxis была повышена за счет развития метода быстрого итеративного Негативный Geotaxis (КОЛЬЦО) 4,5, который принимает фотографии лету флаконах следующие сотрясение мух на дно. Преимущество этого протокола является его чувствительность и возможность проверки большого количества мух флаконах в то же время. Тем не менее, этот протокол все еще имеет возможность ошибки человека, и только измеряет негативные geotaxis. Другие лаборатории использовали простое наблюдение в культуре флаконах для определения двигательной активности 6.
Недавно были разработаны несколько систем видеорегистрации для измерения летать двигательную активность. Один протокол видеонаблюдение дает время для регулировки перед записью 7. Способ, описанный на Slawson и соавт. Также использует импульс воздуха, чтобы остановить movemenт до начала записи, которые потенциально могут быть стресс для животных 7. Этот метод предоставляет информацию о средней скорости, максимальной скорости, времени проводят в движении, и т.д. Другой трехмерная система слежения измеряет максимальной скорости отдельных мух в течение ~ 0,2 секунды свободного полета отрыв 8. Трехмерное протокол видеонаблюдение использует мух, выражающие GFP и несколько камер, оснащенных фильтрами, позволяющими для обнаружения флуоресценции для определения летучей мобильность 9. Мухи в этом протоколе, как правило, обладают цилиндрические образцы полета, который является потенциально из-за форме Drosophila культуры флаконы 10. Этот метод был усовершенствован с помощью купол, который позволяет измерения самопроизвольное движение двух мух 11. Способ высокой пропускной что использует камеру для автоматического контроля и количественной оценки индивидуального и социального поведения дрозофилы был также описано 12. Цзоу др.др.. разработала поведенческий систему монитора (BMS), которая использует два помощью компьютера камер для записи поведения жизни, и движения, такие как отдыха, перемещение, летать, еды, питья или смерти индивидуального tephritid дрозофил 13. Несколько других видео системы были разработаны для контроля полетов поведенческую активность 14,15.
Здесь мы опишем метод для количественного Drosophila деятельность, которая использует мониторы населения. Эти мониторы размещены в и температуры контролируемой влажностью инкубаторов при 25 ° С на 12 час день-ночь светового цикла. Каждый монитор население имеет инфракрасные лучи, размещенные в кольцах, расположенных на трех разных высотах. Каждый раз, когда муха движется по кольцам он прерывает инфракрасный луч, который записывается с помощью микропроцессора, которые независимо учета и рассчитывает на активность мух в пузырьке. Микропроцессор будет загружать об активности в пузырьке к компьютеру через определенные пользователем intervaLs, которые могут изменяться от 1 секунды до 60 минут. Описанный здесь метод предоставляет достаточно времени для мух, чтобы приспособиться к новой среде и позволяет одновременного измерения на спонтанную двигательную активность целых 120 популяций мух. Кроме того, мы опишем приготовление пищи, летать обслуживания, настройке мобильность населения мониторы в контролируемой температурой инкубаторов и потенциальных факторов, которые могут повлиять результаты. Этот метод может быть использован для изучения, как различные экологические или генетические изменения влияют на спонтанную двигательную активность мух.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Примечание: штамм Canton-S является стандартным дикого типа фон ма, полученна из Bloomington Stock Center.
1. Приготовление блюд и Рецепт для 1000 мл продовольствия
Примечание: В этом разделе описывается протокол для приготовления пищи. Большие металлические горшки используются для приготовления около 18 л пищи за один раз. Протокол, описанный здесь сокращенных и использует 1000 мл H 2 O. Питание в автоклаве в два раза.
- Смешайте 113 г сахарозы и 28 г пивных дрожжей в 643 мл воды. Оставьте ингредиентов на горячем наборе пластины при 25 ° С с мешалкой для смешивания в течение 15 минут.
- Автоклав решение еда в течение 20 мин.
- Смешайте 49 г кукурузной муки и 8,1 г агара в 268 мл воды и добавить в автоклавного пищевой смеси, описанной в шаге 1.2. Хорошо перемешать с большой ложкой или венчиком.
- Автоклав смесь пищевой течение еще 20 мин.
