Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove

Biochemistry

Kapillær elektroforese Adskillelse af monoklonalt antistof Isoformer med en neutral kapillær

doi: 10.3791/55082 Published: January 16, 2017
* These authors contributed equally

Introduction

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Monoklonale antistoffer (mAb'er) er bioterapeutiske proteiner med stigende interesse på grund af deres evne til at handle mod flere kroniske og degenerative sygdomme 1. Ligesom andre biomolekyler, mAb'er er tilbøjelige til at undergå flere fysisk-kemiske modifikationer på alle stadier af deres livscyklus (dvs. fra biosyntese til det endelige produkt). Sådanne modifikationer indbefatter, men er ikke begrænset til: deamidering, glycosylering, oxidation, cyklisering, isomerisering, aggregering og proteolytisk spaltning 2. Derfor er analyseteknikker stand til at løse iboende isoformer nødvendige for at overvåge mAb'er heterogenitet og stabilitet for at etablere kvalitetsspecifikationer.

Kapillarelektroforese (CE) er en højtydende separationsteknologi bæres outinside af en smal kvartsglas rør (um) fyldt med en baggrund elektrolyt (BGE). Ved påføring af et elektrisk felt (op til 30.000 V), ladet molekyles migrere til elektroden med modsat ladning (dvs. elektro-drevet separation). Anvendelsen af ​​høje spændinger i CE tillader hurtige analyser og øget effektivitet, som er overlegen i forhold til klassiske gelelektroforese. Kapillær zone elektroforese (CZE) er et CE-baserede teknik rutinemæssigt anvendes i den biofarmaceutiske industri til vurdering produktkvalitet 3-9. I modsætning til andre former for CE (f.eks kapillær gelelektroforese, kapillær isoelektrisk fokusering) eller kromatografi-baserede metoder, kan CZE udføres uden anvendelse af denatureringsmidler eller fast-fase-grænseflader, hvilket muliggør analysen af den iboende heterogenitet mAb'er tæt på deres native tilstand 10 . CZE adskillelse af mAb-isoformer opstår inde i en kvartsglas kapillar dækket med en hydrofil polymer (neutral kapillær) og er baseret på deres forskellige elektroforetiske mobilitet, som er styret af ladning, masse, størrelse og form (eller hydrodynamisk volumen) 11. detekteres mAb-dele, nårde mobiliseres og passere gennem påvisning vinduet, som registreres af en ultraviolet (UV) absorbans detektor ved 214 nm 4.

Den vellykkede gennemførelse af denne analyseteknik vil afhænge af behørig opmærksomhed på detaljer før og under forsøget. Handler ellers vil øge omkostningerne og tid til at udføre analysen, i sidste ende fører til konstant fiasko og frustration.

Her præsenterer vi en trin-for-trin guide til at gennemføre en vellykket analyse af mAb heterogenitet ved CZE gennem detaljeret forklaring af fremstilling af opløsninger og prøver, udarbejdelse af CE-systemet, instrumentets metoder, der er op, datafangst, og forarbejdningen. Med henblik på denne gennemgang, et rekombinant fuldt humant anti-tumornekrosefaktor-alfa (anti-TNFa) mAb anvendes som protein model; dog kan denne protokol kan let tilpasses til analyse af andre proteiner overvejer korte modifikationer. ENdditionally, flere anbefalinger afbøde foreslås potentielle problemer. Læseren opfordres til nøje at følge den foreslåede protokol, som sandsynligheden for at lykkes, vil stige.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

1. Fremstilling af opløsninger

  1. Forbered BGE løsning.
    1. Fremstilling af 100 ml af en opløsning sammensat af 0,05% (m / v) hydroxypropylmethylcellulose (HPMC), 200 mM ε-amino n-capronsyre (EACA) og 30 mM lithiumacetat.
      BEMÆRK: Som HPMC er en viskoelastisk polymer, hæld pulveret i et bægerglas, der tilsættes 80 ml vand og til sidst tilsættes omrøringsstangen. Fortsæt med at tilføje de resterende reagenser som normalt. Bær sikkerhedsbriller ved håndtering lithium acetat som det kan forårsage øjenirritation.
    2. Juster til pH-værdi 4,8 ± 0,1 med 50% (v / v) eddikesyre. Lad opløsningen stabiliseres i 5 minutter og justere efter behov.
    3. Tilføj vand op til et endeligt volumen på 100 ml i målekolbe.
    4. Der filtreres gennem en hydrofil membran med en 0,2 um porestørrelse.
    5. Opbevares ved 2-8 ° C i op til 7 dage.
  2. Forbered den interne standard.
    1. Forbered 1 mlaf en opløsning bestående af 1% (m / v) histamin.
    2. Der filtreres gennem en hydrofil membran med en 0,2 um porestørrelse.
    3. Opbevares ved 2-8 ° C i op til 1 dag.

