यहाँ, हम आंशिक पित्त नलिका बंधाव को कुतर में जिगर की चोट और पुनर्जनन के एक शल्य चिकित्सा मॉडल के रूप में प्रस्तुत करते हैं ।
कुतर में, पूर्ण पित्त नलिका बंधाव (cBDL) आम पित्त नलिका के प्रतिरोधी cholestasis और पित्त नलिका प्रसार का अध्ययन करने के लिए एक स्थापित शल्य तकनीक है । हालांकि, दीर्घकालिक प्रयोगों से रुग्णता और मृत्युदर में वृद्धि हो सकती है । अंतर्निहित जिगर की बीमारी के साथ चयन माउस उपभेदों में, सार्थक तुलना भी जिगर की एक पालि के बंधाव के साथ किया जा सकता है, जो पशुओं के नुकसान और खर्च को कम कर सकते हैं । यहाँ, हम आंशिक पित्त नली बंधाव (pBDL) माउस में वर्णन, जिसमें केवल बाएँ यकृत पित्त नलिका ligated है, बाएँ पालि में पित्त रुकावट के कारण नहीं बल्कि शेष पालियों. सावधान microsurgical तकनीक के साथ, pBDL प्रयोगों लागत प्रभावी हो सकता है, के बाद से unligated पालि ligated पालियों के लिए एक आंतरिक नियंत्रण के रूप में कार्य करता है, जब एक ही जानवर में एक ही परिस्थितियों के अधीन । cBDL के विपरीत, पृथक शम-संचालित नियंत्रण समूह आवश्यक नहीं है । pBDL सीधे स्थानीयकृत बनाम cholestasis और अन्य बनाए गए पित्त घटकों के प्रणालीगत प्रभाव की तुलना करने के लिए बहुत उपयोगी है । pBDL भी दवाओं और सेल प्रवास से संबंधित तंत्र की जांच करने के लिए एक उपंयास विधि के रूप में reपर्पज किया जा सकता है ।
तीव्र जिगर की चोट और आंशिक hepatectomy या आम पित्त वाहिनी बंधाव (cBDL) के रूप में मरम्मत के सर्जिकल मॉडल, चूहे में दशकों के लिए इस्तेमाल किया गया है जिगर पुनर्जनन और pathobiology1,2का अध्ययन करने के लिए । cBDL में, आम पित्त नलिका (जो जिगर में उत्पादित सभी पित्त नालियों) ligated है, प्रतिरोधी cholestasis, सूजन में जिसके परिणामस्वरूप, और फाइब्रोसिस पहले 2-3 सप्ताह सर्जरी के बाद में,3सिरोसिस के लिए अंतिम प्रगति के साथ । पित्त वाहिनी प्रसार, transdifferentiation, और निवासी जिगर जनक कोशिकाओं की प्रेरण भी cBDL4,5की विशेषताएं हैं । हालांकि cBDL elucidates प्रतिरोधी cholangiopathy, जो अच्छी तरह से कर रहे है reproducible परिणामों के साथ जंगली प्रकार चूहों में विशेषता और सामांय जिगर के साथ उन उपभेदों में विशिष्ट तंत्र6,7,8, प्रक्रिया तकनीकी रूप से जिगर की बीमारियों के कुछ ट्रांसजेनिक माउस मॉडल में मांग कर सकते हैं, उच्च रुग्णता और समय के साथ पित्त रुकावट की मृत्यु के कारण प्रत्याशित से अधिक जानवरों की आवश्यकता होती है । इस तकनीक अंतर्निहित जिगर की बीमारी है, जो अंयथा cBDL निंनलिखित लंबे समय तक पाठ्यक्रम प्रयोगों के तनाव को सहन नहीं हो सकता है के साथ ट्रांसजेनिक चूहों का अध्ययन करने के लिए भी फायदेमंद है ।
pBDL इन चुनौतियों में से कुछ को दूर करने में मदद करने के लिए एक उचित विकल्प प्रदान कर सकते हैं । प्रारंभिक pBDL में अध्ययन जंगली प्रकार के चूहों में स्थानीय रूप से अभिनय और सूजन के प्रणालीगत मध्यस्थों भेद करने के उद्देश्य से9। pBDL में, आम पित्त नलिका के ऊपर सही और बाएँ यकृत पित्त नलिकाओं का मुख्य पित्त संगम ध्यान से hilum में कल्पना की है, और केवल बाईं यकृत पित्त नलिका ligated एक स्थानीय प्रतिरोधी cholestasis उत्पन्न करने के लिए है । pBDL cBDL के लिए कई फायदे प्रदान करता है । pBDL में, unligated सही पालि ligated छोड़ पालि के लिए एक हूबहू मिलान आंतरिक नियंत्रण के रूप में कार्य करता है, एक ही प्रणालीगत प्रभाव के अधीन है, जैसे पोषण की स्थिति या परिसंचारी कारकों के रूप में । हालांकि प्रणालीगत समर्थक भड़काऊ मध्यस्थों मौजूद थे, Osawa एट अल । unligated पालियों में कम फाइब्रोसिस और परिगलन मनाया, लेकिन भड़काऊ कोशिकाओं को बदलने और वृद्धि कारक-β अभिव्यक्ति ligated पालि9में वृद्धि हुई है ।
