Summary
إجراء لعزل EOB-DTPA وcomplexation لاحق مع جورجيا الطبيعي (III) و 68 ويرد جا هنا، فضلا عن تحليل شامل لجميع المركبات والتحقيقات على الكفاءة وصفها، في المختبر الاستقرار والأوكتانول N- / المياه معامل التوزيع للمجمع رديولبلد.
Abstract
ونحن لشرح طريقة لعزل EOB-DTPA (3،6،9-triaza-3،6،9-تريس (كاربوكسيميثيل) -4- (ethoxybenzyl) حمض -undecanedioic) من على كلمة المدير العام (III) المعقد وبروتوكولات ل إعداد غير المشعة، أي الجا الطبيعي (III) وكذلك المشع 68 جورجيا مجمعها الرواية. تميزت يجند وكذلك جا (III) المعقدة التي بالرنين المغناطيسي (NMR) الطيفي النووي، مطياف الكتلة وتحليل العناصر. تم الحصول على 68 غ من خلال طريقة شطف القياسية من 68 قه / 68 جا المولد. تجارب لتقييم كفاءة 68 جا وسم EOB-DTPA في درجة الحموضة أجريت 3،8-4،0. وقد استخدمت المنشأة تقنيات التحليل الإذاعة TLC (طبقة رقيقة اللوني) وHPLC الراديو (عالية الأداء اللوني السائل) لتحديد نقاء الإشعاعية من التتبع. كما تحقيقا الأول من بالانجذاب 68 استشفاف جورجيا "في الأوكتانول N- / DISTRIBUTIO المياهتم تحديد ن معامل 68 الأنواع جورجيا الحالية في حل ودرجة الحموضة 7.4 باستخدام أسلوب الاستخراج. في المختبر القياسات استقرار التتبع في وسائل الإعلام المختلفة في درجة الحموضة الفسيولوجية أجريت، وكشف عن معدلات مختلفة من التحلل.
Introduction
حمض Gadoxetic، الاسم الشائع لمجمع كلمة المدير العام (ثالثا) من يجند EOB-DTPA 1، هو عامل تباين كثيرا ما تستخدم في الصفراوية التصوير بالرنين المغناطيسي (MRI). 2،3 نظرا لامتصاص محددة من قبل خلايا الكبد الكبد ونسبة عالية من إفراز الصفراوية أنه تمكن من توطين الآفات التنسيق والأورام الكبدية. 2-5 ومع ذلك، بعض القيود تقنية التصوير بالرنين المغناطيسي (على سبيل المثال، سمية عوامل التباين، محدودة التطبيق في المرضى الذين يعانون من رهاب الاحتجاز أو المعدن يزرع) الدعوة الى أداة تشخيصية البديلة .
التصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني (PET) هي طريقة التصوير الجزيئي، حيث يدار كمية صغيرة من مادة مشعة (التتبع)، التي تقوم عليها يتم تسجيلها توزيعه في الجسم عن طريق الماسح الضوئي (PET). 6 PET هو أسلوب ديناميكي يسمح للارتفاع التحليل المكاني والزماني للصور وكذلك الكمي للنتائج، دون الحاجة إلىالتعامل مع الآثار الجانبية للعوامل التباين التصوير بالرنين المغناطيسي. ويمكن زيادة قيمة إعلامية من المعلومات الأيض الحصول على مزيد من قبل مجموعة مع البيانات التشريحية وردت من طرق التصوير إضافية، كما حققت الأكثر شيوعا التصوير الهجين مع التصوير المقطعي (CT) في الماسحات الضوئية PET / CT.
يجب أن يتضمن التركيب الكيميائي للالتتبع مناسبة لPET على النظائر المشعة بمثابة باعث بوزيترون. البوزيترونات لها الحياة قصيرة تمتد منذ أن يدمر على الفور تقريبا مع الإلكترونات من ذرة قذائف من الأنسجة المحيطة. بواسطة إبادة تنبعث اثنين 511 كيلو الفوتونات جاما مع الاتجاه المعاكس لحركة، والتي يتم تسجيلها من قبل الماسح الضوئي (PET). 7،8 لتشكيل التتبع، النويدات PET قد تكون ملزمة تساهميا إلى جزيء، كما هو الحال في 2-ديوكسي 2- [18 F] fluoroglucose (FDG)، الأكثر استخداما على نطاق واسع PET التتبع. 7 ومع ذلك، نوية قد تشكل أيضا سندات التنسيقية إلى واحد أو عدة بروابط (على سبيل المثال، أن يطبق [68 غ] -DOTATOC 9،10) أو الأملاح غير العضوية الذائبة (على سبيل المثال، [18 F] فلوريد الصوديوم 11). وإجمالا، فإن هيكل التتبع أمر بالغ الأهمية لأنه يحدد السلوك biodistribution، والتمثيل الغذائي وإفراز لها.
وPET نوية مناسبة يجب الجمع بين خصائص مواتية مثل الطاقة بوزيترون مريحة وتوفر فضلا عن الحياة نصف كافية لتحقيق المقصود. أصبح جا نوية 68 قوة أساسية في مجال PET على مدى العقدين الماضيين. 12،13 ويرجع ذلك أساسا إلى توافر لها من خلال نظام مولد، والذي يسمح وضع العلامات في الموقع بشكل مستقل من على مقربة من تحطيم الذرة. في مولد والدة نوية يمتص 68 قه على عمود من الذي مزال في نوية ابنة 68 غ، وبعد ذلك وصفت لخالب مناسبة. 6،14 منذ جود جا نوية 68 باعتباره trivalوالأنف والحنجرة الموجبة تماما مثل كلمة المدير العام (III) 10،13، مخلبية EOB-DTPA مع 68 غ بدلا من ذلك سوف تسفر مجمع بنفس شحنة سالبة العام باسم حمض gadoxetic. وفقا لذلك، أن 68 غ التتبع قد تجمع بين مماثلة المميزة خصوصية الكبد مع ملاءمة للتصوير PET. على الرغم من أن يتم شراء حامض gadoxetic وتدار على شكل ملح الصوديوم، في السياق التالي سنشير إلى أنها كلمة المدير العام [EOB-DTPA] ومجمع غير المشعة جورجيا (III) كما جا [EOB-DTPA]، أو 68 غ [ EOB-DTPA] في حالة المكون رديولبلد من أجل الراحة.
