Summary
交感神経と心血管中枢神経系 (CNS) の操作レスポンスを測定する方法、神経科学を進めるために重要です。このプロトコルは、測定と腎交感神経活動 (RSNA) 麻酔下ラット (非生存) の急性変化の定量科学者を支援するために開発されました。
Abstract
腎交感神経活動 (RSNA) および平均動脈圧は、心血管疾患や自律神経研究の重要なパラメーターしかし、限られた資源の科学者を測定し、これらの変数を分析するための技法で演出があります。このプロトコルは、RSNA と麻酔下ラットにおける平均動脈圧を測定する方法を説明します。プロトコルには、中枢神経系 (CNS) を操作する RSNA 録音中に脳にアクセスする方法も含まれています。RSNA 録音テクニックは、光遺伝学的、薬理学的、または中枢神経系の電気的刺激。アプローチは、捜査官は中枢神経核と解剖学的相関する非生存実験で短期 (h 分) 自律神経応答を測定する場合に役立ちます。アプローチは、RSNA のラットの慢性 (サバイバル) 録音を取得するためのものではありません。RSNA、平均放電整流、RSNA と平均動脈圧は、定量化を行い, さらにパラメトリック検定を用いたします。静脈アクセス、telemetrically、平均動脈圧を記録、将来の組織学的解析のための脳の固定を取得する方法は、資料に記載も。
Introduction
心血管系の自律神経の制御に関する前臨床発見は、高血圧、心不全、慢性腎臓病などの疾患を管理するための作戦を知らせます。高血圧 (BP)1に貢献する交感神経と減少の迷走神経心臓の緊張の過活動。慢性的な高架腎交感神経カテコールアミン分泌を強化し、心血管・腎システム2,3有害な結果と、腎血流量を減少させます。自律神経機能障害につながる神経生物学の経路を定義するには、齧歯動物の研究、中枢神経系 (CNS) ニューロンが交感神経のパラメーターを調整する方法を決定するため重要です。このプロトコルの目的は腎交感神経活動 (RSNA) 測定に関する技術情報を提供するためと BP と麻酔下ラットの中枢神経系の操作への応答に急性の交感神経変化の定量化手法を概説します。
科学者がプローブ中枢神経系の薬理学的、電気的、または麻酔ラットの特定の核関数を決定するに生じる急性 (非生存) RSNA 測定 (h に永続的な分) が便利です。これらのメソッドは、孤束核、中脳中心灰などの構造を使用して脚蓋と腹吻側の延髄を行った交感神経パラメーター4を調節する神経生物学の経路を定義するには 5,6,7。このアプローチは調査する中枢神経系のターゲットを識別するために重要な自律神経機能障害8,9慢性モデルでさらに。これらの実験を完了するには、研究室には、はんだごて、手術顕微鏡、脳定位固定装置フレーム、電極アンプ、オーディオ モニターが必要です。電気的なノイズに寄与する要因研究室で現在、によって手術/記録領域は RSNA 記録における電気ノイズを低減するファラデーおり/接地ストラップを必要があります。脳解析がティッシュの固定を必要とする場合、灌流ポンプとヒューム フードが必要です。データがデジタル化することができを使用して複数生理ソフトウェア/データ集録 (アナログ デジタル コンバーター) 単位4,5、異なる解析オプションとテレメトリ信号を組み込むための互換性を記録.
