Summary
distal orta serebral arter dalı (MCAO) Cerrahi tıkanması, deneysel inme araştırmalarında sıkça kullanılan bir modeldir. Bu el yazması farelerde boyuna intravital mikroskopi için bir fırsat sunuyor yanal kafatası pencere takılması, birlikte kalıcı MCAO temel tekniğini açıklar.
Abstract
Fokal serebral iskemi (yani, iskemik inme) nöronal fonksiyon ciddi bir kaybı ve dolayısıyla motor ve zihinsel engelli bir dizi yol açan başlıca beyin yaralanmaya neden olabilir. Inme 1 dünya çapında uzun süreli sakatlık ve ölüm başlıca nedenleri arasında olduğu gibi yüksek prevalans, ciddi bir sağlık yükünü oluşturmaktadır. nöronal fonksiyonu geri kazanımı, çoğu durumda, sadece kısmi vardır. Şimdiye kadar, tedavi seçenekleri oldukça nedeniyle trombolitik 2,3 dar zaman penceresi, özellikle de sınırlıdır. inme kurtarma hızlandırmak için yöntemlerin belirlenmesi birinci sınıf bir tıbbi hedef olmaya devam; Ancak, bu toparlanma sürecine yetersiz mekanistik anlayışlar tarafından engellenmiştir. Deneysel inme araştırmacılar sıklıkla fokal serebral iskemi kemirgen modelleri kullanır. Akut fazda ötesinde, inme araştırma giderek serebral iskemi aşağıdaki-sub akut ve kronik fazda odaklanmıştır. Çoğu inme araştırmacılar uygulamak kalıcı veya tranfarelerde ya da sıçanlarda MCA'nın SIENT oklüzyonu. Hastalarda, MCA tıkanıklıklar iskemik inme 4 en sık nedenleri arasındadır. Filament modelini kullanarak MCA proksimal oklüzyon yanı sıra, uzak MCA cerrahi tıkanması, deneysel inme araştırma 5. en sık kullanılan model muhtemelen. MCA dalı (lenticulo-striat arterlerin dallanma kadar) distalinde Tıkanıklığı tipik striatum yedek ve öncelikle neokorteks etkiler. Gemi tıkanıklığı kalıcı veya geçici olabilir. uzun dönem sonuçları açısından lezyon hacmi ve çok düşük mortalite oranları yüksek tekrarlanabilirlik bu modelin başlıca avantajları vardır. Burada, sagital sinüs kronik kafa penceresi (CW) hazırlık yanal gerçekleştirmek için, ve daha sonra nasıl bir kraniotomi yaklaşımı kullanarak pencerenin altında bir uzak inme neden cerrahi olarak nasıl gösterilmektedir. Bu yaklaşım ile iskemi sonrası akut ve kronik değişikliklerin sıralı görüntüleme için uygulanabilirKonfokal lazer tarama ve iki foton intravital mikroskopi epi-aydınlatıcı.
Protocol
ETİK TABLOSU: Hayvan denekleri deneyler geçerliyse, Landesamt für Gesundheit und Soziales, Berlin, Almanya (G0298 / 13) ve GELİYORUM kriterlerine göre belirlenen kurallara ve yönetmeliklere uygun olarak yapıldı. 12-haftalık erkek C57BL / 6J farelerine, bu çalışmada, 10 kullanılmıştır.
1. Yanal Kronik Kranial Pencere Hazırlık
- ketamin (90 mg / kg) ve ksilazin (10 mg / kg) deri altından enjeksiyonu ile anestezi gerçekleştirin. Bir ağrı uyaran yeterli sedasyon test edin.
- % 70 etanol ile cerrahi aletler ve cerrahi alan sterilize edin.
- Bir kemirgen tıraş makinesi kullanarak gözlere boyundan kafa derisi saç kaldırmak.
- stereotaktik çerçeve içinde başını düzelt.
