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Medicine

चूहों में मायोकार्डियल इन्फेक्शन और एक अलग वर्किंग हार्ट सिस्टम द्वारा कार्डियक फ़ंक्शन का आकलन करने के लिए अर्ध-न्यूनतम इनवेसिव विधि

Published: June 11, 2020 doi: 10.3791/61033

Summary

यह लेख न्यूनतम आक्रामक दृष्टिकोण का उपयोग करके चूहों में मायोकार्डियल इस्केमिया और बाद में पुरानी प्रतिक्रिया करने के लिए एक कुशल विधि प्रस्तुत करता है। इसके अलावा, चूहों के बाएं वेंट्रिकुलर हीमोडायनामिक कार्य का आकलन इकोकार्डियोग्राफी और अलग-थलग काम करने वाले दिल के तरीकों द्वारा किया जाता है।

Abstract

दुनिया भर में रुग्णता और मृत्यु दर में मायोकार्डियल इंफार्क्शन (एमआई) मुख्य योगदानकर्ता बना हुआ है। इसलिए इस टॉपिक पर रिसर्च अनिवार्य है। अंतर्निहित रोग परिवर्तनों की अधिक अंतर्दृष्टि और बेहतर समझ प्राप्त करने के लिए एक आसानी से और अत्यधिक प्रजनन योग्य एमआई प्रेरण प्रक्रिया की आवश्यकता होती है। इस प्रक्रिया का उपयोग तीव्र एमआई, बाद में रीमॉडलिंग और हार्ट फेलियर (एचएफ) में नए और आशाजनक उपचार (दवाओं या हस्तक्षेप के रूप में) के प्रभाव या शक्ति का मूल्यांकन करने के लिए भी किया जा सकता है। जानवर के इंडबेशन और प्री-ऑपरेटिव तैयारी के बाद, आइसोफलुरेन के साथ एक संवेदनाहारी प्रोटोकॉल किया गया था, और सर्जिकल प्रक्रिया जल्दी से आयोजित की गई थी। एक न्यूनतम आक्रामक दृष्टिकोण का उपयोग करना, बाएं पूर्वकाल उतरते धमनी (बालक) स्थित था और एक लिगेचर द्वारा ओक्लेड किया गया था। ऑक्क्लूजन को बाद में रिफ्यूजन (इस्केमिया/रिफ्यूजन इंजरी) के लिए तीव्रता से किया जा सकता है। वैकल्पिक रूप से, पोत को क्रोनिक एमआई, रीमॉडलिंग या एचएफ के विकास की जांच करने के लिए स्थायी रूप से लिगा किया जा सकता है। आम नुकसान के बावजूद, ड्रॉप आउट दरें कम हैं । रिमोट इस्कीमिक कंडीशनिंग जैसे विभिन्न उपचारों की जांच उनके कार्डियोप्रोटेक्टिव संभावित प्री-, पेरी-और पोस्ट-ऑपरेटिव के लिए की जा सकती है। पोस्ट-ऑपरेटिव रिकवरी जल्दी थी क्योंकि संज्ञाहरण को ठीक से नियंत्रित किया गया था और ऑपरेशन की अवधि कम थी। पोस्ट-ऑपरेटिव एनाल्जेसिया को तीन दिनों के लिए प्रशासित किया गया था। न्यूनतम आक्रामक प्रक्रिया संक्रमण और सूजन के जोखिम को कम करती है। इसके अलावा, यह तेजी से वसूली की सुविधा । "वर्किंग हार्ट" माप पूर्व वीवो और प्रीलोड, आलोलोड और प्रवाह के सटीक नियंत्रण सक्षम किए गए थे। इस प्रक्रिया के लिए पर्याप्त प्रदर्शन के लिए विशिष्ट उपकरण और प्रशिक्षण की आवश्यकता होती है। यह पांडुलिपि इन मापों के संचालन के लिए एक विस्तृत कदम-दर-कदम परिचय प्रदान करती है।

Introduction

हालांकि घटना लगातार कम हो रही है, तीव्र मायोकार्डियल इंफार्क्शन (एमआई) अभी भी दुनिया भर में रुग्णता और मृत्यु दर के लिए प्रमुख योगदानकर्ता है1। दवाओं या शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं के रूप में संभावित उपचारों की प्रभावकारिता का मूल्यांकन करने पर प्रतिबंध हैं जो तीव्र एमआई को रोकते हैं और उनका इलाज करते हैं। इससे पहले कि उनके प्रभाव मनुष्यों में जांच की जा सकती है, इन उपचारों को पहले से जोखिमों के लिए परीक्षण किया जाना चाहिए, जिसमें जानवरों में वीवो परीक्षाएं शामिल हैं। वीवो स्थितियों में से एक विकृति का अध्ययन करने का कोई बेहतर अवसर नहीं है। इसलिए, चूहों या चूहों में एमआई प्रेरण और यहां तक कि बड़े पशु मॉडल (सूअर या भेड़) कोरोनरी धमनियों और आसपास के मायोकार्डियम में इस्केमिया के कारण लघु-(तीव्र) और दीर्घकालिक (पुरानी) परिवर्तनों की जांच की अनुमति देता है, साथ ही बिगड़ा हृदय समारोह के कारण प्रणालीगत परिवर्तन। इनफार्क आकार पहले मुख्य उद्देश्य था, लेकिन हाल ही में बाद में कार्डियक रिमॉडलिंग प्रक्रियाएं तीव्र एमआई या इस्केमिया/रिफ्यूजन इंजरी के साथ-साथ लगातार हार्ट फेलियर (एचएफ) में भी काफी रुचि हो गई हैं । इसलिए, लगातार परिणामों तक पहुंचने के लिए एक तुलनीय और आसानी से प्रजनन योग्य विधि की आवश्यकता होती है।

जबकि एमआई हासिल करने के लिए क्रायो-एब्लेशन के उपयोग की सूचना दी गई है2,हमारी विधि अन्य अध्ययनों पर बनाता है जिसमें जांचकर्ता एक एकल सिलाई लिगेशन द्वारा बाएं पूर्वकाल उतरते धमनी (बालक) को ऑक्सील्यू करते हैं। (हेमी-) स्टर्नोटॉमी प्रक्रियाओं की तुलना में, न्यूनतम आक्रामक दृष्टिकोण जो इस लेख में प्रस्तुत किया जाएगा, तेजी से पोस्ट-ऑपरेटिव रिकवरी की अनुमति देता है और स्पष्ट रूप से ऑपरेशन समय को कम करता है। अन्य शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं का एक आम कदम छाती से दिल की लिफ्ट से बाहर दिल सिलाई3प्रदर्शन करने के लिए है । इस विधि का दृष्टिकोण इस कदम को अनावश्यक बनाता है। प्रोटोकॉल के आधार पर, दो अलग-अलग प्रक्रियाएं की जा सकती हैं: एक निर्धारित समय पर इस्केमिया/रिफ्यूजन को प्रेरित करने के लिए टूनीकेट का उपयोग करके एक अस्थायी ऑक्लसेशन; या लिगेचर को ठीक करके धमनी का स्थायी ऑक्सील्यूशन। ऑक्सक्लूजेशन की सफलता का मूल्यांकन इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम (ईसीजी) और लेफ्ट वेंट्रिकल (एलवी) में स्थूल बदलावों के साथ-साथ इसके पालिंग से किया जा सकता है ।