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Protocol
記載されているすべてのメソッドは、イリノイ大学シカゴ校制度の動物ケア委員会によって承認されました。
1. バイポーラ RSNA 電極を作成します。
- 電極を作成するためには、約 18 mm 長い各ステンレス鋼ワイヤの 2 枚を切ります。約 15 の mm 長いチューブ ポリエチレン (PE-50) の 1 つの部分をカットします。ワイヤの両端から突き出たチューブにワイヤーの両方の部分をフィードします。
- 配線上の端から、絶縁を削除します。剥ぎ 2-3 mm を残して線をトリムします。1 つの端に露出配線男性ピンを圧着します。ワイヤーにしっかりとピンをはんだ付け、コネクタ ストリップ内のピンの保護エポキシ樹脂との接続をカバーします。
注: はんだ付けを回避する別の方法、クイック接続/リリース ワニ口クリップを使用します。 - 電極の反対側の端に露出されたワイヤーの 2-3 mm を残して、ワイヤーの端から断熱材を削除します。小さな"V"形の絶縁ワイヤーのフックを作成する線のこの部分を曲げます。
注: これは腎交感神経接触する電極の部分です。流体が管に入るを防ぐためにこの最後をシールすることが重要です。シリコーンやエポキシ効果的に使用できます。
2. 麻酔の管理し、手術のサイトの準備
- 男性・ スプレーグ氏系ラット (年齢 9-11 週間、150 から 400 グラムの重量を量る) に麻酔を管理します。管理ペントバルビ タール ナトリウム 50 mg/kg 腹腔内 (IP) 注入を介して。手術中に麻酔の安定した平面を評価するためにすべての 15 分、麻酔の線量再必要に応じてつま先ピンチ反射を確認します。
注: ペントバルビ タール ナトリウム (ネンブタール) は、麻酔の持続的な平面を RSNA4,5,6の変調に干渉することがなく達成するために従来の研究で使用されました。このプロトコルは、生存非外科があるのでない回復/による術中術後モニター期間です。 - 制度上のアニマル ・ ケアのガイドラインによると手術部位の準備 (すなわち。、ラットの腹部、背中、頭を剃る; 10% ポビドン ヨード液と皮膚を清潔; 目の潤滑と加熱パッドのラットを配置)。実験中に 37 ° C で体温を維持します。
3. (静脈アクセス) の大腿静脈を cannulate します。
- ヘパリンを 0.9% 生理食塩水 (20 単位/ml を達成) に追加します。22 G 針を通してとヘパリン生食液 1 mL 注射器を入力します。針とソリューションで塗りチューブ PE 50 チューブの 15 cm に接続します。
- 仰向けで横たわるラット、鼠径部を 2 cm の横切開を作成します。綿棒を使用して、大腿静脈と動脈を公開する結合組織を解剖します。切開部を開いたまま、どちらかはシングル フック弾性テープな絹で手術野を確保手術滞在または小さな止血剤を使用を適用します。
- カテーテル シースイントロデューサー10として 90 ° の角度で 22 G 針の先端を曲げるに止血剤を使用します。
- 顕微鏡下で血管を可視化します。静脈と動脈のカーブタイプ鉗子を使用してを優しきます。静脈の下に場所 2 つ 12 cm 5-0 絹糸縫合 (1 つの遠位と近位);動脈の下に同様に縫合線を配置します。
- 静脈を閉塞し遠位部 (下) 縫合糸を結ぶ絹テープまたは小さな止血剤のいずれかを使用して手術フィールドにこの縫合糸の端を固定します。ピンと張った、静脈を軽く引いてではなく船が涙がそんなに力します。外科医の利き手に垂直静脈を置きます。
- 簡単に静脈を閉塞し近位縫合緩いオーバーハンド半分の結び目を使用します。繊細な止血鉗子でクランプ血流を閉塞しこの縫合が優しく。非支配的な手に曲がった先端で 22 G 針を保持します。支配的な手を使って鉗子でチューブをクラスプします。
- 静脈カテーテル シースイントロデューサー (ステップ 3.3) で小さな穴をあけるし、船の (とヘパリン生食液充填済み) PE 50 管に挿入船オープンの開口部を維持して容器10にカテーテルの先端の位置で支援するために、曲がった針を使用します。
- 近位部の縫合を解放し、ゆっくり静脈; にヘパリン生理食塩水 0.2 mL をフラッシュカテーテルを進めます。適切な配置を確保するため静脈から血液の戻り値をチェックします。近位の結び目を完了し、遠位部の縫合のネクタイ、保護チューブ、静脈内。
- 補足的な麻酔や薬を管理するため、採血の実験中に静脈アクセスを使用します。3 ウェイ コネクタを組み込む通常静脈内注入や採血が必要になります。麻酔を滴定する有害なつま先ピンチ反射 15 分毎を確認します。
