Summary
כאן, אנו מתארים גישה חדשה לסבול ראש בראש טראומטי פגיעה מוחית תסיסנית melanogaster . השיטה שלנו יש את היתרון של אספקת ישירות חוזרות עם חוזק מתכווננת לראש לבד. חקירה נוספת של מערכת חסרי החוליות תסייע להאיר את הפתוגנזה של אנצפלופתיה טראומטית כרונית.
Abstract
כרונית טראומטית אנצפלופתיה (CTE) היא מחלה נוירודגנרטיבית הוקמה קשורה קשר הדוק עם החשיפה חזרה מתונה טראומטית פגיעה מוחית (mTBI). המנגנונים האחראים לשינויים הפתולוגיים המורכבים שלה נותרים חמקמקים במידה רבה, למרות הקונצנזוס האחרון שהגדיר את הקריטריונים הנוירופתולוגיים. כאן, אנו מתארים שיטה חדשנית לפתח מודל של CTE ב תסיסנית melanogaster ( תסיסנית ) בניסיון לזהות את הגנים מפתח המסלולים המביאים הצטברות טאו hyperphosphorylated אופייני ומוות עצבי במוח. כוח מתכוונן כוח משפיע על פגיעה קלה קלה מועברים ישירות לראש לטוס, הכפוף הראש האצה מהירה האטה. השיטה שלנו מבטלת את הבעיות הפוטנציאליות הטמונות עם מודלים אחרים תסיסנית mTBI ( למשל, מוות של בעלי חיים עלול להיגרם על ידי נזקחלקים אחרים של הגוף או לאיברים פנימיים). פחות טיפול בבעלי חיים ועלות נמוכה, תוחלת חיים קצרה וכלים גנטיים נרחבים הופכים את זבוב הפירות לאידיאלי לניתוח פתוגנזה של CTE ומאפשרים לבצע מסכים גנטיים ופרמקולוגיים בקנה מידה גדול וגנומי. אנו צופים שהאפיון המתמשך של המודל יפיק תובנות מכניסטיות חשובות על מניעת מחלות וגישות טיפוליות.
Introduction
כרונית טראומטית אנצפלופתיה (CTE) הוכרה לאחרונה כהפרעה ניירודגנרטיבית מובהקת, בנפרד מטאופתים אחרים כמו מחלת אלצהיימר 1 . בניגוד למחלת האלצהיימר ולתאופאטים נפוצים אחרים - שגורמי הסיכון החשובים ביותר שלהם הם גיל מתקדם והיסטוריה משפחתית של דמנציה, CTE, כפי שצוין בשמו, מרמז על קשר הדוק עם היסטוריה של טראומה מוחית, הנראה בעיקר בספורטאים, כגון מתאגרפים ו שחקני כדורגל, כמו גם ותיקי צבא 2 , 3 , 4 , 5 . הוא חשב להיות יזום על ידי מכה חוזרת ונשנית המכות שוב ושוב לראש. מטופלים יכולים להציג סימפטומים וסימנים כגון ליקויים קוגניטיביים, שינויים במצב הרוח והתנהגות, תפקוד לקוי של התנועה, החפיפה משמעותית עם מחלת אלצהיימר, פרונטוטמפוראלדמנציה, דמנציה של גוף לוי ומחלת פרקינסון 6 . לעומת זאת, בדיקות לאחר המוות של רקמת המוח חושפות דפוס מובהק של הצטברות טאו hyperphosphorylated סביב כלי דם קטנים במעמקי sulci קליפת המוח, תכונה pathognomonic לא נצפתה בתנאים degenerative אחרים 7 . עם זאת, עד כה, מעט מאוד ידוע על הפתוגנזה המובילה ביטוי המחלה. זה בחלק גדול בשל היעדר מודל בעלי חיים נאמן - רק לאחרונה יש מודלים מכרסמים נוצרו 5 , 8 . אלה אורגניזמים מודל יש את החסרונות של טיפול אינטנסיבי עלות אורך חיים ארוך יחסית, אשר אינם מתאימים היטב עבור מחלות נוירודגנרטיב מחקרים.
