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Neuroscience

Lateral Chronic Cranial Fenster Vorbereitung Ermöglicht Published: December 29, 2016 doi: 10.3791/54701

Summary

Chirurgische Verschluss eines distalen Arteria cerebri media Zweig (MCAo) ist ein häufig verwendetes Modell in experimentellen Schlaganfallforschung. Diese Handschrift beschreibt die grundlegende Technik der Dauer MCAo, mit der Einfügung eines seitlichen Schädelfenster kombiniert werden, die die Möglichkeit für eine Längsintravitalmikroskopie in Mäusen bietet.

Abstract

Fokaler zerebraler Ischämie (dh ischämischer Schlaganfall) verursachen kann schwere Hirnverletzung, zu einem schweren Verlust der neuronalen Funktion führen und damit zu einer Vielzahl von motorischen und kognitiven Behinderungen. Die hohe Prävalenz stellt eine ernste gesundheitliche Belastung, wie Schlaganfall zu den Hauptursachen für langfristige Behinderung und Tod weltweit 1 ist. Wiederherstellung der neuronalen Funktion ist in den meisten Fällen nur teilweise. Bisher sind Behandlungsmöglichkeiten sehr begrenzt, insbesondere aufgrund der engen Zeitfenster für die Thrombolyse 2,3. Die Bestimmung Methoden Erholung von Schlaganfall zu beschleunigen bleibt ein hervorragendes medizinisches Ziel; jedoch wurde dies durch eine unzureichende mechanistische Einblicke in den Recovery-Prozess behindert. Experimentelle Schlaganfall Forscher häufig Nagetiermodellen von fokaler zerebraler Ischämie beschäftigen. Jenseits der akuten Phase wird der Schlaganfallforschung an der subakuten und chronischen Phase nach einer zerebralen Ischämie zunehmend konzentriert. Die meisten Schlaganfall Forscher gelten permanent oder transient Verschluss der MCA bei Mäusen oder Ratten. Bei Patienten, Verstopfungen des MCA gehören zu den häufigsten Ursachen für einen ischämischen Schlaganfall 4. Neben proximalen Verschluss der MCA mit dem Glühfaden Modell, chirurgische Verschluss des distalen MCA ist wahrscheinlich die am häufigsten verwendete Modell in der experimentellen Schlaganfallforschung 5. Occlusion eines distalen (zur Verzweigung der lenticulo-Striatum Arterien) MCA Zweig erspart typischerweise das Striatum und betrifft vor allem die Neocortex. Gefäßverschluss können dauerhaft oder vorübergehend sein. Hohe Reproduzierbarkeit der Läsion Volumen und sehr niedrige Mortalitätsraten in Bezug auf die langfristige Ergebnis sind die wichtigsten Vorteile dieses Modells. Hier zeigen wir, wie eine chronische Hirn Fenster (CW) Vorbereitung lateral des Sinus sagittalis durchzuführen, und danach, wie chirurgisch zu einem distalen Hub unter dem Fenster induzieren eine Kraniotomie Ansatz. Dieser Ansatz kann über für sequentielle Abbildung von akuten und chronischen Veränderungen nach Ischämie angewendet werdenepi-Beleuchtung, konfokalen Laser-Scanning und Zwei-Photonen-Intravitalmikroskopie.

Protocol

ETHIK STATEMENT: Experimente mit Versuchstieren wurden in Übereinstimmung mit den Richtlinien und Vorschriften her durch Landes fuer Gesundheit und Soziales, Berlin, Deutschland (G0298 / 13) und den ANKOMMEN Kriterien durchgeführt, soweit zutreffend. Für diese Studie wurden 10 bis 12 Wochen alte männliche C57BL / 6J-Mäuse wurden verwendet.

