Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Cancer Research
Click here for the English version

Cancer Research

Insan akciğer dokularında ZW10 etkileşim protein Immünoster dijital Analizi

Published: May 1, 2019 doi: 10.3791/58551
Automatic Translation
1, 2, 3, 1, 4, 4, 5, 6, 4, 4, 4, 1
1Department of Hematology, Zhongnan Hospital of Wuhan University, 2Department of Thoracic Surgery, Renmin Hospital of Wuhan University, 3Department of Human Anatomy, Histology and Embryology, Institute of Basic Medical Sciences, Chinese Academy of Medical Sciences, School of Basic Medicine, Peking Union Medical College, 4Department of Immunology, School of Basic Medical Sciences, Wuhan University, 5Department of Gastroenterology, Central Hospital of Wuhan, 6Department of Transfusion, Zhongnan Hospital of Wuhan University

Summary

ZW10 etkileşen protein (ZWıNT) mitotik mil kontrol noktasına ve karsinomun patogenezine katılır. Burada, insan akciğer kanseri dokularında zwınt immün boyama bir metodoloji tanıtmak, tüm slaytlar ve görüntü analizi dijital tarama izledi. Bu metodoloji, yüksek kaliteli dijital görüntüler ve güvenilir sonuçlar sağlayabilir.

Abstract

Bu çalışmanın amacı, insan akciğer dokularının immunoster bir metodolojisi tanıtmak, tüm slayt dijital tarama ve görüntü analizi izledi. Dijital tarama, bir slayt yığınını taramak ve yüksek kalitede dijital görüntüler üretmek için hızlı bir yoldur. Bu, patologlar tarafından konvansiyonel ışık mikroskobu (CLM) ile uyumlu sonuçlar üretebilir. Ayrıca, dijital görüntülerin kullanılabilirliği, aynı slaytın birden çok kişi tarafından aynı anda gözlemlenmesini mümkün kılar. Ayrıca, slaytların dijital görüntüleri bir veritabanında depolanabilir, bu da cam kaydırakların uzun süreli bozulmasını önlenir. Bu tekniğin sınırlamaları aşağıdaki gibidir. İlk olarak, yüksek kaliteli hazırlanmış doku ve orijinal immünhistokimya (ıHC) herhangi bir hasar veya aşırı sızdırmazlık kalıntısı olmadan slaytlar gerekir. İkinci olarak, tümör veya nontümör alanları Puanlama sırasında tümör veya nontümör alanları hakkında herhangi bir karışıklık önlemek için, yazılım kullanarak analiz önce deneyimli patologlar tarafından belirtilmelidir. Üçüncü olarak, operatör tüm slayt görüntüleme içinde dijitalleştirme işlemi boyunca renk çoğaltılması kontrol etmek gerekir.

Introduction

ZW10 etkileşime giren protein (zwint), mitotik mil kontrol noktası1,2,3' te yer alan kinetochore kompleksinin gerekli bir bileşenidir. Bu zwint tükenmesi anormal prematüre kromozom segregasyon1,2,3yol açmaktadır bildirilmiştir. Son çalışmalar, zwint 'in tümör hücrelerinin proliferasyonunun yaygınlaştırılması ile multipl tümörlerin patogenezine dahil olduğunu öne sürdü4,5. Daha önce akciğer kanserinde zwınt ekspresyonu bildirdi5. CLM kullanarak patologlar tarafından slaytların Analizi zaman alıcı ve niceliksel6,7,8olduğunu yaygın olarak kabul edilmiştir. Dahası, saklanan cam slaytların bozulması daha önce oluşturulan slaytları geri çekmek imkansız hale gelebilir. Bilgisayar tabanlı, dijital tüm slayt görüntüleme (WSI) gelişmekte olan yöntem bu sınırlamalar6,7,8üstesinden gelebilir.

Bu amaçla, insan akciğer kanseri dokularında zwınt immün boyama bir metodoloji tarif, tüm slayt dijital tarama ve yazılım tabanlı görüntü analizi ile birleştiğinde. Bu metodolojinin ana avantajı, CLM ile uyumlu sonuçlar üretilmesi. Bu teknoloji, Hematoksilin-eozin lekeleme (H & E) ve IHC, floresans in situ hibridizasyon (balık), doku mikrodizileri (TMA) ve ilaç keşfi ve gelişimi gibi patolojik skorlama alanlarında yaygın olarak kullanılabilir.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Burada açıklanan tüm yöntemler Wuhan Üniversitesi Zhongnan Hastanesi Etik Komitesi ve Wuhan Üniversitesi Renmin Hastanesi tarafından onaylanmıştır.