- dehidratasyonu önlemek için her iki göze deskpantenol göz merhemi kullanın.
- tüm tüyleri ve% 74.1 etanol 3 kat ve% 10 2-propanolol ile sterilize etmek için cerrahi bölgeyi temizleyin.
- Bir orta hat gerçekleştirinBir neşter kullanılarak gözlere boyun kesi.
- 4 çadırlaşması dikişlerle flep span.
- Temporal kas başlar noktaya bir neşter ile kapalı kazıyarak sol hemisfer dikkatlice periosta çıkarın.
NOT: Bu hazırlık da cam kapak giderir diş yapıştırıcı, iyi bir yapışma alanı oluşturmak için hizmet vermektedir. - Bir mikrotur kullanarak kemik kapağının ağız kafatası inceltilerek 4 mm çapında bir fronto-parietal kranyotomi gerçekleştirin. Isı yaralanmasını önlemek için delerken tuzlu su çözeltisi uygulayın.
- kanüller ile kemik flep yükseltmek ve microforceps kullanarak çıkarın.
- tuzlu su çözeltisi ile dikkatlice ve yoğun yıkayınız.
- O kıvama sahip ve akışkan olmayana kadar diş tutkal karıştırın (yani, tutkal artık Konuları üretmek olmamalıdır). Kraniotomi etrafındaki kemik üzerine yerleştirin.
- Hazırlanan tutkal 6 mm çaplı bir cam kapak yerleştirin ve inci ile sabitleyinDiş tutkal e geri kalanı. o su geçirmez olduğundan emin olun. tutkal forseps ile test ederek sert kurutulur ve kadar bekleyin.
NOT: Ek sulama kür sürecini hızlandırır. - tenting sütür çıkarın ve cilt dikişlerle yarayı kapatmak.
- fare kanadını deri yukarı çekin. Bir iğne subkutan yerleştirin ve yavaşça sıvı dengesi için steril tuzlu subkutan 0.5 ml yerine.
- Ameliyat sonrasında, 90 dakika süre ile ısıtıldı geri kafeste hayvanları tutmak. hayvanlar gözetimsiz bırakarak önce tamamen uyanık kadar bekleyin. hayvanlar tamamen diğer hayvanlarla bir kafes onları dönmeden önce iyileşene kadar bekleyin.
- Adım 1.16 tarif edildiği gibi, yaklaşık 12 saat sonra deri altından tuz hacmi ikame tekrarlayın.
- Her ameliyat (örneğin, parasetamol (10 mg / ml) ya da diğer steroidal olmayan anti-enflamatuar ilaçlar) sonra ağız boşluğu içine sonda ile veya doğrudan analjezi uygulanır.
- kontrol Her gün ameliyat sonrası hayvanların durumu ve her zaman bir Petri-çanak, basit yemek yapmak ve ameliyat sonrası kritik kilo kaybını önlemek için katta hayvan yiyecek püre sağlarlar.
NOT: intravital mikroskopi kafatası pencere hazırlandıktan sonra ilk günü yapılabilir. - izofluran anestezi uygulayın ve bir kafa tutucu hayvan düzeltin. cilt sütür açın ve pamuk tomurcukları ve steril tuzlu su ile pencereyi temizleyin. 24 saat sonra, kafa penceresi görüntüleme sağlayan bir zaman noktası ile, beyin omurilik sıvısı ile doldurulmalıdır. Kurulan mikroskopi protokollerini 18 ile görüntüleme gerçekleştirin.
2. Distal MCAO
NOT: MCAO prosedürü CW hazırlandıktan sonra yaklaşık 5 d yapılmalıdır. Bu vuruş kaynaklı bağışıklık reaksiyonu ile CW hazırlanması nedeniyle bağışıklık reaksiyonu girişimi en aza indirir.