لتقييم إمكانية تطبيقها كأثر لPET، تحتاج إلى أن تدرس على نطاق واسع في في المختبر، في الجسم الحي أو بحكم التجارب المجراة أول المجمعات المعادن المشعة. لتحديد مدى صلاحيتها للمشكلة طبية منها، وخصائص التتبع المختلفة مثل السلوك biodistribution والشخصية التخليص والاستقرار وخصوصية الأعضاء والخلايا أو TISSUالبريد امتصاص تحتاج إلى التحقيق فيها. ونظرا للطبيعة غير الغازية، وغالبا ما تتم في المختبر قرارات قبل التجارب في الجسم الحي. ومن المسلم به عموما أن DTPA ومشتقاته هم من صلاحيتها محدودة كما chelators 68 جا بسبب هذه المجمعات التي تفتقر إلى همود الحركي، مما أدى إلى تحلل سريع نسبيا عندما تدار في الجسم الحي. 14-20 ويتسبب هذا في المقام الأول عن طريق الاشتقاق ترانسفيرين بصفتها منافس ل68 غ في البلازما. ومع ذلك، فإننا التحقيق هذا التتبع جديد بشأن إمكانية تطبيق في التصوير الصفراوية، حيث يمكن الحصول على معلومات تشخيصية في غضون دقائق بعد الحقن 3،4،21-23، وبالتالي لا تتطلب بالضرورة الاستقرار التتبع على المدى الطويل. لهذا الغرض، ونحن عزل EOB-DTPA من حمض gadoxetic ويقوم في البداية complexation مع جورجيا الطبيعي (III)، والتي كما هو معمول به خليط من نظيرين مستقرين، 69 غ و 71 68 غ]. استخدمنا إنشاء الطرق وتقييمها في وقت واحد ملاءمتها لتحديد كفاءة 68 Galabeling من EOB-DTPA والتحقيق في بالانجذاب من جديد 68 جا التتبع والاستقرار في وسائل الإعلام المختلفة.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1. إعداد EOB-DTPA والجا [EOB-DTPA]
تنبيه: يرجى التشاور مع جميع بيانات سلامة المواد ذات الصلة (MSDS) من استخدام العضوية المذيبات والأحماض والقلويات قبل الاستخدام. تنفيذ جميع الخطوات في غطاء الدخان واستخدام معدات الحماية الشخصية (النظارات الواقية والقفازات ومعطف المختبر).
- عزل EOB-DTPA من حمض gadoxetic
- وضع 3 مل من 0،25 M حل حقن حمض gadoxetic في قارورة. إضافة 500 ملغ (5.6 مليمول) من حمض الأكساليك إلى حل أثار.
- بعد التحريك لمدة 1 ساعة، تصفية تعليق من خلال فريت باستخدام ضغط منخفض. غسل بقايا ثلاث مرات مع 3 مل من الماء، على التوالي.
- الجمع بين الرواشح المائية وتجهيز الحل مع القطب درجة الحموضة. إضافة 12 M حمض الهيدروكلوريك إلى الترشيح حتى درجة الحموضة حوالي -0.1.
- إزالة المذيب في الخلاء أن تسفر عن بقايا عديم اللون. تخزين تحت غاز خامل.
- غسل بقايا بدقة (ثلاثة على الأقلمرات) مع خلات الإيثيل لإزالة الفائض من حمض الأكساليك. تجفيف بقايا في الخلاء.
- تنحل بقايا في 2 مل من الماء في درجة حرارة الغرفة ثم يبرد المحلول في حمام الثلج. دون إزالة حمام الثلج، إضافة 0.5 M المائي هيدروكسيد الصوديوم محلول قطرة قطرة حتى تشكيل عديم اللون لاصق لوحظ الصلبة.
- إزالة المياه عن طريق الترقيد. غسل الصلبة مرتين أكثر مع 1 مل من الماء البارد. تجفيف الصلبة في الخلاء لانتاج أول جزء المنتج.
- عزل جزء المنتج الثاني من الكسور مجتمعة من المياه يصب عبر اللوني العمود (السيليكا، والميثانول / الماء 4/1). 24 إزالة المذيب في الخلاء.
- إذا كان هكذا حصلت الصلبة ليست بيضاء نقية، تنحل في 1 مل من الماء، إضافة 10 مل من الايثانول وبعد ذلك 10 مل من ايثر لترسيب المنتج. التصفية من خلال فريت باستخدام ضغط منخفض وجاف في الخلاء.
- دمجالصورتين الصلبة من EOB-DTPA وأداء الطيفية NMR، 25 الطيفي الشامل 26 و 27 عنصري التحليلات.
- توليف جا [EOB-DTPA]
تنبيه: مخزن الصلبة جورجيا (الثالث) كلوريد تحت جو خامل الجاف، منذ بناء على ملامسة الهواء أو الرطوبة أو التحلل الشحوم يحدث، مما أدى إلى أبخرة قابلة للتآكل وتشكيل الشوائب الصفراء، البني أو الأسود.- إعداد محلول 0.11 M الأسهم عن طريق إذابة 1.94 غرام (11.0 ملمول) من جورجيا (الثالث) كلوريد في 100 مل من الماء. تمييع 1 مل من 25٪ من محلول النشادر المائي مع 4 مل من الماء.
- حل 80 ملغ (0.15 ملمول) من EOB-DTPA في قارورة في 10 مل من الماء. إذا لزم الأمر، تسخين المذيبات لتحقيق حل كامل.
- إضافة 1.4 مل (0.15 ملمول) من جا (III) حل سهم كلوريد. تجهيز قارورة مع النمام ودرجة الحموضة قطب كهربائي. إضافة المخفف مائي محلول الأمونيا قطرة قطرة حتى الرقم الهيدروجيني للمحلول ما يقرب من 4.1. إثارة في ريال عمانيدرجة الحرارة أوم لمدة 30 دقيقة.
- إزالة المذيب في الخلاء. وضع بقايا في قارورة، مجهزة stillhead مع رقبة الجانب المركزية ومتوازية. تجهيز العنق المركزية مع إصبع التبريد والرقبة جنب مع مخرج المضخة فراغ
- تسخين بقايا تحت ضغط منخفض (125 درجة مئوية، 0.6 ملي بار). دوري إزالة كلوريد الأمونيوم مصعد (مرئية في طلاء أبيض من سطح الزجاج) من إصبع التبريد ولا يزال الرأس، وكذلك من الأجزاء العلوية من القارورة بقطعة قماش مبللة قليلا. تستمر هذه العملية حتى لا يوجد تشكيل واضح من تسامى الجديد.
- لإزالة آثار النهائية من كلوريد الأمونيوم غسل بقايا ثلاث مرات مع 0.5 مل من الميثانول الساخن، على التوالي. تجفيف بقايا عديم اللون في الخلاء. أداء NMR الطيفي، 25 الجماعية الطيفي 26 و 27 عنصري التحليلات.
2. إجراء صفها عامة
تنبيه: كل السابقينperiments بما في ذلك الاتصال المباشر أو غير المباشر مع المواد المشعة يجب أن يضطلع بها الأفراد المدربين فقط. يرجى استخدام معدات التدريع المناسبة. جمع أي نفايات المشعة بشكل منفصل وتخزينها والتخلص منها وفقا للوائح سارية المفعول.
