Summary
חסימה כירורגי של ענף עורק דיסטלי באמצע המוח (MCAo) היא מודל משמש לעתים קרובות במחקר שבץ ניסיוני. כתב יד זה מתאר את הטכניקה הבסיסית של MCAo קבע, בשילוב עם הכניסה של חלון גולגולתי לרוחב, אשר מציעה את ההזדמנות עבור מיקרוסקופיה intravital אורך בעכברים.
Abstract
איסכמיה מוחיית מיקוד (כלומר, שבץ איסכמי) עלולה לגרום לפגיעה מוחית חמורה, מה שמוביל להפסד ניכר של תפקוד עצבי וכתוצאה מכך שורה של מנוע מוגבלויות קוגניטיביות. שכיחות גבוהה שלה מהווה נטל בריאותי חמור, כמו שבץ הוא בין הגורמים העיקריים נכות לטווח ארוך ומוות ברחבי העולם 1. שחזור של תפקוד עצבי הוא, ברוב המקרים, רק חלקית. עד כה, אפשרויות טיפול מוגבלות מאוד, בפרט בשל חלון זמן צר thrombolysis 2,3. קביעת שיטות כדי להאיץ התאוששות משבצת נשארת מטרה רפואית ממשלה; עם זאת, זה כבר הקשה על ידי תובנות מכניסטית מספיק לתהליך ההחלמה. חוקרי שבץ ניסיוני להעסיק מכרסמי מודלים בתדירות של איסכמיה המוחית מוקדים. מעבר השלב האקוטי, מחקר שבץ מתמקד יותר ויותר על השלב תת-אקוטי וכרוני הבאים איסכמיה מוחית. רוב החוקרים שבץ להחיל קבע או טראןחסימת sient של MCA בעכברים או חולדות. בחולים, חסימות של MCA הן בין הגורמים השכיחים ביותר של איסכמי 4 פעימות. מלבד חסימה הפרוקסימלי של MCA באמצעות מודל נימה, חסימה כירורגית של MCA דיסטלי הוא כנראה המודל הנפוץ ביותר במחקר שבץ ניסיוני 5. ספיגה של דיסטלי (אל הסתעפות של העורקים lenticulo-striate) סניף MCA בדרך כלל חוסך בסטריאטום ובעיקר משפיע על הניאוקורטקס. חסימת כלי יכולה להיות קבועה או חולפת. שחזור גבוה של נפח נגע ושיעורי תמותה נמוכים מאוד ביחס לתוצאה לטווח הארוך הם היתרונות העיקריים של מודל זה. כאן, אנו מדגימים כיצד לבצע חלון גולגולתי כרוני (CW) לרוחב הכנה בסינוס sagittal, ולאחר מכן כיצד כמנתח לגרום שבץ דיסטלי מתחת לחלון באמצעות גישה craniotomy. גישה זו ניתן ליישם עבור הדמיה רציפה של שינויים אקוטיים והכרוניים הבאים איסכמיה באמצעותEPI-מאירה, סריקת לייזר confocal, וכן במיקרוסקופ intravital שני הפוטונים.
Protocol
המסר אתיקה: ניסויים מעורבים בנושאים בעלי חיים בוצעו בהתאם להנחיות והתקנות שנקבעו על ידי Landesamt fuer Gesundheit und Soziales, ברלין, גרמניה (G0298 / 13) ואת הקריטריונים מגיעים, לפי העניין. לצורך המחקר, 10 עד 12 שבועות בן זכר C57Bl / 6J שימשו.
1. הכנת חלון גולגולתי כרוני Lateral
- בצע הרדמה עם זריקה תת עורית של קטמין (90 מ"ג / ק"ג) ו xylazine (10 מ"ג / ק"ג). מבחן להרגעה נאותה עם גירוי כאב.
- לעקר את מכשירי ניתוח שדה הניתוח עם 70% אתנול.
- הסרת שיער הקרקפת מהצוואר אל העיניים בעזרת מכונת גילוח מכרסמת.
- תקן את הראש בתוך מסגרת stereotactic.
