प्रसवातर माउस में नॉनइनवेसिव इलेक्ट्रोकार्डियोग्राफी
Summary
यहां, हम एक नॉनइनवेसिव इलेक्ट्रोकार्डियोग्राफी (ईसीजी) प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं, जो शुरुआती प्रसवोत्तर चूहों के लिए अनुकूलित होता है, जिसके लिए एनेस्थेटिक्स के उपयोग की आवश्यकता नहीं होती है।
Abstract
इलेक्ट्रोकार्डियोग्राफी (ईसीजी) लंबे समय से रोग के मानव और पशु मॉडल दोनों में हृदय (और कार्डियोपल्मोनरी) समारोह का आकलन करने की एक प्रभावी और विश्वसनीय विधि के रूप में भरोसा किया गया है । ईसीजी से एकत्र किए गए मात्रात्मक मापदंडों के साथ-साथ हृदय चक्र के एकीकृत शरीर विज्ञान का आकलन करने के लिए व्यक्तिगत हृदय गति, लय और नियमितता, कार्डियक चालन प्रणाली की अखंडता का आकलन करने की सेवा करतेहैं। यह लेख एनेस्थेटिक्स के उपयोग की आवश्यकता के बिना, पहले प्रसवोत्तर दिन के रूप में प्रसवकालीन और नवजात माउस पिल्ले पर एक गैर-भेदभावपूर्ण ईसीजी करने के लिए उपयोग किए जाने वाले तरीकों और तकनीकों का एक व्यापक विवरण प्रदान करता है। यह प्रोटोकॉल नवजात चूहों में ईसीजी प्राप्त करने के लिए एक मानकीकृत और दोहराने योग्य विधि की आवश्यकता को सीधे संबोधित करने के लिए डिज़ाइन किया गया था। एक अनुवाद के नजरिए से, यह प्रोटोकॉल ट्रांसजेनिक माउस लाइनों का उपयोग करके उत्पन्न जन्मजात कार्डियोपल्मोनरी दोषों के लक्षण वर्णन के लिए पूरी तरह से प्रभावी साबित होता है, और विशेष रूप से पहले प्रसवोत्तर दिनों में या उसके दौरान घातकता पैदा करने वाले दोषों के विश्लेषण के लिए। इस प्रोटोकॉल का उद्देश्य प्रारंभिक प्रसवोत्तर हृदय चालन प्रणाली की परिपक्वता से जुड़े मानक डेटा की विशेषता और प्रदान करने के लिए वैज्ञानिक साहित्य में एक अंतर को सीधे संबोधित करना है। यह विधि एक विशिष्ट प्रसवोत्तर समय बिंदु तक ही सीमित नहीं है, बल्कि जन्म से प्रसवोत्तर दिन 10 (P10) तक नवजात माउस पिल्ले में ईसीजी डेटा संग्रह के लिए अनुमति देती है, एक खिड़की जो विवो में मानव रोगों के मॉडलिंग के लिए महत्वपूर्ण महत्व की है, जन्मजात हृदय रोग (सीएचडी) पर विशेष जोर देते हैं।
Introduction
कार्डियक फंक्शन को विभिन्न तरीकों से मापा जा सकता है, जिनमें से सबसे आम में हृदय के माध्यम से विद्युत धारा के चालन का विश्लेषण करने के साथ-साथ इसके समग्र हृदय चक्र और कार्य1का विश्लेषण करने के लिए इलेक्ट्रोकार्डियोग्राफी (ईसीजी) का उपयोग शामिल है। इलेक्ट्रोकार्डियोग्राफी रोग के मानव और पशु दोनों मॉडलों में हृदय विसंगतियों की पहचान करने और उनकी विशेषता के लिए एक उपयोगी नैदानिक उपकरण बना हुआ है1,2. इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम पढ़ने में अनियमितताएं असामान्य हृदय विकास (यानी जन्मजात हृदय रोग (सीएचडी) में पाई जा सकती हैं, और इसमें हृदय गति (जैसे, ब्रैडकार्डिया) में परिवर्तन के रूप में प्रकट होने वाले अतालता शामिल हो सकती हैं, और ताल (जैसे, “दिल ब्लॉक”), अखंडता में दोषों का विचारोत्तेजक और/ इस तरह के परिवर्तन रोगियों को जीवन के लिए खतरा हृदय रोग (जैसे, भीड़भाड़ दिल की विफलता और/या हृदय की गिरफ्तारी) और वृद्धि हुई मृत्यु दर3,4के लिए संवेदनशील हो सकताहै । गंभीर और अनुपचारित CHD के साथ मृत्यु दर की उच्च दर को देखते हुए, इस प्रारंभिक प्रसवोत्तर अवधि के दौरान ईसीजी एकत्र करने के लिए एक मानकीकृत और दोहराने योग्य विधि विकसित करना महत्वपूर्ण है।