"Src =" / files / ftp_upload / 54701 / 54701fig1.jpg "/>
Distal MCAO 1. Genel Bakış Şekil. A. Bu op önce gemiler hakkında güzel bir bakış niteliğindedir. İlk iki kutuplu temas sonrasında B. gemiler. İkinci bipolar temas sonrasında C. gemiler. D. tamamen şimdi kapalı gemiler, ilgili genel bakış. Alt büyütme ile E. Final bakış. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
- Veteriner kadrosu (danışarak bir anestezi maskesi ve uygun bir anestezik rejimi kullanılarak fareler, uyuşturan, örneğin 1.5 ile indüksiyon - 2/3 N 2 O ve 1/3 O 2'de% 1.5 izofluran üzerinden -% 2 izofluran ve 1.0 ile bakım bir buharlaştırıcı).
- (Tıraş ve saç kaldırmak ve uygun bir madde ile deri ve çevredeki kürk dezenfekteörneğin,% 70 etil alkol), ve daha sonra da kurutulur.
- 36.5 ° C 'de farelerin vücut ısısını korumak ameliyat sırasında ± 0.5 ° C. fare rektal sıcaklığına göre ısıtılmış bir geribildirim kontrollü ısıtma yastığı, şiddetle tavsiye edilir.
- lateral pozisyonda hayvan yerleştirin. Anestezi maskesi burun düzeltmek ve 1.0 izofluran konsantrasyonu ayarlamak -% 1.5.
- Her iki Gözleri ıslak merhem (deskpantenol) uygulayın.
- CW hazırlanması için yapılan cilt kesisi kullanın.
- Cildi nazikçe ayırmak ve altında zamansal kas tespit.
- yüksek frekanslı jeneratör enerjisini ayarlayın (5-7 W) ve bipolar modunu kullanın.
- elektrokoagülasyon forseps kullanın ve dikkatli tamamen kas çıkarmadan, bir kas flep oluşturma, kafatası zamansal kas çıkarın.
- Temporal bölgenin rostral kısmında şeffaf kafatası altında MCA tespit retro orbita dorsall sinüs. MCA çatallanma tespit edilemezse, gemi en rostral belirlemeye çalışın.
- sürekli ısı hasarı önlemek için sulama yaparken bir mikrotur ile MCA şube üzerinde ince kafatası.
- kanüller ile kemik kaldırın ve mikroforcepslerle çıkarın.
- 5 W. - 3 yüksek frekanslı jeneratör enerjisini azaltmak
- yukarıdan arter yaklaşın ve yavaşça gemi kaldırmadan her iki tarafta çift kutuplu forseps ile dokunun.
- damar çatallanma proksimal ve distal arter koagüle.
- 30 saniye bekleyin ve sonra kan akımı kalıcı kesintiye emin olmak için hafifçe arter dokunun. Bir rekanalizasyon görülmektedir eğer elektro tekrarlayın.
- Mümkünse, kemik defekti kapamak için kas ekleme 1 ya da 2 dikiş ile zamansal kas sabitleyin.
- Yarayı dikin ve ısıtmalı kurtarma kutunun içine hayvan yerleştirin. hızlı uçucu ANEST sonra Genel olarak, hayvanlar kurtarmalerine.
- Adım 1.16 tarif edildiği gibi hacimli ikamesi için, steril tuzlu su deri altından 0.5 mL uygulanır.
- Ameliyattan sonra hayvanlar 90 dakika süre ile ısıtıldı geri kafes içinde kalmak için izin verir. hayvanlar gözetimsiz bırakarak önce bilinçli kadar bekleyin. Onlar tamamen iyileşti zaman sadece diğer hayvanlarla bir kafese onları geri.
- 12 saat sonra, adım 1.16 açıklandığı gibi, ses ikame tekrarlayın.
- Içme suyu (örneğin, parasetamol (10 mg / ml) ya da diğer steroidal olmayan anti-enflamatuar ilaçlar) ile ve ameliyat sonrası analjezi uygulanır.
