Summary
我们提出了一个行为室，旨在评估认知性能。我们提供的数据表明，一旦获得，斑马鱼记得任务8周后。我们还表明，高血糖斑马鱼改变了认知能力，表明这种模式适用于评估认知和记忆的研究。
Abstract
神经退行性疾病是年龄依赖，衰弱和不治之症。最近的报告还把高血糖与记忆和/或认知障碍的变化联系起来。我们修改并开发了一个三室选择认知任务，类似于与啮齿动物一起用于高血糖斑马鱼的任务。测试室由位于中央的起始室和两侧的两个选择舱组成，并配有一个浅滩，用作奖励。我们提供的数据表明，一旦获得，斑马鱼记得任务至少8周后。我们的数据表明，斑马鱼对这一奖励反应强烈，经过4周的治疗，我们已经发现了高血糖鱼的认知缺陷。此行为分析可能也适用于与认知和记忆相关的其他研究。
Introduction
神经退行性疾病是年龄依赖，衰弱和不治之症。这些疾病的流行率正在上升，因此迫切需要改进和制定新的治疗战略。每种疾病的发病和表现是独一无二的，因为有些会影响语言、运动和自主大脑区域，而另一些疾病则会导致学习缺陷和记忆丧失。最值得注意的是，认知缺陷和/或损伤是所有神经退行性疾病中最普遍的并发症2。为了揭示这些神经退行性疾病所涉及的基本机制，采用了许多不同的模型系统（包括单细胞生物对 嗜好 动物，如啮齿动物和人类等高阶脊椎动物）的使用：然而，大多数神经退行性疾病仍然不治之症。
学习和记忆是生物体之间高度保守的过程，因为环境的不断变化需要适应3。认知和突触可塑性的损伤已经在几个啮齿动物模型中得到了证明。具体来说，成熟的行为分析使用关联学习来评估各种损伤引起的疾病和紊乱后的认知变化。此外，对比歧视逆转评估认知缺陷，因为它涉及到更高的顺序学习和记忆功能，而反转取决于对以前学会的关联的抑制。广泛使用的三室选择任务阐明了中枢神经系统5，6的学习和记忆通路可能的缺陷。最近，这个领域已经扩大到包括非哺乳动物模型，如斑马鱼（Danio rerio），因为几个范式已经开发了从幼虫到成人7，8的年龄范围。
斑马鱼提供了复杂性和简单性的平衡，有利于用行为技术评估认知障碍。首先，斑马鱼由于体积小、繁殖性大，可接受高通量的行为筛查。其次，斑马鱼有一个结构，横向苍白，这是类似于哺乳动物海马，因为它有类似的神经元标记和细胞类型7。斑马鱼也能够获取和记住空间信息9，并且，像人类一样，是日间10。因此，斑马鱼被用作神经退行性疾病的模型，频率越来越高，这并不奇怪。然而，由于缺乏适当的行为检测，因此很难将斑马鱼模型应用于认知评估。使用斑马鱼特有的行为分析出版的工作包括关联学习任务11，焦虑行为12，记忆13，对象识别14，和条件地点偏好15，16，17，18，19。虽然斑马鱼的行为检测已经取得了许多进展，但啮齿动物认知功能的一些测试的对应物尚未开发用于斑马鱼18。
基于我们实验室先前的研究，我们根据使用社交互动作为奖励与啮齿动物使用的三室选择任务，对斑马鱼的认知任务进行了建模/开发。此外，我们扩展了行为任务的关联学习方面，并纳入了对比度歧视逆转，希望进一步发展这一行为任务，以评估认知障碍。这使我们能够审查歧视学习的最初获得以及随后在逆转阶段对这种学习的抑制。在目前的研究中，我们证明这个程序提供了一个可靠的方法来评估斑马鱼在葡萄糖浸泡后4或8周的认知功能。
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Protocol
所有实验程序均由美国大学机构动物护理和使用委员会 （协议 # 1606， 19-02） 批准。
1. 动物
- 动物饲养和维护
- 获得成年野生斑马鱼（Danio rerio）4至11个月作为胚胎，并在内部饲养。
- 在 14 小时光：10-h 深色光圈下，将鱼保持在 28°29 °C 的水生架系统中。
- 每天用商业薄片喂鱼两次，并补充活 的阿提米亚。
- 从这些鱼缸中随机选择鱼进行行为实验。
- 实验完成后，通过浸泡在0.02%的三卡因中2分钟或直到缺乏运动协调和降低呼吸率，为以后的分子和/或神经化学分析麻醉动物。
2. 三室选择测试室
注：这种行为技术是从鲁尔等人20年修改的。
- 房间建设
- 修改行为室26L 水族馆 （50 x 30 x 30 厘米3） 有一个中央或启动室 （10 x 30 x 30 厘米3），从两侧选择室 （每个 20 x 30 x 30 厘米3，图 1A）.