- השתמש dexpanthenol משחה על שתי העיניים כדי למנוע התייבשות.
- נקה את אזור הניתוח כדי להסיר את כל השערות לעקר אותו עם 3 שכבות של אתנול 74.1% ו -10%-propanolol 2.
- בצע קו אמצעחתך מהצוואר אל העיניים בעזרת אזמל.
- SPAN דש העור עם 4 תפרים האהלה.
- הסר את periosteum בזהירות על האונה השמאלית על ידי גירוד אותו עם אזמל עד לנקודה שבה השריר הזמני מתחיל.
הערה: הכנה זו משמשת גם כדי ליצור אזור הידבקות טוב עבור דבק השיניים, אשר פותר את מכסה הזכוכית. - בצע craniotomy fronto-הקודקודית בקוטר של 4 מ"מ על ידי דליל הגולגולת בשולי דש העצם באמצעות microdrill. החל תמיסת מלח תוך כדי קידוח כדי למנוע פגיעה חומה.
- הגבהה של דש העצם עם קנולה ולהסירו באמצעות microforceps.
- להשקות בזהירות בהרחבה עם תמיסת מלח.
- מערבב את דבק השיניים עד שהוא בעל הצמיגות הראויה שאינו נוזל (כלומר, הדבק לא צריך לייצר אשכולות יותר). מניחים אותו על העצם סביב פתיחת הגולגולת.
- מניחים כוס כיסוי בקוטר 6 מ"מ על הדבק מוכן לתקן את זה עם השאר הדואר של דבק שיניים. הקפד שזה אטום למים. מתן עד הדבק הוא מיובש וקשה ידי בדיקתו באמצעות מלקחיים.
הערה: השקיה נוספת מאיצה את תהליך הריפוי. - הסר את תפרי ההאהלה ולסגור את הפצע עם תפרי עור.
- משוך את העור של האגף של העכבר. כנס מתחת לעור מחט בעדינות להחליף 0.5 מיליליטר של תת-עורית מלח סטרילית עבור מאזן נוזלים.
- לאחר ניתוח, לשמור על בעלי החיים בכלוב ההתאוששות המחומם במשך 90 דקות. מתן עד החיות הן ערות לחלוטין לפני שעזבת אותם ללא השגחה. חכה עד החיות הם התאוששו לחלוטין לפני החזרה אותם לכלוב עם בעלי חיים אחרים.
- חזור על החלפת הנפח מלוח תת עורית לאחר כ 12 שעות, כפי שמתוארת בשלב 1.16.
- תמיד להחיל שיכוך כאבים באמצעות gavage או ישירות לחלל הפה לאחר ניתוח (למשל, אקמול (10 מ"ג / מ"ל) או תרופות נוגדות דלקת לא סטרואידיות אחרות).
- בדוק את ה מצבו של חיות בכל יום לאחר הניתוח, ותמיד מספק מחית מזון מן החי על הרצפה פטרי צלחת כדי לאכול פשוט כדי למנוע אובדן משקל קריטי לאחר ניתוח.
הערה: מיקרוסקופיה Intravital יכולה להתבצע ביום הראשון לאחר הכנת חלון גולגולתי. - החל הרדמת isoflurane ולתקן את החיה בעל ראש. פתח תפר העור ולנקות את החלון עם ניצני כותנת מלח סטרילית. לאחר 24 שעות, חלון גולגולתי צריך להיות מלא עם הנוזל השדרתי ידי כי נקודת זמן, המאפשרת הדמיה. בצע הדמיה באמצעות פרוטוקולי מיקרוסקופיה הוקמו 18.
2. דיסטלי MCAo
הערה: הליך MCAo צריכה להתבצע כ -5 ד לאחר הכנת CW. זה ממזער הפרעה מן התגובה החיסונית הנגרמת על ידי הכנה CW עם התגובה החיסונית כתוצאה משבץ מוחי.
