Summary
Presentiamo un metodo per stabilire un modello di sottoattività del detrusore mediante transezione del conus medullaris nei ratti. La sottoattività del detrusore è stata stimolata con successo in questi animali. Il modello può essere utilizzato per studiare la funzione del tratto urinario.
Abstract
L'obiettivo del protocollo presentato era quello di stabilire un modello di sottoattività del detrusore (DU) nel ratto attraverso la transezione del cono midollare. La laminectomia è stata eseguita in un totale di 40 ratti Wistar femmina (gruppo di controllo: 10 ratti; gruppo di test: 30 ratti) del peso di 200-220 g, e il cono midollare è stato transettato al livello L4-L5 nel gruppo di test. Tutti i ratti sono stati alloggiati e nutriti nelle stesse condizioni ambientali per sei settimane. Nel gruppo di test, lo svuotamento delle urine è stato eseguito due volte al giorno per sei settimane ed è stato registrato il volume medio residuo di urina. Un cistometrogramma è stato eseguito in entrambi i gruppi. Sono stati registrati e calcolati la capacità cistometrica massima (MCC), la pressione di apertura del detrusore (DOP) e la conformità della vescica. Il gruppo di test ha mostrato una significativa ritenzione urinaria dopo l'intervento chirurgico, sia durante che dopo lo shock spinale. Tuttavia, nessuna anomalia è stata osservata nel gruppo di controllo. Rispetto al gruppo di controllo, l'MCC e la conformità della vescica nel gruppo di prova erano significativamente superiori a quelli del gruppo di prova (3,24 ± 2,261 ml contro 1,04 ± 0,571 ml; 0,43 ± 0,578 ml / cmH 2 O contro 0,032 ± 0,016 ml / cmH 2 O), mentre il DOP nel gruppo di prova era inferiore al controllo (20,28 ± 14,022 cmH 2 O contro 35 ± 13,258 cmH2 O). Questo metodo per stabilire un modello animale di uranio impoverito mediante la transezione del cono midollare offre un'eccellente opportunità per comprendere meglio la fisiopatologia dell'uranio impoverito.
Introduction
L'underactivity del detrusore (DU) è una tipica disfunzione del tratto urinario inferiore che è rimasta sotto studiata. Anche se l'uranio impoverito è stato definito dall'International Continence Society (ICS)1, vengono utilizzate numerose terminologie diverse per riferirsi a questa malattia, ad esempio "insufficienza del detrusore", "vescica acontrattile", "areflessia del detrusore"2. L'uranio impoverito, come definito dall'International Continence Society (ICS) nel 2002, è una contrazione di forza e durata ridotte, che si traduce in un aumento prolungato del tempo per lo svuotamento della vescica, con conseguente incapacità di raggiungere lo svuotamento completo della vescica entro un periodo normale.
L'uranio impoverito può colpire il 48% degli uomini e il 12% delle donne (di età compresa >70 anni)3 con sintomi del tratto urinario inferiore. Sembra essere multifattoriale e non esiste un trattamento efficace. È stato riportato che l'uranio impoverito è onnipresente nei pazienti con disfunzione neurogena della vescica, come la sclerosi multipla4, il diabete mellito5, il morbo di Parkinson6 o l'ictus cerebrale7. L'uranio impoverito può anche essere causato da danni ai nervi iatrogeni, come l'isterectomia laparoscopica, la prostatectomia o altri interventi chirurgici nella piccola pelvi8. I cambiamenti fisiopatologici e i trattamenti disponibili dell'uranio impoverito sono ancora confusi a causa della mancanza di un modello animale appropriato per lo studio.
Il riflesso della minzione è controllato da vie spino-bulbospinali che combinano il centro di minzione pontina, il nucleo parasimpatico sacrale e i centri della corteccia più anziani9. L'attivazione e il mantenimento del riflesso della minzione dipendono principalmente dal trasporto regolare dei segnali sensoriali dalla vescica ai centri della corteccia più anziani. Si può postulare che la disfunzione sensoriale contribuisca all'uranio impoverito.