2. Prøvefremstilling

  1. Forbered 180 pi mAb prøve fortyndet med Tris-buffer (50 mM tris (hydroxymethyl) aminomethan, pH 8,0) til en slutkoncentration på 1 mg / ml.
  2. Tilsæt 20 pi 1% (m / v) histamin.
  3. Blandes og centrifugeres ved 1.000 xg i 5 sek.
  4. Placer en mikro hætteglas inde i en universel hætteglas.
  5. Overfør prøven i mikro hætteglasset og cap universelle hætteglas. Dispensere prøven opad for at undgå at indføre eventuelle bobler.
  6. Opbevares ved 2-8 ° C i op til 1 dag.
  7. Placer den universelle hætteglas (med micro hætteglas indeholdende prøveopløsningen) i prøven indløb bakken.

3. Udarbejdelse af CE System.

  1. CE-system rengøring.
    BEMÆRK: Conduct ther proceduren mindst en gang om ugen for at undgå elektrisk strøm lækage stammer fra ophobning af støv og snavs. Men afhængig af anvendelsen (f.eks brug af en BGE med øget viskositet eller med høj saltkoncentration, prøver med øget viskositet) elektroder og åbning håndtag kan kræve at blive renset hyppigere for at undgå krydskontaminering og prøve fremførsel.
    1. Sluk for strømmen af ​​CE instrument og åbner hoveddøren.
    2. Rengør overfladen af ​​prøven dækning, prøve at holde systemet (prøve og buffer bakker), patron dækning, klemme bar, grænseflade blok og elektroder med en vand-dæmpet nonwoven tørre. Gentag proceduren med en ethanol-fugtet tørre og tørre før brug.
    3. Skyl åbningen håndtag grundigt med vand. Rense deres overflade med et ikke-vævet klud. Gentag proceduren med en ethanol-fugtet tørre og tørre, før installation.
    4. Rengør de to ender af det fiberoptiske kabel forsigtigly med en fugtig mikrofiber klud. Gentag proceduren med en ethanol-fugtet klud.
  2. Patronanordningen.
    1. Tag en ny neutral kapillær (50 um indvendig diameter) ud af emballagen.
    2. Tape ned ene ende af kapillæren beskyttende rør til arbejdsbænken. Rul, glatte og træk kapillarrøret ud slangen.
    3. Stick et stykke tape eller papir til arbejdsbordet og tilføj målemærker som følger: længde til detektoren (30 cm), kapillær vindue (0,2 cm) og en længde til udløbsenden (10 cm) (dvs. 40,2 cm total længde, 30,0 cm effektiv længde).
    4. Juster kapillær vindue til 0,2 cm måling mærke i det referencedokument. Fastgør kapillar med tape og markere kapillarrøret slutter 2 mm uden for måling mærker.
    5. Skær beskyttelseshætten på kapillarrøret indløbsende (enden længst væk fra vinduet) i en enkelt lige bevægelse ved hjælp flush kant spaltende sten.
      1. Nedsænkes kapillar ende i en udjævnet universel hætteglas fyldt med vand for at undgå permanent skade kapillarrøret indre overtræk. Gentag denne procedure hver gang den kapillære ende er udsat for den omgivende i mere end 1 min.