सर्जरी से पहले एक और महत्वपूर्ण कदम intubation है । जबकि ज्यादातर मामलों में, इंटॉबेशन ट्रेकोटॉमी के माध्यम से या गले में त्वचा चीरा द्वारा दृष्टि के तहत ट्यूब के मौखिक सम्मिलन के माध्यम से किया जाता है, यह प्रोटोकॉल एनेस्थेटाइज्ड जानवर के एंडोट्रेक्अल इंस्टबेशन का वर्णन करता है जो सांस लेने में कठिनाइयों या संक्रमण के बाद4,,5को कम करता है। पोस्ट-ऑपरेटिव जटिलताओं से बचने के लिए, छाती को बंद करने से पहले सिरिंज के माध्यम से छाती से हवा को हटा दिया जाता है।

इस लेख का दूसरा कार्य एक अलग काम करने वाले दिल प्रयोगात्मक मॉडल के माध्यम से हीमोडायनामिक फ़ंक्शन का मूल्यांकन है, इसका उपयोग हमारे संस्थान6, 7,के भीतर अन्य परियोजनाओं में कैसे कियाजाताहै। जबकि इकोकार्डियोग्राफी, कार्डियक मैग्नेटिक रेओनेंस इमेजिंग (एमआरआई) और दबाव-मात्रा छोरों का आक्रामक मात्राव अच्छी तरह से जाना जाता है और वीवो में हृदय समारोह का आकलन करने के लिए व्यापक रूप से उपयोग किए जाने वाले तरीके हैं, उन्हें कुछ सीमाएं हैं। आक्रामक दृष्टिकोण, जैसे कि वैश्विक कार्य या दिल के विशिष्ट मापदंडों की जांच करने के लिए कैथेटर का उपयोग, आमतौर पर उपयोग किया जाता है और हृदय माप के स्वर्ण मानक का प्रतिनिधित्व करते हैं। इसके विपरीत, पूर्व वीवो काम कर रहे दिल उपकरण शायद ही कभी अपनी जटिलता और लागत की वजह से प्रयोग किया जाता है । परफ्यूसेट के मिश्रण से लेकर दिल के पर्याप्त कैनुलेशन तक कई महत्वपूर्ण पहलू हैं, जो सफल मूल्यांकन के लिए महत्वपूर्ण हैं। अलग - थलग पड़े काम करने वाले हृदय तंत्र का वर्णन सबसे पहले ओस्कर लैंगेंडोर्फ ने 18978 में किया था और हाल केदशकोंमें इसे संशोधित किया गया है । आज, दो मॉडलों का उपयोग किया जाता है: लैंगेंडोर्फ (एलडी) मोड और वर्किंग हार्ट (डब्ल्यूएच) मोड। हमारे अध्ययन में, एलडी मोड का उपयोग दिल को अपने नए वातावरण (लगभग 15 मिनट) में अनुकूलित करने के लिए किया जाता है। इस मोड में, हृदय को महाधमनी के माध्यम से कैनुलेटेड किया जाता है और कोरोनरी धमनियों को एंटीरोग्रेडी रूप से प्रेरित किया जाता है, जो मायोकार्डियम की पर्याप्त आपूर्ति करता है। एलडी मोड में हार्ट कोई प्रेशर वॉल्यूम का काम नहीं कर रहा है। इसके विपरीत, डब्ल्यूएच मोड में, बाएं एट्रियम को पल्मोनरी नस के माध्यम से कैनलेटेड किया जाता है, जिसके माध्यम से परफ्यूसेट बाएं एट्रियम में प्रवेश करता है। दिल तो एक पूर्वनिर्धारित afterload के खिलाफ शारीरिक रूप से इस perfusate पंप । समय के साथ आ रहा है कि आगे बढ़ने से, कार्डियक फंक्शन को लगातार मापा जा सकता है। कोरोनरी फ्लो, कार्डियक आउटपुट (सीओ), स्ट्रोक वॉल्यूम (एसवी) और वर्क, अलिंद फ्लो और एलवी सिस्टोलिक और डायस्टोलिक प्रेशर जैसे पैरामीटर्स को मापा जा सकता है । सीधे और केवल दिल पर विभिन्न उपचारों के प्रभाव की जांच की जा सकती है6,10. लियाओ और पोडेसर9 द्वारा एक समीक्षा ने हृदय कार्य और चयापचय पर औषधीय प्रभावों के मूल्यांकन के साथ-साथ एमआई, एचएफ, मोटापा और मधुमेह जैसे विभिन्न रोगों की खोज में इस विधि के व्यापक उपयोग को प्रस्तुत किया।

संक्षेप में, यह प्रोटोकॉल वीवो में एमआई या मायोकार्डियल इस्केमिया/रिफ्यूजन (एमआईआर) चोट करने के लिए एक प्रजनन योग्य विधि प्रस्तुत करता है। इसके अलावा, यह एमआई के बाद एक अलग चूहा दिल पर एलवी (डीवाई-) समारोह के लक्षण वर्णन की अनुमति देता है। यह प्रोटोकॉल उपचार और विश्लेषण का एक अनूठा संयोजन प्रस्तुत करता है।

Protocol

प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल जो इस लेख में वर्णित परिणाम दिया वियना के चिकित्सा विश्वविद्यालय में प्रयोगशाला पशु प्रयोगों के लिए क्षेत्रीय नैतिकता समिति और ऑस्ट्रिया के संघीय शिक्षा, विज्ञान और अनुसंधान मंत्रालय (BMWFW-66.009/0023-WF/V/3b/2016) द्वारा अनुमोदित किया गया है । सभी प्रयोगों की देखभाल और प्रयोगशाला जानवरों के उपयोग के लिए गाइड के अनुरूप, अमेरिका के स्वास्थ्य के राष्ट्रीय संस्थानों (NIH प्रकाशन संख्या 85-23, संशोधित १९९६) द्वारा प्रकाशित ।