La maggior parte degli studi sperimentali sugli animali relativi alle disfunzioni del tratto urinario inferiore si sono concentrati su modelli di vescica iperattiva (OAB)10. Questi modelli forniscono una ragionevole comprensione della fisiopatologia e della prognosi dell'OAB. Tuttavia, sono stati riportati solo pochi modelli di uranio impoverito, ad esempio lesioni sopraspinali (lesioni locali, decerebrazione e occlusione dell'arteria cerebrale media), trassezione del midollo spinale o lesione da contusione, somministrazione sistemica (ad es. ciclofosfamide) o intravescicale di agenti irritanti o infiammatori (ad es. acido, acroleina e lipopolisaccaride)11,12,13,14 . Tra questi metodi, solo il metodo di transezione del midollo spinale o lesione da contusione può essere utilizzato per stabilire un modello animale di DU13. I tentativi di lesione del centro di minzione pontino e dei centri della corteccia superiore sono stati abbandonati a causa del grave trauma. Quindi, viene prestata maggiore attenzione per trovare una posizione accurata nel centro del riflesso della minzione per indurre l'uranio impoverito con effetti collaterali minimi.
Come accennato in precedenza, uno dei meccanismi di induzione dell'uranio impoverito è quello di danneggiare il midollo spinale per danneggiare la via di segnalazione del riflesso della minzione. Il metodo di caduta del peso di Allen è stato sviluppato per stabilire animali da laboratorio con midollo spinale ferito15. Tuttavia, non sono disponibili ulteriori dati sperimentali su questo metodo. Inoltre, poiché parti degli animali hanno recuperato la funzione spinale dopo l'ictus senza DU, non può essere considerato un metodo perfetto per generare un modello animale di uranio impoverito16.
Nel 1987, Bregman ha escogitato un processo di transetto del midollo spinale per generare il modello animale all'uranio impoverito e ha acquisito dati sperimentali17. Tuttavia, questo metodo non è stato applicato per stabilire il modello animale all'uranio impoverito. A quel tempo, i ricercatori erano ancora confusi sulla patogenesi dell'uranio impoverito. Poiché le posizioni nel midollo spinale associate all'induzione di OAB o DU sono adiacenti l'una all'altra, non sono state in grado di trovare il sito preciso del danno al midollo spinale per indurre DU17. OAB e DU sono stati introdotti insieme o separatamente con questo metodo. Quindi, sebbene questo metodo abbia introdotto l'uranio impoverito, era impreciso e non poteva essere utilizzato per la comprensione dell'occorrenza e dell'elaborazione dell'uranio impoverito.
Come detto sopra, la mancanza di un modello animale adatto di uranio impoverito è uno dei principali ostacoli per lo studio dell'uranio impoverito. I ricercatori sono continuamente alla ricerca di un modello accurato e gestibile in grado di simulare la patologia dell'uranio impoverito. Anche le opzioni di trattamento per l'uranio impoverito non sono migliorate significativamente negli ultimi 20 anni. Collettivamente, c'è un grande bisogno di descrivere un protocollo standard per stabilire un modello animale di uranio impoverito.
Quindi, in questo articolo, descriviamo un metodo per stabilire con successo un modello di ratto di uranio impoverito mediante transezione del cono midollare. La transezione è stata eseguita a livello L4\u2012L5 per separare il cono midollare. La capacità cistometrica massima (MCC), la pressione di apertura del detrusore (DOP) e la conformità della vescica sono state registrate e analizzate per convalidare il protocollo. Il protocollo indicato di seguito combina fattibilità e affidabilità in modo standardizzato per stabilire il modello animale di uranio impoverito, simulando la presenza e l'elaborazione dell'uranio impoverito. Il protocollo può essere utilizzato come tecnica per ulteriori studi sull'uranio impoverito.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Tutti i ratti sono stati utilizzati secondo i protocolli approvati dal Comitato sperimentale sugli animali del Beijing Friendship Hospital, Capital Medical University.
