Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove

Medicine

Fare Abdominal aort Myointimal Hiperplazi ikna etmek için balon tabanlı yaralanma

doi: 10.3791/56477 Published: February 7, 2018

Summary

Bu makalede, aortik balon yaralanma sonra myointimal Hiperplazi (MH) gelişimini incelemek için bir fare modeli gösterilmektedir.

Abstract

Hayvan modelleri kullanımını daha iyi MH, Arteryel stenoz için bir önemli neden anlamak için önemlidir. Bu makalede, biz kurulan Gemi yaralanma modelleri büyük hayvanlarda ile karşılaştırılabilir bir fare balon denudation model göstermek. Aort denudation model balon kateter ile klinik ayarını taklit eder ve karşılaştırılabilir pathobiological ve fizyolojik değişikliklere yol açar. Kısaca, yatay bir kesi içinde aorta abdominalisgerçekleştirdikten sonra bir balon kateter olacak geminin eklenen, şişirilmiş ve retrogradely tanıttı. Enflasyon balon intima yaralanma ve geminin overdistension yol açacaktır. Kateter kaldırdıktan sonra aort kesi ile tek dikiş kapalı olacaktır. Bu makalede gösterilen modeli tekrarlanabilir, gerçekleştirmek, kolay ve hızlı ve güvenilir bir şekilde kurulabilir. Ekonomik bir biçimde uygulanabilir pahalı deneysel tedavi edici ajanlar değerlendirmek için özellikle uygundur. Farklı nakavt-fare suşları kullanarak, farklı genler MH gelişimi üzerine etkisi tespit edilebilir.

Introduction

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Koroner ve periferik arter arter stenoz morbidite ve mortalite hastalarda1üzerinde büyük bir etkiye sahiptir. Bir altta yatan patolojik myointima Hiperplazi (MH), artan nükleer silahların yayılmasına karşı geçiş ve vasküler düz kas hücreleri (SMC)2hücre dışı matriks proteinlerinin sentezi ile karakterize bir mekanizmadır. SMC gemi media tabakası bulunur ve Lümen yüzeye stimülasyon geçirilir. Uyarıcı sinyalleri ve büyüme faktörleri, sitokinler, hücre-hücre iletişim, lipitler, hücre dışı matriks bileşenleri ve mekanik makas içerir Kuvvetleri3,4,5,6germek. Yaralanma damar duvarının, patolojik veya iyatrojenik, endotel hücre ve düz kas hücre hasarı neden ve inflamatuar reaksiyonları teşvik ve böylece MH7' ye yol.

Farklı hayvan modelleri Arteryel yaralanma ve myointima Hiperplazi çalışmaya şu anda kullanılabilir. Veya büyük hayvanlar domuzlar gibi köpekler benzer arter ve koroner anatomi insanlarla paylaşma avantajına sahip ve özellikle anjiyoplasti teknikleri, yordam ve aygıtları8araştıran çalışmalar için uygundur. Köpekler sadece gemi yaralanma11hafif bir yanıt ancak, domuz modelleri daha yüksek thrombogenicity9,10, dezavantajı vardır. Buna ek olarak, tüm büyük hayvan modellerinde özel konut, ekipman ve personel, yüksek maliyetleri ile bağlı olan ve her zaman bir kurum olarak mevcut değildir gerektirir. Sıçanlar ve fareler küçük hayvan modelleri içerir. Fareler için karşılaştırıldığında, fareler daha düşük maliyet avantajları ve knock out modelleri çeşitli varlığı var. Bu videoda açıklanan model ApoE-/-Batı bir diyetle beslenen yakından anjiyoplasti aterosklerotik gemiler12klinik ayarını taklit etmek için fareler ile kombine edilebilir. Önceki misal yolu ile tel yaralanma13, sıvı kuruma14, Bahar15ya da kol yaralanması16vasküler yaralanma indüklenen. Yaralanma doğası büyük ölçüde geliştirme ve MH Anayasası etkisi olacaktır beri gemi yaralanma ikna etmek için bir balon kateter kullanarak klinik ayarını taklit etmek için en iyi yoldur.