לעומת עמיתים יונקים, בעלי חיים חסרי חוליות כגון תסיסנית הם חלופה מצוינת, עם תחזוקה חסכונית שלהם,כלים נרחבים לגילוי דטרמיננטים גנטיים וחיי אורך חיים קצרים יחסית. למרבה הפלא, לטוס המוח האנושי לחלוק מבחינה אבולוציונית נתיבים מולקולריים וסלולריים, כמו גם הדמיון האנטומי 10 , 11 , 12 . שני מודלים תסיסנית חקר ללמוד פגיעה מוחית טראומטית דווחו בעבר 13 , 14 . הראשון "High Impact טראומה" (HIT) מכשיר שתוכנן על ידי Katzenberger ועמיתיו הכיל זבובים זבובים חינם בקבוקון פלסטיק שהיה קשור לקצה חופשי של קפיץ מתכת 13 , 15 . כאשר בקבוקון הפלסטיק היה מוטה זקוף ושוחרר, הוא פגע בלוק פוליאוריתן והכניס טראומה לזבובים כאשר הם ניתרו אל קיר הבקבוקון והתאוששו. לעומת זאת, ברקת ועמיתיו עיצבו שיטת משלוחים אחרתIng אומני חרוז רופטור-24 homogenizer פלטפורמה 14 . זבובים היו incapacitated עם CO 2 והניח צינור 2 מ"ל בורג כי היה מאובטח homogenizer ונתון לתנאים טלטול מתוכנת מראש. יתרון אחד של שימוש במערכת homogenizer רקמות היא כי הנסיין יכול לווסת את עוצמת הפציעה, משך הפציעה, ומספר פציעות פגיעה. עם זאת, שני המשטרים סובלים מאותו חיסרון: פגיעה ראשונית בראש נגרמת באופן אקראי במונחים של מיקום השפעה וכוח. בנוסף, שתי השיטות גרמו לתמותה ניכרת, שנגרמה כתוצאה מנזק בטחוני בלתי נמנע לחלקים אחרים של הגוף ולאברים פנימיים. כאן, אנו מתארים שיטה חדשה כדי לגרום mTBI זבובים פירות. המנגנון שלנו מורכב מאפקט בליסטי המונע על ידי גז. לעומת מודלים תסיסנית הקיימים 14 , 15 , השיטה שלנו יש את היתרון הייחודי של מתן מדידההשפעה מכוונת רק על ראש זבוב חופשי, ובכך מאפשר שליטה מדויקת של גורמים שונים, כגון חומרת ההשפעה, מרווח הזמן בין ההשפעות, ואת המספר הכולל של ההשפעות שנגרמו.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1. הרכבה של מכשיר שביתה ( איור 1 )
- הסר את הבוכנה מן מזרק 1 מ"ל tuberculin. חותכים את הקנה על סימן 1 מ"ל.
- הסר מחסום תרסיס (3 מ"מ גובה x 4 מ"מ קוטר) מ 200 פיפטה μL קצה ולהשתמש בו כמו impactor. מניחים את impor בתוך החבית מזרק. לחץ בעדינות על הקנה כדי להזיז את הקצה אל קצה הקצה, כשהצד השטוח מכסה את פתח הזרבובית.
- צרף את קצה קצה חבית צינורות פלסטיק המחובר דו תחמוצת הפחמן (CO 2 ) הרגולטור תזרים של תחנת הרדמה תסיסנית .
- החזק את הקנה באופן אנכי והדק אותו על מחזיק בעל מהדק סטנדרטי, כך שהפסיכולוג יישאר בתחתית הקנה.
- שינוי קצה פיפטה 200 μL לעשות את בעל זבוב.
- גזור 4 מ"מ מהקצה לעשות פתיחה 0.8 מ"מ קוטר, המאפשר רק את הראש לעוף להיות חשופים.
הערה: ת'וRax וכל שאר חלקי הגוף לעוף יישארו בתוך קצה פיפטה.
- גזור 4 מ"מ מהקצה לעשות פתיחה 0.8 מ"מ קוטר, המאפשר רק את הראש לעוף להיות חשופים.
- שינוי טיפ פיפטה 1000 μL ו 1 מ"ל מזרק מחט כובע כדי להפוך את המחבר.
- לחתוך 44 מ"מ מן הפתח של קצה. קח 6 מ"מ אורך של כובע 1 מ"ל מזרק מחט לדחוף אותו בחוזקה לתוך החלק הנותר של עצה פיפטה 1000 μL.