1. Preparazione chirurgica, anestetizzazione e tecniche chirurgiche
NOTA: Un totale di 40 femmine di ratto Wistar, del peso di 200-220 g, sono stati ottenuti commercialmente per il presente studio. Dei 40 ratti, 10 sono stati selezionati casualmente come gruppo di controllo e il resto è stato trattato come gruppo di test. Tutti gli animali sono stati ospitati in un ambiente sterile nelle strutture per animali del Beijing Friendship Hospital, Capital Medical University.
- Eseguire l'anestesia generale somministrando pentobarbital di sodio per via intraperitoneale (40 mg/kg). In alternativa, indurre l'anestesia usando isoflurano al 3% -4% e mantenerla all'1% -3% (inalato). Applicare unguento oftalmico sugli occhi per prevenire la secchezza. Quindi, posizionare il ratto sulla piattaforma chirurgica e fornire supporto termico.
NOTA: Somministrare analgesici come buprenorfina, 0,05 mg/kg, SC, 0,1-0,2 mL all'inizio della procedura. - Controllare la profondità dell'anestesia dalla mancanza di risposta al pizzico della punta. Rasare la pelliccia da tutta la zona posteriore con un rasoio.
- Sterilizzare il sito chirurgico con almeno 3 cicli di uno scrub a due stadi come clorexidina o iodio povidone seguito da alcool isopropilico. Fissare gli arti con nastro chirurgico e fare un'incisione mediana di circa 3 cm sulla schiena con forbici chirurgiche.
- Approfondisci l'incisione attraverso i tessuti sottocutanei usando le forbici chirurgiche e taglia i muscoli attaccati alla colonna vertebrale.
- Identificare ed esporre visivamente la 13a costola (lo spazio intervertebrale collegato aquella costola è l'intervallo T13\u2012L1). Segna la 13acostola usando una sutura.
- Dopo l'identificazione, resecare attentamente i muscoli attaccati alla colonna vertebrale ed esporre la colonna vertebrale. Resecare il legamento sopraspinoso e il legamento interspinoso per un'accurata identificazione della colonna vertebrale. Esporre il livello di L4\u2012L5 con forbici chirurgiche e pinze.
NOTA: Il legamento sopraspinoso può essere identificato facilmente a causa della presenza di tessuto sottocutaneo sottile. Dopo la resezione del legamento sopraspinoso, il legamento tra il processo spinoso è il legamento interspinoso. - Sezionare attentamente il processo spinoso vertebrale L4\u2012L5 e parti del processo trasversale usando una pinza Kelly per esporre il midollo spinale (Figura 1).
- Esporre completamente il cono midollare al livello L4\u2012L5 e transectare il midollare del cono totalmente con le forbici per iridectomia. Inserire un imballaggio di tessuto per bloccare il recupero del midollo spinale.
- Chiudere il muscolo e la pelle sovrastanti sullo strato esterno della pelle utilizzando una sutura non assorbibile 4-0.
- Per il gruppo di controllo, eseguire i passaggi 1.1\u20121.7 e lasciare intatto il cono midollare. Chiudere l'incisione secondo il punto 1.9.
2. Recupero degli animali
- Tenere i ratti in un'incubatrice a temperatura controllata (37 °C) durante la prima ora dopo l'operazione e monitorarli fino a quando non sono sternali o in movimento attivo.
NOTA: Ci vuole circa mezz'ora per il recupero totale. - Trasferire l'animale in una gabbia pulita con cibo e acqua sufficienti. Tieni i ratti in gabbie separate.
NOTA: Il successo della transezione è indicato quando i ratti nel gruppo di prova si muovono solo con l'aiuto delle zampe anteriori, mentre i ratti nel gruppo di controllo potrebbero camminare normalmente.
3. Gestione post-operatoria
- Iniettare penicillina G, un antibiotico (50.000 U/ml per animale) per via intraperitoneale. Somministrare analgesici come buprenorfina, 0,05 mg/kg, SC, 0,1-0,2 ml ogni 6-12 ore per 48 ore dopo l'intervento.
- Comprimere la vescica urinaria nell'ipogastrio per aiutare con lo svuotamento. Eseguilo due volte al giorno alla stessa ora (8 am e 8 pm) per sei settimane.