- شطف للمولد
ملاحظة: A 40 MCI 68 قه / 68 جا مولد مع نوية الأم ملزمة كما أكسيد على السيليكا دوديسيل 3،4،5-trihydroxybenzoate تم استخدامها. ويمكن تنفيذ شطف وتنقية يدويا أو، كما كان الحال في هذا الإجراء، كعملية الآلي جنبا إلى جنب باستخدام مضخة تحوي وحدة موزع.- إعداد حلول 5.5 M، 1.0 م و 0.05 م حمض الهيدروكلوريك. تحضير محلول 5.0 M كلوريد الصوديوم التي تحتوي على 25 ميكرولتر من 5.5 M حمض الهيدروكلوريك لكل مل. يعد حل العازلة درجة الحموضة 4.6 عن طريق الجمع بين 4.1 غ خلات الصوديوم، 1 مل حمض الهيدروكلوريك (30٪) و 2.5 مل حامض الخليك الجليدي وتمييع الخليط بالماء إلى 50 مل.
- PRECondition على PS-H + خرطوشة عن طريق تنظيف ببطء مع 1 مل من 1.0 M حمض الهيدروكلوريك وبعد ذلك 5 مل من الماء.
- أزل العمود السيليكا المولد مع 4 مل 0.05 M حمض الهيدروكلوريك. 12 تحميل جا شطافة 68 على PS-H + خرطوشة.
- تدفق خرطوشة مع 5 مل من الماء وبعد ذلك جففه مع 5 مل من الهواء. أزل 68 غ من خرطوشة مع 1 مل 5.0 M المحمضة محلول كلوريد الصوديوم. 28
- وسم EOB-DTPA مع 68 غ
- حل 1 ملغ (1.9 مكرومول) من EOB-DTPA في 1 مل من الماء. من هذا الحل تأخذ 100 ميكرولتر (0.19 مكرومول) وتمييع لهم 9.9 مل من الماء لإعداد 19 ميكرومتر (10 ميكروغرام / مل) حل سهم EOB-DTPA.
- إزالة 50 ميكرولتر (يعادل 22-29 من MBq) من محلول يحتوي على 68 غ ووضعها في قارورة. إضافة 50 ميكرولتر (0.5 ميكروغرام) من ملي حل الأسهم 19 من EOB-DTPA و 300 ميكرولتر سو العازلة لرفع درجة الحموضة إلى 4.0. يهز لفترة وجيزة واحتضان الحل في درجة حرارة الغرفة لمدة 5 دقائق. إزالة قسامة من 1-5 ميكرولتر وضعت لHPLC أو تحليل TLC.
- لتحليل HPLC الراديو على الطور المعكوس (RP) C18 العمود 29 استخدام الطور المتحرك التالية: أ - المياه / حمض trifluoroacetic (99.9٪ / 0.1٪)، B - الأسيتونتريل / trifluoroacetic حمض (99.9٪ / 0.1٪)، والتدرج : 06 دقيقة 80٪ A → 0٪ و(0.5 مل / دقيقة)، 610 دقيقة 0٪ و(0.5 مل / دقيقة).
- تحديد شدة ذروة إشارات HPLC الراديو ومنطقة تحت منحنى. حساب العائد وضع العلامات، نقاء الإشعاعية (الحزب الشيوعي الثوري) من التتبع على النحو التالي:
الحزب الشيوعي الثوري = A جا EOB-DTPA / (A + A جا جا EOB-DTPA) ∙ 100٪
وجا EOB-DTPA: منطقة تحت منحنى من 68 جا [EOB-DTPA]
وغا: منطقة تحت منحنى حرية 68 الجا
3. وصفها الكفاءة
- إجراء عمليات وضع العلامات وصفهد في القسم 2. استخدام مجموعة متناسقة من بدء النشاط من 68 جا شطافة، على سبيل المثال، 22-29 من MBq (40-140 ميكرولتر، اعتمادا على نضارة شطافة).
- إضافة المبلغ المطلوب من حل العازلة لضبط درجة الحموضة إلى 3،8-4،0 (40-190 ميكرولتر، اعتمادا على حجم 68 غ شطافة). إضافة المبلغ المطلوب من محلول المخزون يجند (10-70 ميكرولتر من حل 19 ملم).
- إضافة الكميات المطلوبة من المياه لضبط الحجم الإجمالي للكل العلامات التحقيق إلى 1.75 مل. تخلط جيدا والسماح للعينة الوقوف لمدة 5 دقائق في درجة حرارة الغرفة. لتحليل HPLC كما هو موضح في القسم 2 لتحديد العائد وضع العلامات.
- إجراء عمليات وضع العلامات مع كميات من يجند بين 0.1 ميكروغرام و 0.7 ميكروغرام في خطوات من 0.1 ميكروغرام. إجراء تجارب في يثلث لكل تركيز يجند. حساب العائد المتوسط والانحراف المعياري.
4. في الاستقرار المختبر
- ع العامrocedure والاستعدادات
- حل لوح من الفوسفات مخزنة المالحة (PBS) في 200 مل من الماء منزوع الأيونات لإعداد محلول المخزون PBS مع تركيز الفوسفات من 10 ملم.
- أداء العلامات من 22-29 من MBq 68 غ مع 0.5 ميكرولتر من EOB-DTPA حل الأوراق المالية، كما هو موضح في القسم 2. اعتمادا على حجم جا شطافة 68، وضبط كمية من العازلة، كما هو موضح في القسم 3. سحب عينات من وضع العلامات محلول يحتوي على 6-12 من MBq التتبع لإجراء قياسات الاستقرار.
- لتحليل TLC الراديو على 80 ملم هلام السيليكا لوحات الألومنيوم المغلفة باستخدام 0.1 M المائية سيترات الصوديوم كما شاطف وتحليل لوحات مع النشاط الإشعاعي الماسح الضوئي TLC 30 تحديد شدة الإشارات TLC كمنطقة تحت منحنى. حساب الحزب الشيوعي الثوري من التتبع على النحو التالي:
الحزب الشيوعي الثوري = A جا EOB-DTPA / (A جا حرة + A جا EOB-DTPA + A جا الغروية) ∙ 100٪
وجا EOB-DTالسلطة الفلسطينية: منطقة تحت منحنى من 68 جا [EOB-DTPA]
وجا مجانا: منطقة تحت منحنى حرية 68 الجا
وجا الغروية: منطقة تحت منحنى الغروية 68 الجا - حساب الحزب الشيوعي الثوري ر / الحزب الشيوعي الثوري 0 لكل نقطة زمنية. مؤامرة للحزب الشيوعي الثوري وبالتالي موحد مقابل الفارق الزمني منذ نقطة البداية ر = 0 دقيقة.
الحزب الشيوعي الثوري ر = الحزب الشيوعي الثوري من 68 جورجيا [EOB-DTPA] في نقطة زمنية ر.
الحزب الشيوعي الثوري 0 = الحزب الشيوعي الثوري من 68 جورجيا [EOB-DTPA] في ر = 0 دقيقة.
- الاستقرار في الفوسفات مخزنة المالحة (A)
- 65 ميكرولتر من العلامات الحل إضافة 150 ميكرولتر من برنامج تلفزيوني حل سهم و 60 ميكرولتر من محلول هيدروكسيد الصوديوم (0.1 M) لرفع درجة الحموضة إلى 7.4. تخلط جيدا.
- إزالة قسامة من 1-5 ميكرولتر لإجراء تحليل TLC ( 'نقطة البداية'). على الفور تخزين الحل في حاضنة عند 37 درجة مئوية، وإزالة قسامات لإجراء تحليل TLC في تمثيلative نقطة زمنية أكثر من 3 ساعة.