- Ameliyat sonrası her gün hayvanların sağlık durumunu kontrol edin. yeme kolaylaştırmak ve ameliyat sonrası kilo kaybı en aza indirmek için katta bir petri kabındaki püresi hayvan yiyecek sağlamak.
3. Sham Tedavisi
- Yukarıda da dahil olmak üzere CW maruz orta serebral ar koagüle yok hazırlık-hariç açıklanan adım 1 ve 2'ye aynı bütün prosedürleri uygulayınakü.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Zaman çizelgesi ve temsili sonuçları Şekil 2 ve 3'te gösterilmiştir. Superior sagittal sinüs (Şekil 2 B, C, D), deneyimli bir cerrah tarafından gerçekleştirilen çok düşük mortalite ve morbidite oranı sonuçları için küçük bir kafatası pencere yanal ile kafa pencere hazırlama. 10 hayvanların hepsi hayatta ve tüm kronik CW bile 28 gün ameliyattan sonra, yüksek kaliteli görüntüleme için kullanılabilir. yara enfeksiyonları veya başka komplikasyonlara hiçbir sorun yoktu.
Nedeniyle uçucu anestezi ve sadece küçük beyin hasarı, yaklaşık 10 kısa maruz kalma - 15 distal MCAO sonra dakika ve ısıtmalı kurtarma kafesine transferi, tüm hayvanlar özgürce kurtarma kafeste hareket ve littermates ile etkileşim, uyanık. Genel olarak, uzak MCAO modelinin mortalite% 5'inden az ve özellikle damar i bir sonucu olarak ortaya çıkarnjury ve MCAO ameliyat sırasında daha sonraki kanama. Distal MCAO takip eden 28 günlük bir gözlem süresi boyunca ölüm çok nadiren meydana gelir. Morfolojik olarak, lezyon histolojisi veya MRI (Şekil 3 A, B) kullanılarak değerlendirilebilir. Buna ek olarak, MR ölçümleri uzunlamasına bir şekilde lezyon hacmini ve ilerlemesini değerlendirmek için bir fırsat sunuyoruz. Iskemi açıkça kronik CW altında bulunan iskemik lezyonu göstermektedir sonra bir MRI sahte ameliyat takip ederken, hiçbir lezyonlu kortikal doku (Şekil 3A) tespit edildi, 24 saat uygulandı. MR sonuçlar açıkça bu şekilde lifli MCAO modelinde (Şekil 3B) aksine, striatum koruyucu, kortekse lezyon katı kısıtlama göstermektedir. Lateral kronik CW Preparasyon figu (epi-floresan mikroskobu (Şekil 3C, üst kısım) ile ve iki foton mikroskobu ile subkortikal alanlarında kortikal damar ve mikro sirkülasyon uzun süreli görüntülenmesini sağlayarak3C, alt kısım) yeniden. Bundan başka, bu tür floresans ömrü görüntüleme gibi floresan etiketli hücreler veya otofloresan ölçümleri görüntü molekül yollar ve hücre-hücre etkileşimleri mümkündür. Şekil 3D'de gösterildiği gibi, uzak MCAO-modelindeki yüksek tekrarlanabilir iskemik lezyonlara neden olur. infarkt hacmi ile ilgili olarak, biz ameliyatları tek bir sette% 15'in altında bir standart sapma bekliyoruz. Yukarıda belirtildiği gibi, proksimal MCAO modelleri aksine ölüm oranları uzak modeli 5 için oldukça düşüktür. fokal serebral iskemi aşağıdaki sıralı MRI, lezyon, hacim ve ödem ilerlemesini kullanılarak değerlendirilebilir. 24 saat ve kalıcı uzak MCAO sonra 96 saatte MRG T2 hiperintensitelerin anlamlı ilerleme gösterdi.
