Biz aynı anda 6 fare kafesleri ev hazır malzemeler kullanılarak alkol buhar odaları inşaatı göstermektedir. Biz ayrıca, insan gebelik 3 üç aylık denk fetal alkol maruz kalmanın bir fare modelinde bunların kullanımını tarif eder. Bu paradigma, gebelik ve doğum sonrası günlerde 1-12 sırasında hayvanlar ortaya koyar.
Gelişimi sırasında alkole maruz kalma toplu Fetal Alkol Spektrum Bozuklukları (FASDs) olarak bilinir morfolojik ve davranışsal anormallikler takımyıldızında neden olabilir. Yelpazenin en şiddetli sonunda büyüme geriliği, kraniofasial dysmorphology ve nörodavranışsal açıkları ile karakterize Fetal Alkol Sendromu (FAS), olduğunu. Kemirgenler gibi hayvan modellerinde, yapılan çalışmalar FASDs patofizyolojisinde dahil birçok moleküler ve hücresel mekanizmaları aydınlatmıştır. Hamile kemirgenler için etanol uygulaması gebeliğin birinci ve ikinci trimesterde insan poz modellemek için kullanılır olmuştur. İnsanlarda üçüncü trimester etanol tüketimi neonatal kemirgenler kullanılarak modellenmiştir. Ancak, birkaç kemirgen çalışmalar insan hamilelik, gebe kadınlarda sık görülür maruz kalma bir desen her üç trimesterde için eşdeğer sırasında etanol maruz kalma etkisini nitelendirmiştir. İşte, biz o kolayca gelen buhar odaları oluşturmak için nasıl göstermekHer altı standart fare kafesleri kapasitelidir btainable malzemeler. Biz her üç trimesterde minimal kullanımı ile, etanol maruz modellemek için kullanılan bir buhar odası paradigma açıklar. Bizim çalışmalar hamile barajlar etanol önemli metabolik tolerans geliştirmiştir göstermektedir. Ancak, yenidoğan farelerin metabolik hoşgörü ve fetusların sayısını, fetus ağırlığı, plasenta ağırlığı, yavrular / çöp sayısı, ölü yavrular / çöp sayıda geliştirmek vermedi ve yavru ağırlığı önemli ölçüde etanol maruz tarafından etkilenmemiştir. Bu paradigmanın önemli bir avantajı genetiği değiştirilmiş fareler ile çalışmalara uygulanabilmesidir. Ayrıca, bu paradigma hayvanların kullanımı, fetal alkol araştırma önemli bir bulandırabilir en aza indirir.
Gebelikte İçme belirgin etkilenen bireyler ve ailelerinin yaşam kalitesini azaltan birçok organ ve sistemlerde kalıcı değişikliklere neden fetüse zarar verebilir. Bu kadınların yaklaşık% 10-30 bir alem desen 1,2 olarak% 1-8 içme, ABD'de gebelik sırasında içki olduğu tahmin edilmektedir. Fetal gelişim sırasında etanol maruz tarafından üretilen etkiler aralığı toplu fetal alkol spektrum bozuklukları (FASDs) olarak da bilinir. Son tahminler FASDs ABD'de 3% 2-5 gibi yüksek bir prevalansı ile önemli bir halk sağlığı sorunu olduğunu göstermektedir. FASDs daha şiddetli tezahürü büyüme geriliği, kraniofasial anormallikleri, ve öğrenme engelliler de dahil olmak üzere nörodavranışsal açıkları ile karakterizedir Fetal Alkol Sendromu (FAS), olduğunu. FAS'ın prevalansı ABD'de 3 0.2-0.7% olarak tahmin edilmiştir. FASDs için mevcut tedaviler sadece kısmen etkilidirve daha etkin tedavileri geliştirme bozuklukları bu karmaşık spektrum hücresel ve moleküler temelleri zayıf anlayışı ile sınırlıdır.