Bu makalede MH farelerde bir balon kateter ile ikna etmek için bir roman yöntemi açıklanmaktadır. İntimal katmanın ve aynı zamanda bir overdistension gemi indüksiyon kazıma bir RX-Port (şekil 1A) ile bir balon kateter (1.2 mm x 6 mm) kullanımına izin verir. Bu faktörlerin her iki MH gelişimi için önemli Tetikleyiciler vardır. 28 gün17bu model gözlem zamanı.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Hayvan insana ilişkin Bakım Kılavuzu laboratuvar hayvanlarının ilkeleri için uygun olarak alınan, Enstitüsü ile laboratuvar hayvan kaynakları tarafından hazırlanan ve ulusal sağlık Enstitüleri tarafından yayınlandı. Tüm hayvan iletişim kuralları sorumlu yerel otorite ('' Amt für Gesundheit und Verbraucherschutz, Hansestadt (Office sağlık ve tüketici koruma) Hamburg'') tarafından kabul edildi.

1. kateter hazırlık

Not: kateter ile ilgili bilgi için Malzemeler tablo bakın.

  1. Kateter kateter sahibinden al.
  2. Distal bağlantı noktası Lümen den embolisinin iyileşiyorsun.
  3. Siyanoakrilat yapıştırıcı kateter distal ucunda bir damla koymak.
    Dikkat: lateks veya nitril eldiven giymek.
  4. Kateter RX limanda embolisinin yerleştirin ve Lümen distal bağlantı noktasına ilerlemek. Daha sonra embolisinin biraz sonuna kadar ~ 5 mm boşluk bırakmayı çekin.
  5. Kuru yapışkan izin vermek için 5 dakika bekleyin.
  6. Embolisinin hareket, sabit olmalıdır. Eğer hala mobil, adımları 1.3-1.6 yineleyin.
  7. 3-mL şırınga 1,5 mL % 0,9 serum doldurmak ve balon enflasyon bağlantı noktasına bağlayın.
  8. Balon enflasyon sınamak için şırınga pistonu itin. 0.6 mL serum fizyolojik şırıngada bırakın.

