चूहों में पूर्ण ट्रांसेक्शन-टाइप स्पाइनल कॉर्ड इंजरी का प्रेरण
Summary
यह प्रोटोकॉल बताता है कि माउस मॉडल में स्थिर ट्रांसेक्शन-प्रकार रीढ़ की हड्डी की चोट को शामिल करने के लिए एक सटीक लेमिनेक्टॉमी कैसे बनाया जाए, रीढ़ की हड्डी की चोट अनुसंधान के लिए न्यूनतम संपाश्र्वक क्षति के साथ।
Abstract
रीढ़ की हड्डी की चोट (एससीआई) काफी हद तक कार्य के अपरिवर्तनीय और स्थायी नुकसान की ओर ले जाती है, जो आमतौर पर आघात के परिणामस्वरूप होती है। एससीआई से उत्पन्न होने वाली दुर्बल विकलांगता को दूर करने के लिए सेल प्रत्यारोपण विधियों जैसे कई उपचार विकल्पों पर शोध किया जा रहा है । अधिकांश पूर्व नैदानिक पशु परीक्षण एससीआई के कृंतक मॉडल में आयोजित किए जाते हैं। जबकि एससीआई के चूहे मॉडल व्यापक रूप से इस्तेमाल किया गया है, माउस मॉडल कम ध्यान प्राप्त किया है, भले ही माउस मॉडल चूहा मॉडल पर महत्वपूर्ण लाभ हो सकता है । चूहों का छोटा आकार चूहों की तुलना में पशु रखरखाव लागत को कम करने के बराबर है, और कई ट्रांसजेनिक माउस मॉडल की उपलब्धता कई प्रकार के अध्ययनों के लिए लाभप्रद है। जानवरों में दोहराने योग्य और सटीक चोट को प्रेरित करना एससीआई अनुसंधान के लिए प्राथमिक चुनौती है, जो छोटे कृंतक में उच्च सटीक सर्जरी की आवश्यकता होती है। ट्रांसेक्शन-प्रकार की चोट मॉडल प्रत्यारोपण आधारित चिकित्सीय अनुसंधान के लिए पिछले दशक में एक आमतौर पर इस्तेमाल किया चोट मॉडल रहा है, लेकिन चूहों में एक पूर्ण ट्रांसेक्शन प्रकार की चोट उत्प्रेरण के लिए एक मानकीकृत विधि मौजूद नहीं है । हमने C57BL/6 चूहों में एक पूर्ण ट्रांसेक्शन प्रकार की चोट को वक्ष कशेरुकी स्तर 10 (T10) पर उत्प्रेरित करने के लिए एक शल्य चिकित्सा प्रोटोकॉल विकसित किया है। प्रक्रिया ठीक लेमिना को हटाने के लिए रोंगर्स के बजाय एक छोटी टिप ड्रिल का उपयोग करती है, जिसके बाद रीढ़ की हड्डी के ट्रांसेक्शन को प्रेरित करने के लिए गोल अत्याधुनिक के साथ एक पतली ब्लेड का उपयोग किया जाता है। इस विधि से न्यूनतम संपाश्र्वक मांसपेशी और हड्डी की क्षति के साथ छोटे कृन्तकों में प्रजनन योग्य ट्रांसेक्शन-प्रकार की चोट होती है और इसलिए जटिल कारकों को कम करता है, विशेष रूप से जहां व्यवहार कार्यात्मक परिणामों का विश्लेषण किया जाता है।
Introduction
रीढ़ की हड्डी की चोट (एससीआई) एक जटिल चिकित्सा समस्या है जिसके परिणामस्वरूप स्वास्थ्य और जीवनशैली में भारी परिवर्तन होता है। एससीआई के लिए कोई इलाज नहीं है, और एससीआई के रोगविज्ञान को अच्छी तरह से नहीं समझा जाता है। पशु विज्ञान मॉडल, विशेष रूप से कृंतक मॉडल में, नए उपचार के परीक्षण के लिए एक अमूल्य उपकरण प्रदान करते हैं, और दशकों के लिए एससीआई का पता लगाने के लिए इस्तेमाल किया गया है । आज तक, पूर्व-नैदानिक एससीआई अध्ययनों के 72% से अधिक चूहों मॉडलों को नियोजित किया है, जबकि चूहों का उपयोग करने वाले महज 16% की तुलना में1। यद्यपि चूहों, उनके बड़े आकार और मानव SCIs के समान गुहाओं के रूप में प्रवृत्ति के कारण, पारंपरिक रूप से उपन्यास चिकित्सीय दृष्टिकोण का अध्ययन करने के लिए पसंदीदा मॉडल जानवर रहे हैं, चूहों (कई ट्रांसजेनिक माउस मॉडल सहित) अब एससीआई2के सेलुलर और आणविक तंत्र का अध्ययन करने के लिए अधिक बार उपयोग किया जा रहा है। माउस मॉडल आसान हैंडलिंग, तेज प्रजनन दर और चूहों की तुलना में कम लागत के मामले में अतिरिक्त लाभ प्रदान करता है; चूहों ने मनुष्यों के साथ उच्च स्तर की जीनोमिक समानता भी प्रदर्शित की1,2,3 माउस मॉडल के प्रमुख नुकसान की पहचान काफी छोटे आकार के रूप में की गई है जो रीढ़ की हड्डी की चोटों के निर्माण और इलाज के लिए शल्य चिकित्सा हस्तक्षेप के लिए चुनौतियां पैदा करता है4, 5,5.