Ulusal Doğum Kusur Önleme Çalışması (NBDPS) verileri gebelik gebelik 2 sonraki aşamalarında, tespit perhiz tarafından takip edilmiştir önce hamile kadınların en sık, 1. trimesterde içmek olduğunu göstermektedir. NBDPS ayrıca gebelik sırasında etanol tüketimi, ikinci en yaygın desen gebelik 2 her trimesterde boyunca içme içerdiğini buldu. Bunun nedeni fetal etanol maruz kalma (düşük dozlarda bile), doğum öncesi bakım için sınırlı erişim, nöropsikiyatrik hastalıklar için pozitif tarih ve kötüye veya etanol 4 bağımlılık potansiyel zararlı etkileri hakkında farkındalık eksikliği bulunmaktadır. İlginçtir, NBDPS tüketiminin üçüncü en yaygın desen 1 sırasında yoksunluk dahil olduğunu bildirdi <sup> St ve genellikle Organogenezis ölçüde tamamlanmış olduğu için içme güvenli olduğu varsayılır 3. trimesterde sırasında tüketimi ardından 2. trimesterde. Bu nöronal devreler derin arıtma 2 geçmesi bir dönem olduğundan, ancak 3. trimester etanol kaynaklı sinir sistemi hasarı yüksek duyarlılık dönemidir. NBDPS de 1. ve 3. trimesterde 2 sırasında cinsel perhiz ardından 2. trimesterde genelinde tüketimi de dahil olmak üzere, gebelik sırasında oluşan alkol tüketiminin diğer, daha az sıklıkla desenleri, tespit.
Gebe kadınlarda görülen etanol tüketim farklı tiplerini modellemek için bir girişim olarak, gelişim etanol maruz paradigmalar bir dizi en yaygın 5,6 olan sıçan ve fareler, çeşitli hayvan türlerinin kullanımı ile tespit edilmiştir. Bu hayvanlarda gebelik süresi tipik lasyaklaşık 3 hafta, 1 st ve insan gebeliğin 2. trimesterde karşılık ts. Birçok kemirgen çalışmalar bu dönemde değişik dozlarda ve etanol maruz kalma desen etkisini değerlendirdik. Sık sık hamile farelere etanol yönetmek için kullanılan yöntem ve sıçanların örnek sıvı diyetler 7,8, içme suyu 9,10 etanol ek olarak, sakarin-şekerli çözeltiler gönüllü içme 11, mide sondası 12, 13 üzerinden buhar inhalasyon verilmesini içerir ve deri altına ya da periton içine enjeksiyon 14. Bu çalışmaların sonuçları hamileliğin erken dönemlerinde (6,15 gözden) beyindeki nöronal devreler üzerinde zarar için yeterli olduğu maruz olduğu gösteren, FASDs insanlarda gözlenen kusurların çeşitli değinmeyecek var.
Kemirgenler ile yapılan deneyler de göstermiştir ki 3 rd için eşdeğer sırasında maruz </sup> Yaklaşık sıçan ve farelerde postnatal yaşamın ilk 1-2 hafta tekabül insan gebelik, trimesterde belirgin beyin gelişimini bozabilir. Bu periyot süresince maruz neonatal sıçan veya fare etanol uygulanması ile modellenmiştir. Etanol bir yapay yetiştirilen hayvanlar 16-18, mide içi entübasyon 19, deri altı enjeksiyon yoluyla 20 gastrostomi besleme dahil olmak üzere, çeşitli yöntemler, buhar ve inhalasyon 21,22 kullanarak bu hayvanlara tatbik edilmiştir. Bu çalışmalar inandırıcı beyin büyüme atağı etanol 6 gelişimsel etkilere karşı yüksek güvenlik açığı bir dönem olduğunu göstermiştir.
Yukarıda belirtildiği gibi, her üç aylık gebelik sırasında içme kadınlarda 2 etanol tüketiminin bir modeldir. Ancak, nispeten az sayıda çalışmalar hayvan modelleri kullanılarak pozlama bu desen etkisini değerlendirdik. Bu çalışmaların bazıları advantag almış3. üç aylık eşdeğer sıçan ve farelerin durumunda olduğu gibi uterus yerine neonatal dönemde ortaya büyük hayvanların e. Bu hayvan modelleri, insan olmayan primatlar, koyun 23,24 ve 25-27 dahildir. Bununla birlikte, bu hayvan modelleri yaygın, çünkü, yüksek maliyet ve özel bir bakım tesisleri için ihtiyaç, kısmen, FASDs araştırmalarda kullanılan edilmemiştir. Kemirgenler daha sık fetal gelişim 5 tüm trimester etanol maruz kalma etkisini karakterize etmek için kullanılmıştır. Kobay insan 28,29 bu beyin olgunlaşmasında kendi geniş doğum öncesi gelişimini belirli bir benzerlik ve bu açıdan özellikle avantajlı olmuştur. Kobay ile, insan 3. üç aylık eşdeğer gelişme dönemi içerir rahimde etanol maruz kalma etkisini karakterize etmek mümkün olmuştur. Bu hayvanların nispeten yüksek maliyet, hem de gebeliğin nispeten uzun süresinin(~ 67 gün), FASDs araştırma üzerinde çalışıyor birkaç laboratuvarlara kullanımını sınırlandırmaktadır.