Şekil 2: Kronik Kraniyal Pencere hazırlanması. (A) Temsilcisi zaman çizelgesi. <strong> kranyotomi zamansal kasının yan yer alır alanı İşaretleme (B), superior sagittal sinüs medial ve bregma dorsal. Dokunulmamış dura tabakası ve yerine kapak camı ile (C) bir kranyotomi sonrası beyin yüzeyi; daire uzak MCAO sonra iskemik alanın yerini göstermektedir. Birkaç hafta (b = bregma, tm = zamansal kas, SSS = superior sagital sinüs, iskemi ai = alan) için tekrarlayan görüntüleme için hazır (D) sabit cam kapak ile Biten kronik kafa penceresi. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Şekil 3: Yanal Kronik CW ve distal MCAO veya Sham Cerrahisi kombinasyonu. (A) MR sh 24 saat sonra yapılanam ameliyatı herhangi lezyonlu kortikal doku göstermez. Iskemi açıkça kronik CW altında bulunan iskemik lezyon (*) tasvir sonra (B) MR 24 saat uygulandı. (C), intravital epi-floresan görüntüleme (üst kısım) ve kortikal damar iki foton görüntüleme (alt kısım). (D) Enfarktüs hacmi 24 saat sonra MR ile değerlendirildi ve iskemi sonrası 96 saat 96 saatte bir ortalama lezyon 24 saat sonra 13.16 2.3 mm 3 hacmini ve 12.2 1.9 mm 3 göstermektedir. Her bir nokta bir hayvanı (grup başına n = 10 hayvan, ortalama ± SEM) göstermektedir. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
İnme 1 dünya çapında uzun süreli sakatlık ve ölüm başlıca nedenleri arasındadır. Akut tedavi, hızlandırmak ve inme sonrası iyileşmeyi artırmak için yeni yaklaşımlar ve mekanizmaları araştıran ötesinde bir asal tıbbi gol 7 kalır. Deneysel inme araştırmacılar sıklıkla fokal serebral iskemi kemirgen modelleri kullanır. Aslında, geçici veya kalıcı MCAO uyaran modelleri hastalarda 4 fokal serebral iskemi en yaygın türlerinden biri taklit. MCA proksimal oklüzyon yanı sıra, uzak MCAO cerrahi tıkanması için filaman modeli deneysel inme araştırma 5,19 en sık kullanılan model muhtemelen. Burada, kalıcı uzak MCAO temel teknik farelerde boyuna intravital mikroskopi için fırsat sunan bir yanal CW ile birlikte açıklar. uzun vadeli sonuçlarını incelemek açısından özellikle lezyon hacminin yüksek tekrarlanabilirlik yanı sıra çok düşük ölüm oranları, arBu fare modelinin ana avantajı e. Bu kortikal inme modelinde, inme alanı ve peri-enfarktüs bölgede kan damarları kronik CW aracılığıyla görülebilir. Çok-floresan epifloresans videomicroscopic sistemi, kan akış dinamiklerini ve dolaşan hücrelerin dinamik işe kullanılarak görüntülenebilir. Kan damarları dekstranlar veya albümin gibi floresan etiketli makromoleküller aracılığıyla görünür hale getirilir. Hücreler, floresan boyalar ya da tür GFP pozitif hayvan kemik iliği kimeralar genetik modelleri ile, ya etiketlenebilir. Bundan başka, hücre-hücre etkileşimleri ve ekstravasküler hücre dinamiklerini incelemek için, bir iki-fotonlu lazer tarama konfokal mikroskop uygulanabilir. kortikal yüzeyinin altında 250 mikron kadar görüntüleme yapılabilir. Yine, kan damarları floresan etiketli makromolekülleri kullanılarak boyandı ve hücreler (örneğin, transjenik GFP Nestin fare kullanarak) genetik olarak etiketlenmiştir.