- 使用铝制"U形"通道建造三个隔间，该通道贴在内部玻璃壁上，带有水族馆密封剂，将储罐分成三个腔室。
- 构造不透明的分隔器，高 10 厘米，由灰色 PVC 板材构建，可安装到两侧的铝通道中。将每个分隔器从 2 块中分离出来，每个分隔器的大小相等：永久安装在油箱内的固定底部部分和在铝轨中上下移动的可移动顶部件。
- 将超大活页夹粘附在灰色 PVC 板的顶部，以充当手柄。
- 使用永久标记，在油箱外部粘附的灰色 PVC 管上方 10 厘米处绘制小水平线。
注：此标记是打开顶部灰色 PVC 表以允许访问任何一方的点。 - 在测试前将控制（系统）水添加到水箱中，从底部到顶部达到 25 厘米的水平，或将 30 L. Place 玻璃水族馆加热器放入腔室的每个部分 24 小时，使温度达到 28.5 °C。
注：在行为会话开始时取下加热器，并在使用两天后进行完整的水交换。
- 歧视设置
- 对于每个歧视任务，使用 Velcro（图 1B/D）将彩色毛毡片（米色、黑色或白色）分别放置在选择室的外背、侧面和底部。
注：中央腔室不应具有与之相关的背景颜色。
- 对于每个歧视任务，使用 Velcro（图 1B/D）将彩色毛毡片（米色、黑色或白色）分别放置在选择室的外背、侧面和底部。
- 作为奖励，通过将4只成年斑马鱼（否则不会用于研究）放置在每个选择室后角的一个小而清晰的水箱中（图1B/D），创建一组特异性（浅滩）。
注：每天从鱼缸中随机选择浅滩鱼，每个浅滩鱼箱中至少有一男一女的年龄和体型与实验鱼相同。
3. 行为任务
- 服水土
注：适应行为室包括三天的培训：两天的小组适应，然后一天的个别训练。 - 组适应
- 将米色（中性）感觉背景连接到两个选择舱的外部，并在每个选择舱中浸入一个活浅滩油箱（图1B）。
- 将五六只斑马鱼添加到中心起跑室，打开两个推拉门，让鱼自由漫游30分钟。
注：实验斑马鱼在适应过程中穿过任一选择舱后，应该能够通过鱼缸与这些浅滩鱼进行互动和社交，作为奖励。当鱼的整个身体进入房间时，它被认为是进入一个侧室的。 - 第二天（组适应2天）用同一实验鱼重复此程序。
注意：不要保留相同的鱼群。
- 个人适应
- 室设置：将米色（中性）感觉背景连接到两个选择舱的外部，并在两个选择舱中浸入一个活浅滩罐，如组适应（图1B，E）。
- 将单个斑马鱼放在中央起跑室 2 分钟，并关闭滑动门，2 分钟后，同时打开两个门。
- 确保每条鱼从中央房间从一扇门游过总共10次，无论哪一边。奖励鱼每次进入一个侧室（1天的个别适应）。
注：如果鱼在30分钟内无法完成此任务10次或拒绝离开起始室，请将其排除在研究之外。
- 数据采集：记录鱼游进两边的次数和完成任务所需的总时间。
- 室设置：将米色（中性）感觉背景连接到两个选择舱的外部，并在两个选择舱中浸入一个活浅滩罐，如组适应（图1B，E）。
- 收购
注：适应后，斑马鱼开始了为期3天的采集任务。- 房间设置：将白色毛毡片连接到一个选择舱的外部，将黑色毡片连接到另一个选择舱的外部（图1C，F）。
注：每天使用伪多域时间表37替代每一侧的背景颜色。- 在培训的这一阶段，只将浅滩奖励放置在一个选择舱内：这成为奖励的一面。
- 要开始采集，请将一条实验鱼放在起始室中 2 分钟，选择舱关闭。
- 2 分钟适应后，同时打开两扇门，允许进入两个选择隔间，并启动秒表以评估选择延迟。