1. ıHC slaytlarının hazırlanması

  1. Akciğer dokusu örneğini, insan akciğer dokusu parçası (yaklaşık 3 x 3 cm),% 4 civarında formaldehite fosfat-tamponlu tuz (PBS) içinde 24 saat oda sıcaklığında (RT) daldırarak düzeltin.
  2. % 80,% 95 ve% 100 etanol, sırasıyla, oda sıcaklığında 15 dakika, 20 dakika ve 20 dakika içinde doku dehydrate. Son olarak, her oda sıcaklığında 20 dk için 100% ksilon 3x içinde doku batırın.
  3. Gömme için, parafin (63 °C) dokusunu 30 dakika boyunca batırın. parafin değiştirin ve başka bir 45 dakika için tekrar doku batırın. Son olarak, parafin yeniden değiştirin ve ek bir 1 h için doku batırın.
  4. Dokuyu 5 μm kalınlığında bölümlere kesebilir ve 20 μg/mL Poly-L-lizin-kaplamalı slaytlara yerleştirebilirsiniz.
  5. Ağlatma için, 2 h için 65 °C ' lik bir fırında slaytları yerleştirin ve daha sonra 15 dakika boyunca dimetilbenzen bölümlerine batırın ve ardından 15 dk için 100% Ksilin içinde ıslatın.
  6. 100% etanol içinde 5 dakika için doku bölümleri 2x ile slaytlar hidrat,% 95 etanol içinde 5 dk seri seyreltilmiş etanol ile bir tedavi izledi,% 80 etanol 5 dk,% 70 etanol 5 dk, ve 5 dk içinde 50% Etanol.
  7. Antijen onarımı gerçekleştirin.
    1. Çift distile H2o (DDH2o) ile 1x için seyreltik sitrik asit onarım sıvı (20X).
    2. Bir antijen onarım kutusunda doku bölümleri ve 1x sitrik asit onarım sıvı (300 mL) ile slaytlar yerleştirin ve daha sonra, 2 dakika boyunca yüksek güç mikrodalga fırında ısı, 6 dakika kaynatma sürdürmek için düşük güce Isıtma izledi.
    3. Bölümlerin doğal olarak oda sıcaklığında soğumasını bekleyin.
    4. 0,01 M PBS ile sitrik asit tamir sıvısının yerine, oda sıcaklığında döner shaker içinde, 5 dakika için her zaman, 3x bölümleri yıkayın.
  8. Endojen peroksidaz ortadan kaldırır.
    1. % 30 H2o2 Ila 3% DDH2o, Slaytlar (tüm dokularda kapsar emin olun) ekleyin ve 30 dakika oda sıcaklığında ıslak bir kutuda slaytlar inkük.
      Not: ıslak kutu 10 x 15 cm plastik bir kutu ve su içerebilir.
    2. Oda sıcaklığında Rotary shaker içinde 0,01 M PBS ile, 5 dakika boyunca her zaman, 3x slaytlar yıkayın.
  9. Nonspesifik antijen engelleyin.
    1. 0,1% Tween 20 (PBST) ile PBS ile konsantre normal keçi serumu% 10 keçi serumu ile seyreltin.
    2. Slaytlara% 10 keçi serumu ekleyin ve 37 °C ' de ıslak kutuda 30 dakika boyunca inküye yapın.
      Not: keçi serumu slaytlardaki tüm dokuları kapsamalıdır.
  10. Dokuları lekeleyin.
    1. Bir gecede 4 °C ' de tavşan anti-insan anti-ZWINT antikor (1:50) ile slaytları kulyur.
    2. Oda sıcaklığında Rotary shaker içinde 0,01 M PBST (1 mL 0,1% ara 20 ' de 1.000 mL PBS) ile 5 dakika boyunca her seferinde 3 adet slayt yıkayın.
    3. 37 °C ' de 30 dakika boyunca sekonder antikor (Anti-tavşan algılama sistemi, 1:200) ile slaytları kulbe etme.
    4. Rotary Shaker 0,01 M PBST ile, 5 dakika boyunca her zaman, 3x slaytlar yıkayın.
  11. İmmunostan görselleştirmek için, slaytlar ekleyin 300 μL taze 3, 3-diaminobenzidin ve sonra, oda sıcaklığında musluk suyu ile slaytlar yıkayın.
    Not: boyama derecesi mikroskop altında izlenir (büyütme 10X-40X).
  12. Dokusu karşı. Oda sıcaklığında 2 dakika boyunca hematoksinlin boyama çözeltisi ile slaytları lekeleyin ve daha sonra 15 dakika boyunca musluk suyu ile slaytları yıkayın.
    Not: Kernel, mikroskop altında mavi renkte görünür (büyütme 10X-40X). Mavi boyama derecesi daha güçlü ise, 3-5 s için hidroklorik alkol farklılaşma, doku belirgin boyama kolaylaştırmak için 15 dakika için musluk suyu ile mavi geri doku durulama takiben kullanılabilir.
  13. 50% etanol içinde 5 dakika,% 70 etanol 5 dk, 5 dk için% 80 etanol,% 95 etanol içinde 5 dk ve son olarak, oda sıcaklığında% 100 etanol içinde 5 dk için 2x için slaytlar susuz.
  14. Şeffaflık için,% 100 Ksilin içeren bir tanktaki doku bölümlerini 15 dakika boyunca batırın ve bölümleri oda sıcaklığında 15 dakika boyunca% 100 ksilen içeren başka bir tanka aktarın.
  15. Sızdırmazlık için, 50-100 μL nötr sakız alın ve karışımı% 5 ksile ekleyin (kabarcıklar karıştırma kaçının). Akciğer dokusu bölümlerine yukarıda bahsedilen karışımı 15 μL ekleyin. Filmi kapak camıyla mühürleyin ve kabarcıkları hafifçe bastırın.