2. fare hazırlık

  1. Erkek farelerin 14 yaklaşık 30 gram ağırlığında haftalık yaşta elde edilir.
    Not: Biz laboratuvar Enstitüsü hayvanlardan elde edilen hayvanlar kullanılır. Biz burada C57BL/6J kullanılır.
  2. Bir indüksiyon odası fare 2.0-%2.5 isofurane (500 mL/dk oksijen akış hızı) ile uyuşturan için kullanın.
  3. Sırtında bir Isıtma yastık üzerinde fareyi getirin ve anestezi ağız ve burun fare kapsayan bir sağlamlılık ile korumak. Anestezi yeterli derinlik için arka ayak ve kuyruk refleksleri olmayışı doğrulamak için pinching tarafından kontrol edin.
  4. Karın saç saç makası kullanarak kaldırın.
  5. Arka ayakları yaymak ve konumlarını bant kullanarak düzeltin.
  6. Karın bölgesi povidone-iyot, % 80'i etanol tarafından takip kullanarak dezenfekte. Bu işlemi iki kez daha tekrarlayın.
  7. Cerrahi sitesi değil kontamine emin olmak için bir cerrahi örtüsü kullanın. Açık cilt ve kas katmanları boyunca linea alba karın organları ortaya çıkarmak için bir makas (veya neşter).
  8. Bağırsak % 0,9 serum fizyolojik nemli eldiven içinde yatıyordu ve onları nemli tutmak için sarın.
  9. İki iyi forseps yağ dokusu karın aortu yukarıda kaldırmak için kullanın.
  10. Bir insülin şırınga (30 G) kullanarak, heparin çözüm (50 U/mL) 250 µL Inferior Vena kava (IVC) içine enjekte ve sistemik dağıtımı için 3 dakika bekleyin. Heparin hemostaz bastırmak ve ameliyat sırasında istenmeyen pıhtılaşma önlemek.
  11. İki forseps kullanarak, infrarenal aortada aşağı onun çatallanma ve onun giden şube damarları incelemek.
  12. Klempe bir bölge, bir yüksek sıcaklık cauterizer yerleştirilmesi için beklenen yan damarlara ligate.
  13. Hemen altındaki renal arterler infrarenal aortada sıkma tarafından kan akışını durdurmak.
  14. İkinci bir klemp hemen üstünde aort çatallanma distal bir konuma yerleştirin.
  15. Küçük bir yatay kesi kelepçeler gemi boyunca arasındaki orta nokta itibariyle makas kullanarak gerçekleştirin.
    Not: Belgili tanımlık kesme boyutu 1/3 kap çevresi'e eşdeğer olmalıdır.
  16. Bir şırınga (30 G) iğne ile belgili tanımlık kesme yerleştirin ve aort 250 µL heparin çözüm (50 U/mL) ile yıkayın.
  17. 10-0 dikişler kullanarak, bir tek düğüm belgili tanımlık kesme her yanına koyun.
  18. Aorta belgili tanımlık kesme bir gemi DİLATÖR ekleyerek genişletmek ve gemi biraz yayıldı. Dilatasyon 2-3 kere tekrar edin.
  19. % 0,9 serum fizyolojik ile balon kateter nemlendirir.
  20. Düzleştirilmiş balon katater aort yerleştirin ve aort üzerinde proksimal klemp doğru ilerlemek.
  21. Proksimal klemp ulaşan, dikkatle proksimal klemp açın ve ~0.6 mL serum enjekte edilerek kan kaçağı önlemek için balon şişirmek.
    Not: 1.5:1 gemisine şişirilmiş balon oranıdır.
  22. Yaklaşık 2 cm retrograd kateter ilerlemek.
  23. Genişletilmiş kateter geri, balon biraz şırınga serbest bırakarak deflate ise çek.
  24. Katater aort kesi ulaştığında proksimal klemp takın. Balon tamamen boşaltmak ve çıkarın.
  25. 30 G kullanarak aort 250 µL heparin çözüm (50 U/mL) ile yıkayın.
  26. 10-0 dikişler kullanarak aort kesi kapatın. Yer dikiş ventral tarafta bir ya da iki dikiş tarafından takip her yan tarafında kesildi.
  27. Distal klempi aç. Kanama, durumunda kelepçe tekrar kapatın ve ek dikiş yerleştirin.
  28. Proksimal klemp dikkatlice açın.
  29. İki temizleme bezi destek ve herhangi bir kanama durdurmak için dikiş üzerinde yerleştirin.
  30. Absorbe hemostats Bunu sürdürebilmek için dikiş üzerinde yerleştirin.
    Not: Aortik nabız klemple kesi görünür olmalıdır.
  31. Bağırsak karın geri yerleştirin.
  32. Karın boşluğu ile steril % 0,9 serum, 37 ° C'ye Önceden ısıtılmış olduğu durulama
  33. 6-0 çalışan dikiş kullanarak karın kas katman kapatın.
  34. 5-0 çalışan dikiş ile cilt kapatın.
  35. 4-5 mg/kg Carprofen subkutan uyanmak için fareyi izin vermeden önce enjekte et. O bilinç kazanmıştır kadar hayvan izle, sternal recumbency korumak. Hayvan yalnız bir kafes içinde tam kurtarma kadar tutun.
  36. Metamizole 3 gün ağrı kesici olarak içme suyu (50 mg/100 mL) ekleyin ve hayvan her gün izlemek. Genellikle fareler gibi tatlı metamizole tat ve ameliyattan hemen sonra içki başlatın. Tercih edilen sürekli salınım enjekte edilebilir maddeleri metamizole yerine kullanılabilir.
    Not: Bu model için gözlem süresi 28 gün olur.