- استقرار نحو يزيد من APO -transferrin في برنامج تلفزيوني (B)
- إلى 120 ميكرولتر من العلامات الحل إضافة 50 ميكرولتر من برنامج تلفزيوني حل سهم و 430 ميكرولتر من محلول هيدروكسيد الصوديوم (0.1 M) لرفع درجة الحموضة إلى 7.4. إضافة 40 ميكرولتر من محلول APO -transferrin (25 ملغ / مل). تخلط جيدا.
- إزالة قسامة من 1-5 ميكرولتر لإجراء تحليل TLC ( 'نقطة البداية'). على الفور تخزين الحل في حاضنة عند 37 درجة مئوية، وإزالة قسامات لإجراء تحليل TLC في نقاط زمنية تمثيلية أكثر من 3 ساعات.
- الاستقرار في مصل الدم البشري (C)
- 500 ميكرولتر من المصل البشري إضافة 25 ميكرولتر من العلامات حل و45 ميكرولتر من محلول هيدروكسيد الصوديوم (0.1 M) لرفع درجة الحموضة إلى 7.4. تخلط جيدا.
- إزالة قسامة من 1-5 ميكرولتر لإجراء تحليل TLC ( 'نقطة البداية'). على الفور تخزين الحل في incuباتور في 37 درجة مئوية، وإزالة قسامات لأداء تحليل TLC في نقاط زمنية تمثيلية أكثر من 3 ساعات.
5. تحديد معامل توزيع LogD
- إجراء عمليات وضع العلامات كما هو موضح في القسم 2. 50 ميكرولتر من العلامات الحل إضافة 20 ميكرولتر من برنامج تلفزيوني حل سهم و 170 ميكرولتر من محلول هيدروكسيد الصوديوم (0.1 M) لرفع درجة الحموضة إلى 7.4.
- سحب 200 ميكرولتر من هذا الحل ووضعها في البلاستيك V-قنينة. إضافة 200 ميكرولتر من الأوكتانول N-. إغلاق قنينة ودوامة لمدة 2 دقيقة. ثم الطرد المركزي العينة في 1600 x ج لمدة 5 دقائق.
- إزالة يثلث 40 ميكرولتر من مرحلة ن -octanol والمرحلة المائية كل ووضعها في منفصلة V-قارورة. يجب الحرص على عدم خلط طبقات.
- قياس نشاط كل عينة في عداد غاما جيدا لمدة 30 ثانية. لكل عينة يعيد فورا قياس مرتين وذلك بحساب متوسط النشاط Ᾱ ر ر بالتالي المكتسبة، W1، Ᾱ ر، W2 وᾹ ر، W3 (الأنشطة في عينات المائية) وᾹ ر، O1، Ᾱ ر، O2، Ᾱ ر، O3 (الأنشطة في الأوكتانول N-) جنبا إلى جنب مع فيما يخصه الوقت نقطة طن من تصميمهم.
- تحديد نقطة زمنية لقياس عينة الماضية حيث ر 0. تحديد وقائمة Δt في دقيقة عن طريق حساب Δt = ترينيداد وتوباغو 0. أداء تصحيح اضمحلال Ᾱ ر، باستخدام الصيغة التالية:
Ᾱ 0 = Ᾱ ر · 2 (Δt / 68 دقيقة). - حساب Ᾱ 0، W كمتوسط من Ᾱ 0، W1، Ᾱ 0، W2 وᾹ 0، W3 وكذلك Ᾱ 0 يا كمتوسط من Ᾱ 0، O1، Ᾱ 0، O2 وᾹ 0، O3. حساب logD باستخدام الصيغة التالية:
logD = سجل [(Ᾱ - إجراء التجربة برمتها في يثلث وحساب متوسط logD جنبا إلى جنب مع الانحراف المعياري.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
يجند EOB-DTPA وجا غير المشعة (III) تم تحليلها عن طريق 1 H و 13 C {1} H مطيافية الرنين النووي المغناطيسي، مطياف الكتلة وتحليل العناصر تعقيدا. النتائج الواردة في الجدول (1) ويصور في أرقام 1-6 التحقق من نقاء المواد.
شطف من جا مولد 68 قه / 68 أسفرت عن حلول 400-600 من MBq 68 غ]. ووصف النتائج الإجراء وضع العلامات في تشكيل المرجوة التتبع 68 جورجيا [EOB-DTPA]، وأشار كما ذروة HPLC الإذاعة واظهار الوقت الاحتفاظ 2.8 دقيقة (الشكل 7). مقارنة مع الوقت الإبقاء على مستوى جا [EOB-DTPA] في كاشف الأشعة فوق البنفسجية تجاه عند 220 نانومتر (2.7 دقيقة، الشكل 8) يؤكد وضع العلامات ناجحة. تم الكشف غير منسقة 68 الجا كما ذروة الراديو في 2.1 دقيقة (الشكل7). وكان التحقيق كفاءة 68 جا وسم EO-BDTPA من خلال تحديد العائد وضع العلامات بوصفها وظيفة من تركيز يجند عبر HPLC (الشكل 9). تم تحديد العوائد في ثلاث نسخ وحسبت الانحرافات المعيارية.
اعتمادا على درجة الحموضة وتركيز الأيونات الموجودة في الحل، وغير منسقة أو غير المسمى 68 الجا قد تكون موجودة في أنواع مختلفة، على سبيل المثال، gallates أو هيدروكسيد غير قابلة للذوبان. 31 ويستخدم هذا المصطلح المعمم "الحرة 68 غ" (32) لجميع المسمى غير الأنواع في حل سوى هيدروكسيد، الذي يشار إليه عادة باسم "الغروية 68 جا". في ظل الظروف تحليل وصفها، يتحرك الحرة 68 غ مع الجبهة المذيبات (R و = 1.0) على لوحة TLC. لا يمكن الكشف عن الغروية 68 الجا عبر HPLC، بينما كان في لوحة TLC يبدو كنشاطفي الأصل (R و = 0). ويرد اللوني الممثلين لوحة TLC تحليلها مع النشاط الإشعاعي الماسح الضوئي TLC في الشكل 10. والتتبع يسلك سلوك الاحتفاظ مختلفة، اعتمادا على ما إذا كانت عينة من العلامات الحل (درجة الحموضة 3،8-4،0، R و = 0.3) أو عينة من الفسيولوجية تم تحليل درجة الحموضة (R و = 0.5).