2. otomatik tüm-slayt tarama ıHC slaytlar

  1. Mühürlü slaytlar onları kurutmak için oda sıcaklığında 12 saat kurumaya izin verin.
  2. El Ile parlak alan seçeneğini seçin ve manuel tarama arayüzünü girin.
  3. Slaytların adını gözden geçirin ve görüntüler için bir depolama yolu seçin.
  4. Tarama alanını ayarlayın ve Kullanıcı kümesi eşikleri kullanarak tarama örnekleriseçeneğini belirleyin. Eşik 200 μm bir tarama alanı genişletme değeri ile yaklaşık 50.
  5. Tarama odağı değerini ayarlayın, odağı otomatik olarak seçin — 1050 ile 2650 arasında değişmektedir — ve son olarak, tek katmanlı moduseçin.
  6. IFC slaytlarını iş istasyonunda yükleyin ve otomatik taramayı başlatın.
    Not: slaytların zarar görmediğinden emin olun. Slaytları temiz ve saydam tutmak ve slaytlarda toz, konfeti ve aşırı sızdırmazlık kalıntılarının önlenmemesi. Cam slayt ve lamel magazini işaretler yoksun olmalıdır. Slaytları ksilene ile temizlemeniz gerekmez. Slaytların boyutu Tablo 1' de verilir.
  7. Otomatik olarak 20X, 40X veya 100X büyütme ile bir slayt üzerindeki tüm doku bölümünü tarayın.
  8. Tüm slayt taramasının sonunda görüntüleri toplayın ve saklayın.

3. görüntüleme yazılımı tarafından slaytların Analizi

  1. Histopatolojik görüntü analiz yazılımını başlatın ve yerel bilgisayarıseçin.
  2. Tarama verilerini depolayan dosyayı açın.
  3. 2X ile 40X aralığında uygun yakınlaştırma seviyesini seçin.
  4. Renk ayarı ile en uygun kontrastı ayarlamak için rengi ayarlayın.
  5. El ile daire ve her görüntü ilgi bölümlerini adlandırın.
    Not: Örneğin, bir alan daire ve tümör alanıolarak adlandırın.
  6. Eklentileri ve qcseçin. Şu anda, senaryo Oluşturucusu açılır.
  7. Yoğunluk Quant seçin ve algılama çubuğunu ayarlayın.
    Not: Bu işlem dikkatle yapılmalıdır. Mavi tolerans çubuğu hücresel çekirdeğin rengini ayarlamak için kullanılır. Kahverengi tolerans çubuğu, görüntüde dolgu renginin doygunluğunu ayarlamak için kullanılır. Düzelttikten sonra görüntülerin sonuçları Orijinal meslektaşları ile tutarlı olmalıdır.
  8. Puan düzeylerini ayarlamak için orijinal görüntülerin benzer çember çevrelenen alanların boyama yoğunluğunu yapmak.
    Not: koyu kahverengi güçlü pozitif gösterir, kahverengimsi sarı orta pozitif, açık sarı zayıf pozitif, ve beyaz negatiftir.
  9. Modeli bir dosya olarak depolar ve adlandırın. Modeli diğer slaytlara uygulayın ve Seçili detaylandırmayıseçin ".
  10. Yazılım otomatik olarak resimde çember alanları için H-Puanını hesaplamak izin verin.