NOTA: La perdita della normale costrizione del detrusore è il simbolo dell'uranio impoverito. - Ospitare tutti i ratti in gabbie metaboliche, ciascuna contenente un imbuto di raccolta delle urine posto su una carta assorbente precedentemente pesata per monitorare la minzione e l'incontinenza.
- Raccogliere e annotare separatamente la variazione di peso della carta assorbente, che indica separatamente il volume vuoto (VV) e il volume residuo di urina.
4. Test urodinamici
- A sei settimane dopo l'operazione, eseguire un cistometrogramma, utilizzando apparecchiature di misurazione urodinamica come segue.
- Anestetizzare i ratti iniettando il 10% di cloralio idrato nella cavità peritoneale (3 ml/kg).
- Comprimere la vescica per lo svuotamento, quindi fissare il ratto alla piattaforma chirurgica usando un nastro.
- Inserire il catetere epidurale (3F) nella vescica e collegare l'apparecchiatura di misurazione urodinamica, il catetere epidurale e la pompa per infusione tramite il tubo a tre arti.
- Pompare soluzione fisiologica salina ad una velocità di 0,2 ml/min per la misurazione urodinamica (vedi Tabella dei materiali). Registrare l'MCC e il DOP e la conformità della vescica (calcolata dividendo δ volume della vescica con δ pressione del detrusore).
5. Analisi statistica
- Eseguire analisi statistiche utilizzando software disponibili in commercio.
- Utilizzare il test di Kolmogorov-Smirnov per testare la normalità dei dati.
- Esprimere le variabili normalmente distribuite come valori medi con deviazioni standard. Utilizzare i test t di Student accoppiati a due code per confrontare i parametri del cistometrogramma in entrambi i gruppi.
NOTA: p < 0,05 indica che la differenza aveva rilevanza statistica.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
L'intera procedura della transezione del cono midollare può essere completata entro 45 minuti da chirurghi esperti. Il nostro laboratorio ha eseguito oltre 100 casi di interventi chirurgici di transezione del cono midollare. Il tasso di successo è superiore al 95%, come definito dalla sopravvivenza dei ratti e dall'induzione riuscita dell'uranio impoverito. Il test urodinamico ha confermato l'induzione dell'uranio impoverito.
Sulla base della nostra esperienza, l'induzione dell'uranio impoverito può essere valutata preliminarmente dal volume residuo di urina. La ritenzione di urina è stata osservata immediatamente dopo l'intervento chirurgico. Nel gruppo di test, il punto di picco del volume è apparso il secondo giorno dopo l'operazione e la diminuzione del volume si è gradualmente sostenuta per circa dieci giorni. Dieci giorni dopo l'intervento chirurgico, il volume ha raggiunto un livello costante (Figura 2). È stato osservato che durante i primi dieci giorni dopo l'intervento, il volume medio residuo di urina era di 2,09 ± 1,05 ml, che è stato ridotto a 0,67 ± 0,21 ml il 10° giorno dopo l'intervento. Tuttavia, nessuna anomalia è stata osservata nel gruppo di controllo.
Per confermare l'induzione dell'uranio impoverito, è necessario eseguire il test urodinamico. Il profilo rappresentativo pressione-volume del gruppo di prova e del gruppo di controllo è mostrato nelle figure 3 e 4. Rispetto al gruppo di controllo, il MCC e la compliance della vescica nel gruppo di prova sono significativamente più alti nel gruppo di prova (1,04 ± 0,571 ml vs 3,24 ± 2,261 ml, p < 0,001 e 0,032 ± 0,016 ml / cmH 2 O vs 0,43 ± 0,578 ml / cmH 2 O, p < 0,05, rispettivamente) mentre il DOP nel gruppo di prova è diminuito significativamente (35 ± 13,258 cmH 2 O vs 20,28 ± 14,022 cmH2O; p < 0,01). Cfr. tabella 1.
Figura 1: Metodo per la transezione del cono midollare. (a) Esposizione della 13a costola (freccia nera). b) Esposizione degli archi vertebrali L4 e L5. La placca vertebrale è stata distrutta dal rongeur per smascherare il midollo spinale (freccia nera). Fare clic qui per visualizzare una versione ingrandita di questa figura.