मौजूदा साहित्य में एक अंतर है जो माउस मॉडल में स्थिर एससीआई को प्रेरित करने के लिए एक मजबूत और प्रजनन योग्य सर्जिकल प्रोटोकॉल की आवश्यकता पर प्रकाश डालता है। इसलिए, हम इन सीमाओं को दूर करने के लिए इस प्रोटोकॉल में एक उपन्यास और सटीक शल्य चिकित्सा दृष्टिकोण प्रदान करते हैं। यह प्रोटोकॉल चूहों में ट्रांसेक्शन-प्रकार की चोट को प्रेरित करने के लिए गहन दिशानिर्देश प्रदान करता है, क्योंकि इस चोट प्रकार को चोट6के बाद पुनर्योजी और अपक्षयी परिवर्तनों का अध्ययन करने के लिए सबसे उपयुक्त माना गया है, साथ ही न्यूरोप्लास्टी, तंत्रिका सर्किटरी और ऊतक इंजीनियरिंग दृष्टिकोण7। हमने निचले वक्ष क्षेत्र में चोट को प्रेरित करने के लिए चुना है, क्योंकि छाती के स्तर का एससीआई का उपयोग साहित्य 1 में सबसे अधिक कियाजाताहै।
Protocol
Representative Results
Discussion
यह विधि चूहों में टी 10 कशेरुकी स्तर पर एक पूर्ण ट्रांसेक्शन प्रकार की चोट को प्रेरित करती है, जिसके परिणामस्वरूप चोट के स्तर से नीचे जानवर की पूरी पैराप्लेजिया होती है। कुल मिलाकर, इस विधि के परिणामस्व?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस काम को आरआर को ग्रिफ़िथ यूनिवर्सिटी इंटरनेशनल स्टूडेंट (पीएचडी) वजीफा, जेई और जेएसजे को पेरी क्रॉस फाउंडेशन ग्रांट, जेएसजे और जेई को क्लेम जोन्स फाउंडेशन ग्रांट और जेएसजे और जेई को क्वींसलैंड ग्रांट का मोटर एक्सीडेंट इंश्योरेंस कमीशन मिला ।
Materials
| Baytril injectable 50 mg/mL, 50 mL | Provet | BAYT I | Post-operative care drug |
| Betadine 500 mL | Provet | BETA AS | Consumable |
| Castroviejo needle holder, locking | ProSciTech | T149C | Reusable |
| Ceramic zirconia blade, round with sharp sides, single edge, angled | ProSciTech | TXD101A-X | Reusable |
| Cotton swabs (5pcs) | Multigate | 21-893 | Consumable |
| Dremel Micro | DREMEL | 8050-N/18 | Cordless rotary tool |
| Dressing forceps fine | Multigate | 06-306 | Single use disposable |
| Drill bits | Kemmer Präzision | SM 32 M 0550 070 | Reusable |
| Dumont #7b forceps | Fine Science Tools | 11270-20 | Reusable |
| Dumont tweezers, style 5 | ProSciTech | T05-822 | Reusable |
| Fur trimmer | WAHL | WA9884-312 | Zero Overlap Hair Trimmer |
| Iris scissors, Ti, sharp tips, straight, 90mm | ProSciTech | TY-3032 | Reusable |
| Isoflurane isothesia NXT 250 | Provet | ISOF 00 HS | Anaesthetic agent |
| Colibri Retractor – 4cm | Fine Science Tools | 17000-04 | Reusable |
| Scalpel handle | ProSciTech | T133 | Reusable |
| Signature latex surgical gloves size 7.5 | Medline | MSG5475 | Consumable |
| Sodium Chloride 0.9% | STS | PHA19042005 | Consumable |
| Sterile Dressing Pack | Multigate | 08-709 | Single use disposable |
| Sterile Fluid Impervious Drape 60×60 cm | Multigate | 29-220 | Single use disposable |
| Surgical spirit 100 mL | Provet | # SURG SP | Consumable |
| Suture Material – SILK BLK 45CM 5/0 FS-2 | Johnson & Johnson Medical | 682G | Silk Suture |
| Suture Material – Vicryl 70CM 5-0 S/A FS-2 | Johnson & Johnson Medical | VCP421H | Vicryl Suture |
| Temgesic 0.3 mg in 1 mL, x 5 ampoules (class S8 drug) | Provet | TEMG I | Post-operative care drug |
References
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