4. 平均動脈圧を監視するため、大腿動脈の cannulate します。
- 顕微鏡下で動脈を視覚化します。中心静脈カテーテル留置に使用されるメソッドと同様、遠位部の縫合、動脈を閉塞し (ステップ 3.4) を結ぶこの縫合糸絹テープと手術野の端を確保し、動脈の外科医の支配的な手に垂直の位置します。
- 動脈アクセス圧力トランスデューサー/輸液システムを使用している場合
- 圧力トランスデューサーを 500 mL 0.9% 生理食塩水バッグに接続します。すべてのバブルを削除する生理食塩水でチューブをフラッシュし、システムを加圧する圧力インデューサ袋の中に袋を配置します。
- ステップ 3.1 に従って、22 G の針を通してとヘパリン生食液 1 mL 注射器を記入し、PE 50 の 15 cm を (ヘパリン生理食塩水でフラッシュ チューブ) 針に接続します。
- 簡単に動脈を閉塞し近位縫合緩い半分の結び目を使用します。非支配的な手でカテーテル シースイントロデューサー (ステップ 3.3) を開催します。利き手で容器カニュレーション鉗子で PE 50 の先端を保持します。ベントの 22 G 針を動脈に穴をあけるし、血管にカニューレを挿入します。
- 動脈とあらかじめ可能な限りカテーテルに近位縫合、優しくフラッシュ ヘパリン生理食塩水 0.2 mL をリリースします。動脈血の適切な配置を確保するために戻り値をチェックします。近位の結び目を完了し、遠位部の縫合のネクタイ、保護チューブ、動脈内。動脈ラインを圧トランスデューサーに接続します。
注: チューブの遠位部分は、静脈ラインを確保するラットの後肢にテーピングできます。イェスペルセンらによって血管穿刺する方法を説明します;。11縫合する保護管とのアプローチよりも接着剤ではなく、切開を広めるためリトラクターを使用してによって異なります、プロトコルでは、曲がった針イントロデューサは含まれません。
- テレメトリを用いた場合、動脈アクセス
- 動脈カニュレーション前に、高倍率下で圧カテーテルを検査します。カテーテルの泡/残骸がない、そのまま半月板液体満たされた間 (近位) を確保してゲル満たされる (遠位) コンポーネント。各注入前にカテーテルの遠位端にゲルを補充します。磁石を用いた送信機をオンに完璧な配置に耐える手術中に BP を監視します。
- 簡単に大腿動脈を閉塞し近位縫合緩いオーバーハンド半分の結び目を使用します。非支配的な手でカテーテル シースイントロデューサー (ステップ 3.3) を保持します。先端からジェルを変位を避けるために血管カニュレーション鉗子でテレメトリ ユニットのカニューレの先端を保持します。
- ベントの 22 G 針を動脈に穴をあける、カニューレを血管カニュレーション鉗子を使用して先端からゲルを変位を避けるために動脈に挿入します。可能な限りのカニューレを進めます。近位および遠位部の縫合の関係を使用して、圧力カテーテルを固定します。
- 側腹部の切開に隣接する内テレメトリ インプラント体を押し込むし、切削針 4-0 ナイロン縫合糸を使用してこの切開を閉じる。バッテリ寿命を節約するために録画期間の結論に磁石を用いたテレメトリー デバイスをオフに。
5. 脳にアクセスする定位手術フレームの位置、ラット
- 優しく定位手術フレームに腹臥位にラットを移動します。
- 耳バー間ラットを置き、ラムダと前の高さを均等に切歯バーを調整します。ラット系統、重量、および中枢神経系のターゲットの場所に依存可能性があります位置決めします。
- 頭皮の正中線から 2 cm rostrocaudal メス切開を確認します。綿棒を使用して、しっかりと頭蓋骨表面から結合組織を削除します。前、ラムダと正中縫合糸の可視化を支援する頭蓋骨に過酸化水素を適用します。
- ラットの脳のアトラスを使用すると、ガイドはターゲット12ぎざぎざの穴切りをドリルに、頭蓋骨を通して電極アクセスのサイズ。
6. 腎交感神経を分離します。
- 10 X 前置増幅器および電極アンプ線 RSNA 電極 (手順 1.1 1.3) に接続します。
- 後腹膜切開前に、または後、ラットの脳定位固定装置のフレームで保護されて腎神経を分離します。ラットは、固定フレームは、RSNA 電極を配置します。4-5 cm 尾側方向、背骨の少し外側で肋骨の下から伸びるメス切開を確認します。ブラントは、傍脊柱筋群を視覚化する切開を解剖します。
- はさみを使用して、脂肪が筋肉を満たしている rostrocaudal、非常に表面的な 1-2 cm の切開を行います。綿棒を使用すると、腎臓を視覚化する筋肉から脂肪を広めます。腹膜腔を入力することが重要です。