1. Seitliche Chronische Cranial Fenster Vorbereitung

  1. Führen Anästhesie mit einer subkutanen Injektion von Ketamin (90 mg / kg) und Xylazin (10 mg / kg). Test für eine ausreichende Sedierung mit einem Schmerzreiz.
  2. Sterilisieren der chirurgischen Instrumente und OP-Feld mit 70% Ethanol.
  3. Entfernen Sie die Kopfhaare vom Hals bis zu den Augen ein Nagetier Rasierer.
  4. Befestigen Sie den Kopf in einem stereotaktischen Rahmen.
  5. Verwenden Sie Dexpanthenol Augensalbe auf beiden Augen Austrocknung zu vermeiden.
  6. Reinigen Sie den OP-Bereich alle Haare zu entfernen und zu sterilisieren es mit drei Schichten von 74,1% Ethanol und 10% 2-Propranolol.
  7. Führen Sie eine MittellinieInzision vom Hals bis zu den Augen unter Verwendung eines Skalpells.
  8. Umspannen den Hautlappen mit 4 Ausbeulung Nähten.
  9. Entfernen Sie die Periost vorsichtig auf der linken Hemisphäre, indem Sie sie mit einem Skalpell zu dem Punkt, Schaben, wo der Schläfenmuskel beginnt.
    ANMERKUNG: Diese Zubereitung dient auch eine gute Haftfläche für das Dentalkleber zu schaffen, die das Deckglas fixiert.
  10. Durchführen einer fronto-parietalen Kraniotomie mit einem Durchmesser von 4 mm durch den Schädel an dem Rand der Knochenlappen Dünnung eines Mikrobohrers verwendet wird. Bewerben Salzlösung während des Bohrens Hitze Verletzungen zu vermeiden.
  11. Elevate den Knochendeckel mit Kanülen und entfernen Sie sie microforceps verwenden.
  12. Spülen Sie sorgfältig und ausgiebig mit Kochsalzlösung.
  13. Mischen Sie die Dentalkleber , bis er die richtige Konsistenz hat und nicht Flüssigkeit (dh sollte der Kleber nicht produzieren Fäden mehr). Legen Sie es auf den Knochen um die Kraniotomie.
  14. Legen Sie ein Deckglas mit einem 6-mm Durchmesser auf dem vorbereiteten Kleber und fixieren Sie es mit the Rest des Dentalkleber. Achten Sie darauf, dass es wasserdicht ist. Warten Sie, bis der Kleber getrocknet und hart indem sie sie mit einer Pinzette zu testen.
    HINWEIS: Eine zusätzliche Bewässerung beschleunigt die Aushärtung.
  15. Entfernen Sie die Ausbeulung Nähte und schließen Sie die Wunde mit Hautnähte.
  16. Ziehen Sie die Haut von der Flanke der Maus nach oben. Legen Sie eine Nadel subkutan und ersetzen sanft 0,5 ml steriler Kochsalzlösung subkutan für den Flüssigkeitshaushalt.
  17. Nach der Operation bleiben die Tiere im beheizten Erholungskäfig für 90 min. Warten Sie, bis die Tiere, bevor sie vollständig wach sind verlassen sie unbeaufsichtigt. Warten Sie, bis die Tiere vollständig zurückgewonnen werden, bevor sie in einen Käfig mit anderen Tieren zurück.
  18. Wiederholen Sie die subkutane Salzvolumensubstitution nach etwa 12 Stunden, wie in Schritt 1.16 beschrieben.
  19. Immer anwenden Analgesie über eine Magensonde oder direkt in die Mundhöhle nach der Operation (zB Paracetamol (10 mg / ml) oder andere nicht-steroidale Antirheumatika).
  20. Überprüf den Zustand der jeden Tag nach der Operation Tiere, und immer auf dem Boden Tierfutter in einer Petrischale püriert bieten Essen einfach zu machen und kritische Gewichtsverlust nach der Operation zu vermeiden.
    HINWEIS: Intravitalmikroskopie kann am ersten Tag nach dem Schädelfenster Vorbereitung durchgeführt werden.
  21. Bewerben Isofluran-Narkose und befestigen Sie das Tier in einem Kopfhalter. Öffnen Sie die Hautnaht und reinigen Sie das Fenster mit Wattestäbchen und steriler Kochsalzlösung. Nach 24 Stunden sollte das kraniale Fenster mit Zerebrospinalflüssigkeit von diesem Zeitpunkt gefüllt werden, die Bildgebung ermöglicht. Führen Bildgebung durch etablierte Mikroskopie - Protokolle 18.