4. H-Puanlama sistemi kullanılarak puanların ölçülmesini9,10

  1. İmmunostlama ve boyama yoğunluğu yüzdesini hesaplayın (0: negatif, 1 +: zayıf, 2 +: Orta, 3 +: güçlü).
  2. Tümör ve bitişik nontümör alanlarının patolojik puanlamasını hesaplamak için bir puanlama sistemi (H-Score) kullanın.
    Not: H-Score = (zayıf yoğunluk x 1 olan hücrelerin yüzdesi) + (orta yoğunluklu x 2 olan hücrelerin yüzdesi) + (güçlü yoğunluğa sahip hücrelerin% x 3). Bu nedenle, maksimum H-Score 300 ise 100% hücrelerin güçlü yoğunluğu ile nicelik.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

ZWıNT 'in ifade düzeylerini, ıHC tarafından 14 skuayöz Hücre Karsinomu (SCCs) ve 14 adenokarsinomları (ADCs) dahil olmak üzere, küçük hücreli olmayan akciğer kanseri (NSCLC) numunelerinin (tümör ve bitişik nontümör dokularında) 28 çifti olarak ölçtük. Slaytların tüm slayt dijital tarama yüksek kalitede dijital görüntüler (Şekil 1a) sağladı. Sonuçlar, akciğer kanserinin H-skoru komşu noncancer dokulardan önemli ölçüde daha yüksek olduğunu gösterdi (P < 0,0001, iki kuyruklu t-test) (Şekil 1a ve 1B). Ayrıca, biz SCCs içinde ZWıNT ifade düzeyini önemli ölçüde daha yüksek olduğunu bulundu ADCs (Şekil 1C).

Figure 1
Şekil 1 : Akciğer kanseri dokularında Immunohistokimyasal boyama. Bu rakam Yuan et al değiştirildi. Dove Press 'in izni ile 5 . (A) Bu panel, akciğer kanseri hastalarının temsili immünhistokimyasal görüntülerini gösterir (büyütme: 10X ve 40X). (B) Bu panel, akciğer kanseri ve komşu noncancer dokularının H-Puanını gösterir. (C) Bu panel, ADCS ve SCCS 'nin H-Puanını gösterir. Hata çubukları standart sapma gösterir. * P < 0,05; P < 0,001. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek Için lütfen tıklayınız.

MIN (mm) Maks (mm)
Genişlik 25 26
Uzun -luğu 75 76
Kalın -lığı 0,9 1,2

Tablo 1: slayt boyutları.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Tüm slayt tarama güçlü tarama ve klinik ve araştırma amaçlı yüksek kaliteli görüntüler üretimi için sıcak bir konu haline geliyor11,12,13. Görseller,11,12,13dakika içinde slayt tarama mikroskopları tarafından üretilebilmektedir. Bu metodolojisi uygulayarak, ZWıNT ıFC slaytları için yüksek kaliteli görüntüler elde ettik ve tümör ile nontümör dokularının arasındaki H-Puanını karşılaştırdık. Burada sunulan protokolde, en kritik adımlar, patolojik Puanlama13,14 önce yüksek kaliteli IHC slaytlar, görüntü edinme ve tümör ve nontümör alanların belirtimi hazırlanması vardır , 15 , 16 yaşında.

Geçerli Yöntem (CLM) ile karşılaştırıldığında bazı avantajları vardır. Dijital tarama yeterli hızlı (~ 20 slaytlar/saat) bir slayt yığını taramak ve yüksek kaliteli dijital görüntüler üretmek için. Bu CLM ile uyumlu sonuçlar üretebilir ama nispeten daha az zaman alır. Dijital görüntülerin kullanılabilirliği, aynı slaytın birden çok kişi tarafından aynı anda gözlemlenmesini mümkün kılar. Slaytların dijital görüntüleri bir veritabanında depolanabilir, bu da cam kaydırakların uzun süreli bozulmasını önlenir.