- リトラクターを使用して、腹部大動脈、腎動脈を視覚化する傍脊柱筋群から腎臓を優しくします。腎神経の損傷を避けるために過度に血管を伸ばすしないでください。2"× 2" 綿ガーゼのパッドの使用は傷害から腎臓を守るために生理食塩水に浸した。
- 高倍率下切開ポケット腎神経を識別します。神経束は、大動脈と腎動脈で形成される直角に最も簡単に表示されます。腎神経密接に大動脈から腎臓に腎動脈に従います。
- 記録電極を配置する神経束のセグメントを選択します。優しくミクロ解剖ピンセットを使用して周囲の組織/血管から神経線維を解剖します。
- ホルダーにワイヤー RSNA 電極を保護 (e.g。、ワニ口クリップ、サポート スタンドに接続されている)。電極を神経セグメントのレベルを下げます。神経フックを使用すると、神経をストレッチすることがなく電極上に腎神経の部分がフワリします。
注: 神経は神経に並列非絶縁ワイヤーのフックの形をした両方の"V"の中休むべきであります。電極線は必要がありますその他の組織、血液やリンパ液を触れないでください。 - ドライになってから露出の腎交感神経活動を防ぐために鉱物油を使用して切開をご記入ください。切開、ファラデーケージの中に接続されている他の皮膚に一端接地クリップを使用します。
- 高と低域の (10 Hz と 3 kHz) のフィルタ リングを用いた増幅器に信号を直接します。10 k. Include、RSNA の破裂のパターンを評価するオーディオ モニター最大ゲインを調整します。2,000-10,000 Hz4,5,6,7,8までのサンプリング レートを使用します。CNS 操作高速/簡単な交感神経反応を原因とする仮説がある場合は、増加のサンプリング レートを使用します。
7. レコード データ
- 静脈内投与 (0.1 mL) の 10 μ G/ml フェニレフリンまたは生理食塩水 1 mL のボーラス注入圧受容器反射を想起させるによって RSNA の録音の品質を評価します。図 1に示すように、注入する必要があります BP を増やすし、RSNA を阻害します。60-80 mmHg の平均動脈圧の増加は、腎 sympathoinhibition4,13,14十分です。
- 必要に応じて信号を改善するために電極の位置を調整します。神経はフックが電極と接触していない場合や、任意の組織、血液、あるいはリンパ液がワイヤーと接触して、再配置が必要です。
注: 再配置のための必要性は神経放電の聴覚の特性に基づいています。- 心臓のサイクルでは、RSNA のバーストが周期的に行われていないと、録画に支障がある場合は、再配置電極が慎重に。
- 呼吸運動も、RSNA の録音の品質に影響を与える、ゆっくり、筋肉の動きを中断しない電極呼吸時に所定の位置に電極を移動することによって信号を向上します。
- クリア信号を取得すると、鉱物オイルを撤回し切開のポケットに神経/電極接続をカバーするシリカゲルに適用場所の RSNA 電極を保護します。ゲルが完全に設定前にネズミを移動しないでください。
- RSNA を継続的に記録しながら中枢神経系の処理のプロトコルを実行し、動脈圧を意味します。脳幹を操作するマイクロインジェクター/パルサーを使用すると、このデバイスから論理信号が中枢神経系の操作のタイミングを文書化する RSNA/BP の録音に導入できます。
- 実験が完了したら、粉砕シリカゲルと脊髄筋と記録電極に近位の神経によって騒音レベルを決定します。RSNA4,5,6に対する「ゼロ」値のレコードの少なくとも 30 秒。定量化のノイズのための代替方法としてアトロピン、ヘキサメト、chlorisondamine、または pentolinium 酒石酸8,15,16,などの短時間作用神経節ブロックを管理します。17。
- 慎重に RSNA 電極、ワイヤ電極からシリカゲルの痕跡を取り外します。再利用のため電極を保存します。テレメトリ送信機の電源を切り、カテーテルの先端を損傷しないように注意を取って、それを削除します。
8. 安楽死 (Transcardiac 潅流)
- 注入色素や蛍光色素、電解病変を作成する、または c-fos 発現の検出では、中枢神経系の操作の場所を識別します。
- 脳解析固定が必要になります、transcardiac 潅流ラットに準備します。ラットの深く麻酔を確実につま先ピンチ反射を評価します。必要な場合は、補足的な麻酔を提供します。ヒューム フードのパラホルムアルデヒド固定液の transcardiac 血流を実行します。
注意: 熱心な皮膚/眼刺激。 - 灌流ポンプ、0.9% 食塩を総理にチューブを挿入します。