2. הפעלה של התקן השביתה
- להרדים זבוב בן 2 בן נקבה לטוס באמצעות CO 2 על משטח לטוס.
- בעדינות להעביר אותו בעל זבוב באמצעות מברשת בסדר. הקש על בעל בעדינות כך ראש לטוס הוא ראה מחוץ לקצה קצה. אם חוטם זבוב חשוף מחוץ לקצה, בעדינות תחוב אותו בחזרה לתוך קצה עם מחט קהה 1 מ"ל מזרק.
הערה: הקפד לשמור את חוטם זבוב בתוך בעל. אחרת, הזבוב עלול למות מפציעה מוצצת. - להדק את הזבוב הועד לקנה המזרק עם המחבר כך ראש לטוס פונה כלפי מטה.
- הגדר את לחץ הגז ב 100 kPa. התאם את קצב הזרימה בהתאם לתכנון הניסוי.
- להפוך במהירות את הרגולטור תזרים לעבור מתג לסירוגין, כך מכה מכה את הראש לעוף פעם אחת.
- להרים את הזבוב מחזיק ולהזיז אותו על משטח לטוס. הפוך את בעל לטוס בעדינות ברז בצד כדי לתת לעוף החוצה. להשאיר את הזבוב בתוך בקבוקון ריק להתאושש.
3. מעקב וידאו בסיוע תנועה
- מלאו 6 ס"מ קוטר פטרי צלחת עם elastomer סיליקון שקוף כדי להפוך את זירת המעקב. השאירו 3 מ"מ שטח בין הסיליקון ואת מכסה צלחת כדי לאפשר את הזבובים ללכת בחופשיות אבל לא לעוף.
- להרדים ארבעה זבובים מן או את הדמה או מטופלים הקבוצה בכל פעם ומניחים אותם בזירה. השאירו את הזבובים ב 22 מעלות צלזיוס למשך 1 שעות.
- מיקום מכשיר הצמד תשלום (CCD) מעל הזירות ולהקליט במשך 5 דקות.
- ניתוח נתיבי תנועה נרשמה באמצעות תוכנת Ctrax (זמין באופן חופשי מ Caltech) 16 . לייצא את הנתונים במעקב בשפה תכנות (למשל, Matlab) בפורמט תואם ולנתח את הנתונים מבוסס על מרחק נסע לכל מסגרת 17 . חישוב מרחק הליכה ממוצע עבור כל זבוב ולשלב אותו עם כל זבובים נרשמה אחרים / קבוצה כדי להשיג ממוצע מצטבר המרחק נסע על ידי האוכלוסייה של קבצים באותה קבוצה.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
כדי להקים מודל CTE באמצעות תסיסנית מבוגר, קבענו את האפקטיביות של המכשיר שלנו על גרימת פגיעה אחת בראש סגור. כדי לחסל את הווריאציות הנוגעות לגנוטיפ, למין או לגיל, השתמשנו בניסויי קנטון- S WT בני יומיים בניסוי. אנחנו יכולים בקלות לשלוט על כוחו של effor על ידי ויסות קצב הזרימה של CO 2 בלחץ גז מתמיד של 100 kPa. זבובים שנחשפו לשביתה אחת בקצב הזרימה הגבוה ביותר (15 L / min) הציגו פגמים חיצוניים מינימליים ( איור 2 ). הן העיניים החיצוניות ואת הפה נראה שלם. עם זאת, מצאנו כי קצב הזרימה של 15 L / min היה קטלני בחריפות, וכתוצאה מכך פחות מ 10% שיעור ההישרדות בתוך 24 שעות ( איור 3 א ). לעומת זאת, החשיפה לשביתה של 10 או 7.5 ליטר לדקה גרמה ל -61.1% ול -96.3% להישרדות, בהתאמה, בעוד שבשיעורים של 5.0 ו -2.5 ליטר לדקה, כל הזבובים שרדו בגניבהאה 24 שעות ( איור 3 א ). לכן, אנחנו סטנדרטית המחקרים העתידיים שלנו על 5.0 L / min CO 2 קצב הזרימה. לאחר שביתה אחת ב 5.0 L / min, זבובים התאושש בהדרגה ניידות שלהם בתוך 4 דקות ( איור 3 ב ). במהלך הבא 2 ד, פונקציה קטר שלהם, נמדדת על ידי יכולת הליכה, שוחזר לאט לנורמה ( איור 3 ג ). כהערכה ראשונית, פנוטיפים אלה מזכירים את אלו שהוצגו על ידי אנשים שחוו זעזוע מוח או רמות קלות של טראומה. חולים הסובלים מפגיעה מוחית טראומטית לעיתים קרובות נוכח עם הידרדרות הדרגתית של תנועות שרירים ומוות בטרם עת.