- 使用偏颇的设计，随机分配鱼的黑色或白色偏好（即W+/B-或B+/W-），这意味着浅滩被放置在黑色（B+）或白色（W+）选择舱。
- 表示选择响应
- 一旦鱼进入一个侧舱做出选择，停止定时器。
- 如果鱼正确选择首选侧，立即关闭中央室和侧之间的门，将鱼限制在首选侧 1 分钟，并允许它通过与浅滩水箱互动（图 1C，F）获得奖励。将此试验评分为"正确"（奖励）的"C"。
- 如果鱼游过不正确的门，将其移回中央室，关闭两扇门，并将试验评分为"I"为"不正确"（无奖励）。
- 如果鱼在开门后 2 分钟内没有做出决定，则将鱼移到正确的一侧 1 分钟，并将试验评分为"标记"（强制奖励）。
- 将鱼移回起始室时，使用鱼网作为牧羊工具，轻轻引导鱼进入中央室。
注意：不要将鱼从水中挖出来，将其替换到起始室，因为这可能会影响行为分析。 - 鱼一旦回到中央室，等待1分钟，然后再执行任务。确保每条鱼执行任务 8 次。
- 数据采集
- 对于每个实验鱼，按顺序记录 8 个采集试验（第 3.4.2 节）中每个试验的第一决定（或选择延迟）和单个分数（C、I 或 M）的时间。
- 报告这些实验的结果，作为每个采集日每个试验的组平均值报告。
- 一旦鱼完成了试验，将其归类为"高性能"鱼或"低性能"鱼。
注：如果一条鱼在当天的8次试验中至少选择了鱼缸的正确一侧，它就被认为是"高性能"的。任何不符合此标准的鱼都是"表现不佳"。 - 一旦确定，分别容纳高性能和低性能的鱼。
- 在鱼完成试验后，在三天的采集中，将鱼分类为"高"或"低"表演者。
注：在收购的第三天结束时，鱼在研究期间仍保持"高"或"低"的表现。
注：一些最初在"表现不佳"组的鱼在收购第2天或第3天学习任务。当这种情况发生时，初始的"低性能"鱼可能会移动到"高性能"组。在第 3 天（收购结束）后，不要以这种方式在群落之间移动鱼。
- 房间设置：将白色毛毡片连接到一个选择舱的外部，将黑色毡片连接到另一个选择舱的外部（图1C，F）。
4. 实验治疗
- 采集期结束后，当鱼表现出解决黑白背景之间简单辨别任务的能力时，开始对实验斑马鱼进行治疗。
注：为了显示这种方法的适用性，本研究展示了两种实验设计：- 纵向研究
- 将实验鱼放回它们的储水箱8周。将鱼保持在标准水箱中，每天更换水，每天喂鱼两次。
注意：在这8周内，不要在储罐中进行任何行为训练。 - 在此期间后进行反向评估，以评估斑马鱼是否可以在 8 周后无需培训即可完成反转任务。
- 将实验鱼放回它们的储水箱8周。将鱼保持在标准水箱中，每天更换水，每天喂鱼两次。
- 高血糖：将实验组暴露在水中（处理应激控制）、曼尼托（1%+3%、渗透控制）或葡萄糖（1%+3%），持续4或8周22、23周。
注意：在这 4 或 8 周内不要进行任何行为训练。
- 纵向研究
5. 反转
注：在实验操作后（如第4.2节），鱼在3室选择范式逆转的最后一部分进行测试。为此，奖励方被逆转（与收购相比），这样以前在白色一侧有浅滩奖励的鱼现在得到黑色一侧的浅滩奖励，反之亦然。通过这种方式，反向评估鱼是否了解奖励（浅滩）的位置，无论背景的颜色如何。
- 会议厅设置
- 将黑色毛毡连接到其中一个选择室的外部，将白色毛毡连接到另一个选择室的外部，确保黑白侧与收购试验（第 3.4 节）相同。
- 将浅滩坦克淹没在侧的后角，与先前奖励的选择室相反（图1D，G）。