- Поместите продукты на тарелку и дайте остыть при постоянном перемешивании с мешалкой. Яе дополнительные решения следует добавлять в пищу, например, мифепристона (RU486), держать еду на плитке, созданной при 60 ° С и добавить решение, когда пища достигает необходимой температуры.
- Растворите 2,4 г tegosept в 10,7 мл 100% этанола и держать на холодной тарелке мешалкой до полного растворения и смешивания в течение 15 мин.
- Добавить tegosept решение на питание, когда температура пищи является 60 ° C и хорошо перемешать.
- С помощью насоса или пищевой дозатор лить около 10 мл пищи в широком флаконе. При использовании продовольственной диспенсер можно вылить еду одновременно в 100 широких пластиковых флаконах (1 лоток) за один раз.
- Обложка флаконы с Kimwipes и марли и оставить еду при комнатной температуре в течение 12-24 часов, чтобы остыть. Храните продукты при 4 ° С и использовать в течение 3-4 недель. Разминка еду до комнатной температуры перед использованием для летучей работы.
2. Подготовка стеклянных флаконах
- Подготовка пищи в соответствии с протоколом, перечисленных в пункте 1. Алиготе 5 мл пищи в каждую узкой, стеклянный флакон, который является правильный размер для мониторов населения. Это количество пищи должно быть достаточно низким, чтобы быть ниже нижнего кольца монитора населения.
- После того, как пища остывает до комнатной температуры покрытия флаконов с губкой пробками и держать их при температуре 4 ° С в течение до 2 недель. Потому что количество пищи во флаконе является довольно низким, то лучше использовать пищу в течение недели или двух, чтобы предотвратить любую сушку.
- Разминка флаконов до комнатной температуры перед использованием.
3. Поддержание Родительского мух
- Grow мух в широких пластиковых флаконах с стандартной лабораторной пищи и держать флаконы в увлажненной контролируемой температурой окружающей среды камере при 25 ° С на 12 час цикле свет / темнота. Период дневного света начинается в 6:00 утра в этой лаборатории.
- Утром ясно, взрослых рейсы из флаконов, из которых будут собраны родительские мухи.
- Сбор вновь eclosed Flieс и разделить их по полу на CO 2 площадки в 8 часов после вылупления, чтобы убедиться, что женские мухи девственники. Мухи начинают спариваться 8 ч после вылупления.
- Когда Дева мужские и женские мухи от 5 до 10-дневного возраста, положить 10 мужчин и 10 женщин мух в пробирку со стандартной пищи и несколько зерен активных дрожжей на вершине.
Примечание: Контроль плотность личинок с использованием того же количества мух и держать их в пробирку в течение двух дней. Добавление активных дрожжей способствует яйценоскости. - Держите мух спариваться и откладывать яйца в контролируемой температурой окружающей среды камере при 25 ° С при 12-часовом цикле свет / темнота в течение 2 дней. Настройка 5-10 флаконов родительских мух.
- Pass мух к новой пластиковой флакон через день и держать флаконы с яиц в инкубаторе при 25 ° С
4. Совокупность экспериментальных мух
- После 9 дней мухи начнет eclose из флаконов, где parentaл мухи отложили яйца (описанные в шаге 3.6.). Ясно и отбросить мух, что eclosed в первый день и вернуться флаконов в инкубаторе. Большинство мух eclosed на 1 день составляют женщины. Более синхронизированы населения мух будет eclose на 2 день.
- В 24 часа в сутки место вновь eclosed мухи на СО 2 колодки и собрать 25 мужские и 25 женские мух на флаконах с кистью или металлической ложкой. Хранить мух на СО 2 прокладок в течение короткого периода времени, чтобы свести к минимуму влияние СО 2. Запишите день вылупления на флаконе. Соберите по крайней мере 5 дублирующие флаконы для экспериментальных и для контрольных групп.
- Хранить флаконов в контролируемой температурой окружающей среды камер при 25 ° С при 12-часовом цикле свет / темнота.
- Pass мух на новый пластиковый флакон через день, используя воронку.
- Возраст мух, пока желаемый возраст для экспериментов не будет достигнута.
5. Настройка подвижности Мониторы
- Наведитенаселение контролирует в инкубаторе с регулируемой температурой.