यद्यपि हम इस समस्या का समाधान करने वाले पहले व्यक्ति नहीं हैं, लेकिन माउस पिल्ले पर ईसीजी एकत्र करने के पिछले तरीकों में पारंपरिक रूप से आक्रामक प्रक्रियाएं (चमड़े के नीचे सुई या तार इलेक्ट्रोड) और/या एनेस्थेटिक्स5,6,7का उपयोग शामिल है । नॉनइनवेसिव ईसीजी विश्लेषण करने के फायदे में दर्द को कम करना और जानवर पर तनाव पूर्ववत करना शामिल है। जबकि प्रयोगकर्ता अभी भी पिल्ला तनाव पैदा करने के बारे में सतर्क रहना चाहिए, डिवाइस के लिए सटीक डेटा का उत्पादन करने के लिए आम तनाव से बचने के लिए डिज़ाइन किया गया है । हृदय समारोह के मूल्यांकन के संदर्भ में, जानवरों के लिए संज्ञाहरण शुरू करना जिनमें कार्डियोपल्मोनरी असामान्यताएं हो सकती हैं, संभावित रूप से मुखौटा कर सकते हैं या अंतर्निहित स्थितियों को भी बढ़ा सकते हैं। एनेस्थेटिक्स कोशिकाओं के depolarization और/या पुनर्ध्रुवीकरण में फेरबदल करके विद्युत चालन को प्रभावित कर सकते हैं । अंत में, संज्ञाहरण का उपयोग हाइपोथर्मिया के लिए एक बढ़ा जोखिम पर नवजात पिल्ला डाल सकते हैं, जो आगे किसी भी अंतर्निहित विकृति चकित सकता है । निम्नलिखित प्रोटोकॉल पिल्ला को किसी भी एनेस्थेटिक्स, आक्रामक प्रक्रियाओं, या स्पष्ट असुविधा को पेश नहीं करता है। एक बार उपकरण सेटअप को अंतिम रूप दिया जाता है, डिवाइस सेटअप और जानवर को शामिल डेटा संग्रह कुशलता से पूरा किया जा सकता है, जिसके बाद पिल्ले को उनकी मां को लौटाया जा सकता है। इसके अतिरिक्त, यह प्रणाली दोहराने और/या धारावाहिक विश्लेषण करने की अनुमति देती है, जो समय के साथ विश्लेषण की आवश्यकता वाले प्रयोगों के लिए आदर्श है, औषधीय चिकित्सा की शुरूआत आदि ।
Protocol
Representative Results
Discussion
प्रसवकालीन दिन में एकत्र किए गए डेटा अंक 1 माउस पिल्ले वयस्क चूहों (प्रति मिनट 500-700 धड़कता) के लिए औसत अपेक्षित मूल्यों से थोड़ा नीचे हैं। 8 माउस की उम्र के रूप में हृदय गति में वृद्धि हुई है, जो अपे…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
लेखक बचत छोटे दिल सोसायटी (KLT), UNE COBRE कार्यक्रम (NIGMS अनुदान संख्या P20GM103643 से उदार समर्थन स्वीकार करते हैं; LAF), और न्यू इंग्लैंड विश्वविद्यालय (VLB) में यकीन फैलोशिप कार्यक्रम, साथ ही आशीष अधिक (iWorx, Dover, एनएच) से रोगी तकनीकी सहायता । चित्रा 3, चित्रा 4, और चित्रा S1 बायोरेंडर सॉफ्टवेयर के साथ बनाया गया था।
Materials
| LabScribe4 | iWorx | LabScribe4 | Software used to record ECG | https://www.iworx.com/users/teaching.php |
| Neonatal Mouse ECG & Respiration System | iWorx | RS-NMECG : Neonatal Mouse ECG | ECG device | https://www.iworx.com/research/cardiac-function/rs-nmecg/ |
| Tensive Conductive Adhesive Gel | Parker Laboratories, Inc | 22-60 | Tac-gel used as conductive gel for ECG | https://www.parkerlabs.com/tensive.asp |
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