Præsenteret her er en protokol for oprettelse af akut pontin infarkt i en rotte model via elektrisk stimulation med en enkelt puls.
Pontine infarkt er den mest almindelige slagtilfælde undertype i den bageste cirkulation, mens der mangler en gnaver model efterligne pontine infarkt. Forudsat her er en protokol for en vellykket oprettelse af en rotte model af akut pontine infarkt. Der anvendes rotter, der vejer ca. 250 g, og en sonde med en isoleret kappe sprøjtes ind i ponerne ved hjælp af et stereotasisk apparat. En læsion er produceret af den elektriske stimulation med en enkelt puls. Longa score, Berderson score, og stråle balance test bruges til at vurdere neurologiske underskud. Derudover bruges den klæbende fjernelse somatosensoriske test til at bestemme sensorisk funktion, og lemmer placering test bruges til at evaluere proprioception. MR-scanninger bruges derefter til at vurdere infarkt in vivo, og TTC farvning bruges til at bekræfte infarkt in vitro. Her identificeres en vellykket infarkt, der er placeret i anterolateral basis af rostralpons. Afslutningsvis er en ny metode beskrevet for at etablere en akut pontin infarkt rotte model.
Siden 1980’erne, den midterste cerebral arterie okklusion (MCAO) model induceret af silikone filamenter har været meget udbredt i grundlæggende slagtilfælde forskning1. Andre metoder (dvs. suturering af en gren af MCA2 og fotokemisk induceret fokale infarkt) er også blevet anvendt. Disse modeller er blevet betegnet MCA-baserede slagtilfælde modeller og har i høj grad bidraget til undersøgelser af de patofysiologiske mekanismer underliggende slagtilfælde og potentielle terapeutiske. Selv om der er begrænsninger i disse eksperimentelle modeller3,4, disse metoder har været anvendt mange labs5,6. MCA-baserede stregmodeller repræsenterer et slag i det forreste cirkulation. men, få rapporter har undersøgt modeller efterligne slagtilfælde i den bageste omsætning7.
Der er betydelige forskelle mellem ætiologi, mekanismer, klinisk manifestation, og prognose mellem forreste og bageste omsætning slagtilfælde8. Derfor kan resultaterne fra forreste cirkulationsstrøgmodeller ikke anvendes på bageste cirkulationsstrøg. For eksempel er reperfusion tidsvinduet for anterior omsætning blevet udvidet til 6 h, med en lille del af undersøgelser ne strækker sig til 24 timer baseret på billeddannelse resultater9. Tidsvinduet for bageste cirkulation kan dog være længere end 24 timer, ifølge tidligere rapporter10 og vores egne kliniske erfaringer. Dette aflange reperfusionstidsvindue skal undersøges nærmere og bekræftes i forsøgsmodeller.
Med hensyn til posterior cirkulation slagtilfælde, pontin infarkt er den mest almindelige undertype, der tegner sig for 7% af alle iskæmiskslagtilfælde tilfælde 11,12. Ifølge infarkt topografi, pontine infarkter er opdelt i isolerede og ikke-isolerede pontine infarctions13. Isolerede pontine infarkter er kategoriseret i tre typer baseret på de underliggende mekanismer: stor arteriesygdom (LAD), basilar arterie gren sygdom (BABD), og små arteriesygdom (SAD). Kendskab til mekanismer, manifestation, og prognose for pontine infarkt er afledt af kliniske undersøgelser af tilfælde14. Men, en gnaver model efterligne pontine infarkt er blevet mindre undersøgt.
I tidligere undersøgelser, diffus hjernestamme tegmentum skade involverer pons er blevet undersøgt7. En gruppe forsøgte at skabe en pontin infarkt model via ligation af basilar arterie (BA)15. En anden gruppe brugte en 10-0 nylon monofilament sutur til selektivt at ligte fire punkter i den proksimale BAselektivt 16. Denne model efterligner LAD, men de fleste pontine infarctions skyldes BABD og SAD. Desuden er selektiv ligation af BA en kompliceret operation og har en høj dødelighed.
Forudsat her er en detaljeret protokol for en nem at udføre, let gengivet, og vellykket rotte model af akut pontin infarkt ved elektrisk stimulation.
Denne undersøgelse giver en protokol for at generere en akut pontin infarkt rotte model. Denne model kan bruges til forskning i prognose og rehabilitering (herunder post-slagtilfælde kroniske smerter) i pontine slagtilfælde patienter.
Der er flere styrker af denne metode. For det første giver det en rotte model af akut pontin infarkt for fremtidige undersøgelser. Som nævnt ovenfor, pontin infarction er en fælles slagtilfælde undertype, der har fået mindre opmærksomhed. En stor mangel…
The authors have nothing to disclose.
Denne undersøgelse blev ydet økonomisk støtte fra National Science Foundation of China (81471181 og 81870933) til Y. Jiang og National Science Foundation of China (nr. 81601011), Natural Science Foundation of Jiangsu Province (Nr. BK20160345) til J. Zhu og ved det videnskabelige program for Guangzhou Municipal Health Commission (20191A011083) til Z. Qiu.
4-0 sucture | Shanghai Jinzhong | Surgical instruments | |
Adhesive tape | Shanghai Jinzhong | Surgical instruments | |
Animal anesthesia system | RWD | Wear mask when using the system | |
Bone cement | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
Cured clamp | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
General tissue scissors | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
IndoPhors | Guoyao of China | Sterilization | |
Isoflurane | RWD | 217181101 | |
Lesion Making Device | Shanghai Yuyan | Making a lesion | |
MRI system | Bruker Biospin | Confirmation of infarction in vivo | |
Needle holder | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
Penicilin | Guoyao of China | Infection Prevention | |
Probe | Anke | Need some modification | |
Q-tips | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
Shearing scissors | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
Stereotaxic apparatus | RWD | ||
Suture needle | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
Tissue holding forcepts | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
TTC | Sigma-Aldrich | BCBW5177 | For infarction confirmation in vitro |