Bu tekniğin sınırlamaları, görüntüleme yazılımını kullanarak analizden önce tümör veya nontümör doku örneklerini belirlemek için yüksek kaliteli doku ve IFC slaytlar6,8,11 ve teknik uzmanlık ihtiyacını içerir ,6,7skorlama sırasında tümör veya nontümör alanları hakkında herhangi bir karışıklık önlemek için. Operatör aynı zamanda tüm slayt görüntüleme17dijitalleştirme işlemi boyunca renk çoğaltılması izlemek gerekir.

Bu yöntem aktif olarak balık, tma ve ilaç keşfi ve geliştirme6,18' de uygulanabilir. Tabata ve ark. primer patolojik TANıNDA WSI kullanımını araştırdılar19. Japonya 'da dokuz hastanelerden 1070 WSı numunelerini retrospektif olarak analiz ettiler ve WSı 'nin primer tanıyla kullanımını doğrulandığını doğruladı. WSı ana avantajlarından biri de birden fazla öğrenci tarafından slaytların eşzamanlı görüntüleme sağlar20. Bu nedenle, tüm slayt tarama görüntüleri doğrulama eğitim ve araştırma amaçlı6,18,21için dijital tanılama gelişimine katkıda bulunabilir.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Yazarların ifşa etmesi gereken hiçbir şey yok.

Acknowledgments

Bu proje Çin 'in ulusal doğal Vakfı (No. 81500151, 81400121, 81270607, 81541027 ve 81501352) ve Hubei eyaleti (Çin) doğal temeli (No. 2017CFB631) tarafından destekleniyordu. Yazarlar Guo Qin, Chang Min, li Hui ve Wuhan Google biyolojik teknoloji Co, LTD onların teknik destek için meslektaşları onların takdir ifade. Yazarlar da dil düzenleme için muhammed Jamal teşekkür ederiz.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Pannoramic MIDI 3D HISTECH Cat: PMIDI-040709 An automated digital slide scanner with a remarkable feature set :12-slide capacity, fluorescence scanning, and many more.
QuantCenter 3D HISTECH Downloaded from the official website of the company The framework for 3DHISTCH's image analysis applications.
LEICA RM2235 Leica Microsystems Cat: 14050038604 The enhanced precision of the new accessories will add convenience to block to knife approach as well as specimen orientation.
Rabbit anti-human Anti-ZWINT antibody Abcam Cat: ab197794 Immunohistochemical analysis of ZWINT in human lung tissue.
Anti-rabbit secondary antibody Wuhan Goodbio Technology Cat:GB23303-1 Secondary antibody for IHC staining.
Phosphate-buffered saline Wuhan Goodbio Technology Cat:G0002 A solution containing a phosphate buffer.
OLYMPUS CX23 OLYMPUS Cat:6M87620 Microscope for detection of H&E or IHC slides.
Dimethylbenzene Shanghai Lingfeng Chemical Reagent Cat:1330-20-7 A colorless, flammable fluid used as a solvent and clarifying agent in the preparation of tissue sections for microscopic study.
Hematoxylin Staining Solution Wuhan Servicebio technology Cat:G1039 It is commonly used for histologic studies, oftern colors the nuclei of cells blue.
Tween 20 Baitg Cat:2005-64-5 It is a polysorbate-type nonionic surfactant formed by the ethoxylation of sorbitan before the addition of lauric acid. It is used as a deterent and emulsifier in pharmacological applications.
Citric acid repair liquid Wuhan Servicebio technology Cat:G1202 Is is used to repair antigen after fixation during IHC procedure.
LEICA ASP200s Leica Cat: 14048043626 It was designed for routine and research histopathology of up to 200 cassettes.
LEICA Arcadia H Leica Cat: 14039354103 It is a heated paraffin embedding station and allows for simple operation and precise control, resulting in improved quality, a smooth workflow and reliability.
LEICA Arcadia C Leica Cat: 14039354102 It is a cold plate holding more than 60/65 cassettes on its large working surface. It was designed with an environment adaptive control module to make sure the operating temperature is always stabilized at -6°C.
CaseViewer Software 3DHISTECH