لتحقيق الاستقرار في التتبع، وصفت الطازج 68 غ [EOB-DTPA] وأضيف لعينات من درجة الحموضة الفسيولوجية، التي تحتوي على المخفف في برنامج تلفزيوني (فوسفات تركيز 5.5 ملم، A)، فائض الاشتقاق ترانسفيرين (1.6 ملغ / مل في برنامج تلفزيوني المخفف مع تركيز الفوسفات من 0.8 ملي، B) والمصل البشري (C)، على التوالي. وبمرور الوقت، تم تحديد نقاء الإشعاعية (الحزب الشيوعي الثوري ر) من التتبع في العينات عبر TLC. تم حساب النسبة المئوية للالتتبع سليمة كنسبة من الحزب الشيوعي الثوري ر فينقاط كل وقت والحزب الشيوعي الثوري 0 في نقطة الانطلاق (الجدول 2). وهذا أمر ضروري نظرا لحلول العلامات التي تحتوي على التتبع لاختلاف الحزب الشيوعي الثوري 0 (93-96٪). وصفت نسبة بالتالي موحدة من التتبع سليمة بوصفها وظيفة من الوقت في الشكل 11.
لتحديد logD العينات المائية من التتبع في حل PBS المخفف كانوا على استعداد. كانت مختلطة العينات مع الأوكتانول N-، طرد وأزيلت في وقت لاحق قسامات لتحديد تركيز النشاط في كل المراحل. قيم النشاط وحساب لاحق من logD وصفت لها في الجدول 3. قيمة logD يعني هي 3.54 ± 0.08.
الشكل 1. 1 H-NMR طيف EOB-DTPA. < / قوي> وسجلت الطيف في D 2 O في 400.1 ميغاهيرتز. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 2. 13 C {1} H الطيف -NMR من EOB-DTPA. وسجلت الطيف في D 2 O في 100.6 ميغاهيرتز. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 3. MS من EOB-DTPA (تأين بالإرذاذ الإلكتروني (ESI)، والميثانول، ووضع سلبي).54334fig3large.jpg "الهدف =" _ فارغة "> الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الرقم 4. 1 H-NMR طيف جا [EOB-DTPA]. وسجلت الطيف في D 2 O في 400.1 ميغاهيرتز. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الرقم 5. 13 C {1} H الطيف -NMR من جا [EOB-DTPA]. وسجلت الطيف في D 2 O في 100.6 ميغاهيرتز. يرجى النقر لها البريد لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 6. MS الجا [EOB-DTPA] (ESI، والميثانول، ووضع سلبي)، جنبا إلى جنب مع تصوير مفصل لنمط نظائر ذروة الجزيئية. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الرقم 7. ممثل HPLC اللوني لعينة من 68 جورجيا [EOB-DTPA] التي تحتوي على أجزاء غير منسقة 68 غ، كما هو مسجل من قبل كاشف النشاط الإشعاعي. غير المنسقة 68 جا يسلك وقت الاحتفاظ 2.1 دقيقة، في حين يتم الكشف عن التتبع في 2.8 دقيقة .الهدف = "_ فارغة"> الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الرقم 8. ممثل HPLC اللوني للمادة القياسية جا [EOB-DTPA]، والكشف في قناة الأشعة فوق البنفسجية تجاه عند 220 نانومتر الساعة الإبقاء على مستوى البارد هو 2.7 دقيقة. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.
يتم رسم الشكل 9. تصوير من 68 فعالية جا وسم EOB-DTPA. العائد وضع العلامات على النحو الذي تحدده عبر HPLC بوصفها وظيفة من تركيز EOB-DTPA (22-29 من MBq بدء النشاط، ودرجة الحموضة 3،8-40.0، 5 دقائق، RT). ويصور الانحراف المعياري عن طريق أشرطة الخطأ. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
تم تحليل 10. ممثل شخصية TLC اللوني الكشف عن مختلف الأنواع 68 جورجيا عينة من 68 جورجيا [EOB-DTPA] في برنامج تلفزيوني المخفف (تركيز الفوسفات 5.5 ملم، ودرجة الحموضة = 7.4) بعد 110 دقيقة من الحضانة. التوزيع المثالي لالغروية 68 جا (R و = 0)، 68 غ [EOB-DTPA] (R و = 0.5) والحرة 68 جا (R و = 1.0) على 70 ملم لوحة TLC كما الكشف عنها بواسطة النشاط الإشعاعي الماسح الضوئي TLC هي قدم. التهم هي التحلل تصحيحها. الرجاء انقر هنا لعرض أكبرنسخة من هذا الرقم.
ويصور الشكل 11. قرارات استقرار 68 جا [EOB-DTPA] في وسائل الإعلام المختلفة. اضمحلال تصحيح، نسبة قياسية من التتبع سليمة كما هو محدد عبر TLC، بوصفها وظيفة من الزمن. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم .
يتم إعطاء الجدول 1. نتائج الرنين المغناطيسي الطيفي، MS والتحليلات عنصري يقوم على EOB-DTPA والجا [EOB-DTPA]. ونظرا النسبية شدة ذروة ماجستير في٪، وتحديد وقمم بين قوسين معقوفين. وكانت القيم CHN عنصري calcu ذا الصلة لC 23 H 33 N 3 O 11 · H 2 O (EOB-DTPA) و (NH 4) 0.75 H 1.25 [C 23 H 28 الجاليوم 3 O 11] · 2H 2 O (جا [EOB-DTPA]).
تم تحديد الجدول 2. تقرير الاستقرار من 68 جا [EOB-DTPA] في وسائل الإعلام المختلفة، والحزب الشيوعي الثوري من 68 جورجيا [EOB-DTPA] في وسائل الإعلام A و B و C عبر TLC في نقطة زمنية معينة. ونظرا للتكوين العينات والنسب المئوية في المائة من التتبع / الحرة 68 غ / الغروية 68 غ]. وموحدة نسبة التتبع سليمة كنسبة من الحزب الشيوعي الثوري ر / الحزب الشيوعي الثوري 0. الحزب الشيوعي الثوري 0 هو الحزب الشيوعي الثوري منها من التتبع في ر = 0 دقيقة.
SS = "jove_content" FO: المحافظة على together.within الصفحات = "1"> 
الجدول 3. تحديد logD تسوس تصحيح القيم ألفا 0، العاشر من ثلاثة قسامات (س = 1، 2، 3) إزالة من كل مرحلة (W: مائي، O: ن -octanol) من العينة. وترد جميع الأنشطة في الاجتماع التحضيري للمؤتمر. يتم احتساب LogD كما هو موضح في المادة 5 من البروتوكول. وتكررت التجربة مرتين.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
EOB-DTPA يمكن الوصول إليها من خلال توليفة متعددة الخطوات 33 ولكن للتو قد يكون كذلك معزولة عن عوامل التباين المتاحة التي تحتوي على حمض gadoxetic. لهذا الغرض، وأيون المركزي كلمة المدير العام (III) يمكن عجلت مع وجود فائض من حمض الأكساليك. بعد إزالة كلمة المدير العام (III) أكسالات وحمض الأكساليك يجند يمكن أن تكون معزولة عن طريق الترسيب في الماء البارد في درجة الحموضة 1.5. ومع ذلك، من أجل تعزيز عوائد عمود اللوني من الترشيح يمكن القيام بدلا من ذلك أو كإجراء المتابعة. أي أسلوب غلة يجند النقي تحليلي في إجمالي العوائد من 70٪ (أرقام 1-3، الجدول 1).