- Подключите каждый монитор с помощью телефонного кабеля 4-проводной к источнику питания Interface Unit (PSIU) через 5-позиционная раскольников (многоканальный), которые могут быть подключены до 5 отдельных мониторов к одному отверстию в PSIU. См. рисунки 1А и 2В.
- Подключите PSIU к розетке линии (100-240). Подключите выходной разъем питания в одном из гнезд PSIU спаривания 2. На прилегающей зеленый свет горит зеленым цветом, когда подключен правильно.
- Подключите PSIU к универсальной последовательной шины (USB) оборудования. Подключите кабель USB между аппаратным USB с Macintosh или Windows PC для записи данных. Было бы лучше иметь компьютер, посвященный только для сбора данных с коллекции проходит в течение нескольких дней за один раз.
- Скачать программное обеспечение USB (PSIUdrivers.zip). Драйвер USB используется интерфейс источника питания и должен быть загружен только один раз. Он синтезируетканала передачи данных между компьютерной программой и PSIU / деятельности мониторов. Для использования ПК COM порта и для Macintosh использовать простой последовательный порт.
- Скачать компьютерную программу для Macintosh OSX (Intel) или для Windows PC (XP/Vista/7) программ, следуя инструкциям производителя Notes 308.pdf.
- Запустите компьютерную программу и настроить программу, нажав на предпочтениях, огней или мониторы. Программа будет работать, пока пользователь не выберет "бросить", чтобы остановить программу. Если компьютерная программа или компьютер выключен мониторы будут продолжать рассчитывать перерывов луча, но на счету не будет записываться, пока программа не будет вновь запущен. В этом случае первое чтение будет включать в себя все счетчики с момента последнего PSIU послал данные на компьютер.
- Выберите вкладку Настройки и выберите последовательный порт, PSIU для Macintosh и COM для ПК.
- Выберите интервал считывания, которая колеблется от нескольких секунд, минут или час. <литий> Выберите мониторов: Каждый монитор имеет свой уникальный номер, который задается производителем. Выберите Monitor диапазона, соответствующего цифры, указанные на мониторы производителем.
- Коробка огни: Убедитесь, что все мониторы подключены правильно, который отмечен зеленым светом рядом с номером монитора на программное обеспечение. Красный свет указывает, что связь потеряна, и черный ящик показывает, что система выключена или неправильной установки.
6. Настройка эксперимента
- Удалить стеклянные флаконы, содержащие пищу от 4 ° С, и пусть они нагреться до комнатной температуры.
- Отдельные мужские и женские мухи того же возраста на CO 2 площадки. Для процессов старения можно начать обучение мобильности еще в 3-дневном возрасте.
- Положите 10 мужской или 10 женского мух в каждом стеклянном флаконе с кормом. Используют не менее трех флаконов для каждой экспериментальной и контрольной линии мух и для каждого пола.
- Держите VIлов на их стороне, пока мухи не оправиться от СО 2 для обеспечения мух не застрять в еде. Отдельные мухи приблизительно в 8:00 и оставить их около 2 часов при комнатной температуре, чтобы оправиться от CO 2.
- Поместите пробирки внутри населения мониторов, размещенных в инкубаторах.
- Откажитесь от данных, собранных в первые 24 часа после того, как мухи помещаются в инкубатор, чтобы позволить им адаптироваться к новой среде.
- Pass мух после 3 или 4 дня в новых флаконах, чтобы избежать высыхания пищи. Если мухи склонны к смерти или возраст 40 дней и старше, пройти мух через 2 дня и использования данных, собранных за день 2. Кроме того, использование более трех ампул в группе, чтобы обеспечить адекватные повторов. Данные из флаконов с мертвых мух следует сбрасывать со счетов и не включены в анализ.
7. Запуск активность Мониторы и расчете общей спонтанной активности
- Выберите предпочтения - интервал для сбора данных <.бр /> Примечание: Компьютерная программа позволяет сбор данных с интервалами от 1 секунды до 60 минут. 10 и 30 минутных периодов были найдены, чтобы обеспечить адекватную информацию о подвижности без подавляющее число временных точках. На выбранный период времени, программа будет отправлять текущий общий счет для каждого монитора к компьютеру и начать отсчет снова с нуля. Компьютерная программа хранит данные в новой папке, созданной системы данных компьютера. Данные, собранные в каждом мониторе хранятся отдельно, и индивидуальные текстовые документы создаются для каждого флакона. Данные собирали непрерывно, пока программа работает.
