यह लेख एक व्यवहार परख पुरुष संभोग ड्राइव ड्रोसोफिला में melanogaste प्रेरणा का अध्ययन करने के लिए अनुसंधान का उपयोग करता है वर्णन करता है। इस विधि का प्रयोग, शोधकर्ताओं, आनुवंशिक आणविक और सेलुलर तंत्र है कि इस प्रेरणा आबाद उजागर करने के लिए उन्नत मक्खी neurogenetic तकनीकों का उपयोग कर सकते हैं।
जांच के दशकों के बावजूद, प्रेरक राज्यों के neuronal और आणविक ठिकानों रहस्यमय बना हुआ है। हमने हाल ही में पुरुष ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर (ड्रोसोफिला) के संभोग ड्राइव का उपयोग प्रेरणा का गहराई से जांच की, जिसके लिए तरीकों यहाँ विस्तार हम के लिए एक उपन्यास, न्यूनीकारक, और स्केलेबल प्रणाली विकसित की है। व्यवहार प्रतिमान लग रहा है कि पुरुष संभोग ड्राइव दोहराया copulations के पाठ्यक्रम पर प्रजनन क्षमता के साथ कम हो जाती है और अधिक से अधिक ठीक हो जाए ~ 3 डी पर केंद्रित है। इस प्रणाली में, शक्तिशाली उपकरण neurogenetic मक्खी में उपलब्ध आनुवंशिक पहुंच और ख्यात तारों यौन व्यवहार के लिए उपलब्ध आरेख के साथ एकाग्र। इस अभिसरण तेजी से अलगाव और विशिष्ट प्रेरक कार्यों के साथ छोटे neuronal आबादी से पूछताछ की अनुमति देता है। यहाँ विस्तार डिजाइन और तृप्ति परख है कि मापने और पुरुष मक्खी में प्रेमालाप प्रेरणा को बदलने के लिए प्रयोग किया जाता है के निष्पादन हम। इस का प्रयोगपरख, हम भी दिखाना है कि कम पुरुष संभोग ड्राइव डोपामिनर्जिक न्यूरॉन्स उत्तेजक द्वारा दूर किया जा सकता है। तृप्ति परख, सरल, सस्ती, और आनुवंशिक पृष्ठभूमि के प्रभाव को मजबूत है। हम तृप्ति परख प्रेरक राज्यों के तंत्रिका जीव विज्ञान में कई नए अंतर्दृष्टि उत्पन्न करने की उम्मीद है।
, भ्रूण के विकास के 2, circadian लय 3, और विकास और तंत्रिका तंत्र 4, 5, 6 की तारों के सिद्धांतों ड्रोसोफिला में काम जीन 1 की प्रकृति सहित कई जैविक घटना में गहरी अंतर्दृष्टि और अग्रणी प्रदान की गई है। प्रेरणा शायद प्रणाली है कि इस प्रकार अब तक अध्ययन किया गया है पर सीमाओं की वजह से अब तक कम अच्छी तरह से इन घटनाओं से समझ में आ बनी हुई है। मक्खी में प्रेरणा मुख्य रूप से खिला मुक्केबाज़ी और बहिःकंकाल जो वसा के जमाव के प्रकट संकेत precludes प्रति उनकी गायब छोटे भोजन का सेवन करने के कारण भूख है, जो कई चुनौतियां प्रस्तुत करने के संदर्भ में अध्ययन किया है। नतीजतन, वहाँ उड़ान भरने में प्रेरणा का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया प्रणालियों का विस्तार करने की जरूरत है।
हम में संभोग ड्राइव के अध्ययन के लिए एक व्यवहार ढांचे का वर्णनड्रोसोफिला। इस प्रणाली मक्खी के रूप में अच्छी तरह से पहुंच 7, 8, 9, 10, 11, 12 और उसके यौन dimorphic circuitry 8, 13 के ख्यात connectome में neurogenetic उपकरणों का लाभ लेता है। इसके अलावा, के ज्यादा सहज 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 और सीखा 22, 23, 24 संवेदी मोटर circuitry को नियंत्रित करने के प्रेम प्रसंग से बाहर विस्तार से काम किया गया है, एक दुर्लभ अवसर प्रदानसटीक सर्किट नोड जिस पर प्रेरणा impinges पता लगाने के लिए। हमने हाल ही में खबर दी है कि, मक्खी में, मनुष्य के रूप में, डोपामाइन का स्तर संभोग ड्राइव 25, 26, 27 के लिए केंद्रीय हैं। हम assays का उपयोग हम यहाँ वर्णन 25 इस संरक्षित घटना का विश्लेषण करती है प्रासंगिक डोपामाइन उत्पादक और मक्खी में न्यूरॉन्स प्राप्त करने, को सुविधाजनक बनाने के विस्तृत molecular- और सर्किट स्तर के लिए आनुवंशिक पहुँच प्राप्त की है।
हम झांग एट अल में व्यवहार assays में जोड़ें। 25 एक नए फ्लैट व्यवहार अखाड़ा कि वीडियो स्कोरिंग है, जो हम एक 2-आयामी (2 डी) तृप्ति परख, पिछले तरीकों पर एक महत्वपूर्ण सुधार कॉल की अनुमति देता है। नतीजतन, नई परख अधिक स्केलेबल और मात्रात्मक, और जीन और न्यूरॉन्स प्रेरणा में शामिल की आनुवंशिक स्क्रीन के लिए इसलिए अधिक उपयुक्त है। हम प्रेम प्रसंग assays और neuroge के साथ मिलकर इस नए परख का उपयोग करें,netic जोड़तोड़, प्रदर्शित करने के लिए उपाय और मक्खी में संभोग ड्राइव को बदलने के लिए कैसे।
प्रेरक राज्यों, तृप्त किया जा सकता है बनाए रखा है, और 34 बरामद किए। हम एक 2-डी तृप्ति परख है कि जल्दी से और मजबूती के साथ मक्खी में ड्राइव संभोग के इन पहलुओं के सभी उपायों को प्रस्तुत करते हैं। इस पर…
The authors have nothing to disclose.
The authors thank Mike Crickmore, Dragana Rogulja, and Michelle Frank for comments on the manuscript. Pavel Gorelik provided technical support for manufacturing the behavioral arenas. This work was conducted in Mike Crickmore’s lab and is also supported by the Whitehall Foundation (Principal Investigator: Dragana Rogulja). S.X.Z. is a Stuart H.Q. and Victoria Quan Fellow at Harvard Medical School.
1/16 inch clear acrylic | McMaster-Carr | 8589K12 | Used to make arenas; see Supplemental Material 1 for designs. |
1/8 inch clear acrylic | McMaster-Carr | 8589K42 | Used to make arenas; see Supplemental Material 1 for designs. |
3/16 inch clear acrylic | McMaster-Carr | 8560K219 | Used to make arenas; see Supplemental Material 1 for designs. |
1/32 inch black delrin | McMaster-Carr | 8575K132 | Used to make arenas; see Supplemental Material 1 for designs. |
Hex screws, 1 inch long (50x) | McMaster-Carr | 92314A115 | Used to make arenas. Can be replaced by 3/4 inch screws (92314A113, McMaster-Carr) for 32-chamber arenas. |
Thumb nuts (25x) | McMaster-Carr | 92741A100 | Used to make arenas. Can be replaced by regular hex nuts (90480A005, McMaster-Carr). |
Camcorder | Canon | Vixia HF R700 | Can be replaced by any consumer comcorder. |