Summary

신생아 Hypoxic-허 혈 성 뇌 손상의 마우스 모델에서 Neurobehavioral 평가

Published: November 24, 2017
doi:

Summary

우리는 출생 후 하루에 일방적인 경 동맥 폐색을 수행 7-10 CD-1 신생아 hypoxic-허 혈 성 (HI) 모델을 만드는 새끼 마우스와 뇌 손상의 영향을 조사. 우리는 운영 되지 않은 정상 쥐에 비해 이러한 마우스 neurobehavioral 함수 공부.

Abstract

우리 신생아 hypoxic-허 혈 성 (HI) 모델을 만들려면 CD-1 마우스에 일방적인 경 동맥 폐색을 수행 하 고 비 운영 (즉, 에 비해 이러한 마우스 neurobehavioral 함수를 공부 하 여 신생아이 뇌 손상의 영향을 조사 일반) 쥐입니다. 연구 기간 동안 쌀 있습니다 방법은 출생 후 하루 7-10 (p 7-10) 쥐에 신생아이 뇌 손상 유발 하 사용 되었다. 이 작업은 일방적인 경 동맥 결 찰 및 hypoxia (8% O2 와 90 분의 92% N2 )에 노출에 의해 새끼에서 수행 되었다. 수술 후, 1 주일 손상 된 두뇌 반투명 두개골을 통해 육안으로 평가 되었다 고 부재 (“대뇌 피 질의 부상” 그룹) 또는 피 질 손상의 존재 (“대뇌 피 질의 부상” 그룹)에 따라 하위 그룹으로 분류 했다 오른쪽 반구에 병 변을 등 주 6 일에 다음 neurobehavioral 테스트를 수행한 인식과 모터 기능을 평가 하기: 수동 회피 작업 (PAT), 사다리, 테스트 및 그립 강도 테스트. 이러한 행동 테스트 신생아이 뇌 손상의 효과 결정 하는 데 도움이 되 고 신경 퇴행 성 질환의 다른 마우스 모델에서 사용 됩니다. 이 연구에서 신생아 안녕 뇌 부상 쥐 우 반구 손상에 대응 하는 모터 적자를 보여주었다. 행동 테스트 결과 인간의 신생아이 환자, 뇌성 마비 등 신생아 뇌졸중 환자에서에서 관찰 하는 적자와 관련이 있습니다. 이 연구에서 신생아이 뇌 손상의 마우스 모델 그리고 설립 되었다 모터 적자와 비 운영 쥐에 비해 인지 장애의 다른 정도 보여주었다. 이 일이 마우스 모델에 기본 정보를 제공합니다. MRI 이미지 다른 고기, 모터 및 인지 테스트 구분 뇌 손상의 심각을 보여줍니다.

Introduction

신생아이 뇌 손상 초기 아 동기 (어린이 1000 당 약 2 명의 환자)1,2,3,,45발생합니다. 신생아이 뇌 손상에 관한 연구는 중요 한, 그리고는 설립된 신생아 안녕 뇌 부상 마우스 모델을 사용 하 여이 뇌 손상에 vivo에서 전 임상 연구를 촉진할 수 있다.

전통적인이 모델 성인 쥐6에 사용 됩니다. 신생아 모델에 대 한 쌀 있습니다 메서드는 P7 쥐7,8에 주로 사용 됩니다. 그러나, 때문에 쥐와 생쥐 약간 다른9,10, 비록 그들은 둘 다 설치류, 우리 수행 수정된 쌀 있습니다 방법 p 7-10, p 7-10 기간은 보여준 이전의 연구에 따라 CD-1 강아지에 특징 미 숙 oligodendrocytes, 인 간에 게 해당 용어 P011,12. 신생아이 마우스 모델 p 7-10 새끼에 모두 일방적인 경 동맥의 결 찰 및 8% 산소와 산소를 쥐의 노출을 통해 설정 됩니다.