नोट: 250−300 ग्राम शरीर के वजन (बीडब्ल्यू) के 10−12 सप्ताह पुराने पुरुष स्प्राग डावले चूहों का उपयोग किया जाता है। चूंकि निम्नलिखित प्रक्रियाएं और उपचार एक ऑपरेटिंग रूम (या) के बाँझ वातावरण में किए जाते हैं, जानवरों को संभालते समय स्क्रब, दस्ताने, फेसमास्क और हुड पहनते हैं। या में प्रवेश करने से पहले, सुनिश्चित करें कि हाथ धोए गए और कीटाणुरहित हैं। यदि इरादा सर्जिकल सत्र में कई जानवरों पर काम करना है, तो या तो कपड़े और कीटाणुरहित करें, या संचालन के बीच में उपकरणों को ऑटोक्लेव करें। ये स्वच्छ दिशानिर्देश प्रोटोकॉल अनुभाग में प्रस्तुत सभी प्रक्रियाओं के लिए मान्य हैं।

1. प्रीऑपरेटिव तैयारी और एनेस्थीसिया

  1. एक्सिलाज़ीन (4 मिलीग्राम/किलो बीडब्ल्यू) और केटामाइन (100 मिलीग्राम/किलो बीडब्ल्यू) इंट्रापेरिटेली के मिश्रण को इंजेक्ट करके प्रीऑपरेटिव एनेस्थीसिया शुरू करें।
  2. 2,हवा और आइसोफलुने (1−2.5%) के मिश्रण के साथ 14 जी ट्यूब और मात्रा नियंत्रित वेंटिलेशन के साथ चूहों को घुंघराले करें। 75−85 स्ट्रोक/न्यूनतम, १०० एमएल/स्ट्रोक/बीडब्ल्यू(चित्रा 1A)पर । यदि आवश्यक हो, तो इंडबटिंग करते समय बेहतर दृश्य के लिए: स्थानीय विश्राम प्राप्त करने के लिए निचले फरीनेक्स पर कपास-ऊन टिप के माध्यम से जाइलोकैन लागू करें।
  3. चूहों को एक गर्म ऑपरेटिंग टेबल पर एक रीढ़ की स्थिति में रखें और टेप(चित्रा 1B)के साथ अग्रअंगों को ठीक करें।
  4. जांच के साथ गुदा तापमान को मापें।
    नोट: इसे 37.5−38.5 डिग्री सेल्सियस के बीच रखा जाना चाहिए।
  5. छाती को शेव करें और ऑपरेटिंग एरिया को एंटीसेप्टिक पोविडोन आयोडीन सॉल्यूशन से साफ करें। आंखों के सूखने से रोकने के लिए चूहे पर आंखों का मरहम लगाएं।
  6. पिरिट्रामाइड (0.1 एमएल/किलो बीडब्ल्यू) को इंट्रापेरिटी रूप से इंजेक्ट करके इंट्राऑपरेटिव एनाल्जेसिया का संचालन करें।
  7. जानवर के चरम हिस्सों में ईसीजी जांच को कम से कम रखें।
  8. सर्जिकल प्रक्रिया शुरू करने से पहले पूंछ और अंगुली सजगता की जांच करें।

2. सर्जिकल प्रक्रिया-मायोकार्डियल इस्केमिया का प्रेरण

  1. स्केलपेल का उपयोग करके त्वचा का चीरा करें। तीसरे इंटरकोस्टल स्पेस के स्तर पर बाएं छाती पर 2 मिमी पैरास्टेर शुरू करना सुनिश्चित करें और 5 वें इंटरकोस्टल स्पेस(चित्रा 1C)के स्तर पर पूर्वकाल एक्सिलरी लाइन जारी रखें।
  2. पसलियों को दृश्यमान बनाने के लिए सतही मांसपेशियों को धीरे से बदलें(चित्रा 1D)।
  3. मामूली रक्तस्राव के मामले में, एक कॉटर का उपयोग काटना या आसपास के ऊतकों को डिस्कनेक्ट करने के लिए करें।
  4. चौथे इंटरकोस्टल स्पेस के स्तर पर थोराकोटॉमी करें और दिल और फेफड़े(चित्रा 1E)की दृश्यता हासिल करने के लिए एक रिट्रैक्टर डालें। रक्तस्राव से बचने के लिए सावधानी से प्लूरा खोलें।
  5. एक निश्चित समय पर इस्केमिया/रिफ्यूजन (एमआईआर) को प्रेरित करने के लिए एक टूनीकेट का उपयोग करके अस्थायी रूप से बालक को ऑक्सीलेड करें; या स्थायी रूप से (एमआई) लिगामेंट (चित्रा 1एफ, जी)को बंद करने के लिए 6-0 सीवन का उपयोग करके6−7समुद्री मील बनाकर इसे ऑक्सील्यू कर दिया।
    नोट: बालक के ऑक्सक्यूज़न के लिए सही स्थान दिल के वेंट्रल/बाएं पार्श्व मार्जिन पर बाएं अर्क के नीचे लगभग 2−3 मिमी स्थित है। सफल ऑक्लूसी ईसीजी परिवर्तन (एसटी-सेगमेंट ऊंचाई) और एलवी में स्थूल परिवर्तनों के साथ पालिंग के रूप में जुड़ा हुआ है।
  6. इस्केमिया/रिफ्यूफ्यूजन मॉडल के मामले में, 30 मिनट के ऑक्सफ्यूजन के बाद टूनीकेट को हटाकर बालक को फिर से खोलें ।
  7. 4-0 सिंगल मोनोफिलमेंट सीवन(चित्रा 1H)का उपयोग करके तीन सिंगल बटन टांके के साथ छाती बंद करें। पिछले सीवन को कसने से पहले, एक नूमोथोरैक्स(चित्रा 1I)को रोकने के लिए 10 एमएल सिरिंज के साथ छाती से किसी भी अवशिष्ट हवा को हटा दें।
  8. मांसपेशियों को फिर से स्थापित करें और अस्थिर एनेस्थीसिया को बंद कर दें।
  9. सीवन एक सतत सीवन के साथ एक 4-0 सीवन(चित्रा 1J)का उपयोग कर त्वचा ।
  10. चूहों द्वारा सीवन के संक्रमण और काटने से बचाने के लिए एक एंटीसेप्टिक स्प्रे प्रशासित करें।