- 皮膚と胸郭のすぐ下にある腹部壁を通して 5-6 cm の横切開し、胸腔内を開きます。慎重に肝臓を横隔膜から区切ります。湾曲した無愛想なはさみを使って横隔膜で小切開を行います。左心室に直接ヘパリンの 0.1 mL を注入します。
- いずれかの心臓に貫通して (この手順のためによく動作しますステンレス強制経口投与針) 左心室に灌流針を渡すまたは小切開を切断することによって鋭いはさみを使用し、強制経口投与を渡すことを介して針の先端が透けてので、大動脈の壁 (が大動脈に到達する必要があります)。場所で針を固定するのに手術や電気クリップを使用します。
- 輸液ポンプを使用すると、0.9% 生理食塩水入り (常温) を管理します。すぐに生理食塩水の洗浄のための出口を作成する右房内 2 〜 3 mm の切開を作成します。下行大動脈を切断しないでください。約 400 mL の輸液、淡黄色に赤色/茶色から肝変化色まで生理食塩水洗浄を続ける以上 2-3 分。
- ポンプを停止します。定着剤に至るを切り替える (e.g、10% ホルマリン、4% パラホルムアルデヒド);。400 mL を吹き込む 2-3 分以上脳を削除し、少なくとも 3 日間、または脳が沈むまで 30% スクロース (ショ糖 0.1 M リン酸緩衝生理食塩水 100 mL に溶解し 30 mL) に組織を転送する前に 4 ° C で一晩固定液に試料を保存、18をセクショニング クライオ前に、に対する凍害保護作用のためです。
9. データを分析します。
- 全波は絶対的な値を取得する生の RSNA を是正します。波は、raw ノイズ信号の 10 s セグメントを是正します。低い信号対雑音比の影響を受けた研究を除外することが重要です。RSNA の定量化の研究では、捜査官は、信号雑音比を 2:1 6:1 に17,19,20を超えるなど事前条件を適用されます。
- 平均非重複セグメント (μ V) の RSNA を整流し、ノイズ推定値 (μ V) を減算を計算します。実験の目的に応じて捜査官 10 などの間隔を選択可能性があります s (図 1) または 1, 計算の平均を計算する意味する生理学的なソフトウェアで波形解析オプションを使用して、スプレッドシートにデータをエクスポート時間間隔を選択します。
- 異なる動物間で正常化のベースラインからの変化率の詳細な分析値を表現します。パラメトリック統計を使用すると、グループの比較を行います。
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Representative Results
図 1は、ネンブタール麻酔下のラットからサンプルの RSNA および BP の録音を示しています。平均動脈圧が増加し、圧受容器反射と過渡の sympathoinhibition4,6を呼び起こすフェニレフリンの静脈注射が使用されました。RSNA を定量化するには、生の RSNA だった整流および非重複 10 s セグメントの平均ノイズ推定された各セグメントから差し引かれます。
図 1: RSNA およびフェニレフリン注入 IV への応答に BP 。(A) の生の RSNA は全波整流 (B);砕いた「ゼロ」を整流 RSNA ははめ込みCに示すように。(ノイズ) マイナス 10 秒平均の非重複を求めた (D)。反射を呼び起こす、フェニレフリン (1 μ g/mL) の 0.1 mL の静脈 (矢印) を注入しました。ボーラス投与は、BP と RSNA の一時的な抑制の急激な増加を誘発されます。この図は、Fink 午前、ディーン C、ピアノ氏、カーリー DW から適応されました。脚の蓋は、腎交感神経活動とネンブタール麻酔下のラットにおける心肺活動を制御します。PLoS 1 つ。2017 年12(11): e01879564。この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください。
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Discussion
RSNA を測定するための重要な手順が含まれます: (1) 傍脊柱筋から腎臓を分離するときに腎動脈と神経のストレッチと腎神経線維 (2) 慎重に解剖記録電極の神経セグメントを配置するときの回避周囲の組織/船から (3) 電極ワイヤーを確保する、組織、血液、またはリンパ液、および腎神経と神経電極ユニットをシリカゲルに鉱物油を適用することによって完全に乾くことから神経を防止 (4) 無料です。トラブルシューティングは、記録システムが適切に接地されていることを確認することが重要です。RSNA の明確なシグナルを得るためには、電極の位置を可視化とシリカゲルに埋め込む前に、生の RSNA 聴取しながら慎重に調整できます。いくつかの時間を持続させる実験のための中枢神経系の操作によって変調することができます RSNA 信号で手術結果が正常に完了します。