"Src =" / files / ftp_upload / 54,701 / 54701fig1.jpg "/>
באיור 1. סקירה כללית של דיסטלי MCAo. א זהו סקירה יפה על הכלי לפני op. .ב כלי לאחר מגע דו קוטבי הראשון. ג כלי לאחר מגע דו קוטבי שני. ד הסקירה על הכלי, אשר סגורים לחלוטין עכשיו. א סוף סקירה עם בהגדלה נמוכה. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
- לטשטש את העכברים באמצעות מסיכת הרדמה משטר הרדמה המתאים, בהתייעצות עם צוות וטרינרי (למשל, אינדוקציה עם 1.5 - isoflurane ותחזוקה 2% עם 1.0 - isoflurane 1.5% ב 2/3 N 2 O ו 1/3 O 2 דרך מאדה).
- לגלח ולהסיר את השיער ולחטא את העור ופרווה שמסביב עם סוכן מתאים (למשל, 70% כוהל אתילי), ולייבש אותו לאחר מכן.
- שמירה על טמפרטורת הגוף של עכברים ב 36.5 ° C ± 0.5 מעלות צלזיוס במהלך הניתוח. כרית חימום מבוקר משוב, מחומם על פי טמפרטורה רקטלית של העכבר, מומלץ מאוד.
- מניח את החיה במצב לרוחב. תקן את האף במסכת הרדמה ולהתאים את ריכוז isoflurane ל -1.0 - 1.5%.
- החל משחה רטובה (dexpanthenol) לשתי העיניים.
- השתמש החתך בעור עשה לעריכת CW.
- בעדינות להפריד את העור ולזהות את השריר הזמני מתחת.
- התאם את האנרגיה של הגנרטור תדירות גבוהה (5 - 7 W) ולהשתמש במצב דו קוטבית.
- השתמש מלקחי electrocoagulation ובזהירות להסיר את השריר הזמני מהגולגולת, יצירת דש שרירים, בלי לחלוטין הסרת השריר.
- זהה את MCA מתחת הגולגולת השקופה בחלק המקורי של האזור הזמני, גב אל-Orbita רטרוסינוס l. אם הסתעפות MCA לא ניתן לזהות, לנסות לזהות את הכלי המקורי ביותר.
- הגולגולת דק מעל הסניף MCA עם microdrill תוך להשקיית ברציפות, כדי למנוע נזק חום.
- הרם את העצם עם קנולה ולהסיר אותו עם microforceps.
- להקטין את האנרגיה של הגנרטור בתדירות גבוהה 3 - 5 W.
- מתקרב העורק מלמעלה בעדינות לגעת בו עם המלקחיים דו קוטביים משני הצדדים מבלי להרים את כלי השיט.
- להקריש העורק proximally ו distally אל הסתעפות כלי.
- המתן 30 שניות, ולאחר מכן גע העורק בעדינות על מנת להבטיח כי זרימת הדם מופרעת לצמיתות. חזור על electrocoagulation אם recanalization הוא ציין.
- תקן את השריר הזמני עם 1 או 2 תפרים בבית הכנסת השריר לכיסוי פגם העצם, אם אפשר.
- לתפור את הפצע והמקום חי לתוך תיבת ההתאוששות המחוממת. באופן כללי, התאוששות חיות במהירות לאחר anest נדיפיםhesia.
- להחלפת נפח, להחיל 0.5 מ"ל של תמיסת מלח סטרילית מתחת לעור, כמתואר בשלב 1.16.
- לאחר ניתוח, לאפשר החיות להישאר בכלוב ההתאוששות המחומם במשך 90 דקות. חכה עד החיות מודעות לפני שעזבת אותם ללא השגחה. רק להחזיר אותם בכלוב עם בעלי חיים אחרים כאשר הם התאוששו לחלוטין.
- חזור על החלפת הנפח, כמוסבר בשלב 1.16, לאחר 12 שעות.
- החל שיכוך כאבים לאחר הניתוח באמצעות מי השתייה (למשל, אקמול (10 מ"ג / מ"ל) או תרופות נוגדות דלקת לא סטרואידיות אחרות).