Çünkü biyomedikal araştırmalarda maliyet-etkililik ve geniş kullanım, araştırmacılar hamileliğin her trimesterde etanol maruz modellemek için sıçanları kullandık. İlk çalışmalarda, fareler 0.08 g / dl baraj tepe kan düzeyleri etanol (BEC) ile sonuçlanan gastrostomi yapay yetiştirilen YENİDOĞANLARDA (doğum sonrası gün (P) 1-10) ile, etanol uygulaması takip sıvı diyetler ile hamilelik sırasında maruz bırakıldı ve yavrular 0.16 g / dl olarak. Bu paradigma optik sinir miyelinasyonda uzun süreli değişimlere neden ve beyincik 30-32 Bergmann glia liflerinin sayısını azalttı. 3. trimester eşdeğeri (P4-9) 33,34 parçası sırasında neonatal idaresi tarafından takip İntragastrik entübasyon ile bir alem gibi bir şekilde gebe sıçan barajlara etanol uygulanan yapay yetiştirme koşulları kullanılarak benzer şekilde, Maier ve işbirlikçileri. Peak anne ve yavru BECS gebeliğin 20 ve P6 hem de 0.3 g / dl idi. Bu her üç aylık dönem maruziyet paradigma gebeliğin 33 seçilmiş dönemlerinde maruz kalan yavrular gözlenen belirgin şekilde daha fazla olduğu büyüme geriliği sonuçlandı. Buna ek olarak, tüm üç aylık için eşdeğer sırasında etanole maruz kalan sıçan beyincik Purkinje ve diğer dönemlerde 34 boyunca maruz kalan hayvanlarda gözlenenden daha büyük olmuştur granül hücrelerin sayısında bir azalma sergiledi. Hipokampal hücre sayılarında azalmalar da bu paradigma ile bildirdi, ancak bu etkiler 35 trimester eşdeğer 3 rd sırasında öncelikle maruz kalma sonucu ortaya çıktığı saptanmıştır edildi. Hamile farelere ve neonatal farelerde hem de intragastrik gavaj yoluyla etanol verilmesini içeren bir yöntem olup, aynı zamanda, tüm üç aylık maruz 36 modellemek için kullanılmıştır. Barajlarda 0.13 g / dl (gestasyonel gün 17) ve P6 yavrular 0.24 g / dl, neden boylam arasında BECS vermiştir Bu yöntem,monoamin nörotransmiter hipokampus ve hipotalamusta seviyeleri ve hipokampus 37,38 protein 2 bağlayıcı DNA metiltransferaz ve metil CpG artan ekspresyonu g süreli değişiklikler. Benzer bir poz paradigma (baraj ve yavrular 0.2 g / dl BEC = 0,14-0,2 g / dl) kullanılarak, Gil-Mohapel vd. 39 yetişkin farelerin kıvrımlarının yeni olgunlaşmamış nöronların sayısında bir artış tespit ettiklerini yetişkin doğumlu nöronların olgunlaşmasında etanol neden olduğu nöronal hasar veya bir değişiklik için bir telafi mekanizması temsil edebilir. Müfettişler ayrıca sıvı diyetler yoluyla barajlar teşhir veya hamilelik ve emzirme 9,40 sırasında hem su içerek bütün trimester etanol poz modellemek için çalıştılar. Genellikle düşük yavru BECS (; 41,42 örneğin, ,002-,05 g / dl) sonuçlanır Ancak, annelerinin sütü ile yavrular teşhir yarar sınırlıdır.
Fareler aynı zamanda extens kullanılmıştırgelişim etanol maruz kalma etkilerini karakterize etmek için kısaltılmıştır. Bu hayvan modeli birçok genetik olarak tadil edilmiş fare soyları 5 kullanılabilir olan ek bir avantaj, sıçan hayvan modeli için yukarıda tarif edilen güçlü birçok hisse. Fareler başarıyla 1 st, 2. ya da gebelik 43,44 arasında 3. trimesterinde etanolün etkilerini karakterize etmek için kullanılmaktadır. Bu teknik olarak daha zor insan gebeliğin tüm trimesterlere eşdeğer sırasında fareler maruz çünkü Ancak, bu hayvanların tüm trimester maruziyetin etkisi iyi karakterize edilmemiştir. Örneğin, sıçanlarda başarılı bir şekilde kullanılmış olan yapay yetiştirme ve mide sondası, fareler 45 daha özel işlemleri gerektirir. Bildiğimiz kadarıyla, bugüne kadar sadece tek bir çalışma fareleri kullanarak tüm trimester etanol maruz kalma etkisini incelemek için çalıştı; Bu hayvanlar su Duri içme etanol solusyonlarındanng gebelik ve laktasyon 46. Maternal BECS 0.07 g / dl ve yavru Becs belirlenir, ancak barajlarda olan kısım olması bekleniyor yordu.
