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Neuroscience

कुतर में कं स्थानीयकृत Electroencephalography और स्थानीय फील्ड क्षमता की समवर्ती रिकॉर्डिंग

Published: November 30, 2017 doi: 10.3791/56447
Automatic Translation
1, 2, 1, 1
1School of Biological Sciences, Whiteknights, University of Reading, 2Department of Bioengineering, Imperial College

Summary

इस प्रोटोकॉल एक anesthetized चूहे में सह स्थानीयकृत electroencephalography (ईईजी) और बहु लामिना स्थानीय क्षेत्र क्षमता की समवर्ती रिकॉर्डिंग के लिए एक सरल तरीका का वर्णन । एक गड़गड़ाहट छेद एक microelectrode के सम्मिलन के लिए खोपड़ी में ड्रिल्ड ईईजी संकेत की नगण्य विकृति का उत्पादन करने के लिए दिखाया गया है ।

Abstract

हालांकि electroencephalography (ईईजी) व्यापक रूप से मस्तिष्क की तंत्रिका गतिविधियों की रिकॉर्डिंग के लिए एक गैर इनवेसिव तकनीक के रूप में प्रयोग किया जाता है, ईईजी के neurogenesis की हमारी समझ अभी भी बहुत सीमित है । स्थानीय क्षेत्र क्षमता (LFPs) एक बहु लामिना microelectrode के माध्यम से दर्ज की neocortex में अलग cortical परतों में एक साथ तंत्रिका गतिविधि के एक अधिक विस्तृत खाते प्रदान कर सकते हैं, लेकिन तकनीक आक्रामक है । एक पूर्व नैदानिक मॉडल में ईईजी और LFP माप का मेल बहुत तंत्रिका ईईजी संकेतों की पीढ़ी में शामिल तंत्र की समझ को बढ़ाने कर सकते हैं, और ईईजी के एक और अधिक यथार्थवादी और तार्किक सटीक गणितीय मॉडल के व्युत्पत्ति की सुविधा । anesthetized कुतर में समवर्ती और सह-स्थानीयकृत ईईजी और मल्टी-लामिना LFP संकेतों को प्राप्त करने के लिए एक सरल प्रक्रिया यहाँ प्रस्तुत की गई है । हम यह भी जांच की है कि ईईजी संकेत काफी एक गड़गड़ाहट छेद से प्रभावित थे एक microelectrode के सम्मिलन के लिए खोपड़ी में drilled । हमारे परिणामों का सुझाव है कि गड़गड़ाहट छेद ईईजी रिकॉर्डिंग पर एक नगण्य प्रभाव पड़ता है ।

Introduction

यह आम तौर पर स्वीकार किए जाते है कि LFPs microelectrodes के माध्यम से दर्ज मुख्य रूप से सिंक्रनाइज़ उत्तेजक और स्थानीय पिरामिड तंत्रिका की निरोधात्मक synaptic गतिविधियों के भारित योग को प्रतिबिंबित आबादी1,2,3 , 4. हमारे हाल के अनुसंधान का प्रदर्शन किया है कि LFP संकेत के प्रोफ़ाइल उत्तेजना और संकोचन5,6के घटकों में अलग हो सकता है । हालांकि, के रूप में LFP सामांय रूप से एक इनवेसिव प्रक्रिया के द्वारा मापा जाता है, यह मानव मस्तिष्क के अधिकांश अध्ययनों के लिए अनुकूल नहीं है ।

दूसरी ओर, ईईजी मस्तिष्क की विद्युत गतिविधि को मापने के लिए एक गैर इनवेसिव तकनीक है । यह व्यापक रूप से मिर्गी के रूप में मस्तिष्क संबंधी रोगों के कुछ प्रकार के लिए एक नैदानिक उपकरण के रूप में प्रयोग किया जाता है, और मानव संज्ञानात्मक अध्ययन में एक अनुसंधान उपकरण के रूप में. अपनी लोकप्रियता के बावजूद, ईईजी की एक प्रमुख सीमा ठीक अंतर्निहित तंत्रिका संकेतों के संदर्भ में7,8,9अपने लौकिक प्रोफाइल व्याख्या अक्षमता है ।

तेजी से, ईईजी के गणितीय मॉडल मस्तिष्क समारोह की समझ को बढ़ाने के लिए विकसित कर रहे हैं10,11,12,13,14,15. मौजूदा ईईजी मॉडल के अधिकांश सहज गतिविधि के दौरान ईईजी डेटा स्पेक्ट्रम के लिए उत्पादन की भविष्यवाणी की मॉडल की फिटिंग आवृत्ति डोमेन विशेषताओं के आधार पर विकसित कर रहे हैं, और बहुत कुछ ईईजी मॉडल यथार्थवादी संवेदी पैदा क्षमता उत्पन्न कर सकते हैं. इस संदर्भ में, ईईजी और LFP की समवर्ती रिकॉर्डिंग ईईजी के अधिक सटीक गणितीय मॉडल विकसित करने के लिए महत्वपूर्ण अंतर्दृष्टि और बाधाओं को प्रदान करेगा ।

ईईजी के तंत्रिका मूल का पता लगाने के लिए समवर्ती रिकॉर्डिंग के लिए इस जरूरत को संबोधित करने के लिए, हम neocortex चूहे के anesthetized में ईईजी और बहु-लामिना LFP संकेतों को एक साथ रिकॉर्ड करने के लिए एक पद्धति विकसित की है. सेटअप पिछले समवर्ती ईईजी/LFP के समान है रहनुमाओं16,17में किए गए अध्ययन । हम आगे ईईजी रिकॉर्डिंग पर खोपड़ी में छेद के आसपास एक गड़गड़ाहट छेद के प्रभाव की जांच की, द्विपक्षीय ईईजी रिकॉर्डिंग की तुलना (यानी, एक गड़गड़ाहट छेद के साथ एक गोलार्द्ध, दूसरे गोलार्द्ध बरकरार) संवेदी के अभाव में उत्तेजना. हमारे परिणाम प्रदर्शित करता है कि समवर्ती ईईजी/LFP रिकॉर्डिंग बस और प्रभावी ढंग से, खोपड़ी में गड़गड़ाहट छेद से थोड़ा ईईजी संकेत विरूपण के साथ आयोजित किया जा सकता है ।

Protocol

सभी प्रयोगों ब्रिटिश गृह कार्यालय विनियमों (पशु (वैज्ञानिक प्रक्रियाओं) अधिनियम, १९८६) के अनुसार किया गया था और अनुसंधान विश्वविद्यालय, यूके में पढ़ने की नैतिकता समिति द्वारा अनुमोदित ।

1. पशु तैयारी

नोट: मादा लिस्टर डाकू चूहों सभी प्रयोगों के लिए इस्तेमाल किया गया । यह एक गैर उत्तरजीविता प्रक्रिया है ।