لقد وجدنا أنه من أجل عزل جا [EOB-DTPA] ضبط درجة الحموضة مع محلول الأمونيا والمفيد مقارنة مع استخدام هيدروكسيد الصوديوم، منذ كلوريد الأمونيوم من قبل المنتج يمكن إزالتها من بقايا ماء جدا عن طريق التسامي. وفقا للشروط المذكورة أعلاه تتم هذه العملية بطيئةلاي. منذ ما زالت كميات لا يستهان بها من كلوريد اكتشافها بعد خمسة أيام، وجرفت بقايا الملح العالق بها مع الميثانول. على الرغم من أن هذا العمل حتى تؤدي هذه الممارسة إلى فقدان جزئي للجا [EOB-DTPA]، تم الحصول على المنتج في الطهارة التحليلي مع العائد الإجمالي من 46٪ (أرقام 4-6 والجدول 1). لعزل كل من EOB-DTPA والجا لها (III) المجمع، ينبغي النظر في استخدام اللوني المرحلة عكس كطريقة بديلة للتنقية، وخاصة منذ التحلل من هلام السيليكا غير المرجح عند استخدام المذيبات القطبية للغاية.
عملية وضع العلامات من EOB-DTPA تتطلب استخدام عالية النقاوة المذيبات والمواد الكيميائية والمعدات خالية من المعادن لتجنب وجود تنافس ايونات المعادن، نظرا ل68 جا كونها موجودة بكميات nanomolar (2 من MBq 68 غ في عينة 1.75 مل يساوي تركيز نوية 0.14 نانومتر). وسم EOB-DTPA إلى 68 غ يحدث في درجة الحموضة 3،8-4،0 في غضون خمس دقائق[أوتس] في درجة حرارة الغرفة. تتطلب التحقيقات على 68 فعالية جا وسم تحديد العائد وضع العلامات مع الحفاظ على ظروف التفاعل ودرجة الحموضة، ودرجة الحرارة وفترة رد الفعل، فضلا عن بدء النشاط من 68 جا ثابت أو في مجموعة له ما يبرره. لكل نقطة البيانات (أي التركيز يجند) التجربة يجب أن يتم تنفيذ ثلاثة مرات على الأقل لتوفير مستوى الثقة معقول، حيث أن تركيزات كل من يجند و 68 غ منخفضة للغاية، وبالتالي فإن وضع العلامات العائد حساسة حتى على انحرافات بسيطة لل ظروف التفاعل. على سبيل المثال، حيث أن 68 غ شطافة الأعمار، لا بد من سحب لتوفير النشاط انطلاق ثابتة، وبالتالي فإنها تتطلب كميات متزايدة من العازلة aliquots من زيادة حجم. وعلاوة على ذلك، والشيخوخة النتائج شطافة في زيادة تركيزات الزنك المنتج تسوس 68، والذي في حد ذاته قد يكون بمثابة منافس لل68 جا، مما يؤثر سلبا على labelinويتحقق ز الكفاءة. 13،34،35 وضع العلامات الكمي عمليا من 22-29 من MBq 68 جا وفقا للشروط المذكورة أعلاه مع كميات من EOB-DTPA ≥ 0.7 ميكروغرام (الشكل 9)، مع محتويات مجانية 68 جا ≤ 2٪ وحوالي 5 ٪ من الغروية 68 غ موجودة في العينات.
في حين قدمت HPLC فصل خط الأساس متفوقة الحر 68 غ و 68 غ [EOB-DTPA]، ليست مناسبة لكشف الغروية 68 غ]. لذا اخترنا TLC لتحديد الحزب الشيوعي الثوري خلال قياسات الاستقرار، حيث القياس الكمي لترانسفيرين أو المرتبط بالبروتين كان مطلوبا 68 غ]. لقد وجدنا فصل خط الأساس المقبول لهذا الغرض (الشكل 10). ومع ذلك، فإن استخدام حجم الإقصاء اللوني أو الترشيح أساليب 15،36 لإزالة، يمكن أن تعتبر كسور الغروية، تليها تحليل HPLC كبدائل. جا مجمع 68 يسلك المتقاعد أقوىention على لوحات TLC (R و = 0.3) إذا تم سحب عينة مباشرة من وضع العلامات حل بدلا من العينات في درجة الحموضة الفسيولوجية (R و = 0.5). نقترح هذه الملاحظة يمكن تفسيرها من قبل الدول بروتوناتيون مختلفة من المجمع.
في العادة يتم تنفيذ قرارات الاستقرار في المختبر من 68 استشفاف جا في برنامج تلفزيوني 15،17 أو أنظمة عازلة بديلة محاكاة درجة الحموضة الفسيولوجية 37، وكذلك في المحاليل التي تحتوي على الاشتقاق ترانسفيرين 37، وهو المنافس الرئيسي ل68 غ في الدم، أو في 15،17 المصل البشري. في تجاربنا كان مطلوبا إضافة 0.1 M محلول هيدروكسيد الصوديوم إلى برنامج تلفزيوني لضبط درجة الحموضة من العينات إلى 7.4. لم نتمكن من تأكيد أن تركيز الفوسفات يؤثر على معدل التدهور، منذ التجارب الاستقرار في حلول متفاوتة تركيز الفوسفات (0.8 ملم و 5.5 ملم (A)) أسفرت غير reprodu-النتائج cible. ومع ذلك، وجدنا أن الحل B، التي تحتوي على APO -transferrin (1.6 ملغ / مل، وهو ضمن مجموعة من محتوى البلازما العادي 38) و 0.8 ملي الفوسفات (الدم البشري عادة ما يسلك مستوى الفوسفات من 0،8-1،5 مم 39،40 )، يسبب التحلل بمعدل مماثلة لتلك التي يمكن ملاحظتها في مصل الدم البشري (C). في حلول AC بعد 185 دقيقة محتوى الغروية 68 جا زادت بنحو 24٪، في حين أن مضمون الحرة 68 جا زادت بنسبة 11٪ في حل A، 17٪ في محلول B و 27٪ في حل ج (الجدول رقم 2 ). حقيقة أن 68 الجا التي شكلتها تحلل التتبع موجودا في الغالب كما المجاني 68 جا بدلا من الغروية أو المرتبط بالبروتين 68 غ في B و C قد يكون بسبب التشبع ترانسفيرين أو ترانسفيرين ملزمة معدلات بطيئة نسبيا.