Burada, biz alkol buharı teneffüs odalarına yoluyla hamile baraj ve yenidoğanlarda hem de uygulanır farelerin tüm trimester etanol maruz kalma için yeni bir model tarif. Buhar odaları, bir önceki tasarıma 47 göre inşa edilmiştir. Biz inhalasyon odalarını inşa ve pozlama işlemlerini yürütmek konusunda ayrıntılı yönergeler sağlar. Biz de elde edilebilir BECS ve yavru hayatta kalma ve büyüme maruziyetin etkisi hakkında bilgi vermek.
Burada ayrıntılı olarak buhar inhalasyon bölmelerin yapımı için yöntemleri tarif eder. Odacıkları oluşturmak için gereken malzemeler ve aletler ticari tedarikçilerden temin edilebilir ve bölmelerin yapımı için adımları nispeten doğru olan,. Burada tarif sistemi, geri akış ve karıştırma önlemek için herhangi bir in-line check valfleri içermez. Biz havada biz havaya tek odaları içine herhangi bir karıştırma veya etanol geri akışı yok düşündüren tek odalarını herhangi bir saptanabi…
The authors have nothing to disclose.
R01-AA015614, R01-AA014973, T32-AA014127 ve K12-GM088021 Ulusal Sağlık Enstitüleri tarafından desteklenen verir. Yazarlar, teknik yardım ve Dr Samantha L. Blomquist teşekkür ederim. Eleştirel el yazması ve video değerlendirmek için Kevin Caldwell ve Donald Partridge.
Item | Company | Cat # | Qty | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Polycarbonate 1/4" clear 48" x 24" | McMaster-Carr | 8574K23 | 10 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Foam Rubber bulb seal 3/8"w x 7/32"h | McMaster-Carr | 93085K67 | 10ft | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Weld-on #16 | McMaster-Carr | 7515A11 | 3 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Piano hinge 12" long | McMaster-Carr | 1658A11 | 2 x 1ft | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Hold-down toggle clamps standard | McMaster-Carr | 5126A26 | 8 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
PEX tubing 1/2" | McMaster-Carr | 51275K88 | 10ft | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Barbed Tee tube fitting (Black) Pkg 10 | McMaster-Carr | 5463K608 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Barbed plug fitting (Black) Pkg 10 | McMaster-Carr | 5462K79 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Barbed Elbow tube fitting (Black) Pkg 10 | McMaster-Carr | 5463K596 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3/8" Through-Wall Adapters, Tube to Threaded Pipe | McMaster-Carr | 5463K851 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Phillips Machine screw 4-40 | McMaster-Carr | 91772A112 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Machine screw hex nut 4-40 | McMaster-Carr | 90480A005 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Panel-mount flowmeter 2-20 | McMaster-Carr | 41945K76 | 3 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
FLASK, FILTER 1000ML 6/PACK | VWR | 89001-800 | 2 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Precision Seal Septa | VWR | 89084-490 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
VWR Black Rubber Stopper #8 1-hole | VWR | 59581-367 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
TUBE TYGON R3603 3/8X9/16 50' | VWR | 89068-556 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
TUBE TYGON R3603 1/4X11/16 50' | VWR | 89068-502 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Aerator Stone P2120 | VWR | 32573-007 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3/8" T-connectors Pk of 20 | VWR | 46600-060 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
VWR Disconnectors tapered Pk of 10 | VWR | 46600-110 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3/8 Hose Barb valved in-line coupling | Colder Products Company | HFCD17612 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Air pump medium capacity | LMI Manufacturers | DB60L | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Nexelate Wire Shelving 36"W X 24"D X 63"H | Global industrial | T9A990135 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Stem Casters Set of (4) 5" Polyurethane Wheel | Global industrial | T9A500591 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Breathalyzer Alco-Sensor III | Intoximeters, Inc. | ASIII | 1
|