2. Distal MCAo

HINWEIS: Die MCAo Verfahren sollte etwa 5 d nach CW Vorbereitung durchgeführt werden. Dies minimiert die Interferenz von der Immunreaktion durch die CW-Zubereitung mit dem Hub-induzierte Immunreaktion verursacht.

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Abbildung 1. Übersicht über die Distal MCAo. A. Dies ist eine schöne Übersicht über die Gefäße vor dem op. B. Die Gefäße nach dem ersten bipolaren Kontakt. C. Die Gefäße nach der zweiten bipolaren Kontakt. D. Die Übersicht über die Schiffe, die nun vollständig geschlossen sind. E. Abschließende Übersicht mit geringerer Vergrößerung. Bitte klicken Sie hier , um eine größere Version dieser Figur zu sehen.

  1. Betäuben die Mäuse eine Narkosemaske und eine angemessene Betäubung Regime, in Beratung mit Tierärzten (zB Induktion mit 1,5 bis 2% Isofluran und Wartung mit 1,0 bis 1,5% Isofluran in 2/3 N 2 O und 1/3 O 2 über einen Verdampfer).
  2. Rasur und entfernen Sie die Haare und desinfizieren die Haut und die umliegenden Fell mit einem geeigneten Mittel (zB 70% Ethylalkohol) und trocknen Sie es danach.
  3. Aufrechterhaltung der Körpertemperatur der Mäuse bei 36,5 ° C ± 0,5 ° C während der Operation. Eine Rückkopplung gesteuert Heizkissen, erhitzt nach der Rektaltemperatur der Maus, ist sehr zu empfehlen.
  4. Legen Sie das Tier in der Seitenlage. Befestigen Sie die Nase in der Narkosemaske und stellen Sie die Isofluran-Konzentration auf 1,0 bis 1,5%.
  5. Tragen Sie nass-Salbe (Dexpanthenol) für beide Augen.
  6. Verwenden Sie den Hautschnitt für die CW-Vorbereitung gemacht.
  7. trennen die Haut sanft und identifizieren unterhalb des Schläfenmuskel.
  8. Stellen Sie die Energie des Hochfrequenzgenerators (5 bis 7 W) und den bipolaren Modus verwenden.
  9. Verwenden Sie die Elektrokoagulation einer Pinzette vorsichtig die Schläfenmuskel aus dem Schädel zu entfernen, einen Muskellappen zu schaffen, ohne völlig den Muskel zu entfernen.
  10. Identifizieren Sie den MCA unter der transparenten Schädel im rostralen Teil des Schläfenbereich, dorsal der retro Orbital Sinus. Wenn der MCA Bifurkation nicht identifiziert werden kann, versuchen Sie das Schiff die meisten rostral zu identifizieren.
  11. Dünne der Schädel über dem MCA Zweig mit einem Mikrobohrer, während kontinuierlich Hitzeschäden zu vermeiden Bewässerung.
  12. Heben Sie den Knochen mit Kanülen und entfernen Sie sie mit microforceps.
  13. Verringern die Energie des Hochfrequenzgenerators auf 3 bis 5 W.
  14. Nähern Sie sich die Arterie von oben und sanft berühren mit der bipolaren Pinzette auf beiden Seiten, ohne das Schiff zu heben.
  15. Koagulieren der Arterie proximal und distal zu der Gefäßverzweigung.
  16. Warten für 30 Sekunden, und dann um die Arterie sanft berühren, um sicherzustellen, dass der Blutfluss dauerhaft unterbrochen wird. Wiederholen Sie die Elektrokoagulation, wenn ein Rekanalisation beobachtet wird.
  17. Befestigen Sie den Schläfenmuskel mit 1 oder 2 Stiche am Muskelansatz den Knochendefekt zu bedecken, wenn möglich.
  18. Nähen Sie die Wunde und legen Sie das Tier in die erhitzte Rückgewinnungskasten. Im Allgemeinen Tiere Erholung schnell nach dem flüchtigen anesthesia.
  19. Für Volumensubstitution gelten 0,5 ml steriler Kochsalzlösung subcutan, wie in Schritt 1.16 beschrieben.
  20. Nach der Operation lassen sich die Tiere für 90 min im beheizten Erholungskäfig zu bleiben. Warten Sie, bis die Tiere bewusst sind, bevor sie unbeaufsichtigt lassen. Nur bringt sie mit anderen Tieren zu einem Käfig, wenn sie vollständig wiederhergestellt werden.
  21. Wiederholen Sie die Volumensubstitution, wie in Schritt 1,16, nach 12 h erläutert.
  22. Bewerben postoperativen Analgesie über das Trinkwasser (zB Paracetamol (10 mg / ml) oder andere nicht-steroidale Antirheumatika).
  23. Überprüfen Sie den medizinischen Zustand der jeden Tag nach der Operation Tiere. Geben Sie püriert Tierfutter in einer Petrischale auf dem Boden essen zu vereinfachen und postoperativen Gewichtsverlust zu minimieren.