हाल ही में, pBDL बनाए रखा पित्त10के जिगर parenchymal प्रभाव का अध्ययन करने के लिए फिर से परिभाषित किया गया है । आंतरिक नियंत्रण (unligated “अन्तर्वासना”) और प्रयोगात्मक समूहों के लिए एक ही जानवर का उपयोग करके, pBDL प्रभावी ढंग से प्रयोग प्रति की जरूरत है, जो बारी में और अधिक लागत प्रभावी है जानवरों की संख्या आधा । चूहे pBDL के प्रभाव को ज्यादा बेहतर ढंग से सहन करते हैं, ताकि आदर्श समय पाठ्यक्रम प्रयोग (≥ 2 सप्ताह) को ligated पालि में प्राप्त किया जा सके. सबसे महत्वपूर्ण बात, pBDL प्रतिरोधी cholestasis के प्रत्यक्ष intrahepatic प्रभाव भेद कर सकते है और ligated पालि में बनाए रखा पित्त घटकों, unligated नियंत्रण पालि की तुलना में । कुल मिलाकर, pBDL जिगर में स्थानीय cholestasis के पालि विशिष्ट प्रभावों का अध्ययन करने के लिए एक आकर्षक विधि है ।
हालांकि cBDL प्रतिरोधी cholestasis के लिए सबसे आम प्रयोगात्मक तकनीक है, यह कुतर में कई चुनौतियों मौजूद कर सकते हैं । एक समापन बिंदु प्राप्त करने के लिए आवश्यक पोस्ट-ऑपरेटिव दिनों की संख्या के आधार पर, जानवरों महत…
The authors have nothing to disclose.
डॉ खान NIH/niched K12HD052892, अल्फा-1 फाउंडेशन, Hillman फाउंडेशन, और पिट्सबर्ग जिगर अनुसंधान केंद्र से अनुदान सहायता स्वीकार करता है । Dr. Michalopoulos NIH/NIDDK P01DK096990 से अनुदान सहायता स्वीकार करता है । हम ऐनी ओआरआर के उत्कृष्ट और उदार तकनीकी सहायता की सराहना करते हैं । हम डॉ डेविड ए के भी आभारी हैं की प्रत्यारोपण के लिए पहुँच प्रदान करने के लिए पकडने के लिए Microsurgery लैब/
Microscope-Leica Wild M650, 6–40× magnification | Leica Microsystems | n/a | |
Tec 3 isoflurane funnel fill vaporizer | General Anesthetic Services | n/a | |
Stevens Tenotomy Scissors | Accurate Surgical & Scientific Instruments Corporation | ASSI.9193 | |
Adson Forceps | Fine science tools | 11006-12 | |
Mosquito classic delicate hemostatic forceps | Codman | 30-4472 | |
Micro-retractor | Murdock; Roboz Surgical Instrument | RS-6550 | |
Nonwoven gauze sponges | Fisherband | 870-PC-DBL | |
Puritan 6” Small Cotton Swab w/Wooden Handle | Puritan Medical Products Company | 868-WCS | |
Dumont SS Forceps – Standard Tips/Straight/Inox/13.5cm | Fine science tools | 11203-23 | |
Dumont SS Forceps – Standard Tips/Angled 45°/Inox/13.5cm | Fine science tools | 11203-25 | |
Vannas Spring Scissors – 3mm Cutting Edge | Fine science tools | 15000-00 | |
Microneedle holder | Aesculap Surgical Instruments | FD231R | |
Micro AROSuture, sterile 10-0 nylon suture, 70 µm, TAP points | AROSurgical Instruments Corporation | T4A10N07 | |
4-0 Vicryl | Ethicon | J662H | |
5-ml Syringe | BD | 309646 | |
Falcon tissue culture dish, 60 × 15 mm | Corning | 353002 | |
Isoflurane, United States Pharmacopeia (USP) liquid for inhalation, 250 ml | Piramal Healthcare | NDC 66794-017-25 | |
Buprenex injectable (buprenorphine hydrochloride) | Reckitt Benckiser Pharmaceuticals | NDC 12496-0757-1 | |
Cefazolin for injection , USP | APP Pharmaceuticals | NDC 63323-238-61 | |
PVP scrub solution (povidone–iodine 7.5%) | Medline | NDC 12496-0757-1 | |
70% Ethanol | Decon Labs | 2716 | |
Phosphate Buffered Saline Without Calcium or Magnesium | LONZA | 17-516F | |
Sirius Red | Sigma | 365548 | |
Hematolxylin | Fisher (Richard-Allan Scientific) | 22-050-111 (7211) | |
Eosin | Anatech (Fisher) | 832 (NC9686037) | |
Formalin | Fisher | SF100-20 |