3. पश्चात उपचार और बहिष्कार मापदंड

  1. चूहों को हीटिंग टेबल पर तब तक रखें जब तक वे जाग न जाएं। जैसे ही वे अनायास सांस लेना शुरू करते हैं, चूहों को उत्तेजित करें।
  2. उन्हें ठंडा करने से रोकने के लिए एक हीटिंग लैंप के नीचे एक पिंजरे में extubated चूहों रखो।
  3. मानकीकृत परिस्थितियों में जानवरों के घरों में चूहों को वापस करें जब वे सामान्य रूप से फिर से व्यवहार करना शुरू करते हैं।
  4. तीन दिनों के लिए पोस्ट-ऑपरेटिव एनाल्जेसिया के लिए 250 एमएल पानी के लिए पिरिट्रामाइड के 2 एम्पुल्स और 5% ग्लूकोज के 30 एमएल जोड़ें।
  5. चेकलिस्ट और अपवर्जन मापदंड(तालिका 1)के साथ चूहों की फिटनेस और व्यवहार की जांच करें। अगले सप्ताह के लिए दिन में दो बार जानवरों का निरीक्षण करें, फिर सप्ताह में दो बार।
    नोट: अंतरराष्ट्रीय मानकों के अनुसार, किसी भी पीड़ित जानवरों, या जानवरों है कि चेकलिस्ट के साथ मूल्यांकन में 6 अंक तक लाभ, पशु चिकित्सकों के लिए चिकित्सा से संबंधित निर्णय करने के लिए पेश करते हैं । 7 या अधिक अंक हासिल करने वाले किसी भी जानवर को तुरंत केटामाइन और जाइलाज़ीन की ओवरडोज के साथ बलिदान किया जाना चाहिए।
परीक्षा अवलोकन स्कोर
शरीर का वजन स्थिर 0
10% नुकसान 4
48 घंटे के लिए 15% नुकसान 7
18% नुकसान 7
सामान्य (कोट फ्लैट और चमकदार) 0
बाहरी उपस्थिति पिलोरेक्शन 1
हीमाटोमा 2
त्वचा के घाव/कटौती/काटने के निशान 2
गंभीर रूप से कम ग्रूमिंग 4
(छिद्र अशुद्ध/क्लॉटेड या नम) 7
गंभीर त्वचा जलन या घाव 7
कूबड़ आसन और gt;2 घंटे 7
महत्वपूर्ण पेट का तनाव (ascites) 7
व्यवहार सामान्य (सो, जिज्ञासु, सामाजिक संपर्क, प्रतिक्रिया जब छुआ) 0
असामान्य व्यवहार, जैसे बिगड़ा गतिविधि 2
आत्म-अलगाव, स्पष्ट अतिसक्रियता या स्टीरियोटाइपिया 4
लेटेंगिया के लिए & 6 घंटे 4
6 घंटे से 8 घंटे के लिए सुस्ती 7
उदासीन और जीटी;8 घंटे 7
स्टीरियोटाइपिया के लिए निर्बाध और gt;10 मिनट के लिए और अभी भी 2 घंटे के बाद बनी हुई है 7
छूने पर दर्द के लक्षण 7
ऑटोम्यूटेशन 7
पाचन सामान्य 0
दस्त (मुलायम मल) 3
72 घंटे या पानी के लिए दस्त 7
खूनी मल 7

तालिका 1: चेकलिस्ट और बहिष्कार मानदंड। इस तालिका में परीक्षाएं शामिल हैं जिन्हें देखा जाना चाहिए और इसी स्कोर। तदनुसार, जानवर के पोस्ट-ऑपरेटिव उपचार को अनुकूलित किया जाना चाहिए, या एक पशुचिकित्सक से परामर्श किया जाना चाहिए।

4. इकोकार्डियोग्राफी माप

नोट: इकोकार्डियोग्राफी आमतौर पर दो बार किया जाता है, एमआई के प्रेरण से पहले और अंगों को काटा जाने से पहले।

  1. चूहों को जाइलाज़ीन (4 मिलीग्राम/किलो बीडब्ल्यू) और केटामाइन (100 मिलीग्राम/किलो बीडब्ल्यू) के मिश्रण से इंजेक्ट करें।
  2. चूहों को हीटिंग ट्रे पर एक रीढ़ की स्थिति में रखें। छाती पर इको जेल लगाएं, जो अल्ट्रासाउंड तरंगों को बेहतर यात्रा करने में मदद करता है और संकेत हस्तक्षेप को कम करता है।
  3. पेपिलरी मांसपेशियों के स्तर पर एलवी गुहा के पैरास्टेरल शॉर्ट एक्सिस दृश्य प्राप्त करें।
  4. बाएं वेंट्रिकुलर रिजेक्शन अंश और आकृति विज्ञान को मापने के लिए एम-मोड इकोकार्डियोग्राफी करें।

5. अंग संचयन (काम कर रहे दिल के बिना)

  1. अंग संचयन से पहले जाइलाज़ीन (4 मिलीग्राम/किलो बीडब्ल्यू) और केटामाइन (100 मिलीग्राम/किलो बीडब्ल्यू) को इंट्रापेरिटोनली रूप से प्रशासित करें। सुनिश्चित करें कि सजगता नकारात्मक हैं।
    नोट: कोई इंस्टुबेशन की आवश्यकता नहीं है क्योंकि प्रक्रिया 1 मिनट से अधिक समय तक नहीं होती है।
  2. xiphoid के तहत त्वचा का चीरा बनाने के लिए एक स्केलपेल का उपयोग करें और कैंची का उपयोग करके दोनों पक्षों पर पसलियों के समानांतर इसका विस्तार करें।
  3. ललाट एक्सिलरी लाइन में पसलियों को काटें और छाती को ऊपर उठाने के लिए xiphoid कोपकड़ें (चित्रा 2A)।
  4. दो जोड़ी संदंश के साथ ऊतक को ध्यान से टूटना द्वारा शारीरिक या फाइब्रोटिक ऊतक आसंजन को हटा दें।
  5. 5 एमएल सिरिंज के साथ वेना कावा अवर से रक्त के नमूने (रक्त गैस मूल्यांकन या आणविक विश्लेषण के लिए) लें।
  6. इनलेट और आउटलेट स्तर(चित्रा 2B)पर पूरे दिल का एक्सिशन करें। यदि आवश्यक हो, तो सेक्शन 6 में वर्णित कामकाजी दिल मूल्यांकन के साथ आगे बढ़ें।
  7. फसल के अंग, उन्हें तरल नाइट्रोजन में ठंढ और आगे आणविक विश्लेषण के लिए -80 डिग्री सेल्सियस में स्टोर करें, या हिस्टोलॉजिकल उद्देश्यों के लिए फॉर्मलडिहाइड में।

6. एक कामकाजी हृदय प्रणाली के माध्यम से पूर्व वीवो हीमोडायनामिक माप

नोट: सामान्य सेटअप और उपकरण के घटकों को पहले11वर्णित किया गया है । निम्नलिखित प्रोटोकॉल जानवर के दिल की हैंडलिंग और एलवी फ़ंक्शन का मूल्यांकन करने के लिए आवश्यक कदमों का वर्णन करता है।