    6. Sæt kapillarindløb ende i udløbssiden af ​​patronen.
    7. Skubbe og trække kapillarrøret gennem patronen som nødvendigt, indtil den kapillære vinduet centreres til vinduet patronen.
    8. Sæt blænden stik (100 um x 200 um) i vinduet patronen.
      BEMÆRK: Kontroller, at hvidt lys passerer gennem vinduet når den udsættes for en hvid lyskilde. Hvis det lys, der passerer gennem har en brunlig udseende, justere efter behov.
    9. Sæt kapillar ind i foruddannet kølevæske rør til et samlet kapillær længde på 40,2 cm (med forudinstalleret slange møtrik, ferrule og O-ringen i begge ender i den rækkefølge).
    10. Skub kapillar gennem coolant slange som nødvendigt, indtil kapillarrøret vises ved den anden side af slangen.
    11. Sæt enden af ​​kølemidlet slangen i udløbssiden af ​​patronen og spænd slangen møtrikken.
    12. Sæt kapillarindløb ende ind i indløbet siden af ​​patronen.
    13. Skubbe og trække kapillarrøret gennem patronen som nødvendigt, indtil kapillarrøret vises indløbssiden af ​​patronen.
    14. Sæt enden af ​​kølemidlet slangen ind i indløbet siden af ​​patronen og spænd slangen møtrikken.
    15. Skær beskyttelseshætten på den kapillære udløbsenden (enden nærmest fra vinduet) i en enkelt lige bevægelse ved hjælp flush kant spaltende sten.
    16. Sæt sæl-holderen klip over kapillære ender og tryk for at klikke på plads. Efterse kapillar slutter. Hvis de ikke engang, gentages proceduren.
    17. Placer kapillær-længde skabelon på kanten af ​​arbejdsbordet.
    18. Placer patronen nedad against kapillarrøret længde skabelon og tilpasse kapillarrøret slutter med reference- linjer på skabelonen. Hvis kapillær måling mærker (se 3.2.4) ikke tilpasse med reference- linjer, justeres efter behov.
    19. Hold kapillarrøret mod kapillarrøret længde skabelon og skære begge ender af kapillærrøret ved hjælp flush kant af spalte sten 2 mm under reference- linjer på skabelonen.
    20. Efterse kapillar slutter med et forstørrelsesglas. Hvis kapillar kanter ikke er glatte, polere dem ved hjælp af bløde ansigt spaltende sten.
    21. Sæt blænden O-ring i åbningen plug hul med O-ringen indføringsværktøj.
    22. Installer udjævnede universelle hætteglas fyldt med vand ind i patronen sag og sted patron i tilfælde straks med kapillar ender indsat i hætteglas. For kort og lang sigt opbevaring holde ved 2-8 ° C.
  3. Udarbejdelse af buffer bakker.
    1. Fyld og placere udjævnede universal hætteglas i bufferen indløb og udløb bakker (figur 1). Gentag hætteglas positioner i banerne 2, 3, 4 og 5 efter med det antal prøver, der skal analyseres, placere en bane for hver seks prøve injektioner.
      BEMÆRK: undgå at fugte hætteglas hætter for at forhindre strømtab.

figur 1
Figur 1: Placering og fylde niveau af universelle hætteglas i buffer indløbs- og ud- bakker. Fyld niveauer: 1/1 = 1400 uL, 3/4 = 1300 uL og 1/2 = 1000 uL. Forkortelser: W = vand, HCl = 0,1 M saltsyre. Klik her for at se en større version af dette tal.

  1. CE-system komponenter forsamling.
    1. Installer UV-detektor.
    2. Installer åbningen håndtagved at trykke op i grænsefladen blok.
    3. Installere det fiberoptiske kabel. Sæt den tilsvarende ende til klemmen bar og, mens du holder begge ender, drej med uret. Forbind den anden ende til UV-detektor.
      BEMÆRK: Håndter fiberoptiske kabel med omhu under denne procedure, da bøjning kan forårsage sin brud.
    4. Placer prøve og buffer bakker ind i prøven besiddelse systemet og klikker på plads.
    5. Placer kapillar patronen ind i interfacet blok og, mens du trykker på klemmen bar i begge ender, stram knapperne.

4. Instrument Metoder Set-up

  1. Opret konditionering, løb og nedlukning instrument metoder efter med følgende parametre og Tabel 1: Spænding, max: 30,0 kV; Aktuel, max: 300,0 uA; Patron temperatur: 20,0 ° C; Prøve opbevaringstemperatur: 10,0 ° C; UV-detektor oprindelige betingelser: Bølgelængde: 214 nm; Datarate: 4 Hz; Filter: Normal; Peak bredde (peger): 16-25; Absorbans signal: Direkte.
    BEMÆRK: Data erhvervelse kan øges op til 25 Hz for at forbedre dækningen af ​​smalle adskillelseszone.
<td> Vand Outlet hætteglas
Conditioning program metode tid
Tid (min) Tilfælde Værdi Varighed Inlet hætteglas Outlet hætteglas Oversigt Kommentarer
- Skyl - Pressure 2068 mbar 1,0 minut BI: C1 BO: C1 Forward HCI 0,1 M
- Skyl - Pressure 2068 mbar 2,0 minutter BI: B1 BO: C1 Forward
- Skyl - Pressure 2068 mbar 10,0 min BI: E1 BO: C1 Forward BGE
0.00 Separat - Spænding 15,0 KV 10,0 min BI: D1 BO: D1 0.17 Min rampe, normal polaritet Adskille
10.00 Skyl - Pressure 2758 mbar 10,0 min BI: E1 BO: C1 Forward BGE
20.01 Vente - 0,0 min BI: A1 BO: A1 - Skyl tips
Running metode tidsprogram
Tid (min) Tilfælde Værdi Varighed Inlet hætteglas Oversigt Kommentarer
- Skyl - Pressure 2068 mbar 1,0 minut BI: C1 BO: C1 Fremad, In / Out hætteglas inc 6 HCI 0,1 M
- Skyl - Pressure 2068 mbar 2,0 minutter BI: B1 BO: C1 Fremad, In / Out hætteglas inc 6 Vand
- Skyl - Pressure 2068 mbar 4,0 min BI: E1 BO: C1 Fremad, In / Out hætteglas inc 6 BGE
- Injicer - Pressure 34 mbar 20,0 sek SI: A1 BO: B1 Tilsidesæt, Forward Sample Injection
- Vente - 0,4 min BI: A1 BO: A1 Ind / Ud hætteglas inc 6 tips Vask
0 Separat - Spænding 15,0 KV 30,0 min BI: D1 BO: D1 0.17 Min rampe, normal polaritet, In / Out hætteglas inc 6 Prøve Separation
0.5 AutoZero - - - - - -
30.01 Stop data - - - - - -
30.02 Skyl - Pressure 2068 mbar 2,0 minutter BI: B1 BO: C1 Fremad, In / Out hætteglas inc 6 Vand
32,03 Vente - 0,0 min BI: A1 BO: A1 Ind / Ud hætteglas inc 6 Skyl tips
32.04 Ende - - - - - Ende
Shutdown program metode tid
Tid (min) Tilfælde Værdi Varighed Inlet hætteglas Outlet hætteglas Oversigt Kommentarer
- Skyl - Pressure 2068 mbar 1,0 minut BI: E6 BO: E6 Forward HCI 0,1 M
- Skyl - Pressure 2068 mbar 6,0 min BI: F6 BO: F6 Forward Vand
- Lampe - Off - - - - - -
- Vente - 0,0 min BI: A1 BO: A1 - Skyl tips

Tabel 1: Conditioning, løb og nedlukning tidsprogrammer.

5. Data Acquisition og Behandling

  1. Programmere prøvesæt.
    1. Programmere kapillar til konditionering ved hjælp af conditioning instrumentet metode. Når der anvendes kapillaret for første gang, program fire gentagelser; ellers programmere kun to gentagelser af konditionering metoden.
    2. Programmere de prøver, der skal analyseres ved hjælp af rindende instrument metoden.
    3. Program kapillarrøret til opbevaring ved hjælp af lukning instrumentet metoden og gentag proceduren angivet i afsnit 3.2.22.
  2. Køre eksperimentet.
  3. Eksporter elektroferogrammer.
  4. Beregn migration tid og procentdelen for grundlæggende, vigtigste ennd sure isoformer hjælp lodret fald line integration af elektroferogram profil.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Figur 2 viser den typiske elektriske strøm profil af et 200 mM EACA, 30 mM lithiumacetat, pH 4,8 BGE med anti-TNFa-mAb prøve fortyndet med Tris-buffer (50 mM, pH 8,0). Som det kan ses, er den nuværende er stabil i hele analysen og kan svinge mellem værdier på 30 til 35 uA. Figur 3 viser CZE elektroferogram for en blindprøve, hvor den detekterede top svarer til histamin intern standard. Det forventes for histamin at have en migration på cirka 3,7 til 4,1 min. Figur 4 viser CZE elektroferogram af anti-TNFa-mAb. Som det kan bemærkes, er hovedtoppen før og efter toppe af mindre intensitet. Da adskillelse udføres under normal polaritet (dvs. fra positiv til negativ), analysen afslører grundlæggende isoformer (mAb varianter med positiv ladning) migrerer hurtigere og sure isoformer (mAb varianter med negativ ladning) migrere langsommere end den vigtigste isoform.

Figur 2
Figur 2: Elektrisk strøm profil af en typisk CZE løb. Den BGE nuværende er stabil omkring 30 uA, når mAb prøve fortyndes med Tris-buffer (50 mM, pH 8,0). Klik her for at se en større version af dette tal.

Figur 3
Figur 3: CZE elektroferogram af blindprøve. Bemærk, at der ikke detekteres nogen toppe bortset fra den af ​​histamin intern standard. AU = absorbansenheder. Klik her for at se en større version af dette tal.

telt "fo: holde-together.within-side =" 1 "> Figur 4
Figur 4: Fysisk heterogenitet af anti-TNFa-mAb bestemt ved CZE. Denne prøve består af basale, vigtigste og sure isoformer. Indsat viser en udvidet visning af varianterne løses af CZE. AU = absorbansenheder. Klik her for at se en større version af dette tal.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

I denne tutorial, fremhæver vi vigtigheden af ​​ordentlig praksis, når der udføres CZE analyser af mAbs for at øge sandsynligheden for at lykkes. Men når CZE bruges rutinemæssigt, opstår, spørgsmål uundgåeligt 12.

For de bedste resultater, er det vigtigt at følge de toner, der var inkluderet i hele protokollen, da de vil hjælpe analytikeren til at overvinde og fejlfinding vanskelige skridt. En vigtig overvejelse for at opnå optimale opløsning på et givent sæt af betingelser er den korrekte fremstilling af BGE opløsning. Denne proces kræver at have streng kontrol med ionstyrken af ​​buffermidler, koncentrationen af ​​ikke-bufrende additiver og pH. Samlet set CE kræver omhu og opmærksomhed på detaljer. Det kan nemt blive beskadiget, hvis nogen skridt om ordningen rensning eller samling ignoreres.

Den foreliggende fremgangsmåde finder anvendelse af en neutral kapillær. I modsætning nøgne kvartsglas kapillærer,neutrale kapillærer reducerer proteinadsorption på kapillar indervæg og dermed forbedre adskillelse effektivitet, nøjagtighed og repeterbarhed 9. Imidlertid er dets anvendelse begrænset af mængden af ​​injektioner, der kan udføres. Det er vores erfaring, kan 120 til 150 injektioner udføres uden virkning på opløsning på grund af den gradvise nedbrydning af det indre overtræk. Når kapillar har nået denne grænse, vil en ny kapillær være påkrævet.

Andre protokoller er blevet rapporteret til analyse af den fysisk-kemiske heterogenitet mAbs ved CZE, der omfatter anvendelse af permanently- og dynamisk-belagte kapillærer 13,14. Men disse undersøgelser foreslår, at anvendelsen af ​​en fast række betingelser til at analysere mange forskellige mAbs. I modsætning til eksisterende metoder, mener vi, at optimal ydeevne kun kan opnås ved at skræddersy forsøgsbetingelser. For eksempel har den protokol præsenteres her blevet brugt og justeres ifortiden for at analysere isoform heterogenitet fire andre forskellige mAbs og en mAb fragment 10. For at tilpasse denne protokol til at evaluere andre mAbs, anbefaler vi graduering af BGE ionstyrke og pH i henhold til varianter mangfoldighed og isoelektriske punkt af molekylet, der skal analyseres.

Yderligere skridt efter mastering denne teknik bør omfatte evaluering af metoden ydeevne. Parametre som selektivitet og repeterbarhed (hvad angår den relative standardafvigelse for migration tid og arealprocent) skal afprøves, for at bekræfte, at fremgangsmåden er egnet til den påtænkte anvendelse.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Glacial acetic acid Tecsiquim AT0035-7
ACS grade hydrochloric acid J.T. Baker 9535-05
Histamine dihydrochloride Fluka 53300
(Hydroxypropyl) methyl cellulose  Fluka 09963
Lithium acetate Sigma-Aldrich 517992
6-Aminocaproic acid Sigma-Aldrich A2504
eCAP Tris Buffer, 50.0 mM,  pH 8 Beckman Coulter 477427
PA 800 Plus Pharmaceutical Analysis System Beckman Coulter A66528
eCAP Neutral capillary  Beckman Coulter 477441
Vial, Micro, 200 µl Beckman Coulter 144709
Universal Vial Caps Beckman Coulter A62250
Universal Vials Beckman Coulter A62251
Cable, Optics, UV/Vis Beckman Coulter 144093
UV/Vis Detector Module Beckman Coulter 144733
Cartridge Assembly Kit, Blank Beckman Coulter 144738