3. Sham-Behandlung

  1. Führen Sie alle identisch zu den Schritten 1 und 2 beschrieben oben einschließlich CW Vorbereitungs ausnehmen nicht die exponierten cerebri ar gerinnenrie.

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Representative Results

Die Zeitleiste und repräsentative Ergebnisse sind in den Abbildungen 2 und 3 dargestellt ist . Der kraniale Fenstervorbereitung, mit einem kleinen Fenster cranial lateral des Sinus sagittalis superior (Abbildung 2 B, C, D) führt zu einer sehr niedrigen Mortalität und Morbidität , wenn sie von einem erfahrenen Chirurgen durchgeführt. Alle 10 Tiere überlebten, und alle chronischen CW für qualitativ hochwertige Bildgebung verwendet werden könnte, auch 28 Tage nach der Operation. Es gab kein Problem mit Wundinfektionen oder andere Komplikationen.

Aufgrund der kurzen Exposition gegenüber flüchtigen Anästhesie und nur geringfügige Schädigung des Gehirns, etwa 10 bis 15 Minuten nach der distalen MCAo und Transfer zum beheizten Erholungskäfig, waren alle Tiere wach, sich frei in der Erholungskäfig bewegen, und die Interaktion mit littermates. Im allgemeinen Mortalität der distalen MCAo Modell ist weniger als 5% und vor allem tritt als Folge der vaskulären injury und anschließender Blutung während MCAo Chirurgie. Die Mortalität während des Beobachtungszeitraums von 28 Tagen folgende distalen MCAo tritt nur sehr selten auf. Morphologisch kann die Läsion Histologie oder MRI (Abbildung 3 A, B) verwendet werden , beurteilt. Darüber hinaus bieten MRI-Messungen die Möglichkeit Läsionsvolumen und Progression in Längs Weise zu beurteilen. Ein MRI durchgeführt 24 h nach der Ischämie deutlich der ischämischen Läsion zeigt unter der chronischen CW angeordnet, während Scheinoperation folgend, wurde keine läsionierten kortikalen Gewebe (3A) gefunden. Das MRI - Ergebnisse zeigen deutlich die strenge Beschränkung der Läsion zu der Hirnrinde, wodurch die striatum schonen, im Gegensatz zu der filamentösen MCAo Modell (3B). Die seitliche chronische CW Vorbereitung ermöglicht langfristige Visualisierung der kortikalen Gefäßen und Mikrozirkulation durch Epi-Fluoreszenz - Mikroskopie (3C, oberer Teil) und der subkortikalen Bereiche durch Zwei-Photonen - Mikroskopie (Figure 3C, unterer Teil). Ferner ist es möglich, Bild molekularen Wege und Zell-Zell-Interaktionen mit fluoreszenzmarkierten Zellen oder Autofluoreszenz-Messungen, wie beispielsweise Fluoreszenz-Lebensdauer-Imaging. Wie in 3D gezeigt, bewirkt , dass das distale MCAo Modell ischämischen Läsionen in hohem Maße reproduzierbar. In Bezug auf die Infarktvolumens erwarten wir weniger als 15% in einem einzigen Satz von Operationen eine Standardabweichung. Wie oben erwähnt, im Gegensatz zu den Modellen der proximalen MCAo sind Mortalitätsraten für das distale Modell 5 eher gering. Mit sequenziellen MRT, Läsion, Volumen und Ödeme Progression nach einer fokalen kann zerebraler Ischämie bewertet werden. Die MRT bei 24 Stunden und 96 Stunden nach der Dauer distalen MCAo zeigte keine signifikante Progression von T2 Hyperintensitäten.