  1. चूहों को चरण 5.1 में वर्णित और नसों के अनुसार हेपरिन (फीमोरल नस) के 200 आईयू इंजेक्ट करें।
  2. एक स्केलपेल के साथ कॉस्टल आर्क के नीचे एक चीरा के माध्यम से छाती खोलें और इसे कैंची के साथ दोनों पूर्वकाल सहायक लाइनों तक विस्तारित करें और उरोस्थि को ऊंचा करें।
  3. अपने आउटलेट के पास महान जहाजों को काटें या दिल में प्रवेश करने के लिए यह उत्पादित(चित्रा 2B)
  4. बर्फ-ठंडे क्रेब्स-हेन्सेलिट बफर में दिल विसर्जित करें और इसे महाधमनी(चित्रा 3 ए)के माध्यम से एरिथ्रोसाइट-पेर्फस्ड पृथक हृदय प्रणाली पर माउंट करें।
  5. 60 एमएमएचजी (स्थिरीकरण अवधि) के निरंतर आँसलोड के साथ एलडी मोड से शुरू करें।
  6. एलडी मोड के 15 मिनट के बाद, डब्ल्यूएच मोड पर स्विच करें। इसलिए, एक फेफड़े की नस(चित्रा 3B)के माध्यम से बाएं एट्रियम को कैनुलेट कर सकते हैं। फिर, अलिंद कैनुला को ओक्ल्यूडेड करने वाली क्लिप को खोलकर सिस्टम में प्रवाह दिशा बदलें। इसके परिणामस्वरूप बाएं आलिंद का पर्फ्यूजन होता है और बाएं हृदय में शारीरिक रक्त प्रवाहहोताहै ।
  7. डब्ल्यूएच मोड में 20 मिनट के लिए हीमोडायनामिक माप रिकॉर्ड करें।
  8. कोरोनरी प्रवाह (CF, एमएल/न्यूनतम) हर 5 मिनट को मापने के लिए 2 एमएल सिरिंज के साथ कोरोनरी की रक्त बूंदें ले लीजिए ।
    नोट: CF को बाएं एट्रियल फ्लो (एलएएफ) और महाधमनी प्रवाह (वायु सेना) के बीच अंतर के रूप में मापा जाता है।
  9. प्रवाह जांच के साथ एलएएफ (कार्डियक आउटपुट के बराबर) और वायु सेना के निरंतर माप करें।
    नोट: जांच WH तंत्र के माध्यम से एलवी में डाला जाता है । सभी डाटा लगातार दर्ज हो रहे हैं।
  10. यदि चल रहे प्रोटोकॉल अनुरोधों, एलवी में महाधमनी वाल्व के माध्यम से एक उच्च निष्ठा कैथेटर प्रतिगामी डालें और बाएं वेंट्रिकल सिस्टोलिक दबाव (LVSP) को मापने ।
  11. प्रति मिनट किए गए दबाव-मात्रा कार्य का आकलन करने के लिए, हृदय गति से विभाजित हृदय उत्पादन के रूप में स्ट्रोक की मात्रा की गणना करें।
  12. निम्नलिखित सूत्र के अनुसार बाहरी हृदय कार्य (ईएचडब्ल्यू) की गणना करें: सीओ एक्स एलवीएसपी(जी एक्स एम/मिनट) दिल के वजन को सामान्य किया जाता है।

Representative Results

निम्नलिखित परिणाम पिल्ज़ एट अल6द्वारा प्रकाशित किए गए हैं । इस सटीक सर्जिकल प्रक्रिया के साथ, रिमोट इस्कीमिक परकंडीशनिंग (आरआईपीआरसी) के कार्डियोप्रोटेक्टिव प्रभाव की जांच की जा सकती है। यह तीव्र एमआई या एमआई और बाद में वेंट्रिकुलर रीमॉडलिंग से पीड़ित रोगियों के लिए एक संभावित नया उपचार है, जो कई मामलों में लगातार एचएफ की ओर जाता है । एमआई/एमआईआर के रोगविज्ञानी परिवर्तनों की नकल करना उपचार के मूल्यांकन में एक अनिवार्य कदम है जैसा कि विट्रो या पूर्व वीवो अध्ययन शारीरिक वातावरण प्रदान नहीं करते हैं । इस प्रोटोकॉल में, जानवरों को 30 मिनट बालक ऑक्लसियन के अधीन किया गया था जिसके बाद रिफ्यूजन (यानी, मीर) था।

प्रक्रिया की प्रजनन क्षमता को साबित करने के लिए, हिस्टोलॉजिकल कटौती और दाग(चित्रा 4A)किए गए थे। यह स्पष्ट था कि MIR + RIPerc इलाज जानवरों में फाइब्रोटिक निशान नकली जानवरों के निशान गठन के साथ तुलनीय था, जबकि शाम और मीर समूहों के बीच फाइब्रोसिस की तुलना महत्वपूर्ण था(चित्रा 4B)। इसके अतिरिक्त, MIR + RIPerc इलाज जानवरों मीर इलाज जानवरों की तुलना में काफी कम फाइब्रोसिस दिखाया । हालांकि, प्रतिनिधि हिस्टोलॉजिकल छवियां इस शल्य प्रक्रिया की शक्ति को स्पष्ट करते हैं क्योंकि इंफार्क्शन स्पष्ट रूप से एमआईआर समूह(चित्र 4 ए)में निरंतर है। वीवो एचोग्राफी में उपयोग करना, रिजेक्शन अंश, एलवी एंड-डायस्टोलिक और एंड-सिस्टोलिक व्यास (एलवीईडी और एलवीएसडी) को मापा गया और मीर उपचार के कारण कार्डियक फंक्शन में काफी कमी दिखाई गई जबकि हीमोडायनामिक पैरामीटर को आरआईपीआरसी(चित्रा 4C−F)−Fद्वारा संरक्षित किया गया था। पूर्व वीवो हीमोडायनामिक डेटा ने प्रक्रिया की प्रभावशीलता का प्रदर्शन किया क्योंकि एमआईआर समूह ने एलवीएसपी, कार्डियक आउटपुट (सीओ), स्ट्रोक वॉल्यूम (एसवी) के साथ-साथ बाहरी हृदय कार्य (ईएचडब्ल्यू)(चित्रा 5ए−जी)में महत्वपूर्ण कमी दिखाई।

इस शल्य प्रक्रिया के बारे में एक साहित्य खोज कोई नकारात्मक या नाकाफी टिप्पणी और परिणाम जब यह पर्याप्त रूप से किया गया था की सूचना दी । फिर भी, परिचय में उल्लिखित नुकसान और चर्चा को रोका जाना चाहिए और प्रदर्शन का एक स्थिर स्तर प्राप्त करने और तुलनीय परिणाम प्राप्त करने के लिए प्रशिक्षण अनिवार्य है ।