3. histopatoloji

  1. Balon yaralı aort 2.2-2,9 adımlarda açıklandığı gibi farelerin hazırlayarak 28 gün sonra hasat.
  2. Makas (çatallanma ve böbrek damarlarının yukarıda 0.3 mm arasında) balon yaralı aort kaldırmak ve kalbini keserek fare ötenazi için kullanın.
  3. % 0,9 ile gemi Lümen sifonu NaCl.
  4. Gecede %4 paraformaldehyde (PFA) hasat gemi tamir ve 5 saat süreyle etanol, 2 saat, bir saat için % 80 etanol, % 95 etanol için 2 saat boyunca % 70 etanol ile başlayan ve % 100 etanol konsantrasyonları artan kurutmak. O zaman, Ksilen örneklerinde 2 saat boyunca parafin örnekleriyle infiltre daha önce 3 kez, kuluçkaya.
    Not: % 0,9 ile hasat gemi kızarma yerine NaCl, %4 ile temizlenip PFA.
    Dikkat: PFA ve Ksilen zehirlidir ve özen ile ele alınmalıdır.
  5. Örnek parafin içinde katıştırabilir ve bir microtome kullanarak 5 µm kalınlığında dilimler halinde kesin.
  6. Ksilen ile slaytlar için 3 kere 5 dakika deparaffinize.
  7. Etanol azalan bir dizi kullanarak doku slaytlar rehydrate. 2 kez 5 min, % 95, % 80 ve % 70 etanol tarafından 3 dakika takip için % 100 etanol ile başlayın.
  8. Slaytları Masson'ın açıklanan18trichrome boyama ile leke.
  9. % 100 etanol 10 min için 2 kez lekeli slaytları kurutmak. Ksilen 10 min için 2 kez ile temizleyin ve montaj ortamda monte edin.
  10. Slaytları parlak alan mikroskopla görüntüleyin. Bir genel bakış resim veya 0.35 detaylı gözlem için sayısal bir diyafram ile 20 x büyütme ile bir lens için 5 x büyütme ve 0.12 sayısal bir diyafram ile bir lens kullanmak.

4. ayirt mikroskobu

  1. Etanol azalan bir dizi kullanarak doku slaytlar rehydrate. 2 kez 5 min, % 95, % 80 ve % 70 etanol 3 min tarafından takip için % 100 etanol ile başlayın.
  2. Antijen-alma slaytlar bir gemi 20 dk için antijen-alma çözümde Isıtma tarafından gerçekleştirin.
  3. Oda sıcaklığında aşağı slaytlar soğumaya bırakın.
  4. Slaytları fosfat tamponlu tuz (PBS) ile üç kez yıkadıktan sonra antijen engelleme çözüm bölümlerinde 30 dk için geçerli.
  5. Slaytlar PBS ile 5 min için üç kez yıkayın.
  6. Bölümler ile birincil antikor birincil antikor Dilüent seyreltilmiş kuluçkaya.
    Not: Konsantrasyon ve kuluçka zamanı ayrı ayrı her antikor için seçilmelidir.
  7. Slaytlar ilişkisiz antikor kaldırmak için PBS ile 5 min için üç kez yıkayın.
  8. Bölümler ile önceden konjuge bir ikincil antikor ikincil antikor Dilüent seyreltilmiş kuluçkaya.
    Not: Konsantrasyon ve kuluçka zamanı ayrı ayrı her antikor için seçilmelidir.
  9. İlişkisiz antikorlar üç kez 5 min için slaytlar yıkayarak çıkarın.
  10. 4', 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) kullanarak 15dk için hücre çekirdeği counterstain; son DAPI konsantrasyon-meli var olmak 350 nM.
  11. Slaytlar ayirt çözüm montaj uyumlu bağlayın.
    Not: Yanlış montaj çözümü kullanarak Floresans sinyal belirsiz.
  12. Slaytlar floresan mikroskop ile görüntüleyin. 40 x büyütme objektif 1.3 sayısal bir diyafram ile kullanın.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Balon denudation MH geliştirme farelerde çalışmaya uygun bir modeldir. Hayvanlar cerrahiden de yeniden elde etmek ve mükemmel fiziksel durumu sonrası ameliyat göster. Bu model ile % 3 ölüm oranı cerrahi işlem nedeniyle daha az 50 farelerde kurduk. Şekil 1B -C temel cerrahi adımı göster. Bir cilt kesi sonra linea alba, aorta abdominalistanımlamak. Mikrocerrahi kelepçeler (şekil 1B) yerleştirin. Aort ortasında küçük bir kesi yapmak, gemi ve retrograd kan akımı (şekil 1 c) yönünü karşı slayt içine bir balon kateter ayarlayın. Şişirilmiş balon hareketin intima ve aynı zamanda, overdistension gemi kazıma için yol açar. Aort kesi ile tek dikiş kapalı olacaktır. Aortik nabız klemple kesi görünür olmalıdır.