쥐 오른쪽 반구의 posterolateral 영역에서 뇌 병 변의 다양 한 학위를 보여주 하는 절차를 거쳐야 합니다. 인식과 모터 적자, neurobehavioral 평가 팻에 따라 식별, 사다리, 테스트 및 그립 강도 테스트 수행 했다. 비 운영 (즉, 일반)와 쥐의 차이점 분석 되었다. 이 일이 마우스 모델에 대 한 기본 정보를 제공합니다. MRI 이미지에는 다른 고기, 모터 및 인지 테스트를 사용 하 여 뇌 손상의 심각도 따라 보여 줍니다.

Protocol

모든 동물 시설 평가 및 인증의 실험실 동물 배려 (AAALAC)에 대 한 협회에 의해 신임 된 주어진 음식에에서 대 한 표준 케이지 (27 × 22.5 × 14 cm3)에서 지 내게 및 광고 libitum 번갈아 12 h 빛/어둠 아래 물 사이클입니다. 저자 뒤 동물 보호 규정, 그리고 실험적인 절차는 기관 동물 관리 및 사용 위원회의 연 세 대학 대학의과 대학에 의해 승인 되었다 (IACUC No. 2010-0252; 2013-0220). <p class="jove…

Representative Results

모든 데이터는 평균 ± 표준 오차 (SEM) 의미의로 표현 됩니다. 두 그룹 사이의 변수 비교 독립 또는 쌍 t를 사용 하 여 실시 했다-SPSS 통계 소프트웨어에 대 한 테스트. P-값 < 0.05 통계적으로 중요 하 게 고려 되었다. 신생아이 부상으로 두뇌 손상의 다른 심각도 그리고 그러므로 분류 했다 (그림 1 c</str…

Discussion

이 연구에서 우리 신생아 P7-10 CD-1 마우스에이 뇌 손상을 유발 하 고 관련 인식과 모터 적자와 함께 뇌 병 변 확인. 이 절차 동안, 일방적인 오른쪽 경 동맥의 폐색 중요 했다. 이 단계에서는 동맥 손상 고 해체 될 수 있습니다. 동맥 눈물을 경험 대부분 새끼 죽 었 다. 반대로, 연구원은 일방적인 오른쪽 경 동맥 대신 다른 혈액 정 맥 출혈, 강아지의 뇌만 약간 손상, 그리고 아무 중요 한 표현 형<sup cla…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

이 연구는 국립 연구 재단 (NRF 2014R1A2A1A11052042; 2015M3A9B4067068), 과학의 부 및 기술, 한국, 한국 건강 기술 R & D 프로젝트 (HI16C1012), 건강의 교육부에서 교부 금에 의해 지원 되었다 & 복지, 한국, 그리고 연세대 학교 의과대학 (6-2016-0126)의 “동화” 교수 연구 지원 프로그램

Materials

Hypoxic chamber Jeung Do Bio & Plant Co Experimental Builder 
PAT apparatus  Jeung Do Bio & Plant Co Experimental Builder 
The ladder rung walking  Jeung Do Bio & Plant Co Experimental Builder 
SDI Grip Strength System  San Diego Instruments Inc.
Grip-Strength Meter Ugo Basile  47200
Harvard Apparatus Fluovac anesthetizing system  Harvard Apparatus
Anesthetizing box acryl box
I-Fran Liquid (Isofluorane) Hana Pharm. Co., Ltd. General Anesthetics ( isoflurane 100ml)
CD-1 mice Orient Co., Ltd.
Blue Nylon Mono Non-Absorbbable suture 5-0 50cm Ailee Co., Ltd. NB 521
IBM SPSS Statistics IBM Ver. 23

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Cite This Article
Kim, M., Yu, J. H., Seo, J. H., Shin, Y., Wi, S., Baek, A., Song, S., Cho, S. Neurobehavioral Assessments in a Mouse Model of Neonatal Hypoxic-ischemic Brain Injury. J. Vis. Exp. (129), e55838, doi:10.3791/55838 (2017).

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