kafatası pencereAmeliyat dura açmadan kraniotomi ile yapılır. Bir büyük hatadır kaza mikrotur ile kafatası açarken altında dura tabakası ve korteks zarar etmektir. Bu nedenle, bu teknik bir bağışıklık reaksiyonu ve etkileri mikroskopi sonuçları neden olur dura ve korteks, zarar vermemek için bazı teknik beceri gerektirir. Alternatif olarak, potansiyel inceltilmiş-kafatası modeli özellikle uzun vadede, çünkü kalan kafatasının daha az güvenilir mikroskopi kalitesi ile sınırlıdır. CW modeli, pencere kalitesi kafatası büyütme veya kalitesini 14,20 görüntüleme dura kalınlaşma etkileri kadar, birkaç ay sürer, oysa sık sık tekrarlayan kafatası inceltme gereklidir. Bir inceltilmiş-kafatası hazırlanması bu modelin bir modülasyon mümkün olacaktır. Dural tabaka korteksin herhangi bir yaralanma ya da uyarma önlemek için beyin üzerinde bırakılmalıdır. iskemik alana doğrudan uygulama bir deneysel model istenen yalnızca dura yeniden olabilirdikkatli ve herhangi bir köprü damarları zarar vermeden, taşındı.
Model CW birleştirilmesi ve ancak çok küçük bir iskemik lezyonlara neden dolaşımdaki Foto-ışıması ile hedeflenen damar tıkanıklığı uyarılması aksine, uzak MCAO-modelindeki taklit kortikal MCA 13 bulunan insan vuruş çoğunluğu. geçici enflamatuar reaksiyon ile bir girişimi engellemek için bağlı CW hazırlanması, pencere uzak MCAO ameliyattan önce birkaç gün hazırlanmalıdır.
Testlerin bir dizi kemirgenlerde işlevsel yanı sıra davranışsal yönleri vardır değerlendirmek için (örneğin, yürüme analizi, rotarod testi, kutup testi, yapışkan kaldırma testi, merdiven testi, açık alan testi ve Morris su labirenti) 21. Bu testlerin tümünde, MCAO tabi fareler kısa vadeli ve orta vadeli sonuçları açısından kontrol hayvanlarında daha az başarılı gerçekleştirin. Ancak, değerlendirilmesi ile ilgiliuzun dönem sonuçlar, fonksiyonel test duyarlılığı çok uzak MCAO açısından sınırlı yanı sıra MCAO 19,21-23 proksimal hafif olduğu kabul edilmelidir.
iyi eğitimli cerrahlar tarafından gerçekleştirilen distal MCAO, en az 20 dakika içinde uyarılan edilebilir ve yüksek tekrarlanabilir iskemik lezyonlar üretebilir. Ancak, tekrarlanabilirlik karıştırıcıların kapsamlı bir kontrol gerektirir. Cerrahi teknik farklılıklar enfarkt boyutu 24 farklılıklara yol açabilir. Farklı fare suşları nedeniyle suşları arasında serebral vasküler anatomi varyansları farklı bir inme sonucu gösterebilir. Vücut sıcaklığı daha ağır açıkları 25,26 daha küçük lezyonlar ve hipertermi giden hipotermi iskemi, nöronal hasar ve duyarlılık etkiler Dahası, ısı kontrolü ve bakımı oldukça bu modelde ilgili, hem de diğer iskemi modellerinde 27 içindedir. Kan pressu gibi genel fizyolojik parametrelerdeGazların yeniden ve kan, sonucun önemli etmenler ve 28 için kontrol edilmelidir. Bazı maddeler direkt nöro-koruyucu etkiler gösterirler veya vazoaktif özellikleri 29 üzerinden dolaylı olarak hareket edebilir Buna ek olarak, anestezi seçimi, son derece önemlidir. Bu nedenle, anestezi maruz standardize ve mümkün olduğunca kısa tutulmalıdır. Son olarak, barınma koşulları, zenginleştirme kullanımı gibi, yanı sıra inme sonucu etkileyebilir ve böylece 30 raporları standardize ve araştırma tarif edilmelidir. Yeni tedavi yaklaşımları, standardizasyon, kalite kontrol ve raporlama gelişmesi için ilgili klinik öncesi sonuçlar üretmek için büyük önem 31 taşımaktadır.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Binocular surgical microscope | Zeiss | Stemi 2000 C | |