Figura 2: Andamento temporale delle modifiche nei parametri di comportamento dello svuotamento nel gruppo di test. I valori sono rappresentati come media ± SD. Fare clic qui per visualizzare una versione ingrandita di questa figura.
Figura 3: Tracce cistometriche rappresentative nel gruppo di test. a) Tracce rappresentative di un ratto che presentano un volume vescicale significativamente elevato e una bassa pressione del detrusore. b) Tracciamento rappresentativo di un secondo ratto che presenta un volume vescicale elevato e una pressione del detrusore leggermente inferiore al solito. Con la velocità di infusione fissa, il tempo di infusione nel gruppo di test è molto diverso. Tuttavia, il tempo di infusione di tutti i ratti nel gruppo di test è aumentato in modo significativo, il che significa una vescica allargata. Fare clic qui per visualizzare una versione ingrandita di questa figura.
Figura 4: Tracce cistometriche rappresentative nel gruppo di controllo. a) Un ratto con volume vescicale normale e con un graduale aumento della pressione vescicale con l'infusione. b) Un ratto con volume vescicale normale e con un graduale aumento della pressione vescicale con l'infusione. Con una velocità di infusione fissa, il tempo di infusione nel gruppo di controllo per quasi 6 minuti indica lo stesso volume della vescica in tutto il gruppo di controllo. Fare clic qui per visualizzare una versione ingrandita di questa figura.
| Gruppo | Caso | Capacità massima cistometrica (ml) | Pressione di apertura del detrusore (cmH2O) | Compliance della vescica (ml/H2O) |
| Gruppo di test | 26 | 3,24±2,261 | 20.28±14.022 | 0,43±0,578 |
| Gruppo di controllo | 10 | 1,04±0,571 | 35±13.258 | 0,032±0,016 |
| Valore T | 4.517 | -2.847 | 3.435 | |
| (p=0,000) | (p=0,008) | (p=0,002) | ||
| L'analisi statistica è stata impiegata utilizzando il test t. Dati presentati come media ± DS. | ||||
| Un p<0,05 è stato considerato statisticamente significativo. | ||||
Tabella 1: Profili rappresentativi pressione-volume di due gruppi.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
L'uranio impoverito è una causa comune di sintomi del tratto urinario inferiore sia negli uomini che nelle donne. È una costellazione complessa di sintomi con poche opzioni di trattamento che possono ridurre significativamente la qualità della vita (Qol) delle persone colpite18. Sebbene si ritenga che l'uranio impoverito sia multifattoriale, la comprensione della sua patogenesi rimane rudimentale. Gli studi hanno dimostrato che la patogenesi dell'uranio impoverito potrebbe essere correlata a fattori miogeni e neurogeni.
Nelle ipotesi miogeniche, è stato osservato che gli individui con uranio impoverito potrebbero sperimentare un declino più significativo della contrattilità del detrusore rispetto a quelli con invecchiamento sano. È stato riscontrato che la contrattilità del detrusore diminuisce con l'età ed è probabilmente influenzata da altri fattori come malattie metaboliche o neurogene. I dati della valutazione urodinamica hanno mostrato che i residui di uranio impoverito e post-vuoto erano associati all'invecchiamentodi 19. Uno studio ha dimostrato che il 22,1% degli uomini e il 10,8% delle donne (tutti di età compresa > 60 anni) hanno riportato difficoltà con lo svuotamento della vescica3. Inoltre, la causa principale alla base di questo era la diminuzione della contrattilità del detrusore. Gli studi sulle vesciche diabetiche hanno mostrato cambiamenti simili a quelli trovati in DU20. La diminuzione del rapporto muscolo-collagene che porta ad spazi allargati tra le cellule muscolari può causare la diminuzione della contrattilità del detrusore. Un aumento correlato all'età della noradrenalina circolante è stato riscontrato anche nella maggior parte delle vesciche neurogene21,22. Pertanto, ci sono stati tentativi di indurre l'uranio impoverito stabilendo il diabete mellito nel modello animale. Ma questi hanno fallito a causa della mancanza di un controllo accurato dei livelli di zucchero nel sangue e di altre complicazioni del diabete mellito. Tuttavia, nelle ipotesi neurogeniche, l'uranio impoverito è stato classificato in tre gruppi: ostacolo nei segnali efferenti del riflesso della minzione, ostacolo dei segnali afferenti che iniziano il riflesso e controllo integrativo difettoso23. Quindi, molti ricercatori hanno prestato attenzione a stabilire il modello animale da una lesione accurata dei componenti del sistema neurogeno. A causa della complicata funzione del sistema neurogeno, è difficile individuare la posizione che induce l'uranio impoverito. Sfortunatamente, numerosi tentativi di utilizzare lesioni del sistema neurogeno per indurre l'uranio impoverito sono falliti.