結果を解釈する際、調査官は平均動脈圧と RSNA に麻酔の影響を検討してください。このプロトコルは、バルビツ レート麻酔 (ペントバルビ タール ナトリウム)、平均動脈圧を減らすことができます自律応答21を変更を使用します。実験によって目的、その他の注射用製剤または (鼻の円錐形または気管) を介して吸入麻酔に使用される22があります。研究者は、ウレタン23とアルファ ・ クロラローズ24などの選択肢を検討すること。これらのエージェントは心血管反射神経の鈍化の影響がより少ないが、調査担当者に潜在的な健康被害をもたらすことができます。
このプロトコルで説明されているメソッド以外の代替アプローチを記録し、電極を作製するための他の所で採用されています。RSNA は、ステンレス鋼4,9、銀25、またはプラチナ26ワイヤを使用して記録できます。電極ワイヤ上に露出した神経セグメントを持ち上げることに加えて科学者たちは正常に相性 RSNA の中央両端カット腎交感神経26を記録しています。柔軟性は、(関西研の単位で測定) 線の引張力によって異なります。高い関西研ワイヤーより脆性であるが、その図形を保持柔軟性があり曲げて、繰り返しを壊れにくく低関西研ワイヤーです。RSNA の録音、曲げや録音の間に位置する簡単にワイヤを選択する重要です。ワイヤーは柔軟性が足りない、神経、下の位置にフックを作成することは困難であるが、余りに堅いことをしないでください。後者は、ストレッチや神経の損傷のリスクを増加させます。当研究室は、155 185 関西研ステンレス鋼線を使用しています。
RSNA の分析のための多くの方法があります。なく、バースト周波数4,26,27を定量化することで変更、RSNA を決定ことができます 10 秒記録セグメントの平均を定量化し、パーセントとしての違いを計算します。研究15,26のラット間でベースライン レベルと RSNA 応答の大きさが異なる場合、このアプローチは好まれるかもしれない。別のアプローチは、RSNA の信号の整流化(mV 単位) RSNA 振幅は時間の選択した期間合計 (e.g。、20 ms)15,26。インテグレーターは、低位相フィルターを適用し、時定数を超えるアクティビティのバースト時の平均放電振幅を提供します (e.g。、> 20 s)15,27。統合された信号は振幅と位相、RSNA を調べる際に役立ちますが、このアプローチは振動の変更に関する情報を提供しません。RSNA 振動を調査するとき、周波数領域及び時間領域法を適用されています。高速フーリエ変換 (FFT)、信号を正弦波振動に分類、それぞれ異なる振幅と位相20,26の RSNA の頻繁に使用されるアプローチです。FFT は、RSNA の低と高周波バーストを調べるため、RSNA 信号の呼吸と心臓の変調を勉強するための便利な方法です。
このプロトコルのメソッド、中枢神経核の機能的意義についての仮説を対処するため重要です。腎交感神経神経間直接通信中枢神経系、腎臓としたがって、RSNA に急性の変化が心血管の研究の重要な変数を表します。その腎 sympathoexcitation 病態と多くの病気の臨床プレゼンテーションに貢献を考慮した優先研究分野は、交感神経を制御する中枢神経機構を定義する (例えば.、慢性腎臓病、心臓障害、不整脈、糖尿病、閉塞性睡眠時無呼吸症候群)28,29。交感神経活動の間接測定 (e.g。、BP、心拍変動、カテコールアミン レベル)、常に中枢神経核の機能的意義に関する研究に適していません。したがって、RSNA の麻酔下ラットにおける平均動脈圧直接測定は機能的、解剖学的異常腎交感神経機能のソースを定義するための貴重なメソッドを表します。
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Disclosures
アン M. Fink データ科学国際顧客諮問委員会のメンバーであります。
Acknowledgments
本研究は、看護研究 (K99/R00NR014369) の国立研究所によって支えられました。
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Stainless steel wire | A-M Systems; Sequim, WA | 791000 | RSNA electrode |
| Polyethylene (PE-50) tubing | VWR; Radnor, PA | 63019-048 | RSNA electrode; vessel cannulation |