- בדוק את מצבו הרפואי של חיות בכל יום לאחר הניתוח. לספק מזון מן החי מחית בתוך צלחת פטרי על הרצפה כדי לפשט אכילה כדי להקטין את איבוד משקל לאחר ניתוח.
3. טיפול Sham
- בצע את כל הנהלים באופן זהה שלבים 1 ו -2, כמתואר לעיל, כולל CW הכנה-רק שאין להקריש את ar המוח האמצעי חשוףמצבר.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
ציר הזמן ואת תוצאות נציג מוצגים איורים 2 ו -3. הכנת החלון גולגולתי, עם לרוחב חלון גולגולתי קטן בסינוס sagittal המעולה (האיור 2 B, C, D) תוצאות שיעור תמותה ותחלואה נמוכה מאוד כאשר היא מבוצעת על ידי מנתח מנוסה. כל 10 החיה שרדו, וכל CW הכרוני יכול לשמש הדמיה באיכות גבוהה, אפילו 28 ימים לאחר הניתוח. לא הייתה שום בעיה עם זיהומים בפצע או סיבוכים אחרים.
בשל החשיפה הקצרה הרדמה נדיפים ניזק מוחי מזערי בלבד, כ 10 - 15 דקות לאחר דיסטלי MCAo והעברתי לכלוב ההתאוששות המחומם, כל בעלי החיים היו ערים, נעו בחופשיות בכלוב ההתאוששות, ואינטראקציה עם להמלטה. באופן כללי, התמותה של המודל MCAo דיסטלי הוא פחות מ -5% ובעיקר מתרחשת כתוצאה i וסקולריתnjury ודימום לאחר במהלך הניתוח MCAo. שיעורי התמותה במהלך תקופת המעקב 28 ימים מיום דיסטלי MCAo מתרחשת רק לעתים נדירות מאוד. מורפולוגית, הנגע ניתן להעריך באמצעות היסטולוגיה או MRI (איור 3 א ', ב). בנוסף, מדידות MRI מציעות את ההזדמנות להעריך נפח נגע והתקדמות באופן אורכי. בדיקת MRI שבוצעה 24 שעות לאחר איסכמיה בבירור מתארת את הנגע איסכמי הממוקם מתחת CW הכרוני, בעת ביצוע ניתוח דמה, לא רקמות lesioned קליפת מוח נמצאו (איור 3 א). תוצאות MRI מראות בבירור את ההגבלה הקפדנית של הנגע אל הקורטקס, ובכך חוסכות בסטריאטום, בניגוד למודל MCAo filamentous (איור 3 ב). הכנת CW לרוחב כרונית מאפשרת הדמיה לטווח ארוך של כלי הדם בקליפת המוח ואת מיקרו ידי מיקרוסקופ פלואורסצנטי עלית (איור 3 ג, החלק העליון) ושל שטחים קורטיקליים על ידי מיקרוסקופ שני הפוטונים (figuמחדש 3C, חלק תחתון). יתר על כן, אפשר מסלולים מולקולריים תמונה ואינטראקציות תא אל תא עם תאים שכותרתו קרינה או מדידות autofluorescence, כגון הדמית חי קרינה. כפי שניתן לראות בתרשים 3D, מודל MCAo דיסטלי גורם נגעים איסכמיים מאוד לשחזור. לגבי נפח האוטם, אנו מצפים סטיית תקן מתחת ל -15% ב סט יחיד של ניתוחים. כאמור, בניגוד למודלים של הפרוקסימלי MCAo, שיעורי תמותה נמוכים למדי עבור דגם דיסטלי 5. באמצעות MRI, נגע, נפח סדרתי, והתקדמות בצקת בעקבות איסכמיה מוחית מוקדים ניתן להעריך. בדיקת ה- MRI לאחר 24 שעות ו -96 שעות לאחר MCAo דיסטלי קבע לא הראתה התקדמות משמעותית של hyperintensities T2.
