Vi utförde ensidiga halspulsådern ocklusion postnatal dag 7-10 CD-1 mus pups att skapa en neonatal hypoxisk-ischemisk (HI) modell och undersökt effekterna av HI hjärnskada. Vi studerade neurologiskt betingade funktioner hos dessa möss jämfört med icke-operatör normala möss.
Vi utförde ensidiga halspulsådern ocklusion på CD-1 möss att skapa en neonatal hypoxisk-ischemisk (HI) modell och undersökt effekterna av neonatal HI hjärnskada genom att studera neurologiskt betingade funktioner hos dessa möss jämfört med icke-operatör (dvs. normala) möss. Under studien användes ris-Vannuccis metod att inducera neonatal HI hjärnskador i postnatal dag 7-10 (P7-10) möss. HI operationen utfördes på valparna av ensidiga halspulsådern ligering och exponering till hypoxi (8% O2 och 92% N2 för 90 min). En vecka efter operationen, skadade hjärnor utvärderades med blotta ögat genom halvtransparent skallen och var kategoriseras in i undergrupper baserat på frånvaro (”inga kortikala skadan” grupp) eller närvaro (”kortikala skadan” grupp) av kortikala skadan, till exempel en skada i höger hjärnhalva. På vecka 6, följande neurologiskt betingade tester utfördes för att utvärdera de kognitiva och motoriska funktionerna: passivt undvikande uppgift (PAT), stege walking test och grepp hållfasthetsprovningen. Dessa beteendemässiga tester är bra att fastställa effekterna av neonatal HI hjärnskada och används i andra musmodeller av neurodegenerativa sjukdomar. I denna studie visade neonatal HI hjärnan skada möss motoriska brister som motsvarade högra hjärnhalvan skador. Beteendemässiga resultaten är relevanta för de brister som observerats hos neonatala HI patienter, såsom cerebral pares eller neonatal strokepatienter. I denna studie en musmodell av neonatal HI hjärnskada inrättades och visade olika grader av motor underskott och kognitiv försämring jämfört med icke-operatör möss. Detta arbete ger grundläggande information om HI musmodell. MRI-bilder visar de olika fenotyperna, åtskilda enligt svårighetsgraden av hjärnskador av motoriska och kognitiva tester.
Neonatal HI hjärnskada uppstår under tidig barndom (cirka två patienter per 1 000 barn)1,2,3,4,5. Studier om neonatal HI hjärnskada är viktigt, och med hjälp av en etablerad musmodell för neonatal HI hjärnan skada kan underlätta i vivo preklinisk forskning på HI hjärnskada.
Traditionella HI modeller används på vuxna råttor6. För den nyfödda modellen används ofta metoden ris-Vannucci på P7 råttor7,8. Men eftersom råttor och möss är något annorlunda9,10, trots att de båda gnagare, vi utfört en modifierat ris-Vannucci metod på CD-1 valpar på P7-10, baserat på tidigare studier som visade att P7-10 är perioden med omogna oligodendrocyter, motsvarar mänskliga termen P011,12. Neonatal HI musmodell etableras genom både ligering av den ensidiga halspulsådern och mössen exponering för hypoxi med 8% syre i P7-10 ungar.
Mössen utsättas för det förfarande som visade olika grader av hjärnskador i området posterolateral i höger hjärnhalva. För att identifiera den kognitiva och motoriska brister, neurologiskt betingade bedömningar baserade på PAT, utfördes stege walking test, och grepp styrka test. Skillnaderna mellan icke-operatör (dvs. normalt) och HI möss analyserades. Detta arbete presenteras grundläggande information om HI musmodell. MRI bilderna visar de olika fenotyperna, skilda enligt svårighetsgraden av hjärnan skador med hjälp av motoriska och kognitiva tester.
I denna studie vi inducerad HI hjärnskada i en neonatal P7-10 CD-1 mus och identifierade hjärnskador med relevanta kognitiva och motoriska brister. Under detta förfarande var ocklusion av den ensidiga rätt halspulsådern kritisk. I det här steget kan artären vara skadad och slits. De flesta valpar som upplevt en artär tår dog. Omvänt, om forskare sammanskrivna en annan blod ven i stället för den ensidiga rätt halspulsådern, hjärnan av pup skadades endast lindrigt och inga betydande fenotyp kunde observeras<…
The authors have nothing to disclose.
Denna studie stöddes av bidrag från National Research Foundation (NRF-2014R1A2A1A11052042; 2015M3A9B4067068), ministeriet för vetenskap och teknik, Republiken Korea, koreanska hälsa teknik R & D projekt (HI16C1012), hälsoministeriet & Välfärd, Republiken Korea och programmet ”Dongwha” fakulteten forskning bistånd av Yonsei University College of Medicine (6-2016-0126).
Hypoxic chamber | Jeung Do Bio & Plant Co | Experimental Builder | |
PAT apparatus | Jeung Do Bio & Plant Co | Experimental Builder | |
The ladder rung walking | Jeung Do Bio & Plant Co | Experimental Builder | |
SDI Grip Strength System | San Diego Instruments Inc. | ||
Grip-Strength Meter | Ugo Basile | 47200 | |
Harvard Apparatus Fluovac anesthetizing system | Harvard Apparatus | ||
Anesthetizing box | acryl box | ||
I-Fran Liquid (Isofluorane) | Hana Pharm. Co., Ltd. | General Anesthetics ( isoflurane 100ml) | |
CD-1 mice | Orient Co., Ltd. | ||
Blue Nylon Mono Non-Absorbbable suture 5-0 50cm | Ailee Co., Ltd. | NB 521 | |
IBM SPSS Statistics | IBM | Ver. 23 |