| Light source for microscope | Zeiss | CL 6000 LED | |
| Heating pad with rectal probe | FST | 21061-10 | |
| Stereotactic frame | Kopf | Model 930 | |
| Anaethesia system for isoflurane | Draeger | ||
| Isoflurane | Abott | ||
| Dumont forceps #5 | FST | 11251-10 | |
| Dumont forceps #7 | FST | 11271-30 | |
| Bipolar Forceps | Erbe | 20195-501 | |
| Bipolar Forceps | Erbe 20195-022 | ||
| Microdrill | FST 18000-17 | ||
| Needle holder | FST | 12010-14 | |
| 5-0 silk suture | Feuerstein, Suprama | ||
| 7-0 silk suture | Feuerstein,Suprama | ||
| 8-0 silk suture | Feuerstein, Suprama | ||
| Veterinary Recovery Chamber | Peco Services | V1200 |
References
- Mukherjee, D., Patil, C. G. Epidemiology and the global burden of stroke. World Neurosurg. 76 (6), Suppl 85-90 (2011).
- Ebinger, M., Prüss, H., et al. Effect of the use of ambulance-based thrombolysis on time to thrombolysis in acute ischemic stroke: a randomized clinical trial. JAMA. 311 (16), 1622-1631 (2014).
- Ebinger, M., Lindenlaub, S., et al. Prehospital thrombolysis: a manual from Berlin. J vis Exp. (81), e50534 (2013).
- Bogousslavsky, J., Van Melle, G., Regli, F. The Lausanne Stroke Registry: analysis of 1,000 consecutive patients with first stroke. Stroke. 19 (9), 1083-1092 (1988).
- Engel, O., Kolodziej, S., Dirnagl, U., Prinz, V. Modeling stroke in mice - middle cerebral artery occlusion with the filament model. J Vis Exp. (47), (2011).
- Donnan, G. A., Fisher, M., Macleod, M., Davis, S. M. Stroke. Lancet. 371 (9624), 1612-1623 (2008).
- Meairs, S., Wahlgren, N., et al. Stroke research priorities for the next decade--A representative view of the European scientific community. Cerebrovasc Dis. 22 (2-3), 75-82 (2006).
- Rosamond, W., Flegal, K., et al. Heart disease and stroke statistics--2007 update: a report from the American Heart Association Statistics Committee and Stroke Statistics Subcommittee. Circulation. 115 (5), 69-171 (2007).
- Moskowitz, M. A., Lo, E. H., Iadecola, C. The science of stroke: mechanisms in search of treatments. Neuron. 67 (2), 181-198 (2010).
- Dirnagl, U., Iadecola, C., Moskowitz, M. A. Pathobiology of ischaemic stroke: an integrated view. Trends Neurosci. 22 (9), 391-397 (1999).
- Dirnagl, U., Endres, M. Found in Translation: Preclinical Stroke Research Predicts Human Pathophysiology, Clinical Phenotypes, and Therapeutic Outcomes. Stroke. , (2014).
- Prinz, V., Hetzer, A. -M., et al. MRI heralds secondary nigral lesion after brain ischemia in mice: a secondary time window for neuroprotection. J Cereb Blood Flow Metab. , (2015).
- Shih, A. Y., Mateo, C., Drew, P. J., Tsai, P. S., Kleinfeld, D. A polished and reinforced thinned-skull window for long-term imaging of the mouse brain. J Vis Exp. (61), (2012).