MH kademeli greft zaman içinde gelişir. Histolojik Masson's ile boyama trichrome myointima oluşumu içinde iç elastik lamina (şekil 2A) gösterir. Myointimal lezyonlar özellikle hücresel bileşenleri olumlu SM22 ve bazı hücre dışı matriks bileşenler (şekil 2B) oluşuyordu. Myointimal hücreleri daha fazla ayirt boyama tarafından değerlendirilir. Myointima ana kalabalıkta düz kas (düz kas aktin (SMA) pozitif) hücreleri ve (myofibroblasts fibroblast harekete geçirmek protein (FAP) pozitif) hücreleri (şekil 2B) oluşur.

Figure 1
Şekil 1. Kateter ve onun implantasyon şemaları. (A) kateterin detaylı haritası açılıyor. Distal port, balon, hızlı bağlantı noktası (RX-port), embolisinin, RX-noktasına tek Lümen çift Lümen RX-bağlantı noktasından balon, hub, balon enflasyon bağlantı noktası. (B) cerrahi işlem şematik gösterimi. Aorta abdominalis kan akışının iki mikro kelepçeler ile durdurulur ve küçük bir kesi yapılır. C. şişirilmiş kateter aorta abdominalisiçinde. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 2
Şekil 2. Myointima oluşumu iç elastik lamina içinde. (A) aortas hasat Denuded fare parafin gömülü ve temsili bir kesit trichrome boyama gösterilir. (B) Çift Kişilik ayirt balon yalanlarım aortae boyama gösterilir. Üst satır SM22 ve kollajen III için lekeli myointimal lezyonlar gösteriyor. Alt satırda, damarları SMA ve FAP lekeli. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Bu yazı myointimal Hiperplazi gelişimini incelemek için bir fare modeli gösterir ve altta yatan patolojik süreçlerin araştırma ve test yeni ilaçlar veya tedavi olanakları sağlar.

Bu iletişim kuralı en kritik aort denudation adımdır. Aşırı denudation anevrizma oluşumu ve modeli başarısızlık için yol açacak gibi özel bakım bu adımı sırasında ödenmesi gerekmektedir. Öte yandan, denudation yeterince gerçekleştirilirse, çok az myointima geliştirecek. Bu nedenle, denudation adım yoğunluğunu sonucu ve hayvan bu modelin başarısı için çok önemlidir.

Cerrahi müdahale ile ilgili olarak, bu gemi iki duvar gemi a_ılabilinirse erken başarısızlıkla sonuçlanabilir dikiş ayarlayarak deldi değil önemlidir. Hangi biz fareler18abdominal aort damar darlığı indüklenen bir fare modeli daha önce anlatmıştık. Ancak, bu ve çoğu diğer modeller sadece çok az miktarda doku analizi için sağlar. Bu yöntemin bir avantajı (~ 1 cm gemi kesim) alınan doku nispeten büyük miktarda var. Bir tek damar grefti böylece birden çok bölüme ayrılmıştır ve etkili deneysel hayvan gerekli sayısını azaltarak çeşitli analizler için kullanılır.

Ayrıca, uygun knock-out hayvanlar myointima Hiperplazi farklı hastalık koşullarında gelişimi çalışma için kullanılabilir. Genetik arka planlar da çeşitli ayarları veya bazı genler etkisini myointimal Hiperplazi mekanizmaları anlamak için bu hayvan modeli ile kombine edilebilir.

Özetle, burada açıklanan model tekrarlanabilir, gerçekleştirmek, kolay ve hızlı ve güvenilir bir şekilde kurulabilir. Başarıyla test edilmiş tedavi seçenekleri bu modelde daha da büyük hayvan onaylanabilir19modelleri.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Yazarlar ifşa gerek yok.

Acknowledgments

Yazarlar Christiane Pahrmann onun teknik yardım için teşekkür ederiz.