  1. एक प्रयोगशाला पैमाने पर चूहे का वजन रिकॉर्ड ।
  2. Anesthetize एक चैंबर में चूहे के साथ 5% isoflurane और एक ऑक्सीजन प्रवाह की दर 1 L/
  3. अपने शरीर के नीचे एक कागज तौलिया के साथ एक stereotaxic धारक पर चूहा प्लेस और उसके काटने पट्टी के माध्यम से आराम दांत के साथ । कागज तौलिया एक गर्मी पैड की प्रविष्टि आसान कर देगा (२.३ कदम देखें) और प्रयोग के दौरान चूहे से किसी भी मलमूत्र पकड़ो ।
  4. एक हार्ड-प्लास्टिक नाक शंकु के माध्यम से लगातार isoflurane प्रशासन 3% की एकाग्रता पर एक ऑक्सीजन प्रवाह दर के साथ नाक दबाना पर घुड़सवार ०.५ L/कोन को एक छोटा जानवर isoflurane संवेदनाहारी सिस्टम से कनेक्ट करें ।

2. शल्य प्रक्रिया

  1. कागज तौलिया के नीचे एक थर्मोस्टेट हीटिंग पैड डालें, जिस पर चूहा आराम कर रहा है, दो कान सलाखों के साथ चूहे के सिर को सुरक्षित, और एक गुदा थर्मामीटर का उपयोग कर शरीर के तापमान की निगरानी ।
  2. चूहे के सिर के ऊपर दाढ़ी ।
  3. corneal सुखाने को रोकने के लिए आंखों के लिए नेत्र मरहम लागू करें ।
  4. cranium को उजागर करने से पहले, खोपड़ी के लिए lidocaine बूँदें लागू करें और इसे धीरे से त्वचा में मालिश ।
  5. खोपड़ी की सतह को बेनकाब करने के लिए एक स्केलपेल का उपयोग खोपड़ी पर लगभग 2-3 सेमी की एक midline चीरा बनाओ ।
  6. ध्यान से एक Jacquette दरिद्र और दांतेदार और घुमावदार विदारक संदंश की एक जोड़ी का उपयोग खोपड़ी से उत्तेजित किया जा करने के लिए मूंछ पैड को temporalis मांसपेशी विपरीत पार्श्व अलग । जब भी आवश्यक हो सूती झाड़ू से खोपड़ी को साफ कर लीजिये ।
  7. एक लट रेशम, गैर अवशोषित टांका का प्रयोग, एक तंग गांठ के साथ खोपड़ी के लिए अलग मांसपेशी टाई और फिर stereotaxic फ्रेम18को सुरक्षित रूप से सीवन टाई ।
  8. stereotaxic निर्देशांक का उपयोग करने के लिए बैरल प्रांतस्था, २.५ मिमी caudal bregma और 6 midline करने के लिए पार्श्व19. एक पेंसिल या एक मार्कर का उपयोग कर somatosensory प्रांतस्था के स्थान पर एक डॉट ड्रा.
  9. चिह्नित एक दंत ड्रिल का उपयोग कर स्थान पर एक गड़गड़ाहट छेद ड्रिल । ड्रिलिंग के दौरान overheating से खोपड़ी को रोकने के लिए, बाँझ खारा लागू (सोडियम क्लोराइड ०.९%) कार्य क्षेत्र के लिए हर 10-15 एस ड्रिलिंग प्रक्रिया में निंनलिखित 3 चरण शामिल हैं:
    1. एक ड्रिल बिट #4 (व्यास में ०.०५५) का उपयोग खोपड़ी में व्यास का एक छेद < 2 mm ड्रिल । ध्यान रखें कि बाडी में ड्रिल न करें ।
    2. छेद के नीचे पतली एक ड्रिल बिट #1/4 (व्यास में ०.०१९) का उपयोग कर translucency ।
    3. एक microelectrode के सम्मिलन की अनुमति देने के लिए बाडी का पियर्सन करने के लिए 27 ग्राम सुई का प्रयोग करें ।
  10. एक फैराडे पिंजरे एक कंपन अलगाव कार्य केंद्र के शीर्ष पर घुड़सवार करने के लिए, एक stereotaxic फ्रेम पर सुरक्षित चूहा, स्थानांतरण ।
  11. एक oximeter सेंसर है चूहा हिंद पंजा को एक oximeter नियंत्रण इकाई से जुड़े दबाना लगातार निंनलिखित शारीरिक मापदंडों की निगरानी: हृदय गति, सांस की दर, धमनी ऑक्सीजन संतृप्ति, पल्स हवालात, और सांस हवालात । ये पैरामीटर लगातार एक पीसी मॉनिटर पर प्रदर्शित किए गए, शारीरिक हालत और चूहे की एनेस्थेटिक गहराई को दर्शाती है ।
  12. isoflurane प्रशासन के लिए हार्ड-प्लास्टिक नाक शंकु बदलें और एक microflex सांस एक पारदर्शी नरम नाक शंकु जो संशोधित किया गया है (चित्र 1a) मूंछ के एक तरफ करने के लिए आसान मूंछ उत्तेजना की अनुमति के साथ सज्जित के साथ चूहे अनुकूलक के लिए नाक दबाना isoflurane प्रशासन समझौता किए बिना पैड ।
  13. नाक शंकु पर काट-आउट द्वारा उजागर मूंछ पैड के लिए दो स्टेनलेस स्टील उत्तेजक इलेक्ट्रोड डालें ।
  14. एक अलग वर्तमान उत्तेजित करने के लिए उत्तेजक इलेक्ट्रोड कनेक्ट.
  15. संदंश के साथ गर्दन के midline की त्वचा लिफ्ट और संदर्भ इलेक्ट्रोड की नियुक्ति के लिए तैयार कैंची के साथ एक 1 ~ 2 सेमी चीरा बनाते हैं । मांसपेशी ऊतक काटने के लिए नहीं ध्यान रखना ।