כדי להעריך את ההשפעות ארוכות הטווח של פציעות מוח מרובות, החילנו פרוטוקול mTBI של חמש שביתות רצופות בקצב זרימת 5.0 L / min, עם תקופות שחזור של 24 שעות בין כל שביתה. לחקור E ההשפעה של mTBI על פונקציית התנועה, השתמשנו במעקב וידאו באמצעות מעקב אחר המערכת כדי לנתח את התנהגות המנוע לטוס. לאחר ההזדקנות, הטיפול בקבוצת המטופלים ב- mTBI הראה ירידה בפעילות ההליכה ומרחק הנסיעה בהשוואה לקבוצת הדמה ( איור 4 A & B , קבוצת Sham: 6.49 ± 0.72, n = 28 לעומת קבוצה שטופלה: 4.3 ± 0.47, n = 32, p <0.05). כדי לבדוק אם לפציעות מוחיות חוזרות יש כל השפעה כרונית על הישרדות, קבענו את תוחלת החיים של זבובים שחלו בפרוטוקול mTBI. בתרשים 4C , בהשוואה לקבוצת הדמה (n = 129), זבובים מטופלים (n = 100) היו בעלי תוחלת החיים הממוצעת (36.9 ± 2.7 לעומת 26.3 ± 0.9 d) והורידו באופן משמעותי את אורך החיים המקסימלי (49.3 ± 2.4 לעומת 34.7 ± 1.4 d).
1 "class =" xfigimg "src =" / files / ftp_upload / 55602 / 55602fig1.jpg "/>
איור 1 . תרשים של התקן השביתה. המכשיר השתמשו בחומרים כי הם זמינים במעבדה תסיסנית : 1) 200 פיפטה μL קצה, 2) 1 מ"ל tuberculin מזרק, 3) impactor, 4) חיבור צינור מכור לתחנת הרדמה תסיסנית , ו 5) מחבר להדק את קצה על המזרק. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.
איור 2 . פציעה קלה. שביתה אחת בזרימת הגז הגבוהה ביותר לא גרמה נזק חיצוני ברור לראש, לגוף או לנספחים. ( A &ב ) זבוב מכה. ( C & D ). זבובים דמה עברו בדיוק את אותם נהלים כמו הקבוצה שטופלה, כולל העברות על ומחזיק את הזבוב בעל, למעט שום imporor הונח בחבית מזרק כאשר זרם CO 2 הוחל. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.
איור 3 . השפעת שביתה אחת. ( א ) מדד ההישרדות ב -24 שעות (SI 24 ), המוגדר על ידי אחוז הזבובים ששרדו בתוך 24 שעות לאחר שביתה, הוא גרדה לעומת קצב הזרימה. זבובים אשר נפגעו פעם עם זרימת הגז L 5.0 / min התאושש הפעילות עםב 4 דקות ( B ), ואת הניידות שלהם שוחזר באיטיות לנורמלית על פני תקופה 2 ד ( ג) . שורת שגיאות, שגיאת תקן של ממוצע (SEM). אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.
איור 4 . פיתוח דגם mTBI ב תסיסנית . שביתות חוזרות על פני חמישה ימים גרמו לפגיעה משמעותית בפעילות התנועה ( A & B ) ובמופחת החיים ( C ). נציג מסלולי הליכה נרשם מעל 5 דקות עבור 4 זבובים וזבובים שטופלו מוצגים ב A. שגיאה ברים, SEM. * P <0.05, Mann-Whitney U- מבחן עם תיקון Bonferroni. סה"כ זבובים: קבוצה מטופלת n = 100, קבוצת דמהN = 129. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
מודלים חייתיים המאפיינים בנאמנות תכונות CTE, כולל שינויים נוירופיזיולוגיים, סימני נוירופתולוגים וחסרים נוירו-התנהגותיים, חיוניים לחשיפת מנגנוני מחלה ולפיתוח מטרות אבחון וטיפול. זה מובן כי אין מודל של בעלי חיים של מחלה אנושית מושלמת בחיקוי כל endpoints קליני רלוונטי. עם זאת, אנו מאמינים כי מודל CTE חסון צריך לספק את שלושת הדרישות הבאות: (1) ההשפעה צריכה להיות מיושמת ישירות לראש בעל הגנה הקרקפת והגולגולת שלם; (2) הראש לא צריך להיות משותק במהלך החשיפה השפעה, כך האצה מהירה, האטה ותנועות ראש סיבובית ליניארית מותר; ו (3) העיצוב הניסויי צריך לכלול גם משטרים בודדים וחוזרים על עצמם, ותוצאות ההשלכות צריכות להיות מתונות בטבע, מבלי לגרום לנזק גלוי, כמו בצקת רקמות, שקע או דימום גלוי.