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Endo, H., Ikeda, K., Urano, T., Horie-Inoue, K., Inoue, S. Terf/TRIM17 stimulates degradation of kinetochore protein ZWINT and regulates cell proliferation. The Journal of Biochemistry. 151 (2), 139-144 (2012).
  2. Wang, H., et al. Human Zwint-1 specifies localization of Zeste White 10 to kinetochores and is essential for mitotic checkpoint signaling. Journal of Biological Chemistry. 279 (52), 54590-54598 (2004).
  3. Lin, Y. T., Chen, Y., Wu, G., Lee, W. H. Hec1 sequentially recruits Zwint-1 and ZW10 to kinetochores for faithful chromosome segregation and spindle checkpoint control. Oncogene. 25 (52), 6901-6914 (2006).
  4. Ying, H., et al. Overexpression of Zwint predicts poor prognosis and promotes the proliferation of hepatocellular carcinoma by regulating cell-cycle-related proteins. OncoTargets and Therapy. 11, 689-702 (2018).
  5. Yuan, W., et al. Bioinformatic analysis of prognostic value of ZW10 interacting protein in lung cancer. OncoTargets and Therapy. 11, 1683-1695 (2018).
  6. Higgins, C. Applications and challenges of digital pathology and whole slide imaging. Biotechnic & Histochemistry. 90 (5), 341-347 (2015).
  7. Webster, J. D., Dunstan, R. W. Whole-slide imaging and automated image analysis: considerations and opportunities in the practice of pathology. Veterinary Pathology. 51 (1), 211-223 (2014).
  8. Al-Janabi, S., Huisman, A., van Diest, P. J. Digital pathology: current status and future perspectives. Histopathology. 61 (1), 1-9 (2012).
  9. Bonomi, P. D., et al. Predictive biomarkers for response to EGFR-directed monoclonal antibodies for advanced squamous cell lung cancer. Annals of Oncology. 29 (8), 1701-1709 (2018).
  10. Villalobos, M., et al. ERCC1 assessment in upfront treatment with and without cisplatin-based chemotherapy in stage IIIB/IV non-squamous non-small cell. Medical Oncology. 35 (7), 106 (2018).
  11. Griffin, J., Treanor, D. Digital pathology in clinical use: where are we now and what is holding us back? Histopathology. 70 (1), 134-145 (2017).
  12. Huisman, A., Looijen, A., van den Brink, S. M., van Diest, P. J. Creation of a fully digital pathology slide archive by high-volume tissue slide scanning. Human Pathology. 41 (5), 751-775 (2010).
  13. Gray, A., Wright, A., Jackson, P., Hale, M., Treanor, D. Quantification of histochemical stains using whole slide imaging: development of a method and demonstration of its usefulness in laboratory quality control. Journal of Clinical Pathology. 68 (3), 192-199 (2015).
  14. Hofman, F. M., Taylor, C. R. Immunohistochemistry. Current Protocols in Immunology. 103, Unit 21.4 (2013).
  15. Ramos-Vara, J. A. Principles and Methods of Immunohistochemistry. Methods in Molecular Biology. 1641, 115-128 (2017).
  16. Otali, D., Fredenburgh, J., Oelschlager, D. K., Grizzle, W. E. A standard tissue as a control for histochemical and immunohistochemical staining. Biotechnic & Histochemistry. 91 (5), 309-326 (2016).
  17. Clarke, E. L., Treanor, D. Colour in digital pathology: a review. Histopathology. 70 (2), 153-163 (2017).
  18. Potts, S. J. Digital pathology in drug discovery and development: multisite integration. Drug Discovery Today. 14 (19-20), 935-941 (2009).
  19. Tabata, K., et al. Whole-slide imaging at primary pathological diagnosis: Validation of whole-slide imaging-based primary pathological diagnosis at twelve Japanese academic institutes. Pathology International. 67 (11), 547-554 (2017).
  20. Saco, A., Bombi, J. A., Garcia, A., Ramírez, J., Ordi, J. Current Status of Whole-Slide Imaging in Education. Pathobiology. 83 (2-3), 79-88 (2016).
  21. Griffin, J., Treanor, D. Digital pathology in clinical use: where are we now and what is holding us back? Histopathology. 70 (1), 134-145 (2017).

Tags

Kanser araştırma sayı 147 otomatik dijital tekniği akciğer kanseri ZW10 etkileşim protein immünoster dijitalleştirilmiş tüm slayt görüntüleme H-Score
Insan akciğer dokularında ZW10 etkileşim protein Immünoster dijital Analizi
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Wen, Y., Song-ping, X., Pan, L.,… More

Wen, Y., Song-ping, X., Pan, L., Xiao-yan, L., Shan, P., Qian, Y., Meng, S., Xiao-xing, H., Rui-jing, X., Jie, X., Qiu-ping, Z., Liang, S. Digital Analysis of Immunostaining of ZW10 Interacting Protein in Human Lung Tissues. J. Vis. Exp. (147), e58551, doi:10.3791/58551 (2019).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter