Burada, tarımdaki böcek zararlılarının kontrolü için "en uygun" entomopatojenik mantar Metarhizium anisopliae'nin izolasyonu, belirlenmesi, taranması ve seçimi de dahil olmak üzere etkin bir mikozinsektisid'in bilgi temelli gelişiminde farklı aşamaları bildiriyoruz .
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Bu makalede
Özet
Özet
Ticari mycoinsecticides geliştirirken önemli bir endişe, kimyasal insektisitlere kıyasla öldürme hızıdır. Bu nedenle, hızlı etkili, oldukça öldürücü, entomopatojenik bir mantar seçimi için izolasyon ve tarama önemlidir. Temas halinde hareket eden Metarhizium, Beauveria ve Nomurea gibi entomopatojen mantarlar, böcek zararlıları tarafından alınması gereken Bacillus thuringiensis veya nucleopolyhedrosis virüsünden (NPV) daha uygundur. Mevcut çalışmada, toprakta seyreltme ve yem yöntemi kullanarak enfekte böceklerden 68 Metarhizium suşunu izole ettik . İzolatlar, ITS1-5.8S-ITS2 ve 26S rDNA bölgesinin amplifikasyonu ve sekanslanması ile tanımlandı. En zararsız Metarhizium anisopliae türü, Helicoverpa armigera'nın III instar larvalarına karşı böcek biyolojik tahlillerinde elde edilen ortalama öldürücü konsantrasyon (LC 50 ) ve zaman (LT 50 ) temel alınarak seçilmiştir .Seçilen suş tarafından sporların seri olarak üretilmesi, 14 gün süreyle pirinç kullanılarak bir katı hal fermantasyonu (SSF) ile gerçekleştirildi. Sporlanan spor kütlesi spor ortamından% 0.1 tween 80 kullanılarak ekstrakte edildi ve sporların farklı formülasyonları hazırlandı. Güvercin bezelyelerinde bir H. armigera istila kontrolü için formülasyonların saha denemeleri randomize blok tasarımı ile gerçekleştirildi. Yağ ve sulu formülasyonlar ile elde edilen istila kontrol seviyeleri (sırasıyla% 78.0 ve% 70.9) kimyasal pestisit ile elde edilen% 63.4'ten daha iyi idi.
Giriş
Hindistan'da 1940 yılında organik klorlu pestisit tanıtımı itibaren pestisit kullanımı ekin zararlıları hala tarımsal üretimde verim kaybı açısından yıllık rupi 2 milyarlarca mal olan, birçok kat 1 artmıştır. Sentetik pestisitlerin yaygın ve bilinçli kullanılmaması, çevreye ve insan sağlığına sürekli bir tehdittir 1 . Pestisitlerin ayrımsız kullanımı, topraktaki kalıntılara ve doğal zararlı yırtıcı hayvanların tükenmesine yol açar. Aynı zamanda, haşere popülasyonunun genetik yapısını değiştiren, direnç gelişmesine yol açan güçlü bir seçim basıncı olarak işlev görür 1
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
1. Entomopatojenik Mantarların İzolasyonu
- Toprak seyreltme yöntemi
- Farklı mahsul alanlarından toprak numunelerini ve bitkisel böcekleri toplayın ( Tablo 1 ). Toprak seyreltme kaplama yöntemi 8 kullanarak toprak numunelerinden entomopatojen mantarları izole edin.
Not: Bu çalışmada, Pune'dan (18 ° 31'13''N; 73 ° 51'24'') ve Buldana'da (19 ° 58'36''N 76 ° 30'30''E ) Ilçeleri, Maharashtra, Hindistan. - Her toprak örneğinden 10 g tartın ve bunları 90 ml steril% 0.1 (w / v) Tween-80'e ayrı ayrı ilave edin.
- Toprak....
- Farklı mahsul alanlarından toprak numunelerini ve bitkisel böcekleri toplayın ( Tablo 1 ). Toprak seyreltme kaplama yöntemi 8 kullanarak toprak numunelerinden entomopatojen mantarları izole edin.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Araştırmalar sırasında, Metarhizium, Beauveria ve Nomuraea çeşitli tipleri Metarhizium suşları gibi, 14, H. armigera, pals 6 korkunç vebası, 14 kontrol daha etkili olduğu tespit edilmiştir (veriler gösterilmemiştir) 6, çeşitli izolasyon yöntemleri ile izole edilmiştir , Farklı tarlalardan ve böceklerden Metarhizium suşlarını izole etmek için daha fazla izolasy.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
1880'li yıllarda, ilk girişim, bok böreği böcekleri, Anisoplia austriaca ve şeker pancarı curculio Cleonis punctiventris 21 kontrol etmek için Metarhizium kullanmaya yapılmıştır. Bu protokolde ön koşullardan biri, ya topraktan ya da enfekte böceklerden oluşan bir öldürücü zararı izole etmekti. Aslında, LC 50 , LT 50 ve ST 50 gibi diğer parametreler, ürünün 22 , 23
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.
Teşekkürler
Yazarlar, Yeni Delhi ve İsviçre, Berne, Kalkınma ve İşbirliği İsviçre Ajansı'nın Biyoteknoloji Bölümü'ndeki Hint-İsviçre İşbirliği Biyoteknolojideki İşbirliği (ISCB) programındaki işbirlikçilerinin katkısını kabul ediyor. Vandana Ghormade, Pallavi Nahar, Priya Yadav, Shuklangi Kulkarni, Manisha Kapoor, Santosh Chavan, Ravindra Vidhate, Shamala Mane ve Abhijeet Lande dahil olmak üzere mikozinsit geliştirilmesine katılan proje öğrencilerinin ve çalışanların katkıları kabul edilmektedir. EKP ve SGT araştırma bursları için sırasıyla Üniversite Hibeler Komisyonu, Hindistan ve Bilimsel ve Endüstriyel Araştırma Konseyi (CSIR), Hindistan'a teşekkür ederler. MVD, ....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Agar | Hi-Media | RM666 | Reaktif |
| Amonyum sülfat | Thomas Baker | 11645 | Reaktif |
| DNA analizörü | Uygulamalı biyosistem | ABI prizması 3730 | enstrüman |
| DNA islasyon kiti | Qiagen | 69104 | Reaktif |
| Dodine | Sigma | 45466 | Reaktif |
| Jel ekstraksiyon kiti | Qiagen | 28604 | Reaktif |
| Glikoz | Hi-Media | GRM077 | Reaktif |
| Knapsac sparyer | Kaypee | HY-16L (1004) | Enstrüman |
| Pepton | Hi-Media | RM006-500G | Reaktif |
| Polipropilen şişeleri | Laxbro | SV-50 | Plastik Eşya Patates |
| dekstroz agar (PDA) | Hi-Media | M096-500G | Reaktif |
| Tween-80 | SRL | 28940 | Reaktif |
| Ultra düşük hacimli sparyer | Matabi | INSECDISK | Enstrüman |
| Unicorn-çantalar | Unicorn | UP-140024-SMB | Otoklaval çanta SSF |
| Maya özü | Hi-Media | RM027-500G | Reaktif |
| Chromas 2.1 | yazılımı |
Kaynaklar
- Aktar, M. W., Sengupta, D., Chowdhury, A. Impact of pesticides use in agriculture: their benefits and hazards. Interdisciplinary Toxicology. 2 (1), 1-12 (2009).
- Dhaliwal, G. S., Jindal, V., Mohindru, B. Crop losses due to insect pests: Global and Indian scenario. Indian J Entomol. 77 (2), 165-168 (2015).
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