איור 2: הכנת חלון גולגולת כרונית. (א) ציר זמן נציג. <strong> (B) סימון האזור שבו craniotomy מתרחש, לרוחב לשריר הזמני, המדיאלי סינוס sagittal מעולה, ועל הגב כדי גבחת. (C) משטח מוח לאחר פתיחת גולגולת, עם שכבת דורה שלמה הזכוכית המכסה במקום; המעגל מציג את המיקום של אזור איסכמי לאחר MCAo דיסטלי. (ד) חלון גולגולת כרוני סיים עם מכסה זכוכית קבועה, מוכן הדמיה חוזרת במשך כמה שבועות (ב = גבחת, tm = שרירים זמניים, SSS = סינוס sagittal המעולה, ai = שטח של איסכמיה). אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
איור 3: שילוב של MCAo CW ו דיסטלי כרוני לרוחב או ניתוח דמה. (א) MRI שבוצעה 24 שעות לאחר shניתוח בבוקר לא מראה שום רקמת קליפת המוח lesioned. (ב) MRI שבוצעה 24 שעות לאחר איסכמיה בבירור מתארת את נגע איסכמי (*) הממוקם מתחת CW הכרוני. (C) Intravital הדמית עלית קרינה (חלק עליון) ואת שני פוטוני הדמיה (חלק תחתון) של כלי הדם בקליפת המוח. (ד) נפח האוטם כפי שהוערך MRI לאחר 24 שעות ו -96 שעות לאחר איסכמיה מראה נפח הנגע ממוצע של 13.16 2.3 מ"מ 3 ב 24 שעות ו -12.2 1.9 מ"מ 3 ב 96 שעות. כל נקודה מייצגת חיה בודדת (n = 10 חיות לכל קבוצה, ממוצע ± SEM). אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
שבץ מוחי הוא בין הגורמים העיקריים נכות לטווח ארוך ומוות ברחבי העולם 1. מעבר לטיפול אקוטי, חוקרת גישות מנגנונים חדשים כדי להאיץ ולשפר את ההתאוששות לאחר שבץ נשאר מטרה 7 רפואי הממשלה. חוקרי שבץ ניסיוני להעסיק מכרסמי מודלים בתדירות של איסכמיה המוחית מוקדים. למעשה, מודלי התרמה חולפת או קבועה MCAo לחקות אחד הסוגים הנפוצים ביותר של איסכמיה המוחית מוקדים בחולי 4. מלבד חסימה הפרוקסימלי של MCA, מודל הנימה עבור חסימה כירורגית של MCAo דיסטלי הוא כנראה המודל השכיח ביותר 5,19 מחקר שבץ ניסיוני. כאן אנו מתארים את הטכניקה הבסיסית של MCAo דיסטלי קבע בשילוב עם CW לרוחב, מציעה הזדמנות עבור מיקרוסקופיה intravital אורך בעכברים. שחזור גבוה של נפח נגע, כמו גם שיעורי תמותה נמוכים מאוד, בעיקר ביחס ללימוד תוצאות ארוכת טווח, arדואר היתרונות העיקריים של מודל Murine זה. במודל שבץ קליפת המוח הזה, כלי דם באזור השבץ באזור פרי-אוטם ניתן מדמיינים באמצעות CW הכרונית. באמצעות מערכת videomicroscopic epifluorescence רבה קרינה, דינמיקת זרימת דם ואת הגיוס הדינאמיים של תאים במחזור ניתן דמיין. כלי דם הם דמיינו באמצעות מקרומולקולות שכותרתו fluorescently, כמו dextrans או אלבומין. תאים יכולים להיות מתויג באמצעות צבעי ניאון או על ידי מודלים גנטיים, כגון מפלצות מח עצם עם בעלי חיים GFP חיובי. יתר על כן, כדי לחקור אינטראקציות התא אל התא ואת הדינמיקה של תאים extravascular, מיקרוסקופ confocal סריקת לייזר שני פוטונים יכול להיות מיושם. הדמיה עד 250 מיקרומטר מתחת לפני השטח של קליפת המוח יכולה להתבצע. שוב, כלי דם הם מוכתמים באמצעות מקרומולקולות שכותרתו fluorescently, ותאי מסומנים גנטיים (למשל, באמצעות עכבר GFP-Nestin המהונדס).