Figur 2
Abbildung 2: Chronische Cranial Fenster Vorbereitung. (A) Repräsentative Timeline. <medial, zum Sinus sagittalis superior und Rücken zu Bregma strong> (B) den Bereich Kennzeichnung , wo die Kraniotomie Ort, lateral der Schläfenmuskel nimmt. (C) Hirnoberfläche nach einer Kraniotomie, mit einer intakten dura - Schicht und dem Deckglas an Ort und Stelle; Der Kreis zeigt die Position des ischämischen Bereich nach distal MCAo. (D) Fertig chronische Hirn Fenster mit festen Deckglas, bereit für die wiederholte Bildgebung für mehrere Wochen (b = Bregma, tm = Schläfenmuskel, SSS = Sinus sagittalis superior, ai = Fläche der Ischämie). Bitte klicken Sie hier , um eine größere Version dieser Figur zu sehen.

Figur 3
Abbildung 3: Die Kombination des Lateral Chronic CW und Distal MCAo oder Sham - Chirurgie. (A) Die MRT durchgeführt , 24 Stunden nach shUhr Operation zeigt keine läsionierte Rindengewebe. (B) Die MRI durchgeführt 24 h nach der Ischämie deutlich die ischämische Läsion zeigt (*) unter der chronischen CW befindet. (C) Intra Epi-Fluoreszenz - Bildgebung (oberer Teil) und Zwei-Photonen - Imaging (unterer Teil) des kortikalen Gefäße. (D) Infarktvolumen bei 24 Stunden via MRT beurteilt und 96 Stunden nach der Ischämie zeigt eine mittlere Läsion Volumen von 13,16 2,3 mm 3 bei 24 Stunden und 12,2 1,9 mm 3 bei 96 Stunden. Jeder Punkt steht für ein individuelles Tier (n = 10 Tiere pro Gruppe, Mittelwert ± SEM). Bitte klicken Sie hier , um eine größere Version dieser Figur zu sehen.