Figure 1
चित्रा 1: प्रीऑपरेटिव तैयारी और सर्जिकल प्रक्रिया। (A)14 जी ट्यूब का उपयोग करके जानवर का तीतुबेशन। (ख)शल्य क्षेत्र की सुपाइन पोजिशनिंग और कीटाणुशोधन। (ग)त्वचा चीरा (3 इंटरकोस्टल स्पेस के स्तर पर बाएं छाती पर 2 मिमी पैरास्टेर) । चीरा 5 वीं इंटरकोस्टल अंतरिक्ष के स्तर पर पूर्वकालक्षति रेखा तक पहुंचना चाहिए। (घ)पसलियों को दृश्यमान बनाने के लिए मांसपेशियों को विस्थापित करें। (ई)छाती का उद्घाटन । (एफ)6−7 नॉट का उपयोग करके बालक का स्थायी ऑक्सक्लूशन। (जी)एक टूनीकेट का उपयोग करके बालक का क्षणिक ऑक्क्यूशन। (ज)पसलियों के चारों ओर तीन सिंगल-गांठ टांके रखकर मायोकार्डियल इस्केमिया और रिफ्यूजन के बाद छाती को बंद करना । (I)छाती का उचित समापन। पिछले गाँठ को कसकर ठीक करने से पहले छाती से किसी भी अवशिष्ट हवा को हटाने के लिए 10 एमएल सिरिंज का उपयोग करें। यह एक नूमोटोराक्स को रोकने के लिए अभिन्न है। (जम्मू)त्वचा सीवन । कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 2
चित्रा 2: अंग संचयन। (क)सब-xiphoidal कटौती के साथ छाती खोलें और उन्हें दोनों मध्य-अक्षीय रेखाओं तक विस्तारित करें । पसलियों के माध्यम से आगे कटौती उरोस्थि उठाने की सुविधा के लिए किया जाता है। (ख)दिल का उत्तेजन । कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 3
चित्र 3: अलग दिल तंत्र। (A)लैंगेंडोर्फ मोड। दिल महाधमनी के कैनुलेशन के माध्यम से डब्ल्यूएच तंत्र पर चढ़कर है। (ख)वर्किंग हार्ट मोड । सिस्टम को बाएं एट्रियम को कैनललेट करके कार्डियक फ़ंक्शन का मूल्यांकन करने के लिए डब्ल्यूएच मॉडल में बंद किया जा सकता है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 4
चित्रा 4: निशान गठन पर रिमोट इस्कीमिक कंडीशनिंग का प्रभाव, बाएं वेंट्रिकुलर फ़ंक्शन और रीमॉडलिंग। (क)हिस्टोलॉजिकल एलवी स्लाइस 14 दिन के बाद मायोकार्डियल रिपरफ्यूजन काटा । (ख)बार ग्राफ में फाइब्रोसिस के मात्रात्मक परिणाम । (ग)प्रतिनिधि एम-मोड इकोकार्डियोग्राम। (घ)रिजेक्शन अंश (ईएफ) बार ग्राफ में मात्रा निर्धारित । (ई)एलवी एंड सिस्टोलिक व्यास (एलवीईएसडी) बार ग्राफ में मात्रा निर्धारित करता है। (एफ)एलवी एंड डायस्टोलिक व्यास (एलवीईडी) बार ग्राफ में मात्रा निर्धारित करता है। मीर, मायोकार्डियल इस्केमिया-रिफ्यूजन; आरआईपीआरसी, रिमोट इस्कीमिक परकंडीशनिंग। डेटा को मतलब ± एसईएम के रूप में व्यक्त किया जाता है। * पी एंड एलटी; 0.05; **p< 0.01; पी एंड एलटी; 0.001। एल्सवियर से अनुमति के साथ पिल्ज़ एट अल6 से पुनर् मुद्रित। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 5
चित्रा 5: एलवी हीमोडायनामिक फ़ंक्शन पर आरआईपीआरसी का प्रभाव। (A)एलवी सिस्टोलिक प्रेशर (एलवीएसपी),(बी)कार्डियक आउटपुट (सीओ), और(सी)स्ट्रोक वॉल्यूम (एसवी) परिणाम 14 पोस्ट-मायोकार्डियल रिपरफ्यूजन के दिन अलग-थलग काम करने वाले दिल से प्राप्त किए गए थे । (घ)सीओ को आफलोड के एक समारोह के रूप में चित्रित किया गया है; (एफ)बाहरी दिल-आफलोड के कार्य के रूप में काम करते हैं, बार ग्राफ(ई और जी)में मात्रात्मक परिणाम। डेटा मतलब ± SEM और n = 4-7 प्रति समूह के रूप में व्यक्त किया जाता है। * पी एंड लेफ्टिनेंट; 0.05; **p< 0.01; पी एंड एलटी; 0.001। मीर, मायोकार्डियल इस्केमिया/रिप्रफ्यूजन; आरआईपीआरसी, रिमोट इस्कीमिक प्रीकंडीशनिंग; EHW, बाहरी दिल काम; एसवी, स्ट्रोक की मात्रा; एयूसी, वक्र के तहत क्षेत्र। एल्सवियर से अनुमति के साथ पिल्ज़ एट अल6 से पुनर् मुद्रित। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Discussion

प्रतिकूल रीमॉडलिंग पोस्ट-एमआई को हार्ट फेलियर के विकास में एक महत्वपूर्ण तंत्र माना जाता है। इसलिए, हृदय अनुसंधान की निरंतरता सुनिश्चित करने के लिए, प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं और तकनीकों को पुन: पेश किया जाना चाहिए। एक सुबोध और स्पष्ट रूप से परिभाषित प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल प्रजनन का एक मौलिक तत्व है। प्रजनन क्षमता उन परिणामों को संदर्भित करती है जिन्हें कई वैज्ञानिकों द्वारा दोहराया जा सकता है और प्रयोगशालाओं में मान्य किया जाता है। इस अध्ययन का उद्देश्य पुरानी या फिर से पर्फोसेड एमआई को प्रेरित करने और चूहों में कार्डियक हीमोडायनामिक फ़ंक्शन का आकलन करने के लिए एक अर्ध-न्यूनतम आक्रामक विधि पेश करना है।

ये परिणाम और आगे प्रकाशित डेटा इस शल्य चिकित्सा विधि की उच्च शक्ति और एमआई, रीमॉडलिंग और एचएफ पर अनुसंधान में इसके महत्व को दर्शाते हैं। जबकि इस्केमिया/रिफ्यूजन इंजरी का इस्तेमाल बाद के रिफ्यूजन के साथ एमआई में होने वाले बदलावों को समझने के लिए किया जा सकता है, स्थायी ऑक्लंफ्यूजन मायोकार्डियम की शॉर्ट और लॉन्ग-टर्म रिमॉडलिंग प्रक्रियाओं को और समझने की अनुमति देता है । अन्य शल्य चिकित्सा दृष्टिकोण अधिक ऊतक क्षति का कारण बनते हैं और जानवर संक्रमण और न्यूमोथोरैक्स विकसित करने के उच्च जोखिम दिखाते हैं, जिसके परिणामस्वरूप ड्रॉप आउट की दर अधिक होती है। इसके विपरीत, इस प्रक्रिया का उद्देश्य सेटअप और हैंडलिंग में विशिष्ट सुधारों द्वारा मृत्यु दर को कम करना है। इसके अतिरिक्त, वे अस्थिर बालक ऑक्सक्लूज़न के कारण फाइब्रोटिक निशान विस्तार में भिन्नता दिखाते हैं।