D.W. Max Kade Vakfı tarafından desteklenmiştir. Alınan T.D. hibe başka Kröner Fondation (2012_EKES.04) ve Deutsche Forschungsgemeinschaft (DE2133/2-1_. S. S. araştırma hibe Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG; aldı. SCHR992/3-1, SCHR992/4-1).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
10-0 Ethilon suture Ethicon 2814G
3 mL Syringe BD Medical 309658
37% HCl Sigma-Aldrich H1758
5-0 prolene suture Ethicon EH7229H
6-0 prolene suture Ethicon 8706H
Acid Fuchsin Sigma-Aldrich F8129-25G Trichrome staining
Antigen retrieval solution Dako S1699
Azophloxin Waldeck 1B-103 Trichrome staining
Bepanthen Eye and Nose ointment Bayer 1578675 Eye ointment
Betadine Solution Betadine Purdue Pharma NDC:67618-152
C57BL/6J Charles River Stock number 000664
Clamp applicator Fine Science Tools 18056-14 JAW DIMS: 4 x 0.75 mm LENGTH: 13 mm
Collagen 3 abcam ab7778 Antibody
DAPI Thermo Fischer D1306
Donkey anti-Goat IgG AF555 Invitrogen A21432 Secondary antibody
Donkey anti-Rabbit IgG AF488 Invitrogen A21206 Secondary antibody
Donkey anti-Rabbit IgG AF488 Invitrogen A11055 Secondary antibody
Donkey anti-Rabbit IgG AF555 Invitrogen A31572 Secondary antibody
Ethanol 70% Th. Geyer 2270
Ethanol 96% Th. Geyer 2295
Ethanol absolute Th. Geyer 2246
FAP abcam ab28246 Antibody
Forceps fine Fine Science Tools 11251-20
Forceps standard Fine Science Tools 11023-10
Glacial Acetic Acid Sigma-Aldrich 537020
Hair clipper WAHL 8786-451A ARCO SE
Heparin Rotexmedica PZN 3862340 25.000 I.E./mL
High temperature cautery kit Bovie 18010-00
Image-iT FX Signal Enhancer Invitrogen I36933 Blocking solution
Light Green SF Waldeck 1B-211 Trichrome staining
Microsurgical clamp Fine Science Tools 18055-04 Micro-Serrefine - 4mm
MINI TREK Coronary Dilatation Catheter 1.20 mm x 6 mm / Rapid-Exchange Abbott 1012268-06U
Molybdatophosphoric acid hydrate Merck 1.00532.0100 Trichrome staining
NaCl 0,9% B.Braun PZN 06063042 Art. Nr.: 3570160
Needle holder Fine Science Tools 12075-14
Novaminsulfon Ratiopharm PZN 03530402 Metamizole
Orange G Waldeck 1B-221 Trichrome staining
Paraffin Leica biosystems REF 39602004
PBS pH 7,4 Gibco 10010023
PFA 4% Electron Microscopy Sciences #157135S
Ponceau S solution Serva Electrophoresis 33427 Trichrome staining
Primary antibody diluent Dako S3022
Prolong Gold Mounting solution Thermo Fischer P36930 Mounting solution for immunofluorescence stained slides
Replaceable Fine Tip Bovie H101
Resorcin-Fuchsin Weigert Waldeck 2E-30 Trichrome staining
Rimadyl Pfizer 400684.00.00 Carprofen
Scissors Fine Science Tools 14028-10
Scissors Vannas-style Fine Science Tools 15000-03
Secondary antibody diluent Dako S0809
Fast acting Adhesive MINIS 3x1g UHU 45370 Cyanoacrylate
Slide Rack Ted Pella 21057
SM22 abcam ab10135 Antibody
SMA abcam ab21027 Antibody
Staining dish Ted Pella 21075
Surgical microscope Leica M651
Tabotamp fibrillar Ethicon 431962 Absorbable hemostat
Transpore Surgical Tape 3M 1527-1
U-100 Insulin syringe BD Medical 324825
Vessel Dilator Fine Science Tools 18603-14
Vitro-Clud Langenbrinck 04-0001
Weigerts iron hematoxylin Kit Merck 1.15973.0002 Trichrome staining
Xylene Th. Geyer 3410