OuR מודל זבוב הפירות הוא הבחין בשיטות אחרות לגרום פגיעה מוחית טראומטית בזבובים 13 , 14 , 15 . הן המודל רופטור ביד ואת מכשיר HIT לגרום פגיעה במיקום השפעה אקראית וכוח. בשתי השיטות, מספרים משתנים של זבובים הכלול או בקבוקון פלסטיק סטנדרטי או צינור 2 מ"ל screwcap ליצור קשר עם הקיר מכולה ריבאונד מספר פעמים במהלך כל שביתה או קרב פציעה. מאז הזבובים הם ניידות בחופשיות בתוך המכולה, הפציעות הראשיות שנגרמו הם שונים באופן משמעותי עבור זבובים בודדים, כמו חלקים שונים של גופם ו / או ראשי נפצעו עם כוחות שונים. לכן, אין זה מפתיע, כי באמצעות מודלים אלה, הזבובים סבלו מחוסר תפקוד מעיים המעי. זה היה בקורלציה ישירה עם שיעור התמותה בשתי משטרי 13 , 14 , חזק המציין כי nעל שינויים נוירונים היו אחראים למוות שנגרם על ידי טראומה בשתי המערכות. לעומת זאת, השיטה שלנו מסוגלת לספק שוב ושוב השפעות ראשיות ישירות לאותו מיקום. הגוף מוגן מפני כל חשיפה ישירה, ומבטל את האפשרות שייתכן שהמוות נגרם כתוצאה מפגיעה בחלקים אחרים של הגוף או באיברים פנימיים. בנוסף, קצב הזרימה של גז CO 2 המשמש להניע את המשקל יכול להיות מוסדר כדי להשיג כוח מבוקר, מתכווננת. והכי חשוב, ראש הזבוב אינו מוגבל בזמן השביתה, מה שמאפשר תהליך האצה מהיר מאוד, המאיץ את הצורה הנפוצה ביותר של mTBI המתרחשת באוכלוסיית האדם 19 .
למרות שזה יהיה אידיאלי להתקין מתג הפעלה / כיבוי אוטומטי כדי לשלוט על הרגולטור תזרים CO 2 , הבורר הנוכחי הנוכחי אינו מופיע להשפיע על שחזור של כוח effector כי העיצוב של המכשיר שלנו כלחייב להפעיל את הכוח במהירות לאחר מכה מכה את הראש.
לסיכום, המערכת שלנו מספקת משטר חדש כדי לחקות טוב יותר mTBI, מציגה פלטפורמה חדשה מודל CTE. כמו מודלים אחרים תסיסנית אשר הוכיחו ערך ב פענוח הפרעות ניוון עצבי האדם 9 , 20 , צפוי כי אפיון מפורט המתמשך של המודל במונחים של אובדן עצבי, hyperauosphorylation טאו, TDP-43 proteinopathy, ותגובה neuroinlamlamatory ל- mTBI שנגרם יהיה ליצור תובנות מכניסטיות חשובות בתהליכי מחלת ה- CTE ויעזור לענות על כמה מהשאלות הקריטיות בתחום.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
עבודה זו נתמכה על ידי ג 'ונס הופקינס בית הספר לרפואה סגל קרן ההפעלה ל LC
Acknowledgments
למחברים אין מה לגלות.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Aerosol Barrier | USA Scientific | 1120-8810 | Used as an impactor |
| 200 μL Pipette Tip | USA Scientific | 1111-0706 | Used as a fly head holder |
| 1000 μL Pipette Tip | USA Scientific | 1122-1830 | Used as a connector |
| 1 mL Tuberculin Syringe | Becton Dickinson | 309625 | |
| 60 mm Petri Dishes | Fisher Scientific | FB0875713A | Used as a tracking arenas |
| Flow Regulator | Genesee Scientific | 59-122WC | |
| Standard Clamp Holder/stand | EISCO Scientific | CH0688 | |
| Fine Brush | Genesee Scientific | 59-204 | |
| Flypad | Genesee Scientific | 59-114 | |
| Sylgard Silicone Elastomer | Dow Corning | 4019862 | |
| CCD Camera | Microsoft | HD-5000 | |
| Ctrax Walking Fly Tracker | Caltech | Ctrax 0.2.11 | |
| MATLAB Image Processing Toolbox | MATLAB | R2015b |
References
- McKee, A. C., et al. The first NINDS/NIBIB consensus meeting to define neuropathological criteria for the diagnosis of chronic traumatic encephalopathy. Acta Neuropathol. 131, 75-86 (2016).