חלון גולגולתיהניתוח מבוצע באמצעות פתיחת הגולגולת מבלי לפתוח את הדורה. מכשול אחד עיקרי הוא לפצוע את שכבת dural ואת הקליפה בטעות מתחת בעת פתיחת הגולגולת עם microdrill. לכן, טכניקה זו דורשת מיומנות טכנית כדי למנוע ניזק ההדור ואת הקליפה, אשר מגביר את מיקרוסקופיה תגובה חיסונית והשפעות תוצאות. לחלופין, מודל דליל-גולגולת פוטנציאל מוגבל על ידי איכות מיקרוסקופיה אמינה פחות בגלל הגולגולת הנותרת, במיוחד בטווח הארוך. לעתים קרובות, דליל גולגולת חוזרת יש צורך, ואילו במודל CW, איכות החלון נמשכת מספר חודשים, עד לצמיחה מחודשת גולגולת או השפעות עיבוי dural הדמית איכות 14,20. מודולציה של דגם זה עם הכנה דלילה-גולגולת תהיה אפשרית. שכבת dural יש להשאיר על המוח, כדי למנוע כל פגיעה או עירור של הקורטקס. רק אם בפנייה ישירה באזור איסכמי היא רצויה במודל ניסיוני יכול הדורה מחדשעבר, בזהירות ובלי לפצוע כל ורידי גישור.
בניגוד מודלים משלב CW ו גרימת חסימת כלי ממוקדת באמצעות הקרנה של הפוטוסנסיטייזרים במחזור, מה שמוביל נגעים איסכמיים קטנים מאוד בלבד, מחק מודל MCAo דיסטלי רוב משייך אדם הנמצאים בשטח MCA קליפת המוח 13. כדי למנוע הפרעה עם תגובה חולפת דלקת בשל הכנת CW, החלון צריך להיות מוכן כמה ימים לפני ניתוח MCAo דיסטלי.
מספר בדיקות כדי להעריך פונקציונליים כמו גם היבטים התנהגותיים במכרסמים זמינים (למשל, ניתוח הליכה, מבחן rotarod, מבחן מוט, בדיקת הסרת דבק, מבחן מדרגות, מבחן שדה פתוח, מבוך מים של מוריס) 21. בכל הבדיקות האלה, עכברים נתונים MCAo לבצע פחות בהצלחה מחיות שליטה, ביחס לתוצאות לטווח קצרים לטווח בינוני. עם זאת, לגבי ההערכהתוצאות ארוכות טווח, יש להודות כי הרגישות של בדיקות פונקציונליות מוגבלת מאוד מבחינת דיסטלי MCAo, כמו גם קלה הפרוקסימלי MCAo 19,21-23.
MCAo דיסטלי, מבוצע על ידי מנתחים מאומנים היטב, יכול להיגרם בתוך פחות מ -20 דקות והוא יכול לייצר נגעים איסכמיים מאוד לשחזור. עם זאת, שחזור דורש שליטה יסודית של לערפלנים. הבדלי טכניקה כירורגית עשויים להוביל להבדלים בגודל אוטם 24. זנים שונים עכבר יכול להראות תוצאת שבץ שונה בשל סטיות באנטומיה וסקולרית מוחית בין זנים. יתר על כן, כפי טמפרטורת גוף משפיעה ניזק עצב רגישות איסכמיה, עם היפותרמיה המוביל נגעים קטנים היפרתרמיה גירעונות חמורים יותר 25,26, בקרת טמפרטורה ותחזוקה רלוונטית מאוד במודל זה, כמו גם מודלים אחרים איסכמיה 27. באופן כללי, פרמטרים פיזיולוגיים, כגון pressu דםמחדש וגזים בדם, הם לערפלנים חשובים של תוצאה וחייבים להיות נשלטו במשך 28. בנוסף, הבחירה של ההרדמה חשובה מאוד, כמו כמה סוכנים גורמים להשפעות נוירו ישירות או לפעול בעקיפין באמצעות תכונות vasoactive 29. לכן, חשיפת הרדמה יש טופל והמשיך קצר ככל האפשר. לבסוף, תנאי דיור, כמו השימוש עשרה, עשויים להשפיע תוצאת שבץ וכן, וכך צריך להיות אחידים ותארו דוחות מחקר 30. כדי להפיק תוצאות פרה-קליניות רלוונטיות לפיתוח גישות טיפוליות חדשות, סטנדרטיזציה, בקרת איכות, ודיווח הנם בעלי החשיבות העליונה 31.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Binocular surgical microscope | Zeiss | Stemi 2000 C | |