Il nostro protocollo è il primo rapporto di stabilire il modello animale DU mediante transezione del conus medullaris. Nel presente studio, il midollo spinale è stato transettato a livello di L4-L5 per indurre danni ai nervi sacrali inferiori.
Il passo più critico dell'intervento chirurgico è identificare il midollo spinale a livello di L4\u2012L5 perché il cono midollare del ratto è lungo e sottile e va dal lato superiore di L1 al lato inferiore del L4. Se il midollo spinale viene transettato sopra la L4, è possibile indurre danni ai nervi sacrali superiori. Al contrario, se la transezione avviene al di sotto di L5, potrebbe non sradicare il centro di minzione. Quindi, eseguire la chirurgia di transezione a livello di L4\u2012L5 può assicurarsi che entrambi i percorsi afferenti ed efferenti del centro di minzione vengano distrutti, il che rende questo metodo unico.
Nel gruppo di test, la ritenzione urinaria è emersa immediatamente dopo l'intervento chirurgico e il profilo di variazione del volume residuo di urina corrispondeva al cambiamento nella funzione di minzione durante o dopo la fase di shock della lesione del midollo spinale. Allo stesso tempo, non è stato osservato il classico stadio di scossa di assestamento dell'incontinenza riflessa, il che indicava che il nervo efferente alla vescica era stato danneggiato.
Abbiamo anche riscontrato un aumento dell'urina residua nella prima settimana dopo l'intervento chirurgico e una diminuzione significativa dopo la prima settimana. Il cambiamento dell'urina residua è probabilmente causato dalla compromissione della coordinazione della funzione di uscita / sfintere / pavimento pelvico. Quindi, nella prima settimana dopo l'intervento chirurgico, l'improvvisa interruzione porta ad un aumento dell'urina residua, e quando la compromissione della funzione di uscita / sfintere / pavimento pelvico viene ricostruita in una certa misura, l'urina residua diminuisce a un livello stabile.
Secondo il significato di DU concepito da ICS: (1) potere di contrazione del detrusore troppo debole e (2) intervallo di contrazione del detrusore troppo breve, è collegato allo svuotamento carente della vescica (diminuita efficacia minzionale), diminuzione della sensazione e sintomi del tratto urinario inferiore. Confrontando i dati urodinamici dei due gruppi, abbiamo scoperto che la capacità cistometrica massima e la conformità della vescica del gruppo di test aumentavano drasticamente di sei settimane dopo l'operazione, mentre la pressione di apertura del detrusore diminuiva. Con l'aiuto di questi dati, è chiaro che la contrattilità del detrusore è diminuita dopo sei settimane, causando l'incapacità della vescica di contrarsi per indurre la minzione.
Come mostrato nel profilo pressione-volume della vescica, con l'aumento della capacità cistometrica massima, la minzione non è emersa, sebbene anche la pressione del detrusore fosse esagerata. L'assenza di minzione ha indicato che l'intervento chirurgico ha bloccato i segnali afferenti, che inducono la minzione, causando disuria del nervo afferente della vescica. Inoltre, questi profili corrispondono al cambiamento fisiopatologico dell'uranio impoverito.