للتنبؤ توزيع الأنسجة استشفاف N- الأوكتانول / تقسيم المياه معاملات السجلlogD يمكن تحديد P أو توزيع معاملات كما تبلغ نسبة تركيز النشاط في المرحلتين. بحكم التعريف، المعلمة logD لا يفرق بين أنواع متعددة موجودة في المتوسط، مما يجعله مناسبا لتجاربنا نظرا لإمكانية الدول بروتوناتيون مختلفة من التتبع وكذلك التحلل في المرحلة المائية. لتحديد logD عن طريق استخراج الوسط المائي عادة مخزنة مع برنامج تلفزيوني لتقليد الظروف الدم. 17،43-45 لأسباب المذكورة أعلاه استخدمنا المخفف في برنامج تلفزيوني، واظهار تركيز الفوسفات 0.8 مم ودرجة الحموضة الفسيولوجية. وبعد استخراج مع ن -octanol والطرد المركزي، وإزالة عدة قسامات من المرحلة نفسها تسمح لأخطاء تسبب قبل pipetting أن تنخفض. نظرا لتركيز النشاط منخفضة جدا في الأوكتانول N- ينبغي للمرء أن يكون حريصا على تجنب انتقال التلوث مع المرحلة المائية وضمان نقل الكمي في قارورة منفصلة. توزيع الطاقوكانت معاملات ution يحددها هذا الإجراء استنساخه، وعلى الرغم من أنها تسمح لتقدير تقريبي لبالانجذاب، مقارنة مباشرة إلى logP ش ج [EOB-DTPA] غير ممكن. نظرا لخصوصية ش ج [EOB-DTPA] مما أدى يست في المقام الأول من بالانجذاب بل امتصاص الصفراوية تجارب إضافية في المواد الحية أو الخلايا ستكون ضرورية لتوفير معلومات أشمل عن مدى biodistribution وكذلك الاستقرار في الجسم الحي من 68 جورجيا [EOB -DTPA]. وإجمالا، طلب وكيل التصوير لنضح والمرحلة الكبدية الصفراوية المبكرة التي يمكن تخيلها.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| primovist | Bayer | - | 0.25 M |
| gallium(III) chloride | Sigma-Aldrich Co. | 450898 | |
| water (deionized) | - | - | tap water deionizing equipment by Auma-Tec GmbH |
| hydrochloric acid 12 M | VWR | 20252.29 | |
| sodium hydroxide | Polskie Odczynniki Chemiczne S.A. | 810925429 | |
| oxalic acid | Sigma-Aldrich Co. | 75688 | |
| ethyl acetate | Brenntag GmbH | 10010447 | |
| silica gel | Merck KGaA | 1.10832.9025 | Geduran Si 60 0.063-0.2 mm |
| TLC silica gel 60 F254 | Merck KGaA | 1.16834.0001 | |
| methanol | VWR | 20903.55 | |
| ethanol | Brenntag GmbH | 10018366 | |
| eiethylether | VWR | 23807.468 | stored over KOH plates |
| ammonia solution (25%) | VWR | 1133.1 | |
| pH electrode | VWR | 662-1657 | |
| stirring and heating unit | Heidolph | 505-20000-00 | |
| pump | Ilmvac GmbH | 322002 | |
| frit | - | custom design | |
| NMR spectrometer | Bruker Coorporation | - | Ultra Shield 400 |
| mass spectrometer | Thermo Fisher Scientific Inc. | - | |
| elemental analyser | Hekatech GmbH Analysentechnik | - | EuroVector EA 3000 CHNS |
| deuterated water D2O | euriso-top | D214 | 99.90% D |
| Material/Equipment required for labeling procedures | |||
| 68Ge/68Ga generator | ITG Isotope Technologies Garching GmbH | A150 | |
| pump and dispenser system | Scintomics GmbH | - | Variosystem |
| hydrochloric acid 30% (suprapur) | Merck KGaA | 1.00318.1000 | |
| water (ultrapur) | Merck KGaA | 1.01262.1000 | |
| sodium chloride (suprapur) | Merck KGaA | 1.06406.0500 | |
| sodium acetate (suprapur) | Merck KGaA | 1.06264.0050 | |
| glacial acetic acid (suprapur) | Merck KGaA | 1.00066.0250 | |
| sodium citrate dihydrate | VEB Laborchemie Apolda | 10782 | >98.5% |
| PS-H+ Cartridge (S) | Macherey-Nagel | 731867 | Chromafix |
| apo-Transferrin | Sigma-Aldrich Co. | T2036 | |
| PBS buffer (tablets) | Sigma-Aldrich Co. | 79382 | |
| human serum | Sigma-Aldrich Co. | H4522 | from human male AB plasma |
| flasks, columns, etc. | custom design | ||
| pH electrode | Knick Elektronische Messgeräte GmbH & Co. KG | 765-Set | |
| binary pump (HPLC) | Hewlett-Packard | G1312A (HP 1100) | |
| UV Vis detector (HPLC) | Hewlett-Packard | G1315A (HP 1100) | |
| radioactive detector (HPLC) | EGRC Berthold | ||
| HPLC C-18-PFP column | Advanced Chromatography Technologies Ltd. | ACE-1110-1503/A100528 | |
| HPLC glass vials | GTG Glastechnik Graefenroda GmbH | 8004-HP-H/i3µ | |
| pipette | Eppendorf | - | |
| plastic vials | Sarstedt AG & Co. | 6542.007 | |
| plastic vials | Greiner Bio-One International GmbH | 717201 | |
| activimeter | MED Nuklear-Medizintechnik Dresden GmbH | - | Isomed 2010 |
| tweezers | custom design | ||
| incubator | Heraeus Instruments GmbH | 51008815 | |
| vortex mixer | Fisons | - | Whirlimixer |
| centrifuge | Heraeus Instruments GmbH | 75003360 | |
| gamma well counter | MED Nuklear-Medizintechnik Dresden GmbH | - | Isomed 2100 |
| water for chromatography | Merck KGaA | 1.15333.2500 | |
| acetonitrile for chromatography | Merck KGaA | 1.00030.2500 | |
| trifluoroacetic acid | Sigma-Aldrich | 91707 | |
| TLC radioactivity scanner | raytest Isotopenmessgeräte GmbH | B00003875 | equipped with beta plastic detector |
References
- Weinmann, H. J., et al. A new lipophilic gadolinium chelate as a tissue-specific contrast medium for MRI. Magn. Reson. Med. 22, 233-237 (1991).
- Stroszczynski, C., et al. Aktueller Stand der MRT-Diagnostik mit leberspezifischen Kontrastmitteln. Radiologe. 44, 1185 (2004).
- Van Beers, B. E., Pastor, C. M., Hussain, H. K. Primovist, Eovist - what to expect. J. Hepatol. 57, 421-429 (2012).
- Zech, C. J., Herrmann, K. A., Reiser, M. F., Schoenberg, S. O. MR Imaging in Patients with Suspected Liver Metastases: Value of Liver-specific Contrast Agent Gd-EOB-DTPA. Magn. Reson. Med. Sci. 6, 43-52 (2007).
- Leonhardt, M., et al. Hepatic Uptake of the Magnetic Resonance Imaging Contrast Agent Gd-EOB-DTPA: Role of Human Organic Anion Transporters. Drug Metab. Dispos. 38, 1024-1028 (2010).
- Wadas, T. J., Wong, E. H., Weisman, G. R., Anderson, C. Coordinating Radiometals of Copper, Gallium, Indium, Yttrium, and Zirconium for PET and SPECT Imaging of Disease. J. Chem. Rev. 110, 2858-2902 (2010).
- Ametamey, S. M., Honer, M., Schubiger, P. A. Molecular Imaging with PET. Chem. Rev. 108, 1501-1516 (2008).