- Holtmaat, A., Bonhoeffer, T., et al. Long-term, high-resolution imaging in the mouse neocortex through a chronic cranial window. Nat Protoc. 4 (8), 1128-1144 (2009).
- Iadecola, C., Dirnagl, U. The microcircualtion--fantastic voyage: introduction. Stroke. 44 (6), Suppl 1 83 (2013).
- Blinder, P., Tsai, P. S., Kaufhold, J. P., Knutsen, P. M., Suhl, H., Kleinfeld, D. The cortical angiome: an interconnected vascular network with noncolumnar patterns of blood flow. Nat Neurosc. 16 (7), 889-897 (2013).
- Shih, A. Y., Driscoll, J. D., Drew, P. J., Nishimura, N., Schaffer, C. B., Kleinfeld, D. Two-photon microscopy as a tool to study blood flow and neurovascular coupling in the rodent brain. J Cereb Blood Flow Metab. 32 (7), 1277-1309 (2012).
- Cabrales, P., Carvalho, L. J. M. Intravital microscopy of the mouse brain microcirculation using a closed cranial window. J Vis Exp. (45), (2010).
- Rosell, A., Agin, V., et al. Distal occlusion of the middle cerebral artery in mice: are we ready to assess long-term functional outcome. Transl Stroke Res. 4 (3), 297-307 (2013).
- Dorand, R. D., Barkauskas, D. S., Evans, T. A., Petrosiute, A., Huang, A. Y. Comparison of intravital thinned skull and cranial window approaches to study CNS immunobiology in the mouse cortex. Intravital. 3 (2), (2014).
- Balkaya, M., et al. Assessing post-stroke behavior in mouse models of focal ischemia. J Cereb Blood Flow Metab. 33 (3), 330-338 (2013).
- Balkaya, M., Kröber, J., Gertz, K., Peruzzaro, S., Endres, M. Characterization of long-term functional outcome in a murine model of mild brain ischemia. J Neurosci Methods. 213 (2), 179-187 (2013).
- Freret, T., Bouet, V., et al. Behavioral deficits after distal focal cerebral ischemia in mice: Usefulness of adhesive removal test. Beh Neurosci. 123 (1), 224-230 (2009).
- Liu, S., Zhen, G., Meloni, B. P., Campbell, K., Winn, H. R. RODENT STROKE MODEL GUIDELINES FOR PRECLINICAL STROKE TRIALS (1ST EDITION). J Exp Stroke Trans Med. 2 (2), 2-27 (2009).
- Florian, B., Vintilescu, R., et al. Long-term hypothermia reduces infarct volume in aged rats after focal ischemia. Neurosci Lett. 438 (2), 180-185 (2008).
- Noor, R., Wang, C. X., Shuaib, A. Effects of hyperthermia on infarct volume in focal embolic model of cerebral ischemia in rats. Neurosci Lett. 349 (2), 130-132 (2003).
- Barber, P. A., Hoyte, L., Colbourne, F., Buchan, A. M. Temperature-regulated model of focal ischemia in the mouse: a study with histopathological and behavioral outcomes. Stroke. 35 (7), 1720-1725 (2004).
- Shin, H. K., Nishimura, M., et al. Mild induced hypertension improves blood flow and oxygen metabolism in transient focal cerebral ischemia. Stroke. 39 (5), 1548-1555 (2008).
- Kapinya, K. J., Prass, K., Dirnagl, U. Isoflurane induced prolonged protection against cerebral ischemia in mice: a redox sensitive mechanism. Neuroreport. 13 (11), 1431-1435 (2002).
- Gertz, K., Priller, J., et al. Physical activity improves long-term stroke outcome via endothelial nitric oxide synthase-dependent augmentation of neovascularization and cerebral blood flow. Circ Res. 99 (10), 1132-1140 (2006).
- Dirnagl, U. Bench to bedside: the quest for quality in experimental stroke research. J Cereb Blood Flow Metab. 26 (12), 1465-1478 (2006).