| Light source for microscope | Zeiss | CL 6000 LED | |
| Heating pad with rectal probe | FST | 21061-10 | |
| Stereotactic frame | Kopf | Model 930 | |
| Anaethesia system for isoflurane | Draeger | ||
| Isoflurane | Abott | ||
| Dumont forceps #5 | FST | 11251-10 | |
| Dumont forceps #7 | FST | 11271-30 | |
| Bipolar Forceps | Erbe | 20195-501 | |
| Bipolar Forceps | Erbe 20195-022 | ||
| Microdrill | FST 18000-17 | ||
| Needle holder | FST | 12010-14 | |
| 5-0 silk suture | Feuerstein, Suprama | ||
| 7-0 silk suture | Feuerstein,Suprama | ||
| 8-0 silk suture | Feuerstein, Suprama | ||
| Veterinary Recovery Chamber | Peco Services | V1200 |
References
- Mukherjee, D., Patil, C. G. Epidemiology and the global burden of stroke. World Neurosurg. 76 (6), Suppl 85-90 (2011).
- Ebinger, M., Prüss, H., et al. Effect of the use of ambulance-based thrombolysis on time to thrombolysis in acute ischemic stroke: a randomized clinical trial. JAMA. 311 (16), 1622-1631 (2014).
- Ebinger, M., Lindenlaub, S., et al. Prehospital thrombolysis: a manual from Berlin. J vis Exp. (81), e50534 (2013).
- Bogousslavsky, J., Van Melle, G., Regli, F. The Lausanne Stroke Registry: analysis of 1,000 consecutive patients with first stroke. Stroke. 19 (9), 1083-1092 (1988).
- Engel, O., Kolodziej, S., Dirnagl, U., Prinz, V. Modeling stroke in mice - middle cerebral artery occlusion with the filament model. J Vis Exp. (47), (2011).
- Donnan, G. A., Fisher, M., Macleod, M., Davis, S. M. Stroke. Lancet. 371 (9624), 1612-1623 (2008).
- Meairs, S., Wahlgren, N., et al. Stroke research priorities for the next decade--A representative view of the European scientific community. Cerebrovasc Dis. 22 (2-3), 75-82 (2006).
- Rosamond, W., Flegal, K., et al. Heart disease and stroke statistics--2007 update: a report from the American Heart Association Statistics Committee and Stroke Statistics Subcommittee. Circulation. 115 (5), 69-171 (2007).
- Moskowitz, M. A., Lo, E. H., Iadecola, C. The science of stroke: mechanisms in search of treatments. Neuron. 67 (2), 181-198 (2010).
- Dirnagl, U., Iadecola, C., Moskowitz, M. A. Pathobiology of ischaemic stroke: an integrated view. Trends Neurosci. 22 (9), 391-397 (1999).
- Dirnagl, U., Endres, M. Found in Translation: Preclinical Stroke Research Predicts Human Pathophysiology, Clinical Phenotypes, and Therapeutic Outcomes. Stroke. , (2014).
- Prinz, V., Hetzer, A. -M., et al. MRI heralds secondary nigral lesion after brain ischemia in mice: a secondary time window for neuroprotection. J Cereb Blood Flow Metab. , (2015).
- Shih, A. Y., Mateo, C., Drew, P. J., Tsai, P. S., Kleinfeld, D. A polished and reinforced thinned-skull window for long-term imaging of the mouse brain. J Vis Exp. (61), (2012).