- Cutler, C. S., Hennkens, H. M., Sisay, N., Huclier-Markai, S., Jurisson, S. S. Radiometals for Combined Imaging and Therapy. Chem. Rev. 113, 858-883 (2013).
- Henze, M., et al. PET Imaging of Somatostatin Receptors Using [68GA]DOTA-D-Phe1-Tyr3-Octreotide: First Results in Patients with Meningiomas. J. Nucl. Med. 42, 1053-1056 (2001).
- Hofmann, M., et al. Biokinetics and imaging with the somatostatin receptor PET radioligand 68Ga-DOTATOC: preliminary data. Eur. J. Nucl. Med. 28, 1751-1757 (2001).
- Blau, M., Nagler, W., Bender, M. A. Fluorine-18: a new isotope for bone scanning. J. Nucl. Med. 3, 332-334 (1962).
- Green, M. A., Welch, M. J. Gallium Radiopharmaceutical Chemistry. Int. J. Radiat. Appl. Instrum. B. 16, 435-448 (1989).
- Rösch, F. Past, present and future of 68Ge/68Ga generators. Appl. Radiat. Isot. 76, 24-30 (2013).
- Liu, S. The role of coordination chemistry in the development of target-specific radiopharmaceuticals. Chem. Soc. Rev. 33, 445-461 (2004).
- Haubner, R., et al. Development of (68)Ga-labelled DTPA galactosyl human serum albumin for liver function imaging. Eur. J. Nucl. Med. Mol. Imaging. 40 (68), 1245-1255 (2013).
- Yang, W., Zhang, X., Liu, Y. Asialoglycoprotein Receptor-Targeted Radiopharmaceuticals for Measurement of Liver Function. Curr. Med. Chem. 21, 4-23 (2014).
- Chauhan, K., et al. 68Ga based probe for Alzheimer's disease: synthesis and preclinical evaluation of homodimeric chalcone in β-amyloid imaging. Org. Biomol. Chem. 12, 7328-7337 (2014).
- Chakravarty, R., Chakraborty, S., Dash, A., Pillai, M. R. A. Detailed evaluation on the effect of metal ion impurities on complexation of generator eluted 68Ga with different bifunctional chelators. Nucl. Med. Biol. 40, 197-205 (2013).
- Clevette, D. J., Orvig, C. Comparison of ligands of differing denticity and basicity for the in vivo chelation of aluminum and gallium. Polyhedron. 9, 151-161 (1990).
- Prinsen, K., et al. Development and evaluation of a 68Ga labeled pamoic acid derivative for in vivo visualization of necrosis using positron emission tomography. Bioorg. Med. Chem. 18, 5274-5281 (2010).
- Vogl, T. J., et al. Liver tumors: comparison of MR imaging with Gd-EOB-DTPA and Gd-DTPA. Radiology. 200, 59-67 (1996).
- Reimer, P., et al. Phase II clinical evaluation of Gd-EOB-DTPA: dose, safety aspects, and pulse sequence. Radiology. , 177-183 (1996).
- Ba-Ssalamah, A., et al. MRT der Leber. Radiologe. 44, 1170-1184 (2004).
- Scott, R. P. W. Journal of Chromatography Library. 22A, Elsevier Scientific Publishing Co. A137-A160 (1983).
- Reichenbaecher, M., Popp, J. Strukturanalytik organischer und anorganischer Verbindungen. , 1st, B. G. Teubner Verlag. Wiesbaden. (2007).
- Gross, J. H. Mass Spectrometry: A Textbook. , Springer. (2004).
- Ma, T. S., Rittner, R. C. Modern Organic Elemental Analysis. , Marcel Dekker, Inc. (1979).
- Mueller, D., et al. Simplified NaCl Based 68Ga Concentration and Labeling Procedure for Rapid Synthesis of 68Ga Radiopharmaceuticals in High Radiochemical Purity. Bioconjugate Chem. 23, 1712-1717 (2012).
- Roberts, T. R. Radio-column chromatography. Journal of Chromatography Library. 14, 103-132 (1978).
- Roberts, T. R. Radio-thin-layer chromatography. Journal of Chromatography Library. 14, 45-83 (1978).
- Green, M. A., Welch, M. J. Gallium radiopharmaceutical chemistry. Nucl. Med. Biol. 16, 435-448 (1989).
- Notni, J., Plutnar, J., Wester, H. J. Bone-seeking TRAP conjugates: surprising observations and their implications on the development of gallium-68-labeled bisphosphonates. EJNMMI Res. 2, 13 (2012).
- Schmitt-Willich, H., et al. Synthesis and Physicochemical Characterization of a New Gadolinium Chelate: The Liver-Specific Magnetic Resonance Imaging Contrast Agent Gd-EOB-DTPA. Inorg. Chem. 38, 1134-1144 (1999).
- 68Ga generator for positron emission tomography. Zhernosekov, K., Nikula, T. , DE102010037964B3 (2012).
- Simecek, J., Hermann, P., Wester, H. J., Notni, J. How is 68Ga Labeling of Macrocyclic Chelators Influenced by Metal Ion Contaminants in 68Ge/68Ga Generator Eluates? ChemMedChem. 8, 95-103 (2013).
- Baur, B., et al. Synthesis, Radiolabelling and In Vitro Characterization of the Gallium-68-, Yttrium-90- and Lutetium-177-Labelled PSMA Ligand, CHX-A''-DTPA-DUPA-Pep. Pharmaceuticals (Basel). 7, 517-529 (2014).
- Boros, E., et al. RGD conjugates of the H2dedpa scaffold: synthesis, labeling and imaging with 68Ga. Nucl. Med. Biol. 39, 785-794 (2012).
- Beck, W. S. Hematology. , 5th, MIT press. Cambridge, Massachusetts. (1998).
- Patel, V., Morrissey, J. Practical and Professional Clinical Skills. , 1, Oxford University Press Inc. New York. (2001).
- Bartke, A., Constanti, A. Basic Endocrinology. , 1, CRC Press. (1998).
- Bernstein, L. R. Mechanisms of Therapeutic Activity for Gallium. Pharmacol. Rev. 50, 665-682 (1998).
- Clausen, J., Edeling, C. J., Fogh, J. 67Ga Binding to Human Serum Proteins and Tumor Components. Cancer Res. 34, 1931-1937 (1974).
- Dumont, R. A., et al. Novel 64Cu- and 68Ga-Labeled RGD conjugates show improved PET imaging of αvβ3 integrin expression and facile radiosynthesis [Erratum to document cited in CA156:116856. J. Nucl. Med. 52, 1498 (2011).
- Pohle, K., et al. 68Ga-NODAGA-RGD is a suitable substitute for 18F-Galacto-RGD and can be produced with high specific activity in a cGMP/GRP compliant automated process. Nucl. Med. Biol. 39, 777-784 (2012).
- Notni, J., Pohle, K., Wester, H. J. Be spoilt for choice with radiolabelled RGD peptides: Preclinical evaluation of 68 Ga-TRAP(RGD)3. Nucl. Med. Biol. 40, 33-41 (2013).