हमारा प्रोटोकॉल इंडबेशन के लिए एक आसान तरीका प्रदान करता है, जो पूरी प्रक्रिया के सबसे महत्वपूर्ण चरणों में से एक है। 12 कई अन्य प्रकाशनों के विपरीत, हमारी प्रक्रिया में ट्रेकिओटॉमी नहीं कियाजाताहै। यह जानवरों के बाद के जानवरों के जागृति और पुनर्वास को बढ़ाता है, जिससे रोगविज्ञानी परिवर्तनों का विकास होता है जो जानवरों के बाद ऑपरेटिव माप से गुजरने से पहले इस शल्य प्रक्रिया द्वारा इरादा किया जाता है। जाहिर है, अगर यह एक गैर-जीवित प्रोटोकॉल है, तो ट्रेकिओटॉमी दृष्टि के तहत किया जाता है और इस प्रकार प्रदर्शन करना आसान होता है। इसके अतिरिक्त, एक अस्तित्व-प्रोटोकॉल में श्वासनली का समापन लागू नहीं होता है। यदि छाती खोली जाती है, तो पतन को रोकने के लिए फेफड़ों को हवादार करना अनिवार्य है। इसलिए, शल्य चिकित्सा प्रक्रिया से पहले चूहों को टोक दिया जाता है। न्यूनतम आक्रामक दृष्टिकोण पसलियों या उरोस्थि को इस प्रकार छाती की कॉम्पैक्टनेस और स्थिरता को बनाए रखने में कटौती नहीं करता है। नतीजतन, जानवरों की वसूली में सुधार होता है, और सहज न्यूमोथोरैक्स या रक्तस्राव का खतरा अपेक्षाकृत कम होता है।

जैसा कि ऊपर उल्लिखित है, जबकि इंडबेशन स्पष्ट लाभ का है, प्रदर्शन करना मुश्किल है और प्रयोगों की शुरुआत में उच्च ड्रॉप आउट दर का कारण बन सकता है। इस समस्या को प्रशिक्षण और कुछ शारीरिक ज्ञान के साथ कम किया जा सकता है। ट्यूब को सही कोण पर डालने और जानवर के शरीर को तब तक फैलाना महत्वपूर्ण है जब तक कि प्रकाश मुखर होंठों के माध्यम से चमकता है जिसके बाद ट्यूब को धीरे से आगे बढ़ाया जा सकता है। मुखर होंठों को नुकसान न पहुंचाने का ध्यान रखें क्योंकि इससे सूजन, बाद में ग्लोटिस और घुटन का ऑक्लोन हो सकता है।

यह भी महत्वपूर्ण है कि बालक सही ढंग से लिगामेंट है । छोटी शल्य चिकित्सा खिड़की, तेजी से धड़कने दिल, और हवादार फेफड़े (हर संपर्क के रूप में जितना संभव हो इसे छूने से बचें फेफड़ों में रक्तस्राव में परिणाम हो सकता है) पोत स्पष्ट रूप से दिखाई नहीं देता है। इसलिए शारीरिक ज्ञान अपरिहार्य है। बाएं अर्क जोखिम में दोनों क्षेत्र को मानकीकृत करने और बालक के चारों ओर लिगेशन की स्थिति में मदद करने के लिए अपरिहार्य है। सिलाई को इंट्रामुरैली में किया जाना चाहिए, एलवी में ट्रांसमुरally नहीं क्योंकि इससे एलवी चैंबर व्यास और मात्रा में कमी आ सकती है जो रोग प्रक्रियाओं के कारण नहीं है। सफल ऑक्क्लुस ईसीजी पर जोखिम और एसटी-सेगमेंट की ऊंचाई पर मायोकार्डियल क्षेत्र के साइनोसिस से जुड़ा हुआ है। इस प्रक्रिया की मुख्य सीमा सीवन की सही स्थिति है। तुलनीय परिणाम प्राप्त करने के लिए, टांके एक ही स्तर पर होना चाहिए और ऊतक की इसी तरह की मात्रा का उपयोग करने की जरूरत है । इसके लिए उच्च स्तर के प्रशिक्षण की आवश्यकता होती है और पशुओं के विभिन्न भारों पर विचार किया जाना चाहिए । विचार करने के लिए एक और बिंदु इंटरकोस्टल अंतरिक्ष के बंद होने से पहले वायोथोरैक्स को पर्याप्त रूप से हटाना है। यदि यह ठीक से नहीं किया जाता है, तो जानवर सांस लेने में कठिनाइयों का प्रदर्शन करेंगे क्योंकि बाएं फेफड़ों की मुद्रास्फीति एक नूमोथोरैक्स द्वारा बाधित होगी। जैसा कि ऊपर उल्लिखित है, छाती से किसी भी अवशिष्ट हवा को हटाने के लिए सिरिंज का उपयोग करके इसे कम किया जा सकता है।

वर्तमान में, यह एमआई प्रक्रिया एक आमतौर पर उपयोग की जाने वाली विधि है जो तुलनात्मक परिणामों और उच्च जीवित रहने की दर की गारंटी देती है यदि महत्वपूर्ण कदम उच्च परिशुद्धता के साथ किए जाते हैं। एमआई, एचएफ या कार्डियक रीमॉडलिंग में विभिन्न उपचारों, उपकरणों या दवाओं पर भविष्य की परियोजनाओं का मूल्यांकन इस न्यूनतम आक्रामक तकनीक को निष्पादित करके किया जा सकता है।