- В конце эксперимента, сканировать данные с помощью FileScan110X для Macintosh OSX (Intel) или SystemMB108 для программы ПК с Windows (XP/Vista/7).
Примечание: Сканирование Программа устраняет дубликаты показания и убеждается, что записи являются полными. - Сохранить данные, собранные в течение определенного времени и рeriod дней. Выберите экспериментальный имя и скопируйте файлы из папки данных компьютера для анализа.
Примечание: В это время, интервалы активности могут быть изменены и преобразованы в разных. Исходные данные останутся хранятся в папке данных компьютера и могут быть получены, если они не удаляются.
8. Анализ данных
- Скопируйте данные, собранные в текстовых файлах в колонкам таблицы Excel для анализа данных. Данные, собранные с помощью этого программного обеспечения в столбцах, которые содержат числа, представляющие общую деятельность в одном мониторе в течение определенного периода времени, выбранной исследователем.
Примечание: Данные, собранные для каждого монитора в отдельных текстовых файлах. Есть 32 колонки для каждого монитора. Первые шесть столбцы пусты и содержат только 0; Следующие три содержат данные, собранные на нижнем кольце, в середине и в верхнем кольце. Остальные каналы могут быть удалены, поскольку они не содержат никаких данных. Каждое кольцо выводитодно значение за время. См. снимок экрана исходных данных на рисунке 2. - Вычислить общую активность в пределах желаемого периода времени для каждого монитора, которая представляет собой сумму активностью, собранную в трех различных высотах инфракрасных лучей.
Примечание: Период времени может составлять от нескольких часов, 24 часов или нескольких дней. - Определить среднюю активность двигательную и стандартное отклонение между 3 мониторов, которые представляют 3 биологических повторяет.
Примечание: данные могут быть проанализированы на статистическую значимость с помощью ряд испытаний. Т-тест двухсторонний студентов-х годов, с односторонним дисперсионный анализ (ANOVA) и тест после специальной Туки HSD могут быть использованы для определения влияния нескольких экологических и генетических манипуляций на 24 часов спонтанной двигательной активности 16. Есть целый ряд других программ, которые можно использовать и которые были ранее опубликованных 17.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Спонтанной двигательной активности у дрозофилы зависит от летучей пола (фиг.3А), калорийности пищи (рис. 3б) и цикле свет / темнота. Как только свет выключен муха деятельности резко снижается. 3А иллюстрирует 24 часа двигательной активности записи мужских и женских мух. Звездочка на оси абсцисс отмечает время, когда свет был выключен и переход к темной цикла. 3В иллюстрирует стандартное отклонение между средним спонтанной двигательной активности, собранных в трех мониторов населения для мужчин летит возраст 3 дня на кукурузном пищи. Данные, собранные для спонтанного физической активности в течение 24 часов может быть также выражено как общей активности на лету в течение 24-часового периода, фиг.3С.
_upload/51449/51449fig1highres.jpg "Первоначально" / files/ftp_upload/51449/51449fig1.jpg "/>
Рисунок 1:.. Настройки монитора Население мониторинга спонтанной двигательной активности мух) Несколько мониторов населения связаны с помощью телефонного кабеля 4-проводной до 5-полосных раскольников и помещают в инкубатор с контролируемой температурой Б) Более высокое увеличение двух населения мониторы, которые показывают размещение флаконов в популяции мониторов и трех колец с инфракрасных лучей, расположенных на трех разных высотах. Кликните здесь, чтобы посмотреть увеличенное изображение.
Рисунок 2: Снимок экрана исходных данных, генерируемых такftware показывая дата, время и данные, собранные в кольца 1, 2, и 3. R обозначает кольцо. Кликните здесь, чтобы посмотреть увеличенное изображение.
Рисунок 3: А) Средний спонтанная двигательная активность мужчин (черный) и женского (Magenta) летит в течение 24 часов на стандартной лабораторной диете. Данные собираются в 10-минутными бункеров и представляют среднюю активность в лету вычисляется как среднее деятельности между тремя флаконах каждая из которых содержит 10 мух. B) Среднее спонтанную двигательную активность мужчины летит в течение 24 часов на стандартной лабораторной диете. Данные собираются в 10-минутными бункеров и представляют среднюю активность в лету вычисляется как среднее деятельности между гоРЗЭ флаконы. Стандартные отклонения отмечены зеленым. C) Суммарная активность 20 дней мужчину летит на низкокалорийные (0.5X) (зеленый) и высококалорийный (1.5X) (коричневый) питания в течение 24 часов. Нажмите здесь, чтобы увеличить изображение .
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Спонтанное двигательную активность мух зависит от многих факторов, таких как возраст, генетический фон и пола 2,13,18,19. Кроме того, экологические факторы, такие как калорийности пищи, температуры окружающей среды, добавлением различных препаратов, и день / ночь светового цикла может повлиять летать деятельности. Например, мужчины мухи того же возраста имеют более высокий спонтанное физической активности по сравнению с женщинами (рис. 1). Поэтому мухи одного и того же возраста и пола должны быть сопоставлены друг с другом. При рассмотрении влияния генетических манипуляций на лету деятельности, таких, как избыточная экспрессия или потере функции конкретного гена, экспериментальные и контрольные мухи должны быть в том же генетическом фоне, чтобы удалить любые потенциальные воздействия различных генетический фон или второй сайт модификаторов. Это может быть достигнуто путем обратное скрещивание экспериментальные женского мух ш 1118 или YW мужчин в течение 10 поколений. После 10поколения обратного скрещивания, ш 1118 или YW мух может быть использован в качестве генетического контроля. Другой способ управления для генетического фона является использование индуцируемого GAL4 GeneSwitch (GAL4-GS)-UAS двоичной системе, которая позволяет сверхэкспрессия или понижающая регуляция (RNAi) из интересующего гена в то время, и ткане-специфическим образом в мух кормили кормом с добавлением мифепристона (RU 486) 20,21. RU486 это необходимо для GAL4 к димеризации и привязку к последовательности UAS. Генетические элементы управления двойники мухи продолжали пищи с добавлением этанола (RU486 разбавителя).
Различные методы были использованы для записи Drosophila мобильности. Описанный здесь метод прост, надежен, более информативным, и имеет меньше потенциал смещения по сравнению с другими методами, используемыми для определения Drosophila мобильности, таких как негативных geotaxis. Это имеет то преимущество, объективной одновременной регистрации нескольких популяций мух в течение длительного периода времени встандартные условия культивирования. Измерение двигательную активность с помощью мониторов населения могут быть полезны для изучения того, как различное содержание калорий из пищи влияет летать деятельности или для изучения генетических механизмов, лежащих повышенную активность мух на CR 16. Точно так же, эта система была использована для изучения влияния различных генетических мутаций, старение, или добавлением различных препаратов на лету спонтанной физической активности. Использование отдельных трубок вместо мониторов населения позволяет измерять H 2 O 2 сопротивления в разных генотипов мух, изучая циркадные ритмы в естественных условиях, анализа поведения сна, а другие 17,22-24.
Как и любой метод, есть ограничения к этому системы мониторинга. При мониторинге мух в течение длительного периода времени, существует потенциал для летучей смерти, особенно при использовании в возрасте мух. Использование только здоровые мух поможет предотвратить это. Мы также стараемся использовать более чем 3 биологических повторяет загруппой, если мухи старые или склонны к смерти. Одно из решений состоит, чтобы держать мух только в течение 2 дней подвижности мониторов и использовать данные, собранные в ходе 2-й день, после мухи адаптировались к окружающей среде. Если смерть наступает мы не используем данные, собранные для флакона в расчетах. Хотя мы используем флаконов, расположенные только по вертикали в деятельности мониторов Trikinetics, есть возможность разместить флаконы по горизонтали. Мы выбираем разместить флаконы вертикально, потому что еда в нижней части флакона, который похож на стандартных условиях культивирования инкубатор. Это позволяет мухи, чтобы иметь больше места для пешеходных прогулок вверх и вниз по флаконах, и это больше похоже на негативные geotaxis экспериментов. Влажность инкубатора также должны быть проверены, если пища высушивание становится проблемой 24. Эта система обеспечивает данные по средней активности, и не указаны конкретные подробности о характере активности. Кроме того, если две мухи пересекают луч в то же время, он шсчитайте, что полдела записаны только как один перерыва. Протокол, описанный здесь полезен для количественного общую активность, но и другие протоколы могут обеспечить полезные данные, если точнее информация, такая как траектории полета или скорости желательны 12,14,25.
После этого эксперимента, различия в спонтанной двигательной активности в связи с генетическими или экологическими манипуляций будет известно. Будущее модификация этого протокола может быть, чтобы проанализировать различные уровни активности мух в верхней, средней и нижней колец мониторах населения. Это определяет, будет ли население летать проводят большую часть своего времени в нижней части флакона возле еды или в верхней части. Протокол в его нынешнем виде позволяет точно, одновременного количественного определения спонтанной двигательной активности Drosophila экспериментальной и контрольной групп населения.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Нам нечего раскрывать.
Acknowledgments
Эта работа была поддержана грантом Национального института здоровья (AG023088 БР).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Sucrose FCC Food Grade 100 LB, | Fisher Scientific MP Biomedicals | ICN90471380 | |
| Brewer’s Yeast | Fisher Scientific MP Biomedicals | ICN90331280 | |
| Drosophila Agar Fine | SciMart | DR-820-25F | |
| Cornmeal | Fisher Scientific MP Biomedicals | ICN90141125 | |
| Methyl4-hydroxybenzoate, tegosept | Sigma | H5501-5KG | |
| EtOH | Pharmco-AAPER | 111000200 | |
| Active Dry Yeast | Fisher Scientific | ICN10140001 | |
| Fly CO2 pad | LabScientific | BGSU-7 | |
| Stereo Microscope | Olympus | SZ40 | |
| Drosophila carbon dioxide (CO2) tank | Airgas | UN1013 | |
| Small paint brush for pushing the flies | |||
| Shell vial wide | Fischer Scientific | AS519 | |
| Buzzplugs for wide plastic vials | Fischer Scientific | AS275 | |
| Glass vials (25 x 95 mm) | Fischer Scientific Kimble 60931-8 | AS-574 | |
| Sponge plugs for glass vials | SciMart | DR-750 | |
| Drosophila Food Dispenser | Applied Scientific (Fischer Scientific) | AS780Q | |
| DPM Drosophila Population Monitor | Trikinetics Inc. | ||
| DC Power Supply with line cord | Trikinetics Inc. | ||
| PSIU9 The Power Supply Interface Unit | Trikinetics Inc. | ||
| Telephone cables and 5 way splitters | Trikinetics Inc. | ||
| Universal Serial Bus (USB) hardware | Trikinetics Inc. | ||
| Macintosh or Windows PC with UCB port | |||
| DAMSystem308X Data Acquisition Software for Macintoch OSX (Intel) | www.trikinetics.com | ||
| DAMSystem308 Data Acquisition Software for Windows PC (XP/Vista/7) | www.trikinetics.com |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| DAMFileScan108X software for Macintosh | www.trikinetics.com | ||
| DAMFileScan108X software for Windows PC (XP/Vista/7) | www.trikinetics.com | ||
| USB software (PSIUdrivers.zip) | www.trikinetics.com | ||
| DAMSystem Notes 308 | (http://www.trikinetics.com/Downloads/DAMSystem%20Notes%20308.pdf |
References
- Ali, Y. O., Escala, W. E., Ruan, K., Zhai, R. G. Assaying Locomotor, Learning, and Memory Deficits in Drosophila Models of Neurodegeneration. J. Vis. Exp. 49, 2504 (2011).
- Jones, M. A., Grotewiel, M. Drosophila as a model for age-related impairment in locomotor and behaviors. Exp. Gerontol. 46 (5), 320-325 (2011).
- Grotewiel, M. S., Martin, I., Bhandari, p, Cook-Wiends, E.
- Gargano, J. W., Martin, I., Bhandari, P., Grotewiel, M. S. Rapid Iterative Negative Geotaxis (RING): a New Method for Assessing Age-related Locomotor Decline in Drosophila. Exp. Gerontol. 40 (5), 386-395 (2005).
- Nichols, C. D., Bechnel, J., Pandey, U. B. Methods to assay Drosophila behavior. J. Vis. Exp. 61, 3791 (2012).
- Long, T. A., Rice, W. R. Adult locomotor activity mediates Intralocus sexual conflict in a laboratory-adapted population of Drosophila melanogaster. Proc. Biol. Sci. 274 (1629), 3105-3112 (2007).
- Slawson, J. B., Kim, E. Z., Griffith, L. C. High-resolution video tracking of locomotor in adult Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. 24 (24), 1096 (2009).
- Marden, J. H., Rogina, B., Montooth, K. L., Helfand, S. L. Conditional tradeoff between aging and organismal performance of Indy long-lived mutant flies. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 100 (6), 3369-3372 (2003).
- Grover, D., Yang, J., Tavaré, S., Tower, L. Simultaneous tracking of fly movement and gene expression using GFP. BMC Biotechnol. 8, 93 (2008).
- Grover, D., Yang, J., Tavaré, S., Tower, J. Simultaneous tracking of movement and gene expression in multiple Drosophila melanogaster flies using GFP and DsRED fluorescent reporter transgenes. BMC Res Notes. 2 (58), 1-11 (2009).
- Ardekani, R., et al. Three-dimensional tracking and behaviour monitoring of multiple fruit flies. J. R. Soc. Interface. 10 (78), (2013).
- Branson, K. A., Robie, A. A., Bender, J., Perona, P., Dickinson, M. H. High-throughput ethomics in large groups of Drosophila. Nat Methods. 6 (6), 451-457 (2009).
- Zou, S., et al. Recording Lifetime Behavior and Movement in an Invertebrate Model. PLOS One. 6 (4), (2011).
- Valente, D., Golani, I., Mitra, P. P. Analysis of the trajectory of Drosophila melanogaster in a circular open field arena. PLoS One. 2 (10), 1083 (2007).
- Inan, O. T., Marcu, O., Sanchez, M. E., Bhattacharya, S., Kovacs, K. T. A portable system for monitoring the behavioral activity of Drosophila. J Neurosci. Methods. 202 (1), 45-52 (2011).
- Parashar, V., Rogina, B. dSir2 mediates the increased spontaneous physical activity in flies on calorie restriction. Aging. 1 (6), 529-541 (2009).
- Kaneuchi, T., Togawa, T., Matsuo, T., Fuyama, Y., Aigaki, T. Efficient measurement of H2O2 resistance in Drosophila using an activity monitor. Biogerontology. 4 (3), 157-165 (2003).
- Carey, J. R., et al. Age-specific and lifetime behavior patterns in Drosophila melanogaster and the Mediterranean fruit fly, Ceratitis capitata. Exp. Gerontol. 41 (1), 93-97 (2006).
- Rhodenizer, D., Martin, I., Bhandari, P., Pletcher, S. D., Grotewiel, M. Genetic and environmental factors impact age-related impairment of negative geotaxis in Drosophila by altering age-dependent climbing speed. Exp. Gerontol. 43 (8), 739-749 (2008).
- Osterwalder, T., Yoon, K. S., White, B. H., Keshishian, H. A conditional tissue-specific transgene expression system using inducible GAL4. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 98 (22), 12596-12601 (2001).
- Dietzl, G., et al. A genome-wide transgenic RNAi library for conditional gene inactivation in Drosophila. Nature. 448 (7150), 151-156 (2007).
- Chiu, J. C., Low, K. H., Pike, D. H., Yildirim, E., Edery, I. Assaying locomotor activity to study circadian rhythms and sleep parameters in Drosophila. J. Vis. Exp. 43, 2157 (2010).
- Pfeiffenberger, C., Lear, B. C., Keegan, K. P., Allada, R. Locomotor activity level monitoring using the Drosophila Activity Monitoring (DAM) System. Cold Spring Harbor Protoc. 11, (2010).
- Pfeiffenberger, C., Lear, B. C., Keegan, K. P., Allada, R. Processing circadian data collected from the Drosophila Activity Monitoring (DAM) System. Protoc. 11, Cold Spring Harbor. (2010).
- Ardekani, R., Tavaré, S., Tower, J. Assessing senescence in Drosophila using video tracking. Methods Mol. Biol. 965, 501-516 (2013).
