Bu makalede, aortik balon yaralanma sonra myointimal Hiperplazi (MH) gelişimini incelemek için bir fare modeli gösterilmektedir.
Hayvan modelleri kullanımını daha iyi MH, Arteryel stenoz için bir önemli neden anlamak için önemlidir. Bu makalede, biz kurulan Gemi yaralanma modelleri büyük hayvanlarda ile karşılaştırılabilir bir fare balon denudation model göstermek. Aort denudation model balon kateter ile klinik ayarını taklit eder ve karşılaştırılabilir pathobiological ve fizyolojik değişikliklere yol açar. Kısaca, yatay bir kesi içinde aorta abdominalisgerçekleştirdikten sonra bir balon kateter olacak geminin eklenen, şişirilmiş ve retrogradely tanıttı. Enflasyon balon intima yaralanma ve geminin overdistension yol açacaktır. Kateter kaldırdıktan sonra aort kesi ile tek dikiş kapalı olacaktır. Bu makalede gösterilen modeli tekrarlanabilir, gerçekleştirmek, kolay ve hızlı ve güvenilir bir şekilde kurulabilir. Ekonomik bir biçimde uygulanabilir pahalı deneysel tedavi edici ajanlar değerlendirmek için özellikle uygundur. Farklı nakavt-fare suşları kullanarak, farklı genler MH gelişimi üzerine etkisi tespit edilebilir.
Koroner ve periferik arter arter stenoz morbidite ve mortalite hastalarda1üzerinde büyük bir etkiye sahiptir. Bir altta yatan patolojik myointima Hiperplazi (MH), artan nükleer silahların yayılmasına karşı geçiş ve vasküler düz kas hücreleri (SMC)2hücre dışı matriks proteinlerinin sentezi ile karakterize bir mekanizmadır. SMC gemi media tabakası bulunur ve Lümen yüzeye stimülasyon geçirilir. Uyarıcı sinyalleri ve büyüme faktörleri, sitokinler, hücre-hücre iletişim, lipitler, hücre dışı matriks bileşenleri ve mekanik makas içerir Kuvvetleri3,4,5,6germek. Yaralanma damar duvarının, patolojik veya iyatrojenik, endotel hücre ve düz kas hücre hasarı neden ve inflamatuar reaksiyonları teşvik ve böylece MH7‘ ye yol.
Farklı hayvan modelleri Arteryel yaralanma ve myointima Hiperplazi çalışmaya şu anda kullanılabilir. Veya büyük hayvanlar domuzlar gibi köpekler benzer arter ve koroner anatomi insanlarla paylaşma avantajına sahip ve özellikle anjiyoplasti teknikleri, yordam ve aygıtları8araştıran çalışmalar için uygundur. Köpekler sadece gemi yaralanma11hafif bir yanıt ancak, domuz modelleri daha yüksek thrombogenicity9,10, dezavantajı vardır. Buna ek olarak, tüm büyük hayvan modellerinde özel konut, ekipman ve personel, yüksek maliyetleri ile bağlı olan ve her zaman bir kurum olarak mevcut değildir gerektirir. Sıçanlar ve fareler küçük hayvan modelleri içerir. Fareler için karşılaştırıldığında, fareler daha düşük maliyet avantajları ve knock out modelleri çeşitli varlığı var. Bu videoda açıklanan model ApoE-/-Batı bir diyetle beslenen yakından anjiyoplasti aterosklerotik gemiler12klinik ayarını taklit etmek için fareler ile kombine edilebilir. Önceki misal yolu ile tel yaralanma13, sıvı kuruma14, Bahar15ya da kol yaralanması16vasküler yaralanma indüklenen. Yaralanma doğası büyük ölçüde geliştirme ve MH Anayasası etkisi olacaktır beri gemi yaralanma ikna etmek için bir balon kateter kullanarak klinik ayarını taklit etmek için en iyi yoldur.
Bu makalede MH farelerde bir balon kateter ile ikna etmek için bir roman yöntemi açıklanmaktadır. İntimal katmanın ve aynı zamanda bir overdistension gemi indüksiyon kazıma bir RX-Port (şekil 1A) ile bir balon kateter (1.2 mm x 6 mm) kullanımına izin verir. Bu faktörlerin her iki MH gelişimi için önemli Tetikleyiciler vardır. 28 gün17bu model gözlem zamanı.
Bu yazı myointimal Hiperplazi gelişimini incelemek için bir fare modeli gösterir ve altta yatan patolojik süreçlerin araştırma ve test yeni ilaçlar veya tedavi olanakları sağlar.
Bu iletişim kuralı en kritik aort denudation adımdır. Aşırı denudation anevrizma oluşumu ve modeli başarısızlık için yol açacak gibi özel bakım bu adımı sırasında ödenmesi gerekmektedir. Öte yandan, denudation yeterince gerçekleştirilirse, çok az myointima geliştirecek. Bu nedenle,…
The authors have nothing to disclose.
Yazarlar Christiane Pahrmann onun teknik yardım için teşekkür ederiz.
D.W. Max Kade Vakfı tarafından desteklenmiştir. Alınan T.D. hibe başka Kröner Fondation (2012_EKES.04) ve Deutsche Forschungsgemeinschaft (DE2133/2-1_. S. S. araştırma hibe Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG; aldı. SCHR992/3-1, SCHR992/4-1).
10-0 Ethilon suture | Ethicon | 2814G | |
3 mL Syringe | BD Medical | 309658 | |
37% HCl | Sigma-Aldrich | H1758 | |
5-0 prolene suture | Ethicon | EH7229H | |
6-0 prolene suture | Ethicon | 8706H | |
Acid Fuchsin | Sigma-Aldrich | F8129-25G | Trichrome staining |
Antigen retrieval solution | Dako | S1699 | |
Azophloxin | Waldeck | 1B-103 | Trichrome staining |
Bepanthen Eye and Nose ointment | Bayer | 1578675 | Eye ointment |
Betadine Solution | Betadine Purdue Pharma | NDC:67618-152 | |
C57BL/6J | Charles River | Stock number 000664 | |
Clamp applicator | Fine Science Tools | 18056-14 | |
Collagen 3 | abcam | ab7778 | Antibody |
DAPI | Thermo Fischer | D1306 | |
Donkey anti-Goat IgG AF555 | Invitrogen | A21432 | Secondary antibody |
Donkey anti-Rabbit IgG AF488 | Invitrogen | A21206 | Secondary antibody |
Donkey anti-Rabbit IgG AF488 | Invitrogen | A11055 | Secondary antibody |
Donkey anti-Rabbit IgG AF555 | Invitrogen | A31572 | Secondary antibody |
Ethanol 70% | Th. Geyer | 2270 | |
Ethanol 96% | Th. Geyer | 2295 | |
Ethanol absolute | Th. Geyer | 2246 | |
FAP | abcam | ab28246 | Antibody |
Forceps fine | Fine Science Tools | 11251-20 | |
Forceps standard | Fine Science Tools | 11023-10 | |
Glacial Acetic Acid | Sigma-Aldrich | 537020 | |
Hair clipper | WAHL | 8786-451A ARCO SE | |
Heparin | Rotexmedica | PZN 3862340 | 25.000 I.E./mL |
High temperature cautery kit | Bovie | 18010-00 | |
Image-iT FX Signal Enhancer | Invitrogen | I36933 | Blocking solution |
Light Green SF | Waldeck | 1B-211 | Trichrome staining |
Microsurgical clamp | Fine Science Tools | 18055-04 | Micro-Serrefine – 4mm |
MINI TREK Coronary Dilatation Catheter 1.20 mm x 6 mm / Rapid-Exchange | Abbott | 1012268-06U | |
Molybdatophosphoric acid hydrate | Merck | 1.00532.0100 | Trichrome staining |
NaCl 0,9% | B.Braun | PZN 06063042 Art. Nr.: 3570160 | |
Needle holder | Fine Science Tools | 12075-14 | |
Novaminsulfon | Ratiopharm | PZN 03530402 | Metamizole |
Orange G | Waldeck | 1B-221 | Trichrome staining |
Paraffin | Leica biosystems | REF 39602004 | |
PBS pH 7,4 | Gibco | 10010023 | |
PFA 4% | Electron Microscopy Sciences | #157135S | |
Ponceau S solution | Serva Electrophoresis | 33427 | Trichrome staining |
Primary antibody diluent | Dako | S3022 | |
Prolong Gold Mounting solution | Thermo Fischer | P36930 | Mounting solution for immunofluorescence stained slides |
Replaceable Fine Tip | Bovie | H101 | |
Resorcin-Fuchsin Weigert | Waldeck | 2E-30 | Trichrome staining |
Rimadyl | Pfizer | 400684.00.00 | Carprofen |
Scissors | Fine Science Tools | 14028-10 | |
Scissors Vannas-style | Fine Science Tools | 15000-03 | |
Secondary antibody diluent | Dako | S0809 | |
Fast acting Adhesive MINIS 3x1g | UHU | 45370 | Cyanoacrylate |
Slide Rack | Ted Pella | 21057 | |
SM22 | abcam | ab10135 | Antibody |
SMA | abcam | ab21027 | Antibody |
Staining dish | Ted Pella | 21075 | |
Surgical microscope | Leica | M651 | |
Tabotamp fibrillar | Ethicon | 431962 | Absorbable hemostat |
Transpore Surgical Tape | 3M | 1527-1 | |
U-100 Insulin syringe | BD Medical | 324825 | |
Vessel Dilator | Fine Science Tools | 18603-14 | |
Vitro-Clud | Langenbrinck | 04-0001 | |
Weigerts iron hematoxylin Kit | Merck | 1.15973.0002 | Trichrome staining |
Xylene | Th. Geyer | 3410 |