- Holtmaat, A., Bonhoeffer, T., et al. Long-term, high-resolution imaging in the mouse neocortex through a chronic cranial window. Nat Protoc. 4 (8), 1128-1144 (2009).
- Iadecola, C., Dirnagl, U. The microcircualtion--fantastic voyage: introduction. Stroke. 44 (6), Suppl 1 83 (2013).
- Blinder, P., Tsai, P. S., Kaufhold, J. P., Knutsen, P. M., Suhl, H., Kleinfeld, D. The cortical angiome: an interconnected vascular network with noncolumnar patterns of blood flow. Nat Neurosc. 16 (7), 889-897 (2013).
- Shih, A. Y., Driscoll, J. D., Drew, P. J., Nishimura, N., Schaffer, C. B., Kleinfeld, D. Two-photon microscopy as a tool to study blood flow and neurovascular coupling in the rodent brain. J Cereb Blood Flow Metab. 32 (7), 1277-1309 (2012).
- Cabrales, P., Carvalho, L. J. M. Intravital microscopy of the mouse brain microcirculation using a closed cranial window. J Vis Exp. (45), (2010).
- Rosell, A., Agin, V., et al. Distal occlusion of the middle cerebral artery in mice: are we ready to assess long-term functional outcome. Transl Stroke Res. 4 (3), 297-307 (2013).
- Dorand, R. D., Barkauskas, D. S., Evans, T. A., Petrosiute, A., Huang, A. Y. Comparison of intravital thinned skull and cranial window approaches to study CNS immunobiology in the mouse cortex. Intravital. 3 (2), (2014).
- Balkaya, M., et al. Assessing post-stroke behavior in mouse models of focal ischemia. J Cereb Blood Flow Metab. 33 (3), 330-338 (2013).
- Balkaya, M., Kröber, J., Gertz, K., Peruzzaro, S., Endres, M. Characterization of long-term functional outcome in a murine model of mild brain ischemia. J Neurosci Methods. 213 (2), 179-187 (2013).
- Freret, T., Bouet, V., et al. Behavioral deficits after distal focal cerebral ischemia in mice: Usefulness of adhesive removal test. Beh Neurosci. 123 (1), 224-230 (2009).
- Liu, S., Zhen, G., Meloni, B. P., Campbell, K., Winn, H. R. RODENT STROKE MODEL GUIDELINES FOR PRECLINICAL STROKE TRIALS (1ST EDITION). J Exp Stroke Trans Med. 2 (2), 2-27 (2009).
- Florian, B., Vintilescu, R., et al. Long-term hypothermia reduces infarct volume in aged rats after focal ischemia. Neurosci Lett. 438 (2), 180-185 (2008).
- Noor, R., Wang, C. X., Shuaib, A. Effects of hyperthermia on infarct volume in focal embolic model of cerebral ischemia in rats. Neurosci Lett. 349 (2), 130-132 (2003).
- Barber, P. A., Hoyte, L., Colbourne, F., Buchan, A. M. Temperature-regulated model of focal ischemia in the mouse: a study with histopathological and behavioral outcomes. Stroke. 35 (7), 1720-1725 (2004).
- Shin, H. K., Nishimura, M., et al. Mild induced hypertension improves blood flow and oxygen metabolism in transient focal cerebral ischemia. Stroke. 39 (5), 1548-1555 (2008).
- Kapinya, K. J., Prass, K., Dirnagl, U. Isoflurane induced prolonged protection against cerebral ischemia in mice: a redox sensitive mechanism. Neuroreport. 13 (11), 1431-1435 (2002).
- Gertz, K., Priller, J., et al. Physical activity improves long-term stroke outcome via endothelial nitric oxide synthase-dependent augmentation of neovascularization and cerebral blood flow. Circ Res. 99 (10), 1132-1140 (2006).
- Dirnagl, U. Bench to bedside: the quest for quality in experimental stroke research. J Cereb Blood Flow Metab. 26 (12), 1465-1478 (2006).