| Miniature pin connector | A-M Systems; Sequim, WA | 520200 | RSNA electrode |
| Crimping tool | Daniels Manufacturing Corp.; Orlando, FL | M22520 | RSNA electrode |
| Connector strip | Amphenol; Clinton Township, MI | 221-2653 | RSNA electrode |
| J-B Kwik Epoxy | J-B Weld, Sulphur Springs, TX | 8270 | RSNA electrode |
| Silicone | Permatex; Hartford, CT | 2222 | RSNA electrode |
| Heparin sodium; Injectable (10 mL vial, 1000 U/mL) | KV Veterinary Supply; David City, NE | P03466 | Venous line patency |
| Phenylephrine HCl; Injectable (1 mL vial; 10 mg/mL) | ACE Surgical Supply; Brockton, MA | 950-6312 | Testing renal sympathoinhibition |
| Single-hook elastic surgical stays | Harvard Apparatus; Holliston, MA | 72-2595 | Incision |
| Silk surgical tape | 3M, Minneapolis, MN | 1538-0 | Secure surgical stays |
| Needles, 20 G | Sigma-Aldrich; St. Louis, MO | Z192554-100EA | Vessel cannulation |
| Dumont #7 curved forceps | Fine Science Tools; Foster City, CA | 11274-20 | Vessel cannulation |
| 5-0 silk suture ties | Braintree Scientific; Braintree, MA | SUT-S 106 | Vessel cannulation |
| Delicate hemostatic forceps | Roboz Surgical Instrument Co.; Gaithersburg, MD | RS-7117 | Vessel cannulation and RSNA surgery |
| Crile Hemostatic forceps | Fine Science Tools; Foster City, CA | 13004-14 | Needle bending |
| Telemetry transmitter | Data Sciences International; Minneapolis, MN | PA-10 | Mean arterial pressure monitoring (telemetry) |
| Re-gel syringe | Data Sciences International; Minneapolis, MN | 276-0038-001 | Transmitter reuse (telemetry) |
| Disposable pressure transducer | Transpac; San Clemente, CA | MI-1224 | Mean arterial pressure monitoring |
| Clear-Cuff pressure infuser | MILA International Inc.; Florence, KY | 2281339 | Mean arterial pressure monitoring |
| Vessel cannulation forceps | Fine Science Tools; Foster City, CA | 00574-11 | Catheter insertion |
| Black monofilament nylon 4-0 suture on reverse cutting needle | McKesson Medical-Surgical; San Francisco, CA | S661GX | Secure telemetry transmitter |