डब्ल्यूएच माप, उपरोक्त के रूप में, आमतौर पर इसके रखरखाव और हैंडलिंग के रूप में उपयोग नहीं किए जाने वाले विशिष्ट उपकरणों और ज्ञान की आवश्यकता होती है। प्रतिनिधि और तुलनीय डेटा प्राप्त करने के लिए, नुकसान से बचा जाना चाहिए । सबसे महत्वपूर्ण कदम दिल के बढ़ते और डी मॉडल से डब्ल्यूएच मोड में स्विचकर रहे हैं। यदि दिल को पर्याप्त रूप से उत्पादित नहीं किया जाता है, तो बढ़ते हुए मुश्किल हो सकता है क्योंकि उपकरण के लिए दिल को ठीक करने के लिए पर्याप्त महाधमनी ऊतक लंबाई की आवश्यकता होती है। एलडी मोड से जुड़ने के तुरंत बाद, ठंडे बफर में धोने, शरीर में अपनी शारीरिक उत्तेजनाओं के वियोग या उपकरण द्वारा किसी अन्य प्रजाति से रक्त के साथ रिफ्यूजन के कारण दिल की आवृत्ति कम हो सकती है। ऐसे मामलों में, शारीरिक आवृत्ति को बहाल और संरक्षित करने के लिए एक पेसमेकर लागू किया जाना चाहिए। यह सभी जानवरों में तुलनीय परिणाम सुनिश्चित करता है। चूंकि उपकरण के भीतर रक्त की मात्रा चूहों में शारीरिक मात्रा का एक बहु है, क्रेब्स-हेन्सेलिट बफर-आधारित निलंबन में गोजातीय लाल रक्त कोशिकाओं का उपयोग किया जाता है।

एलडी मोड से डब्ल्यूएच मोड में स्विच निष्क्रिय से सक्रिय दिल के काम के लिए एक स्विच का पर्याय बन गया है। एलडी मोड का उपयोग अपने नए वातावरण के लिए दिल को आदी करने के लिए किया जाता है। डब्ल्यूएच मोड में, दिल को अपने शारीरिक इंजेक्शन कार्यों को करना चाहिए। इसलिए, आ रहा है कि आगे बढ़ने से मूल्यांकन से पहले नई परिस्थितियों के लिए एक छोटा अनुकूलन चरण आवश्यक है।

एक और महत्वपूर्ण कदम जो आमतौर पर भूल जाता है वह है उपकरण और परफ्यूसेट की पर्याप्त तैयारी और रखरखाव। प्रत्येक यौगिक की सटीक मात्रा मिश्रित किया जाना चाहिए और प्रणाली के भीतर तापमान को नियंत्रित और समायोजित किया जाना चाहिए । फिर भी, डब्ल्यूएच कार्डियक आउटपुट, स्ट्रोक की मात्रा, लेफ्ट वेंट्रिकुलर सिस्टोलिक प्रेशर और कोरोनरी फ्लो का आकलन करने के लिए एक सुरुचिपूर्ण तरीका है।

एमआई को प्रेरित करने के लिए यह अत्यधिक प्रजनन योग्य प्रक्रिया और डब्ल्यूएच उपकरण द्वारा प्राप्त डेटा का प्रतिनिधित्व करने वाली प्रक्रिया स्वयं अपनी क्षमता साबित कर रही है। अर्ध-न्यूनतम आक्रामक दृष्टिकोण, बालक ऑक्लूशन और इंस्टुबेशन विधि का स्तर तेजी से वसूली और इनफार्ट आकार में कम परिवर्तनशीलता की सुविधा प्रदान करता है। इसके अतिरिक्त, अलग काम कर रहे दिलों में हृदय समारोह विश्लेषण मूल्यवान हीमोडायनामिक परिणाम प्रदान करते हैं।

Disclosures

लेखकों के पास खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।

Acknowledgments

लेखक ऑपरेशन थियेटर टीम और उनके योगदान, तकनीकी सहायता, मूल्यवान इनपुट और सलाह के लिए जैव चिकित्सा अनुसंधान के लिए केंद्र के तकनीशियनों का शुक्रिया अदा करते हैं । परियोजनाओं को लुडविग बोल्ट्ज़मैन इंस्टीट्यूट, क्लस्टर फॉर कार्डियोवैस्कुलर रिसर्च (रेम प्रोजेक्ट) द्वारा वित्त पोषित किया जाता है।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
ANAESTHESIA & ANALGESIA
Isoflurane Zoetis TU061219 / 8-00487
Ketamine Dr. E. Gräub AG 100 mg/kg of bodyweight
Piritramide Hameln-Pharma Plus GmbH 2 ampulles with 30 ml of Glucose 5% in 250ml water
Xylazine Bayer 4 mg/kg of bodyweight
INTUBATION
Air
Oxygen (pure)
Ventilation machine Hugo Sachs Electronics UGO Basile S.R.L. Respirator
14-gauge tube Dickinson and Company BD Venflon
PREPARATION
Anti-septic povidine iodine solution  Mundipharma Betaisodona solution
Eye ointment  Fresenius Kabi Austria Oleovital with Vitamin A + Dexpanthenol
Shaver
SURGICAL INSTRUMENTS
Anatomical forceps Martin 12-272-15
Anatomical forceps small Martin 24-386-16
Anatomical forceps thin Odelga RU4042-15
Cautery Fine Tip High Temp bvi-Accu-Temp
Cup (small, for liquids) Martin 56-231/11
Mensur MTI 29-260/25
Mosquito clamps MTI 05-055/12
Needleholder short Martin 20-658-14
Needleholder thin Martin
Round hook BT-190
Scalpell size 3 Swann Morton No.10, 0301
Scissors for tissue preparation Aesculap BC259R
Sharp scissors MTI 01-010/10
Small retractor Alm AM.416.10
Surcigal forceps Martin 12-321-13
Surgical scissors
SUTURES
PermaHand Silk 4-0 Johnson & Johnson Medical Products GmbH K891H
Vicryl 4-0 Johnson & Johnson Medical Products GmbH JV2024 single monofil suture 
Vicryl 6-0 Johnson & Johnson Medical Products GmbH V301G polyethylene suture 
COMPUTER PROGRAMS & APPARATUS
Labchart 7 Pro ADInstruments v7.3.2 Labchart Software
PowerLab System  ADInstruments Powerlab 8/30
EX VIVO HEMODYNAMICS
Flowmeter Narcomatic RT-500 Narco Bio-Systems flow probe 
Isolated heart apparatus  Hugo Sachs Electronics
Labchart 7 Pro ADInstruments GmbH v7.3.2 Labchart Software
Millar SPR-407 Millar Instruments Inc. 840-4079 high-fidelity MicroTip catheter 
Needle electrodes via Animal bio Amp ADInstruments GmbH MLA1203
Physiological Pressure Transducer (MLT844) with Clip-on BP Domes  ADInstruments GmbH MLT844
PowerLab System  ADInstruments GmbH Powerlab 8/30

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References

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Pilz, P. M., Lang, M., Hamza, O.,More

Pilz, P. M., Lang, M., Hamza, O., Szabo, P. L., Inci, M., Kramer, A. M., Koch, M., Huber, J., Podesser, B. K., Kiss, A. Semi-Minimal Invasive Method to Induce Myocardial Infarction in Rats and the Assessment of Cardiac Function by an Isolated Working Heart System. J. Vis. Exp. (160), e61033, doi:10.3791/61033 (2020).

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