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Kochanek, K. D., Xu, J., Murphy, S. L., Minino, A. M., Kung, H. C. Deaths: final data for 2009. Natl Vital Stat Rep. 60, (3), 1-116 (2011).
  2. Austin, G. E., Ratliff, N. B., Hollman, J., Tabei, S., Phillips, D. F. Intimal proliferation of smooth muscle cells as an explanation for recurrent coronary artery stenosis after percutaneous transluminal coronary angioplasty. J Am Coll Cardiol. 6, (2), 369-375 (1985).
  3. Greenwald, S. E., Berry, C. L. Improving vascular grafts: the importance of mechanical and haemodynamic properties. J Pathol. 190, (3), 292-299 (2000).
  4. Majesky, M. W., Schwartz, S. M. Smooth muscle diversity in arterial wound repair. Toxicol Pathol. 18, (4 Pt 1), 554-559 (1990).
  5. Owens, G. K. Regulation of differentiation of vascular smooth muscle cells. Physiol Rev. 75, (3), 487-517 (1995).
  6. Owens, G. K., Kumar, M. S., Wamhoff, B. R. Molecular regulation of vascular smooth muscle cell differentiation in development and disease. Physiol Rev. 84, (3), 767-801 (2004).
  7. Kleemann, R., Zadelaar, S., Kooistra, T. Cytokines and atherosclerosis: a comprehensive review of studies in mice. Cardiovasc Res. 79, (3), 360-376 (2008).
  8. Karas, S. P., et al. Coronary intimal proliferation after balloon injury and stenting in swine: an animal model of restenosis. J Am Coll Cardiol. 20, (2), 467-474 (1992).
  9. Ip, J. H., et al. The role of platelets, thrombin and hyperplasia in restenosis after coronary angioplasty. J Am Coll Cardiol. 17, (6 Suppl B), 77B-88B (1991).
  10. Mason, R. G., Read, M. S. Some species differences in fibrinolysis and blood coagulation. J Biomed Mater Res. 5, (1), 121-128 (1971).
  11. Lafont, A., Faxon, D. Why do animal models of post-angioplasty restenosis sometimes poorly predict the outcome of clinical trials? Cardiovasc Res. 39, (1), 50-59 (1998).
  12. Matter, C. M., et al. Increased balloon-induced inflammation, proliferation, and neointima formation in apolipoprotein E (ApoE) knockout mice. Stroke. 37, (10), 2625-2632 (2006).
  13. Lindner, V., Fingerle, J., Reidy, M. A. Mouse model of arterial injury. Circ Res. 73, (5), 792-796 (1993).
  14. Simon, D. I., et al. Decreased neointimal formation in Mac-1(-/-) mice reveals a role for inflammation in vascular repair after angioplasty. J Clin Invest. 105, (3), 293-300 (2000).
  15. Sata, M., et al. A mouse model of vascular injury that induces rapid onset of medial cell apoptosis followed by reproducible neointimal hyperplasia. J Mol Cell Cardiol. 32, (11), 2097-2104 (2000).
  16. Moroi, M., et al. Interaction of genetic deficiency of endothelial nitric oxide, gender, and pregnancy in vascular response to injury in mice. J Clin Invest. 101, (6), 1225-1232 (1998).
  17. Painter, T. A. Myointimal hyperplasia: pathogenesis and implications. 2. Animal injury models and mechanical factors. Artif Organs. 15, (2), 103-118 (1991).
  18. Stubbendorff, M., et al. Inducing myointimal hyperplasia versus atherosclerosis in mice: an introduction of two valid models. J Vis Exp. (87), e51459 (2014).
  19. Deuse, T., et al. Dichloroacetate prevents restenosis in preclinical animal models of vessel injury. Nature. 509, (7502), 641-644 (2014).
Fare Abdominal aort Myointimal Hiperplazi ikna etmek için balon tabanlı yaralanma
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Tediashvili, G., Wang, D., Reichenspurner, H., Deuse, T., Schrepfer, S. Balloon-based Injury to Induce Myointimal Hyperplasia in the Mouse Abdominal Aorta. J. Vis. Exp. (132), e56477, doi:10.3791/56477 (2018).More

Tediashvili, G., Wang, D., Reichenspurner, H., Deuse, T., Schrepfer, S. Balloon-based Injury to Induce Myointimal Hyperplasia in the Mouse Abdominal Aorta. J. Vis. Exp. (132), e56477, doi:10.3791/56477 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
simple hit counter