| Telemetry receiver | Data Sciences International; Minneapolis, MN | RPC-1 | Mean arterial pressure monitoring (telemetry) |
| LabChart Pro (software), PowerLab (acquisition hardware) | AD Instruments; Colorado Springs, CO | ML846, MX2 matrix 2.0 (Compatible with Data Science International telemetry) | 3 options for software/acquisition hardware |
| SciWorks (software), DataWave (acquisition hardware) | DataWave Technologies, Loveland, CO | N/A | |
| Spike 2 (software), Micro1401-3 | Cambridge Electronic Design Ltd., London UK | 1401-3 | |
| Micro-drill | Roboz Surgical Instrument Co.; Gaithersburg, MD | RS-6300 | CNS surgery |
| Stereotaxic surgery frame | Stoelting; Wood Dale, IL | 51600 | CNS surgery |
| Microelectrode amplifier with 10X pre-amplifier | A-M Systems; Sequim, WA | 1800-2 | RSNA recording |
| Retractors | Fine Science Tools; Foster City, CA | 17009-07 | RSNA surgery |
| Micro-dissecting tweezers | Fine Science Tools; Foster City, CA | 11251-10 | RSNA surgery |
| Micro-hook | Fine Science Tools; Foster City, CA | 10064-14 | RSNA surgery |
| Mineral oil | Fisher Scientific; Waltham, MA | 8042-47-5 | RSNA surgery |
| Audio monitor | A-M Systems; Sequim, WA | 3300 | RSNA surgery |
| Silica gel | Wacker, Munchen; Germany | RT601A-B | RSNA surgery |
| Electrical clips | Tyco Electronics; Schaffhausen, Switzerland | EB0283-000 | Grounding or securing perfusion needle |
| Bonn scissors, straight/sharp points | Roboz Surgical Instrument Co; Gaithersburg, MD | RS-5840 | Perfusion |
| Gavage needle | Harvard Apparatus; Holliston, MA | 75-0286 | Perfusion |
| Masterflex perfusion pump | Cole-Parmer; Vernon Hills, IL | 7524-10 | Perfusion |
| Masterflex platinum-cured silicone tubing | Cole-Parmer; Vernon Hills, IL | 96410-15 | Perfusion |
| Formalin (10% buffered solution; 4 L) | Sigma-Aldrich; St. Louis, MO | HT501128 | Perfusion |
| Sucrose | Sigma-Aldrich; St. Louis, MO | S0389 | Cryoprotection |
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