3. कं स्थानीयकृत ईईजी/LFP सेटअप

  1. स्वच्छ और एक कपास झाड़ू का उपयोग कर गड़गड़ाहट छेद आसपास खोपड़ी सूखी ।
  2. ध्यान से एक ईईजी मकड़ी इलेक्ट्रोड के एक फ्लैट पक्ष पर प्रवाहकीय ईईजी पेस्ट जगह है । मकड़ी इलेक्ट्रोड पर ईईजी पेस्ट के एक छोटे से छेद स्पष्ट छोड़ एक बहु लामिना microelectrode पेस्ट और मकड़ी इलेक्ट्रोड से संपर्क किए बिना छेद के माध्यम से पारित करने के लिए अनुमति देने के लिए । यह ईईजी इलेक्ट्रोड और microelectrode के बीच विद्युत संपर्क को रोकता है ।
  3. खोपड़ी में गड़गड़ाहट छेद करने के लिए मकड़ी इलेक्ट्रोड संरेखित करें, खोपड़ी का सामना करना पड़ ईईजी पेस्ट के साथ.
  4. ध्यान से खोपड़ी पर मकड़ी इलेक्ट्रोड दबाएँ, ईईजी पेस्ट के माध्यम से खोपड़ी के साथ फर्म संपर्क बनाने. किसी भी एक सिरिंज पर एक सुई का उपयोग कर गड़गड़ाहट छेद अस्पष्ट पेस्ट निकालें.
  5. मकड़ी इलेक्ट्रोड की परिधि से परे अत्यधिक ईईजी पेस्ट निकालें ताकि मकड़ी इलेक्ट्रोड और खोपड़ी के बीच संपर्क विशेष रूप से इलेक्ट्रोड के आकार के लिए विवश है (चित्र 1b) ।

Figure 1
चित्र 1: समसामयिक ईईजी/LFP रिकॉर्डिंग के लिए सामांय सेटअप । (क) सेटअप isoflurane संज्ञाहरण के तहत मूंछ पैड उत्तेजना में आसानी के लिए एक संशोधित नाक शंकु के होते हैं, व्हिस्की पैड में डाला दो उत्तेजक इलेक्ट्रोड, एक मकड़ी इलेक्ट्रोड बैरल से ऊपर खोपड़ी पर तैनात प्रांतस्था विपरीत पार्श्व करने के लिए उत्तेजक इलेक्ट्रोड, एक मल्टी चैनल microelectrode मकड़ी इलेक्ट्रोड के माध्यम से प्रांतस्था बैरल में डाला, और संदर्भ इलेक्ट्रोड चूहे की गर्दन के पीछे एक चीरा के अंदर रखा. (ख) मकड़ी इलेक्ट्रोड के माइक्रोस्कोप के माध्यम से एक दृश्य सुरक्षित रूप से खोपड़ी पर ईईजी पेस्ट द्वारा तैनात । microelectrode एक गड़गड़ाहट छेद मकड़ी इलेक्ट्रोड के तहत खोपड़ी में drilled में डाला जाता है । खोपड़ी शल्य धागा (टांका) stereotaxic फ्रेम से बंधा द्वारा वापस आयोजित किया जाता है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

  1. ईईजी के लिए संदर्भ इलेक्ट्रोड पर धब्बा ईईजी पेस्ट और यह सुरक्षित रूप से चूहे की गर्दन के पीछे चीरा के अंदर जगह है ।
  2. कम प्रतिबाधा संकेतों (चित्रा 2) के लिए एक निष्क्रिय संकेत अलगानेवाला के माध्यम से एम्पलीफायर के लिए ईईजी इलेक्ट्रोड कनेक्ट. सुनिश्चित करें कि मकड़ी इलेक्ट्रोड के प्रतिबाधा के नीचे है 5 kΩ. अगर ऐसा नहीं है, तो जांच लें कि ईईजी पेस्ट खोपड़ी के साथ अच्छे संपर्क में है और इलेक्ट्रोड मजबूती से ईईजी पेस्ट को दबाया जाता है । यदि आवश्यक हो तो अधिक ईईजी पेस्ट जोड़ें ।
  3. stereotaxic फ्रेम पर एक micromanipulator बांह माउंट । एक रैखिक 16-चैनल microelectrode (१०० µm रिक्ति, प्रत्येक साइट के क्षेत्र १७७ µm2) से कनेक्ट करने के लिए एक 16-चैनल तीव्र headstage micromanipulator बांह पर सुरक्षित रूप से काटा गया ।
  4. ईईजी और microelectrode के लिए संदर्भ इलेक्ट्रोड पर धब्बा ईईजी पेस्ट, तो सुरक्षित रूप से उन्हें चीरा के अंदर जगह (चित्र 1a).
  5. micromanipulator बांह के कोण को समायोजित करें ताकि microelectrode का सीधा cortical सतह पर हो सके । यह कोण सामान्य रूप से 25-35 ° के बीच है ।
  6. microelectrode के टिप ऊपरवाला इलेक्ट्रोड सिर्फ cortical सतह प्रवेश जब तक गड़गड़ाहट छेद के तल पर छोटे खोलने के उद्देश्य से है ताकि micromanipulator knobs मोड़ से एक खुर्दबीन के नीचे microelectrode कम... देखभाल के लिए बाडी की सतह पर microelectrode मजबूर से बचने के रूप में यह इलेक्ट्रोड टूट जाएगा लिया जाना चाहिए ।
  7. एक फाइबर ऑप्टिक केबल (चित्रा 2) के माध्यम से एक डेटा अधिग्रहण इकाई से जुड़े एक एम्पलीफायर के लिए 16 चैनल microelectrode जोड़ा.
  8. प्रवर्धक, डेटा प्राप्ति इकाई, और इकाई से कनेक्टेड कंप्यूटर चालू करें । उत्तेजित करने वाला बॉक्स चालू करें.
  9. microelectrode cortical सतह के लिए सामांय रूप से धीरे से z-micromanipulator के अक्ष घुंडी १,५०० µm20की गहराई में मोड़ द्वारा डालें ।
  10. माइक्रो-उत्तेजना की एक ट्रेन मूंछ पैड को लागू करने और 16-चैनल अवलोकन एक पीसी मॉनिटर पर पीसी पर स्थापित डेटा अधिग्रहण इकाई के सॉफ्टवेयर का उपयोग करके गहराई को समायोजित करें । ध्यान से micromanipulator पर z-अक्ष दस्ता बारी जब तक पैदा LFP के उच्चतम आयाम चैनल 7 के आसपास होता है (के रूप में इस प्रांतस्था में परत चतुर्थ के साथ मेल खाता है) ।
    नोट: Ipsi-पार्श्व ईईजी इलेक्ट्रोड सेटअप: कुछ प्रयोगों के लिए, एक दूसरे मकड़ी इलेक्ट्रोड बैरल प्रांतस्था ऊपर बरकरार खोपड़ी के Ipsi-पार्श्व पक्ष पर रखा गया था. इस सेटअप ईईजी संकेत पर गड़गड़ाहट छेद के प्रभाव की जांच करने के लिए आराम राज्य के दौरान द्विपक्षीय ईईजी रिकॉर्डिंग की अनुमति दी ।
    नोट: ईईजी इलेक्ट्रोड स्थापित करने के लिए शल्य प्रक्रिया ऊपर वर्णित करने के लिए समान है, सिवाय इसके कि चरण २.६ के दौरान, सिर के प्रत्येक पक्ष पर temporalis मांसपेशी ध्यान से खोपड़ी से अलग किया गया था, वापस टांका और इसी पक्ष के लिए सुरक्षित रूप से बंधे stereotaxic फ्रेम ।
    नोट: समवर्ती ईईजी/LFP सेटअप भी है कि ऊपर वर्णित के समान है, एक अतिरिक्त कदम है कि एक दूसरे मकड़ी इलेक्ट्रोड ईईजी पेस्ट के साथ भरी हुई है, तो ipsi-पार्श्व बैरल प्रांतस्था ऊपर खोपड़ी को दृढ़ता से दबाया के साथ ।

Figure 2
चित्र 2. एक संकेत प्रवाह आरेख । चूहे को एक फैराडे पिंजरे के अंदर रखा गया है । उत्तेजक इलेक्ट्रोड एक पीसी पर स्थापित अपने सॉफ्टवेयर के माध्यम से डेटा अधिग्रहण इकाई द्वारा नियंत्रित उत्तेजितकर्ता बॉक्स से आदेश प्राप्त करते हैं । microelectrode द्वारा दर्ज तंत्रिका संकेत फैराडे पिंजरे के अंदर एक पूर्व एम्पलीफायर को प्रेषित किया जाता है. तंत्रिका ईईजी जांच द्वारा दर्ज संकेत एक संकेत अलगानेवाला के माध्यम से पूर्व एम्पलीफायर को प्रेषित है । पूर्व एम्पलीफायर एक फाइबर ऑप्टिक केबल के माध्यम से फैराडे पिंजरे के बाहर डेटा अधिग्रहण इकाई से जुड़ा है. तंत्रिका डेटा तो पीसी पर एक स्थानीय ड्राइव पर संग्रहीत हैं, जबकि वे भी एक पीसी मॉनिटर पर प्रदर्शित किया जा सकता है । एक मोबाइल छोटे जानवर isoflurane प्रणाली फैराडे पिंजरे के बाहर से isoflurane election । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

4. विद्युत उत्तेजना और तंत्रिका रिकॉर्डिंग

नोट: सभी तंत्रिका डेटा के लिए नमूना आवृत्ति 16-bit संकल्प के साथ २४.४१ kHz है. एक परीक्षण परीक्षण के शुरू में एक भी बिजली की उत्तेजना के होते हैं । प्रत्येक परीक्षण 10 एस, जो भी अंतर उत्तेजना अंतराल (आईएसआई) रहता है । प्रत्येक उत्तेजना १.२ एमए के एक वर्ग वर्तमान पल्स है टिकाऊ ०.३ ms. गड़गड़ाहट छेद के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए द्विपक्षीय प्रयोगों के लिए, २५० एस के निरंतर आराम राज्य भी दर्ज की गई है ।

  1. कंप्यूटर पर रिकॉर्डिंग सॉफ़्टवेयर उपयोग में खोलें ।
  2. ' OpenProject ' के ड्रॉपडाउन मेनू से ' लोड प्रोजेक्ट... ' का चयन करके प्रयोग के लिए सही सर्किट लोड । एक नई विंडो (' कार्यक्षेत्र ') दिखाई देगी (चित्र 3) ।

Figure 3
चित्र 3. डेटा प्राप्ति इकाई के लिए सॉफ़्टवेयर GUI का एक प्रदर्शन. यह उपयुक्त सर्किट को अपलोड करने की अनुमति देता है, उत्तेजना मानकों को स्थापित किया है, और डेटा को दर्ज किया और visualized हो । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

  1. एक नई निर्देशिका बनाएं (सॉफ्टवेयर द्वारा एक ' टैंक ' कहा जाता है) के लिए तंत्रिका रिकॉर्डिंग की दुकान ।
    1. खिड़की के ऊपर से ' फाइल ' पर क्लिक करें, और ' डेटा टास्क प्रबंधन ' का चयन करें । एक नई विंडो (' टैंक प्रबंधन ') दिखाई देगा ।
    2. ' टैंक प्रबंधन ' विंडो में, एक मेनू प्रदर्शित करने के लिए माउस का दायां बटन दबाएं । चुनें ' नया टैंक बनाएं ' । एक और नई विंडो (' डेटा टैंक बनाएं ') दिखाई देगा ।
    3. ' डेटा टैंक बनाएं ' विंडो में, उस पथ का चयन करें जहां आप कोई नई डेटा निर्देशिका बनाने की योजना बनाते है और नई निर्देशिका का नाम दर्ज करते हैं । फिर ' ओके ' दबाएँ. यह खिड़की गायब हो जाएगी ।
    4. नई निर्देशिका ' टैंक प्रबंधन ' विंडो में लेकिन ग्रे में दिखाई देगा । इस निर्देशिका पर राइट-क्लिक करके रजिस्टर, और ड्रॉपडाउन मेनू से ' टैंक रजिस्टर ' का चयन करें । एक लाल सितारा और एक हरे रंग का तीर नई निर्देशिका का नाम है जो अब काला (चित्रा 4) में है के बाईं ओर दिखाई देगा ।
    5. किसी भी पिछले निर्देशिका ' टैंक प्रबंधन ' विंडो में राइट-क्लिक करके और ड्रॉपडाउन मेनू में ' ताज़ा टैंक सूची ' का चयन करके उपयोग में नहीं अपंजीकृत ।
    6. ' टैंक प्रबंधन ' खिड़की से बाहर निकलने के लिए ' ओके ' पर क्लिक करें ।

Figure 4
चित्रा 4: सॉफ्टवेयर GUI का एक प्रदर्शन एक पंजीकृत डेटा निर्देशिका दिखा. कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

  1. ' कार्यक्षेत्र ' में नई निर्देशिका प्रयोग के दौरान तंत्रिका संकेतों को प्रदर्शित करने के लिए रजिस्टर ।
    1. ' OpenProject ' विंडो में ' स्कोप ' आइकन पर क्लिक करें । एक नई विंडो (' स्कोप ') दिखाई देगी ।
    2. ठीक क्लिक करें ' गुंजाइश ' विंडो में माउस और ड्रॉपडाउन मेनू में ' ताज़ा टैंक सूची ' का चयन करें । नई निर्देशिका का नाम धूसर में दिखाई देगा ।
    3. नई निर्देशिका पर क्लिक करें । एक लाल सितारा और एक हरे रंग का तीर नई निर्देशिका के नाम के बाईं ओर दिखाई देगा जो अब काले रंग में है ।
  2. खिड़की के ऊपर से ' सेटअप ' पर क्लिक करके ' कार्यक्षेत्र ' खिड़की में डेटा अधिग्रहण के लिए प्रयोगात्मक मापदंडों की स्थापना की । एक नई विंडो दिखाई देगी । चुनें ' स्वीप लूप ', परीक्षण की लंबाई और दर्ज की जाने वाली परीक्षणों की संख्या निर्धारित करें ।
  3. जाँचें कि उत्तेजितकर्ता बॉक्स चालू है.
  4. ' कार्यक्षेत्र ' विंडो में ' रिकॉर्ड ' बटन दबाएँ. एक नई विंडो दिखाई देगी । उस डेटा फ़ाइल का नाम दर्ज करें जिसे आप प्रायोगिक रन के लिए सहेजना चाहते हैं, लेकिन इस स्तर पर वापसी बटन को नहीं दबाते, क्योंकि ईईजी रिकॉर्डिंग पैरामीटर्स को सेट अप करने की आवश्यकता है ।
  5. पूर्व एम्पलीफायर पर ग्राफिक यूजर इंटरफेस (GUI) का उपयोग कर ईईजी रिकॉर्डिंग पैरामीटर सेट करें. स्क्रीन को जगाने के लिए प्रवर्धक की स्क्रीन (कहीं भी) स्पर्श करें । का चयन करें ' अनलॉक ' प्रदर्शन (चित्रा 5) अनलॉक करने के लिए ।
    1. ' 2: ईईजी ' पैनल में बाएं आइकन दबाएं । एक नया प्रदर्शन दिखाई देगा ।
    2. प्रेस ' युग्मन ' और ' एसी ' का चयन करें ।
    3. ' रेफरी मोड ' दबाएँ और ' स्थानीय ' का चयन करें.
    4. ' साैंप दर ' दबाएँ और ' 25KHz ' का चयन करें.
    5. मूल प्रदर्शन पर लौटने के लिए ' OK ' दबाएं ।

Figure 5
चित्रा 5: पूर्व एम्पलीफायर पर जीयूआई. यह ईईजी रिकॉर्डिंग मापदंडों की अनुमति देता है (उदा, नमूना आवृत्ति और संदर्भित वरीयता) सेट किया जा करने के लिए । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

  1. ' 2: ईईजी ' पैनल में मध्य चिह्न दबाकर ईईजी जांच के प्रतिबाधा (ओं) की जाँच करें. यदि बहुत अधिक है, तो जांच करने के लिए अधिक ईईजी पेस्ट जोड़ें । मूल प्रदर्शन पर लौटने के लिए ' OK ' दबाएं ।
  2. ईईजी रिकॉर्डिंग के प्रारंभिक उतार-चढ़ाव की रिकॉर्डिंग से बचने के लिए 20 एस रुको ।
  3. पीसी मॉनिटर करने के लिए वापस जाओ (20 एस प्रतीक्षा के बाद) और कुंजीपटल पर ' वापसी ' कुंजी दबाएँ. ईईजी और LFP संकेतों को रिकॉर्ड किया जाएगा ।

5. डेटा विश्लेषण

  1. निम्नलिखित चरणों का उपयोग करके परीक्षण-दर-परीक्षण आधार पर पूर्व-LFP और ईईजी संकेतों को संसाधित करें.
    1. वापस 20 नमूनों द्वारा समय में तंत्रिका डेटा शिफ्ट (०.८२ एमएस के बराबर) । इस सर्किट द्वारा उत्पादित देरी के लिए खुद को TDT में तंत्रिका डेटा इकट्ठा किया जाता है । डेटा स्थानांतरित करके, समय शूंय बिंदु उत्तेजना की शुरुआत करने के लिए गठबंधन किया है ।
    2. 1 ms में डेटा बिंदु के साथ 0 ms पर डेटा बिंदु को जोड़ने के लिए एक सीधी रेखा के साथ 0 से 1 ms के तंत्रिका डेटा की जगह से उत्तेजना विरूपण साक्ष्य निकालें ।
    3. शूंय-तंत्रिका संकेत २०० एमएस उत्तेजना शुरुआत करने से पहले का मतलब मूल्य घटाकर द्वारा प्रत्येक परीक्षण मतलब है ।
    4. कम पास फ़िल्टर ८०० नीचे दिए गए डेटा का उपयोग कर हर्ट्ज एक 4th क्रम Butterworth IIR दोनों दिशाओं में प्रकार फिल्टर डेटा में किसी भी अस्थाई बदलाव शुरू करने से बचने के लिए ।
    5. सभी जानवरों में बहु-लामिना डेटा संरेखित करें । प्रत्येक जानवर के LFP डेटा के लिए, लागू व्युत्क्रम वर्तमान स्रोत घनत्व (पट्टी iCSD, स्रोत त्रिज्या आर = ०.५ mm) विश्लेषण21 एक गाऊसी फ़िल्टर के साथ (λ = ५० µm) परत IV सिंक का पता लगाने के लिए1, जो सबसे बड़ा नकारात्मक एक cortical पर होने वाली चोटी द्वारा दिया जाता है उत्तेजना शुरुआत के पहले 15 एमएस के भीतर pial सतह के नीचे गहराई । CSD, और इसी LFP, डेटा तो पशुओं में अपने सिंक स्थानों के अनुसार गठबंधन कर रहे हैं । आम सिंक pial सतह के नीचे स्तर IV, ~ ६०० µm में स्थित है ।
    6. संरेखण के बाद, 2 चैनलों, 7 का उपयोग करें, और supragranular के तंत्रिका प्रतिक्रियाओं के प्रतिनिधियों के रूप में डिग्रियों LFP के 12, दानेदार, और infragranular परतों, क्रमशः प्रति बैरल प्रांतस्था में.
  2. १०० परीक्षणों से अधिक पूर्व संसाधित डेटा औसत द्वारा मतलब LFP और ईईजी की गणना.
  3. ईईजी पर गड़गड़ाहट छेद के प्रभाव की जांच करने के लिए, १,००० हर्ट्ज के लिए ईईजी संकेतों को नीचे-नमूना, और (खोपड़ी में एक छेद के साथ) विपरीत पार्श्व के लिए शक्ति वर्णक्रमीय घनत्व (PSD) की गणना और एक २५० एस अवधि से अधिक ipsi पार्श्व (बरकरार खोपड़ी) मकड़ी इलेक्ट्रोड रिकॉर्डिंग विश्राम राज्य के. PSD से गणना की है 0.1-100 हर्ट्ज Matlab में समारोह ' pmtm ' जो multitaper विधि22पर आधारित है का उपयोग कर ।
  4. आवृत्ति रेंज को निम्नलिखित प्रसिद्ध आवृत्ति बैंड में विभाजित करें: डेल्टा (δ): 0.1-4 हर्ट्ज, थीटा (): 4-8 हर्ट्ज, अल्फा (α): 8-13 हर्ट्ज, बीटा (β): 13-31 हर्ट्ज, गामा (γ): 31-100 हर्ट्ज. प्रत्येक बैंड के भीतर औसत PSD की गणना.
  5. प्रत्येक आवृत्ति बैंड के भीतर, PSD में सामान्यीकृत अंतर की गणना, P, विपरीत और ipsi-पार्श्व ईईजी समीकरण का उपयोग कर के बीच:
    Equation
    जहां pc और pi की औसत PSD है विपरीत-और ipsi पार्श्व ईईजी, क्रमशः ब्याज की आवृत्ति बैंड में ।
  6. प्रत्येक आवृत्ति बैंड के भीतर, एक नमूना टी परीक्षण करने की परिकल्पना है कि वहां कोई महत्वपूर्ण अंतर है (०.०५ महत्व स्तर पर) ईईजी संकेत के PSD के बीच दो गोलार्द्धों से दर्ज की परीक्षण करने के लिए ।

Representative Results

4 चूहों से डेटा का मतलब समय श्रृंखला जहां लागू प्राप्त करने के लिए औसत थे. ईईजी प्रतिक्रिया का आयाम भी घटना से संबंधित क्षमता (ईआरपी) के रूप में जाना जाता है, आमतौर पर बहुत LFP की तुलना में छोटे है । चित्रा 6 supragranular, दानेदार, और बैरल प्रांतस्था की infragranular परतों में, क्रमशः औसत ईआरपी और LFP से पता चलता है । प्रत्येक प्लॉट में त्रुटि बैंड संगत मानक त्रुटि है । यह देखा जा सकता है कि ईआरपी लगभग 10 बार पैदा की LFP से छोटी है ।

Figure 6
चित्रा 6: मतलब (एन = 4) ईआरपी के तंत्रिका संकेतों, supragranular, दानेदार, और infragranular LFP । छाया मानक त्रुटि इंगित करता है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

ईआरपी और LFP की लौकिक गतिशीलता की तुलना चित्रा 7में दिखाया गया है । ईआरपी के डायरेक्ट superposition और चित्रा 7A में supragranular LFP तंत्रिका संकेतों के इन दो प्रकार के बीच आयाम मतभेदों के क्रम को दिखाता है । लौकिक गतिशीलता की तुलना करने के लिए, दोनों ईआरपी और LFP उनके नकारात्मक चोटी आयाम के संबंध में सामान्यीकृत हैं । फिगर 7B और 7C सामान्यीकृत supragranular LFP और सामान्यीकृत दानेदार LFP, क्रमशः के साथ सामान्यीकृत ईआरपी आरोपित दिखाते हैं ।

यह आंकड़ा 7B से देखा जा सकता है कि ईआरपी के लिए P1 और N1 की चोटियों supragranular परत में LFP की इसी चोटियों की तुलना में अधिक देरी हो रही है । हालांकि, इन दो तंत्रिका संकेतों के लौकिक प्रोफाइल समान हैं, P1 पूर्ववर्ती N1 के साथ । दूसरी ओर, ईआरपी के लौकिक प्रोफ़ाइल बारीकी से अलग है (प्रति बैरल प्रांतस्था की परत चतुर्थ) LFP (चित्रा 7C) । महत्वपूर्ण बात यह है कि वे एक दूसरे के दर्पण छवियों, दानेदार LFP एक नकारात्मक चोटी के प्रभुत्व के साथ नहीं है (cortical परत चतुर्थ में एक प्रमुख सिंक को प्रतिबिंबित), जबकि ईआरपी विपरीत ध्रुवीयता के साथ दो चोटियों के मुख्य रूप से शामिल थे ।

Figure 7
चित्रा 7: ईआरपी और LFP की लौकिक गतिशीलता की तुलना । (क) ईआरपी (सॉलिड लाइन) आरोपित विथ supragranular LFP (डैश्ड लाइन). छाया मानक त्रुटि इंगित करता है । (ख) सामान्यीकृत ईआरपी (सॉलिड लाइन) आरोपित with सामान्यीकृत supragranular LFP (डैश्ड line) । (ग) सामान्यीकृत ईआरपी (सॉलिड लाइन) आरोपित with सामान्यीकृत दानेदार LFP (डैश्ड line) । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

ईआरपी संकेत एक मकड़ी इलेक्ट्रोड में एक गड़गड़ाहट छेद के साथ इसे में drilled पर रखा के माध्यम से मापा गया था । ईईजी रिकॉर्डिंग पर छेद के प्रभाव की जांच करने के लिए, एक और मकड़ी इलेक्ट्रोड ipsi-पार्श्व बैरल प्रांतस्था ऊपर बरकरार खोपड़ी पर रखा गया था । देखभाल करने के लिए सुनिश्चित करें कि दो मकड़ी इलेक्ट्रोड के impedances परिमाण में ईईजी पेस्ट की मात्रा का समायोजन करके इस्तेमाल किया गया था लिया गया था । चार चूहों से डेटा (जो ऊपर इस्तेमाल एक ही चूहे नहीं थे) यहाँ प्रस्तुत कर रहे हैं.

चित्रा 8 एक चूहे के दोनों इलेक्ट्रोड से समवर्ती आराम राज्य ईईजी रिकॉर्डिंग से पता चलता है, चित्रा ८अमें प्रदर्शित १०० s डेटा के साथ, और आयताकार फ्रेम (20 एस) में डेटा चित्रा 8Bमें विस्तारित कर रहे हैं. दो ईईजी संकेतों मोटे तौर पर सह-भिन्न, आयाम के समान रेंज के भीतर. चित्रा 9 , आवृत्ति अक्ष पर एक रैखिक पैमाने का उपयोग कर शीर्ष पंक्ति के साथ चार चूहों के PSD से पता चलता है, और कम आवृत्ति रेंज में एक विस्तारित दृश्य प्रदान करने के लिए आवृत्ति अक्ष पर एक लघुगणकीय पैमाने का उपयोग कर नीचे पंक्ति. चित्रा 9से, वहां के विषय में PSD में लगातार पूर्वाग्रह प्रकट नहीं होता है । यह पांच आवृत्ति बैंड में औसत PSD में सामान्यीकृत अंतर पर एक नमूना टी परीक्षण प्रदर्शन से पुष्टि की थी, चित्रा 10में दिखाया गया । इन आवृत्ति बैंड में सामान्यीकृत PSD मतभेदों में से कोई भी शूंय से काफी अलग थे (पी = ०.३२, ०.४६, ०.८५, ०.६९, और ०.९७, क्रमशः) ।

Figure 8
चित्र 8: द्विपक्षीय ईईजी रिकॉर्डिंग । (क) खोपड़ी में एक गड़गड़ाहट छेद के साथ आराम राज्य के दौरान खोपड़ी ईईजी रिकॉर्डिंग (काला) और खोपड़ी बरकरार (ग्रे) के साथ विपरीत गोलार्द्ध पर एक साथ ईईजी रिकॉर्डिंग. (ख) (ए) में आयताकार फ्रेम के भीतर waveforms के विस्तारित दृश्य । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 9
चित्र 9: शक्ति वर्णक्रमीय घनत्व (विपरीत के PSD)-(नीला) और ipsi-पार्श्व (लाल) ईईजी । प्रत्येक कॉलम एक चूहे के लिए PSD से पता चलता है । शीर्ष पैनलों रैखिक आवृत्ति पैमाने का उपयोग करें, जबकि नीचे पैनलों लघुगणक आवृत्ति पैमाने का उपयोग करने के लिए कम आवृत्ति रेंज में PSD की कल्पना की अनुमति है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 10
चित्र 10: समूह विश्लेषण । विपरीत-और पांच आवृत्ति बैंड के साथ ipsi-पार्श्व PSD के बीच अंतर सामान्यीकृत: डेल्टा, थीटा, अल्फा, बीटा, और गामा । प्रत्येक बार आवृत्ति बैंड के भीतर मतलब सामान्यीकृत मतभेद, मानक त्रुटि पट्टी के रूप में दिखाए गए के साथ दिखाता है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Discussion

हम सह की समवर्ती रिकॉर्डिंग के लिए एक प्रयोगात्मक प्रक्रिया का वर्णन किया है स्थानीयकृत ईईजी और मूंछ पैड उत्तेजना के जवाब में एक isoflurane anesthetized चूहे के LFP संकेतों । एक microelectrode ईईजी मकड़ी इलेक्ट्रोड में एक खोलने के माध्यम से neocortex में डाला गया था जो एक गड़गड़ाहट खोपड़ी में drilled छेद के साथ गठबंधन किया गया था । इलेक्ट्रोड एक प्रवाहकीय और चिपकने वाला ईईजी पेस्ट द्वारा खोपड़ी के लिए सुरक्षित किया गया था23. नाक शंकु isoflurane के प्रशासन के लिए इस्तेमाल किया ताकि उत्तेजक इलेक्ट्रोड आसानी से मूंछ पैड में डाला जा सकता है संशोधित किया गया था ।

ईईजी पेस्ट मकड़ी इलेक्ट्रोड सुरक्षित रूप से खोपड़ी के लिए बढ़ते में प्रभावी था, जबकि प्रयोगात्मक दिन भर में उत्कृष्ट विद्युत चालकता प्रदान पेस्ट के अतिरिक्त आवेदन के लिए आवश्यकता के बिना । यह खोपड़ी के लिए मकड़ी इलेक्ट्रोड की परिधि को ठीक करने के लिए गोंद के अवांछनीय उपयोग की जगह, के रूप में गोंद गैर प्रवाहकीय है और यह खोपड़ी और इलेक्ट्रोड के बीच चलता है, तो इलेक्ट्रोड के प्रतिबाधा में वृद्धि कर सकते हैं. ईईजी पेस्ट ईईजी जेल, जो गड़गड़ाहट छेद के आसपास आकार करने के लिए मुश्किल है और प्रयोग के दौरान बाहर शुष्क कर सकते हैं, गरीब ईईजी संकेतों में जिसके परिणामस्वरूप पर लाभ के एक नंबर है ।

के रूप में चूहा एक फैराडे पिंजरे के अंदर रखा गया था, बिजली के वातावरण के कारण शोर बहुत तनु थी । हालांकि, कभी तंत्रिका संकेत अभी भी काफी शोर था । अधिकांश मामलों में, यह संदर्भ इलेक्ट्रोड सुरक्षित रूप से स्थित नहीं है और इसलिए पुन: समायोजित किया जा करने के लिए आवश्यक या अधिक ईईजी चिपकाने के लिए उपयोग के कारण किया गया था । एक अंय आम समस्या यह थी कि पैदा LFP आयाम में छोटा था । इस उत्तेजक इलेक्ट्रोड द्वारा सक्रिय cortical क्षेत्र के केंद्र में तैनात नहीं microelectrode के कारण हो सकता है. के बजाय फिर से microelectrode, जो स्थानीय ंयूरॉंस को और अधिक नुकसान हो सकता है डालने, हम आम तौर पर LFP की एक उचित आयाम (> 3 एमवी) जब तक मूंछ पैड में उत्तेजक इलेक्ट्रोड की स्थिति को समायोजित किया जा सकता है ।

तकनीक की सीमाओं में से एक मकड़ी इलेक्ट्रोड है, जो 6 मिमी का व्यास है की गरीब स्थानिक संकल्प है । इस चूहे की खोपड़ी के आकार के साथ तुलना में बड़ी है । दुर्भाग्य से, यहां इस्तेमाल मकड़ी इलेक्ट्रोड खरीद करने के लिए उपलब्ध छोटी है । यह 2-4 mm करने के लिए मकड़ी इलेक्ट्रोड के व्यास को कम करने के लिए वांछनीय हो जाएगा, इस प्रकार ईईजी रिकॉर्डिंग के स्थानिक विशिष्टता में वृद्धि, ईईजी संकेत और supragranular LFP संकेत के बीच तुलना कर कम अस्पष्ट.

प्रोटोकॉल में कई महत्वपूर्ण कदम विशेष ध्यान देने की जरूरत है । पहली गड़गड़ाहट छेद के माध्यम से microelectrode की प्रविष्टि है । चूंकि बाडी अन्यथा बरकरार रहती है, इसलिए सम्मिलनी की शुद्धता महत्वपूर्ण होती है. इलेक्ट्रोड की नोक पर एक मामूली प्रतिरोध आमतौर पर मतलब इलेक्ट्रोड सही ढंग से तैनात नहीं है. यह उठाया जाना चाहिए, स्थिति समायोजित, और फिर से डाला । दूसरे चूहे पर नाक कोन की स्थिति है. यह भी ढीला नहीं होना चाहिए, के रूप में isoflurane शंकु से बच जाएगा । यह भी तंग नहीं होना चाहिए, के रूप में इस चूहे की नाक बाधा और सांस लेने में कठिनाई का कारण सकता है । विशेष ध्यान भी ईईजी रिकॉर्डिंग के आयाम बहुत छोटा है (आमतौर पर 5 से 10 बार छोटे) LFP शीर्ष चैनल रिकॉर्डिंग की तुलना में यह सुनिश्चित करने के लिए आवश्यक है. यदि वे समान हैं तो यह एक संकेत है कि ईईजी जांच microelectrode के साथ प्रत्यक्ष या अप्रत्यक्ष संपर्क में आ गई है । एक अप्रत्यक्ष संपर्क आमतौर पर मस्तिष्क रीढ़ की हड्डी में तरल पदार्थ (सीएसएफ) के माध्यम से होता है जो कभी-कभार खोपड़ी में छेद कर भरता है । सीएसएफ की चालकता आमतौर पर १०० बार है कि खोपड़ी के24,25। इस प्रकार, अगर गड़गड़ाहट छेद के अंदर सीएसएफ के स्तर पर पर्याप्त उच्च है, यह मकड़ी इलेक्ट्रोड के साथ संपर्क कर सकते हैं । इस से बचने के लिए, छेद अक्सर इस तरह के अवशोषण स्पीयर्स के रूप में सुपर शोषक कपास स्पंज के साथ साफ किया जाना चाहिए ।

छेद आसपास ईईजी रिकॉर्डिंग पर खोपड़ी में एक गड़गड़ाहट छेद (व्यास < 2 mm) का प्रभाव ipsi-पार्श्व बैरल प्रांतस्था के ऊपर बरकरार खोपड़ी पर एक और मकड़ी इलेक्ट्रोड रखकर अध्ययन किया गया था ताकि द्विपक्षीय ईईजी रिकॉर्डिंग की तुलना की जा सके । चित्र 9 और चित्र 10में दिखाए गए परिणाम, प्रभाव को महत्व के ०.०५ के स्तर पर तुच्छ होने का सुझाव देते हैं । ईईजी के आयाम को प्रभावित करने वाले अन्य कारकों में शामिल है कितनी अच्छी तरह ईईजी पेस्ट खोपड़ी के साथ संपर्क में था, कैसे फर्म इलेक्ट्रोड पेस्ट करने के लिए दबाया गया था, और खोपड़ी पर ईईजी पेस्ट की स्थानिक सीमा.

यह भी ध्यान दें कि प्रोटोकॉल यहां वर्णित खोपड़ी ईईजी, जो खोपड़ी मानव ईईजी अध्ययन में प्रयुक्त ईईजी से अलग है दर्ज की सार्थक है । खोपड़ी एक रोकनेवाला या एक कम पास फिल्टर है, जो आगे ईईजी रिकॉर्डिंग का संकेत करने के लिए शोर अनुपात कम हो जाएगा की तरह काम करता है.

अंत में, ईआरपी के लौकिक गतिशीलता की तुलना और है कि cortical परतों भर में LFP का सुझाव है कि somatosensory पैदा की क्षमता supragranular की प्रांतस्था परत में है कि दानेदार और infragranular परतों में बेहतर LFP को दर्शाता है । यह हमारे पहले काम6के साथ समझौते में है, प्रदर्शन है कि ईआरपी के प्रारंभिक खंड (P1) वापसी वर्तमान उत्तेजक synaptic दानेदार परत में होने वाली वर्तमान के प्रवाह से उत्पंन होने से संबंधित है, जबकि बाद में कमी ( ईआरपी में N1) thalamic afferent के cortical परतों द्वितीय/III और/या गहरी feedforward परतों से cortical संकेतों को आने में देरी से संबंधित हो सकता है । अंत में, ईईजी/LFP की समवर्ती रिकॉर्डिंग ईईजी की तंत्रिका उत्पत्ति की समझ को बढ़ाने, और cortical परतों में तंत्रिका संकेतों के संदर्भ में ईईजी के गणितीय मॉडलिंग की सुविधा कर सकते हैं ।

Disclosures

लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।

Acknowledgments

हम पढ़ने के विश्वविद्यालय में एंड्रयू निघाले और संसाधन इकाई का शुक्रिया अदा करना चाहूंगा । इस अनुसंधान BBSRC द्वारा वित्त पोषित किया गया (अनुदान संख्या: BB/K010123/ इस काम से जुड़ा डाटा Y.Z. (ying.zheng@reading.ac.uk) से मुफ्त में उपलब्ध है ।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Female Lister Hood rats Charles Rivers
Spider electrode Unimed Electrode Supplies Ltd SCS24-426
EEG paste: Ten20 Unimed Electrode Supplies Ltd 10-20-S
Stereotaxic holder with dual micromanipulator arms: Dual Manipulator Stereotaxic Frame with 18° Ear Bars WPI (World Precision Instruments) 502603
Isoflurane National Vet Services Limited 50878
Hard plastic nose cone: Anasthesia Gas Mask for Rat WPI 502054
Small animal isoflurane anaesthetic system WPI EZ-B800A
Thermostatic heating pad: Rat Blanket System 230V Harvard Apparatus UK 50-7221-F
Ophthalmic ointment: Optixcare eye lube Viovet 203865
Lidocaine Hydrochloride (Injection 2%) Larkmead Vets
Jacquette Scaler #1SSE, 18cm, Hollow WPI 503421
Serrated and curved dissecting forceps WPI 15915
Braided silk, non-absorbable suture: Mersilk Suture W502H National Vet Services Limited 153746
Dental drill: BONE MICRO DRILL SYST 230 VAC Harvard Apparatus UK 72-4860
Sterile Saline: Sodium chloride 0.9% Animalcare Ltd 14K26BT
Drill bit #4 : Ball Mill, Carbide, #4 Harvard Apparatus UK 72-4958
Drill bit #4 : Ball Mill, Carbide, #1/4 Harvard Apparatus UK 72-4962
Faraday cage Newport Corporation VIS-FDC-3600
Vibration isolation workstation: Vision IsoStation Newport Corporation M-VIS3660-RG4-325A
Oximeter Control Unit and sensor: MouseOxPlus, Starr Life Sciences Corp. WPI O15001
Transparent soft nose cone: Microflex Non-Rebreathing Unit with a Rat Nosecone WPI EZ-103A
Stainless steel stimulating electrodes PlasticsOne E363/1/SPC
Isolated current stimulator Made in House
16-channel micro-electrode, 100 μm spacing, area of each site 177 μm2 NeuroNexus A1x16-10mm-100-177-A16
16-channel acute headstage Tucker David Technologies Inc., TDT RA16AC-Z
Pre-Amplifier: Z-Series 64-Channel Neuro-Digitizing Preamp TDT PZ5-64
Passive signal splitter: 32-Channel Splitter Box for PZ5 TDT S-BOX_PZ5
Data acquisition unit: RZ2 BioAmp Processor. Z-Series 4-DSP ultra high performance processor TDT RZ2-4
Software for Neurophysiology: OpenEX TDT
Matlab MathWorks
Absorption spears Fine Sicence Tools 18105-01

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तंत्रिका विज्ञान अंक १२९ स्थानीय क्षेत्र क्षमता electroencephalography घटना से संबंधित संभावित समवर्ती रिकॉर्डिंग गड़गड़ाहट छेद सह information बैरल प्रांतस्था मूंछ उत्तेजना कुतर
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Kang, S., Bruyns-Haylett, M., Hayashi, Y., Zheng, Y. Concurrent Recording of Co-localized Electroencephalography and Local Field Potential in Rodent. J. Vis. Exp. (129), e56447, doi:10.3791/56447 (2017).

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