Ci sono anche limitazioni a questa ricerca. Ad esempio, è necessario prendere una cura intensiva per prevenire l'infezione dopo l'intervento chirurgico. Dalla nostra esperienza, la transezione del cono midollare potrebbe portare a una ridotta motivazione degli arti posteriori inferiori. Inoltre, la perdita di urina trattenuta (a causa dell'incontinenza) può essere difficile da trovare rapidamente con conseguente contatto costante tra un letto a gabbia umido bagnato dall'urina e la parte inferiore del corpo animale. Ciò può portare a gravi infezioni cutanee o del tratto urinario, che potrebbero essere fatali. Questo protocollo richiede che i chirurghi con limitata esperienza microchirurgica si sottopongano a una formazione chirurgica approfondita per padroneggiare la tecnica, in particolare l'identificazione accurata del cono midollare.
Poiché i segni clinici dello svuotamento impedito della vescica (ad esempio, diminuzione della velocità di flusso urinario, elevato residuo postvoid [PVR]) possono emergere a causa dell'uranio impoverito, ma possono anche accadere a causa dell'ostruzione del deflusso della vescica (BOO) (ad esempio, iperplasia prostatica benigna, stenosi uretrale). Pertanto, sono necessari test regolari per riconoscere DU e BOO senza studi invasivi sul flusso di pressione24 . Tuttavia, nel nostro modello, non si osserva alcuna minzione nel test urodinamico causata dalla ridotta capacità di costrizione del detrusore. È difficile analizzare il fattore BOO contemporaneamente, che è anche una limitazione del modello.
In conclusione, l'impostazione del modello animale di uranio impoverito mediante transetto del cono midollare fornisce un modello animale desiderabile per un'ulteriore comprensione dell'uranio impoverito. Con una formazione e una pratica adeguate, questo intervento chirurgico può essere eseguito con un tasso di successo superiore al 95%.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Acknowledgments
Nessuno.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 0.9% saline | Wuhan Prosai Company | EY-C1178 | pump for urodynamic measurement |
| 10% chloral hydrate | Shandong Yulong Co., Ltd | H37022673 | 3mL/kg, administered intraperitoneally |
| Buprenorphine Hydrochloride Injection | Tianjin Pharmaceutical Research Institute Pharmaceutical Co. LTD | H12020275 | 0.05mg/kg subcutaneously 24h and 48h postoperation |
| Epidural Catheter | Shandong Xinghua Co, Ltd | VABR3L | for urodynamic measurement |
| Penicillin G | Alta Technology Co., Ltd | 1ST5637 | 50,000 unit/ml per animal |
| pentobarbital | Beijing solabo Technology Co., Ltd | NK-WF0001 | 40 mg/kg, administered intraperitoneally |
| Suture line(4-0) | ETHICON | VCP422H | suture the injury |
| Three-limb tube | Shandong Xinghua Co, Ltd | VAB3T | for urodynamic measurement |
| Trace infusion pump | Zhejiang Smith Medical Instrument Co., Ltd | 20162540335 | Pump the saline at a speed of 0.2ml/min for urodynamic measurement |
| Urodynamic measurement equipment | Medical Measurement SystemsB.V. | 08-0467 | urodynamic measurement equipment can not only help the diagnosis of dysuria, but also provide objective materials for treatment and therapeutic effect. It is the most commonly used examination method in clinical diagnosis and treatment of lower urinary tract functional diseases |
| Wistar Rats | HFK Biotechnology Co.Ltd,Beijing ,China | SCXK2012-0023 | 200-220g |
References
- van Koeveeringe, G. A., et al. Detrusor underactivity: Pathophysiological considerations, models and proposals for future research. Neurourology and Urodynamics. 33 (5), ICI-RS 2013 591-596 (2014).
- Osman, N. I., Esperto, F., Chapple, C. R. Detrusor Underactivity and the Underactive Bladder: A Systematic Review of Preclinical and Clinical Studies. European Urology. 74 (5), 633-643 (2018).
- Osman, N. I., Chapple, C. R. Contemporary concepts in the aetiopathogenesis of detrusor underactivity. Nature Reviews. Urology. 11 (11), 639-648 (2014).
- Panicker, J. N., Nagaraja, D., Kovoor, J. M. E., Nair, K. P. S., Subbakrishna, D. K. Lower urinary tract dysfunction in acute disseminated encephalomyelitis. Multiple Sclerosis. 15 (9), Houndmills, Basingstoke, England. 1118-1122 (2009).