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Discussion

Der Schlaganfall ist unter den Hauptursachen für langfristige Behinderung und Tod weltweit 1. Jenseits der Akutbehandlung, neue Ansätze und Mechanismen zu untersuchen Genesung nach einem Schlaganfall zu beschleunigen und zu verbessern bleibt ein erstklassiges medizinisches Ziel 7. Experimentelle Schlaganfall Forscher häufig Nagetiermodellen von fokaler zerebraler Ischämie beschäftigen. In der Tat, Modelle vorübergehend oder bleibend MCAo induzieren imitieren eine der häufigsten Arten von fokaler zerebraler Ischämie bei Patienten 4. Neben proximalen Verschluss der MCA, das Filament Modell für chirurgische Verschluss des distalen MCAo ist wahrscheinlich die am häufigsten verwendete Modell in der experimentellen Schlaganfallforschung 5,19. Hier beschreiben wir die grundlegende Technik der permanenten distalen MCAo mit einer seitlichen CW kombiniert, bietet die Möglichkeit für eine Längsintravitalmikroskopie in Mäusen. Hohe Reproduzierbarkeit von Läsionsvolumen sowie sehr niedrige Mortalitätsraten, insbesondere hinsichtlich langfristige Ergebnisse zu studieren, are die wichtigsten Vorteile dieses Mausmodell. In diesem kortikalen Schlaganfallmodell Blutgefäße im Hubbereich und peri-Infarktbereich kann über die chronische CW visualisiert werden. Mit einer Multi-Fluoreszenz Epifluoreszenz- videomikroskopische System, Blutflussdynamik und die dynamische Einstellung von zirkulierenden Zellen visualisiert werden können. Blutgefäße werden durch die Verwendung von fluoreszierend markierten Makromolekülen, wie Dextrane oder Albumin visualisiert. Zellen können entweder durch Fluoreszenzfarbstoffe oder durch genetische Modelle, wie Knochenmark-Chimären mit GFP-positive Tiere zu kennzeichnen. Ferner Zell-zu-Zell-Wechselwirkungen und die Dynamik der extravasalen Zellen zu untersuchen, wurde eine Zwei-Photonen-Laser-Scanning-konfokalen Mikroskop angewendet werden kann. Imaging bis zu 250 & mgr; m unter der kortikalen Oberfläche kann durchgeführt werden. Wiederum Blutgefäße verwenden fluoreszierend markierten Makromolekülen gefärbt, und Zellen genetisch markiert sind (beispielsweise durch die transgene GFP-Nestin Maus).

Die SchädelfensterChirurgie ist ohne Öffnen der Dura über eine Kraniotomie durchgeführt. Ein wichtiger pitfall ist zu versehentlichen die Dural Schicht und Rinde unter verletzen, wenn der Schädel mit dem Mikrobohrer zu öffnen. Daher erfordert diese Technik bestimmte technische Kenntnisse, um Schäden an der Dura und Rinde zu vermeiden, die eine Immunreaktion und Einflüsse Mikroskopie Ergebnisse induziert. Alternativ wird ein Potential ausgedünnten Schädel-Modell durch weniger zuverlässige Mikroskopie Qualität begrenzt, weil der verbleibenden Schädel, vor allem auf lange Sicht. Häufig wiederkehrende Schädel Verdünnung ist notwendig, während in der CW - Modell, die Fensterqualität für mehrere Monate dauert, bis Schädel Nachwachsen oder Dural Verdickung Einflüsse Abbildungsqualität 14,20. Eine Modulation dieses Modell mit einem ausgedünnten Schädel Vorbereitung möglich wäre. Die Dural Schicht sollte auf das Gehirn gelassen werden, um Verletzungen oder Anregung des Kortex zu vermeiden. Nur wenn eine direkte Anwendung auf den ischämischen Bereich in einem experimentellen Modell gewünscht wird, kann die Dura wiederbewegt, sorgfältig und ohne Brückenvenen zu verletzen.

Im Gegensatz zu den Modellen ein CW und induzieren gezielte Gefäßverschluss durch Bestrahlung der zirkulierenden Photosensitizer, was zu einer nur sehr kleinen ischämischen Läsionen, die distalen MCAo Modell imitiert die Mehrheit der menschlichen Hübe Kombination, die in der kortikalen MCA Gebiet 13 befinden. Um Interferenzen mit einer transienten Entzündungsreaktion vermeiden aufgrund CW Zubereitung sollte das Fenster mehrere Tage vor distalen MCAo Operation vorbereitet werden.