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Bruno, V., Battaglia, G., Nicoletti, F. The advent of monoclonal antibodies in the treatment of chronic autoimmune diseases. Neurol. Sci. 31, 283-288 (2011).
  2. Liu, H., Gaza-Bulseco, G., Faldu, D., Chumsae, C., Sun, J. Heterogeneity of monoclonal antibodies. J. Pharm. Sci. 97, (7), 2426-2447 (2008).
  3. Creamer, J. S., Oborny, N. J., Lunte, S. M. Recent advances in the analysis of therapeutic proteins by capillary and microchip electrophoresis. Anal. Methods. 6, (15), 5427-5449 (2014).
  4. Fekete, S., Guillarme, D., Sandra, P., Sandra, K. Chromatographic, Electrophoretic, and Mass Spectrometric Methods for the Analytical Characterization of Protein Biopharmaceuticals. Anal. Chem. 88, (1), 480-507 (2016).
  5. He, Y., et al. Analysis of identity, charge variants, and disulfide isomers of monoclonal antibodies with capillary zone electrophoresis in an uncoated capillary column. Anal. Chem. 82, (8), 3222-3230 (2010).
  6. He, Y., Isele, C., Hu, W., Ruesch, M. Rapid analysis of charge variants of monoclonal antibodies with capillary zone electrophoresis in dynamically coated fused-silica capillary. J. Sep. Sci. 34, (5), 548-555 (2011).
  7. Zhao, S. S., Chen, D. D. Y. Applications of capillary electrophoresis in characterizing recombinant protein therapeutics. Electrophoresis. 35, (1), 96-108 (2014).
  8. Štěpánová, S., Kašička, V. Determination of impurities and counterions of pharmaceuticals by capillary electromigration methods. J. Sep. Sci. 37, (15), 2039-2055 (2014).
  9. Štěpánová, S., Kašička, V. Recent applications of capillary electromigration methods to separation and analysis of proteins. Anal. Chim. Acta. 933, 23-42 (2016).
  10. Espinosa-de la Garza, C. E., et al. Analysis of recombinant monoclonal antibodies by capillary zone electrophoresis. Electrophoresis. 34, (8), 1133-1140 (2013).
  11. Staub, A., Guillarme, D., Schappler, J., Veuthey, J. L., Rudaz, S. Intact protein analysis in the biopharmaceutical field. J. Pharm. Biomed. Anal. 55, (4), 810-822 (2011).
  12. Altria, K. D. Troubleshooting. Methods in Molecular Biology, Vol 52. Capillary Electrophoresis Guidebook: Principles, Operation and Applications. Altria, K. D. Chapter 10 (1996).
  13. Ma, S., Nashabeh, W. Analysis of protein therapeutics by capillary electrophoresis. Chromatographia. 53, (5), 75-89 (2001).
  14. Jaccoulet, E., Smadja, C., Prognon, P., Taverna, M. Capillary electrophoresis for rapid identification of monoclonal antibodies for routine application in hospital. Electrophoresis. 36, (17), 2050-2056 (2015).
Kapillær elektroforese Adskillelse af monoklonalt antistof Isoformer med en neutral kapillær
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Espinosa-de la Garza, C. E., Salazar-Flores, R. D., Pérez, N. O., Flores-Ortiz, L. F., Medina-Rivero, E. Capillary Electrophoresis Separation of Monoclonal Antibody Isoforms Using a Neutral Capillary. J. Vis. Exp. (119), e55082, doi:10.3791/55082 (2017).More

Espinosa-de la Garza, C. E., Salazar-Flores, R. D., Pérez, N. O., Flores-Ortiz, L. F., Medina-Rivero, E. Capillary Electrophoresis Separation of Monoclonal Antibody Isoforms Using a Neutral Capillary. J. Vis. Exp. (119), e55082, doi:10.3791/55082 (2017).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
simple hit counter