- Lee, W. C., Wu, H. P., Tai, T. Y., Yu, H. J., Chiang, P. H. Investigation of urodynamic characteristics and bladder sensory function in the early stages of diabetic bladder dysfunction in women with type 2 diabetes. The Journal of Urology. 181 (1), 198-203 (2009).
- Araki, I., Kitachara, M., Oida, T., Kuno, S. Voiding dysfunction and Parkinson’s disease: urodynamic abnormalities and urinary symptoms. The Journal of Urology. 164 (5), 1640-1643 (2000).
- Meng, N. H., et al. Incomplete bladder emptying in patients with stroke: is detrusor external sphincter dyssynergia a potential cause. Archives of Physical Medicine and Rehabilitation. 91 (7), 1105-1109 (2010).
- FitzGerald, M. P., Brubaker, L. The etiology of urinary retention after surgery for genuine stress incontinence. Neurourology and Urodynamics. 20 (1), 13-21 (2001).
- Rahman, M., Siddik, A. B. Neuroanatomy, Pontine Micturition Center. StatPearls. , (2020).
- Wrobel, A., Lancut, M., Rechberger, T. A. A new model of detrusor overactivity in conscious rats induced by retinyl acetate instillation. Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 74 (7), 16 (2015).
- Rosenzweig, E. S., McDonald, J. W. Rodent models for treatment of spinal cord injury: research trends and progress toward useful repair. Current Opinion in Neurology. 17 (2), 121-131 (2004).
- Yoo, K. H., Lee, S. J. Experimental animal models of neurogenic bladder dysfunction. International Neurourology Journal. 14 (1), 1-6 (2010).
- Kanai, A., et al. Sophisticated models and methods for studying neurogenic bladder dysfunction. Neurourology and Urodynamics. 30 (5), 658-667 (2011).
- Nomiya, M., et al. Progressive vascular damage may lead to bladder underactivity in rats. The Journal of Urology. 191 (5), 1462-1469 (2014).
- Seki, T., Hida, K., Tada, M., Koyanagi, I., Iwasaki, Y. Graded contusion model of the mouse spinal cord using a pneumatic impact device. Neurosurgery. 50 (5), discussion 1081-1082 1075-1081 (2002).
- Yeo, S. J., et al. Development of a rat model of graded contusive spinal cord injury using a pneumatic impact device. Journal of Korean Medical Science. 19 (4), 574-580 (2004).
- Bergman, B. S. Spinal cord transplants permit the growth of serotonergic axons across the site of neonatal spinal cord transection. Brain Research. 431 (2), 265-279 (1987).
- Chancellor, M. B., et al. Underactive bladder; Review of progress and impact from the International CURE-UAB Initiative. International Neurourology Journal. 24 (1), 3-11 (2020).
- Pfisterer, M. H. D., Griffiths, D. J., Schaefer, W., Resnick, N. M. The effect of age on lower urinary tract function: a study in women. Journal of the American Geriatrics Society. 54 (3), 405-412 (2006).
- Duchen, L. W., Anjorin, A., Watkins, P. J., Mackay, J. D. Pathology of autonomic neuropathy in diabetes mellitus. Annals of Internal Medicine. 92 (2), 301-303 (1980).
- Schneider, T., Hein, P., Bai, J., Michel, M. C. A role for muscarinic receptors or rho-kinase in hypertension associated rat bladder dysfunction. The Journal of Urologoy. 173 (6), 2178-2181 (2005).
- Drake, M. J., Harvey, I. J., Gillespie, J. I., Van Duyl, W. A. Localized contractions in the normal human bladder and in urinary urgency. BJU International. 95 (7), 1002-1005 (2005).
- Suskind, A. M., Smith, P. P. A new look at detrusor underactivity: impaired contractility versus afferent dysfunction. Current Urology Reports. 10 (5), 347-351 (2009).
- Osman, N. I., et al. Detrusor underactivity and the underactive bladder: A new clinical entity? A review of current terminology, definitions, epidemiology, aetiology, and diagnosis. European Urology. 65 (2), 389-398 (2014).