- Martland, H. S. Punch drunk. JAMA. 91 (15), 1103-1107 (1928).
- Millspaugh, J. A. Dementia pugilistica. US Naval Med Bull. 35, 297-303 (1937).
- Omalu, B. I., et al. Chronic traumatic encephalopathy in a national football league player: part II. Neurosurgery. 59 (5), 1086-1092 (2006).
- Goldstein, L. E., et al. Chronic traumatic encephalopathy in blast-exposed military veterans and a blast neurotrauma mouse model. Sci Transl Med. 4 (134), (2012).
- Mez, J., Stern, R. A., McKee, A. C. Chronic traumatic encephalopathy: where are we and where are we going? Curr Neurol Neurosci Rep. 13 (12), 407 (2013).
- McKee, A. C., et al. The spectrum of disease in chronic traumatic encephalopathy. Brain. 136 (Pt 1), 43-64 (2013).
- Petraglia, A. L., et al. The spectrum of neurobehavioral sequelae after repetitive mild traumatic brain injury: a novel mouse model of chronic traumatic encephalopathy. J Neurotrauma. 31 (13), 1211-1224 (2014).
- Hirth, F. Drosophila melanogaster in the study of human neurodegeneration. CNS Neurol Disord Drug Targets. 9 (4), 504-523 (2010).
- Littleton, J. T., Ganetzky, B. Ion channels and synaptic organization: analysis of the Drosophila genome. Neuron. 26 (1), 35-43 (2000).
- Appel, L. F., et al. The Drosophila Stubble-stubbloid gene encodes an apparent transmembrane serine protease required for epithelial morphogenesis. Proc Natl Acad Sci USA. 90 (11), 4937-4941 (1993).
- Piyankarage, S. C., Featherstone, D. E., Shippy, S. A. Nanoliter hemolymph sampling and analysis of individual adult Drosophila melanogaster. Anal Chem. 84 (10), 4460-4466 (2012).
- Katzenberger, R. J., et al. A Drosophila model of closed head traumatic brain injury. Proc Natl Acad Sci USA. 110 (44), E4152-E4159 (2013).
- Barekat, A., et al. Using Drosophila as an integrated model to study mild repetitive traumatic brain injury. Sci Rep. 6, 25252 (2016).
- Katzenberger, R. J., et al. A Method to Inflict Closed Head Traumatic Brain Injury in Drosophila. J Vis Exp. (e52905), (2015).
- Branson, K., Robie, A. A., Bender, J., Perona, P., Dickinson, M. H. High-throughput ethomics in large groups of Drosophila. Nat Methods. 6 (6), 451-457 (2009).
- Straw, A. D., Dickinson, M. H., et al. Motmot, an open-source toolkit for realtime video acquisition and analysis. Source Code Biol Med. 4 (5), 1-10 (2009).
- Talavage, T. M., et al. Functionally-detected cognitive impairment in high school football players without clinically-diagnosed concussion. J Neurotrauma. 31 (4), 327-338 (2014).
- Theadom, A., et al. Frequency and impact of recurrent traumatic brain injury in a population-based sample. J Neurotrauma. 32 (10), 674-681 (2015).
- Drobysheva, D., et al. An optimized method for histological detection of dopaminergic neurons in Drosophila melanogaster. J Histochem Cytochem. 56 (12), 1049-1063 (2008).