Eine Reihe von Tests funktionell sowie Verhaltensaspekte bei Nagetieren zur Verfügung stehen zu bewerten (zB Ganganalyse, RotaRod Test, Pfahltest, Klebstoff Entfernungstest, Treppenhaus - Test, offenen Feldtest und Morris - Wasserlabyrinth) 21. In all diesen Tests unterzogen, Mäuse zu MCAo führen weniger erfolgreich als die Kontrolltiere in Bezug auf kurzfristige und mittelfristige Ergebnisse. Jedoch in Bezug auf die Beurteilung derlangfristigen Ergebnisse, muss anerkannt werden , dass die Empfindlichkeit der Funktionsprüfung in Bezug auf die distale MCAo sehr begrenzt ist, sowie mild proximalen MCAo 19,21-23.

Distal MCAo, von gut ausgebildeten Chirurgen durchgeführt, kann innerhalb von weniger als 20 min induziert werden und können in hohem Maße reproduzierbar ischämischen Läsionen erzeugen. Allerdings Reproduzierbarkeit erfordert eine gründliche Kontrolle der Störfaktoren. Die Unterschiede in der chirurgischen Technik kann auf die Unterschiede in der Infarktgröße 24 führen. Verschiedene Mausstämme möglicherweise einen anderen Hub Ergebnis zeigen wegen Abweichungen in der zerebralen Gefäßanatomie zwischen den Stämmen. Ferner ist , wie die Körpertemperatur neuronaler Schädigung und die Anfälligkeit für Ischämie betroffen sind , mit Hypothermie kleinere Läsionen und Hyperthermie zu schwereren Defizite führenden 25,26, Temperaturkontrolle und Wartung sind in diesem Modell sehr relevant, wie auch in anderen Ischämiemodellen 27. Im allgemeinen physiologische Parameter, wie beispielsweise Blut pressure und Blutgase sind wichtige Störfaktoren für das Ergebnis und muss für 28 gesteuert werden. Darüber hinaus ist die Wahl des Anästhetikums sehr wichtig, da einige Agenten direkte neuroprotektive Effekte ausüben können oder wirken indirekt über vasoaktive Eigenschaften 29. Daher sollte der Exposition gegenüber Anästhesie standardisiert werden und gehalten so kurz wie möglich. Schließlich Wohnbedingungen, wie die Verwendung von Anreicherung kann Schlaganfall Ergebnis beeinflussen als auch, und so standardisiert und in der Forschung beschrieben werden sollten , berichtet 30. Um relevante präklinische Ergebnisse für die Entwicklung neuer therapeutischer Ansätze, Standardisierung, Qualitätskontrolle produzieren, und die Berichterstattung sind von größter Bedeutung 31.

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Materials

Name Company Catalog Number Comments
Binocular surgical microscope Zeiss Stemi 2000 C
Light source for microscope Zeiss CL 6000 LED
Heating pad with rectal probe FST 21061-10
Stereotactic frame Kopf Model 930
Anaethesia system for isoflurane Draeger
Isoflurane Abott
Dumont forceps #5 FST 11251-10
Dumont forceps #7 FST 11271-30
Bipolar Forceps Erbe 20195-501
Bipolar Forceps  Erbe                              20195-022
Microdrill FST                              18000-17         
Needle holder FST 12010-14
5-0 silk suture Feuerstein, Suprama
7-0 silk suture Feuerstein,Suprama
8-0 silk suture Feuerstein, Suprama
Veterinary Recovery Chamber Peco Services V1200

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References

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Bayerl, S. H., Nieminen-Kelhä,More

Bayerl, S. H., Nieminen-Kelhä, M., Broggini, T., Vajkoczy, P., Prinz, V. Lateral Chronic Cranial Window Preparation Enables In Vivo Observation Following Distal Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice. J. Vis. Exp. (118), e54701, doi:10.3791/54701 (2016).

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