Intraluminale Drug Delivery per il mouse fistola artero-venosa endotelio
Summary
After puncturing the aorta through the inferior vena cava (IVC) to create an aorto-caval fistula in the mouse, solution containing a drug is infused into the IVC via the same needle, followed by incubation. This method enables more robust drug delivery to the venous endothelium compared to the external route.
Abstract
Consegna di agenti terapeutici per migliorare la fistola artero-venosa (AVF) la maturazione può essere somministrato sia attraverso percorsi intraluminali o esterni. Il semplice modello AVF murino è stato combinato con la somministrazione intraluminale della soluzione medicinale all'endotelio venosa allo stesso tempo come creazione fistola. Gli aspetti tecnici di questo modello sono discussi. In anestesia generale, un'incisione addominale è fatto e l'aorta e vena cava inferiore (IVC) sono esposti. L'aorta infra-renale e IVC sono sezionati per il bloccaggio. Dopo bloccaggio prossimale e distale, il sito di puntura è esposto e un ago da 25 G è utilizzato per forare entrambe le pareti dell'aorta e nel IVC. Subito dopo la puntura, un gene reporter esprimente vettore virale è stato infuso nella IVC tramite lo stesso ago, seguito da 15 minuti di incubazione. La modalità di somministrazione intraluminale abilitato più robusto trasferimento genico virale per l'endotelio venosa rispetto alla somministrazione per via esterna. Questo novel metodo di consegna faciliterà studi che esplorano il ruolo dell'endotelio in AVF maturazione e permettono drug delivery intraluminale al momento dell'intervento chirurgico.
Introduction
La fistola aortovenous murino (AVF) modello di foratura tra l'aorta e la vena cava inferiore (IVC) è ora una tecnica consolidata. 1 In questo modello, entrambe le pareti dell'aorta infra-renale sono perforati con un ago da 25 G, uscendo nella adiacente infra-renale vena cava; il foro di entrata aortica anteriore è riparato con compressione semplice, e non richiede la riparazione di sutura. L'esame di serie di follow-up ad alta risoluzione da Doppler e l'analisi istologica mostra la AVF di avere una fase di maturazione e quindi una fase di mancanza, ricapitolando la fisiopatologia noto di AVF umana. 2
Per esplorare i meccanismi che modulano AVF la maturazione, sono necessari metodi migliori per la consegna di agenti terapeutici alla maturazione AVF endotelio. Consegna di agenti terapeutici alle navi può essere sia via la consegna endovascolare al lume, o tramite consegna esterno al avventizia. Un esempio di consegna esterna è il comcomunemente usato applicazione avventiziale di Pluronic gel. Questo copolimero è termo-reversibile e trasformato da liquido a gel solido quando riscaldato alla temperatura corporea. Studi precedenti hanno dimostrato la somministrazione di farmaci sostenuta si ottiene quando farmaco mescolato in gel Pluronic viene applicato localmente in vivo. 3,4 applicazione avventiziale di vettori virali o siRNA con il gel Pluronic è stato segnalato per essere efficace come un sistema di consegna perivascolare. Noi 5,6 hanno anche riferito che il trattamento di espiantati safene umane con la stimolazione avventiziale da peptidi provocato fosforilazione di proteine recettori endoteliali. 7
D'altra parte, i ricercatori hanno utilizzato anche la consegna intraluminale dei due vettori virali e non virali in canino 8-10 e coniglio 11,12 modelli di innesti di vena. In questi rapporti, il trasferimento genico è stata eseguita ex vivo dopo vena vendemmia. Eslami et al. Riportato gene virale endovascolare consegnay per carotide vene in loco senza creare un by-pass. 13 Gloverman et al. consegna endoluminale e avventiziale riportato DNA nudo nel ratto dell'arteria femorale superficiale epigastrica vena fistole. 14 Il gruppo di Mayo ha segnalato la somministrazione di farmaci avventiziale nel topo carotide-giugulare vena fistole. 15,16 Tuttavia, questi modelli precedentemente segnalati richiesto un anastomosi suturata per creare l'AVF. In questo rapporto, la somministrazione di farmaci endoluminale con la creazione AVF simultanea nei topi è descritto, utilizzando un modello di sutura-meno della creazione AVF. Utilizzando questo modello murino AVF modificato un metodo semplice per la somministrazione di farmaci intraluminale all'arto venosa della fistola può essere eseguita.
Protocol
Representative Results
Discussion
Questa modifica del modello murino AVF incorpora drug delivery intraluminale all'endotelio venoso al momento della creazione AVF. Un AVF stato creato da puntura dell'aorta infra-renale con un ago 25 G ed estendere la foratura attraverso la parete aortica opposta nella IVC, seguita da iniezione di soluzione medicinale attraverso lo stesso ago. La soluzione viene mantenuta intra-cavale, cioè., Nella parte venoso AVF, fino de-bloccaggio. Ciò che distingue questo modello dagli altri modelli murini AVF <su…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
This work was supported in part by the United States Department of Veterans Affairs Biomedical Laboratory Research and Development Program Merit Review Award I01-BX002336, the National Institute of Health grant R56-HL095498, as well as with the resources and the use of facilities at the VA Connecticut Healthcare System, West Haven, CT.
Materials
| Pluronic F-127 | Sigma-Aldrich | P2443-250G | Used as 30% solution in d-water |
| GFP antibody | NOVUS BIOLOGICALS INC | NB100-1770 | |
| Ad-CMV-GFP | VECTOR BIOLABS | 1060 | |
| 0.9% Sodium Chloride Irrigation, USP | Baxter | 2F7122 | |
| BD PrecisionGlide Needle 25G x 5/8 | BD | 305122 | |
| BD 1ml Syringe Tuberculin Slip Tip | BD | 309659 | |
| Scarpel | Surgical Design Inc | 22079707 | |
| 6-0 ETHILON P-1 11mm 3/8c Reverse Cutting | ETHICON INC | 697G | |
| Vevo 770 ultrasound machine | Visualsonics | 20-60 Mhz scan head; RMV-704 | |
| Vascular clamp | Roboz Surgical Instrument Co. | RS-5424 | |
| Clamp applying forceps | Roboz Surgical Instrument Co. | RS-5410 |
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