注：换句话说，以前在白方奖励的鱼现在在黑方得到奖励，反之亦然。 - 像第3.5节一样单独测试鱼。首先，在起始室放置一条实验鱼2分钟，并关闭选择舱的通道。
- 同时打开会议厅的两侧。
注：连续三天每天完成8次试验。
- 表示选择响应
- 如果鱼正确选择首选颜色，请立即关闭中央室的门 1 分钟，让鱼与浅滩奖励互动。将此试验评分为"正确"（奖励）的"C"。
- 如果鱼游过不正确的门，将其移回中央室，关闭两扇门，并将此试验评分为"I"为"不正确"（无奖励）。
- 如果鱼在开门后 2 分钟内没有做出决定，则将鱼移到正确的一侧，并将试验评分为"标记"（强制奖励）的"M"。
- 数据采集
- 对于每个实验斑马鱼，记录选择延迟和每个试验的单独分数（C，I，M）。
- 将这些实验的结果报告为 3 个反转天中每个两个试验块的组平均值。
- 将高绩效和低性能鱼的数据分开，以确定它们在反转过程中是否显示与收购期间相同的性能水平。
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Representative Results
适应行为室需要三天的训练：2天的集体适应，然后是1天的个体适应。然而，由于我们无法区分单个斑马鱼，我们只能在个体适应过程中收集数据。此时，实验动物（n = 30）使用浅滩奖励，平均需要125.11秒才能做出第一个决定（图2A），平均为725.34秒（12分钟）完成整个个体适应任务（图2B）。在适应过程中没有明显的侧偏好（图2C）。与我们先前在实验室评估的其他奖励类型（食物）相比，被排除在外的鱼类数量很少（图2C）。
适应后，斑马鱼开始进入收购阶段。由于鱼是单独测试的，我们从每条鱼收集数据，每个三个收购日。鱼被归类为"高或低性能"，"高性能"的反应更快，更准确，尽管所有鱼有相同的以前接触测试室。在8项试验中，至少有6项选择奖励选择舱的鱼类被列为"表现优等"。不符合这个标准的鱼是"表现不佳的"。高性能鱼和低性能鱼被单独安置，以区分它们在随后的所有试验中的表现。有趣的是，我们观察到一些鱼在收购过程中改变了类别（即最初是"低绩效者"，但后来成为"高绩效者"）。事实上，高性能动物的数量每天都在增加，与第1天（图3A）相比，第3天采集时表现较高的鱼类数量增加。到第3天，>50%的鱼已经成为"高绩效者"。此外，在三个收购日（A1/A3）中，所有鱼类的初始选择延迟都有所减少，表明每一天的收购性能都有所改善（图3B）。当只考虑高绩效鱼群时，也出现了同样的趋势：到第3天，第一次决定的时间改善（变得更快）（图3C）。
在所有实验动物的三个采集天数（A1+A3）中，计算了每个采集试验块（平均两个试验/鱼）的歧视比率（奖励试验/奖励+ 非回归试验），以确定鱼如何准确地解决（获得）歧视任务（即去鱼缸的奖励侧）。这一比率显示，每次试验期间，移动到奖励方的鱼的百分比每天增加（即在每个试验日跨试验区块）和总体（即在三个获取日），导致所有鱼在收购结束时都执行上述机会（图上所示的虚线：（图4A），并表明鱼已经学会了歧视任务。
在获得歧视学习后，我们测试了斑马鱼会记住这个任务多久。为此，经过测试的斑马鱼在水箱中停留了8周。在此时间之后，鱼被测试了持续3天（R1-R3）的逆转任务。我们发现，鱼在三天的逆转中表现出强烈的反转行为和更多的歧视（图4B），表明它们能够（1）记住鱼缸颜色与奖励之间的关系，（2）抑制它们以前在获取过程中学到的东西，并学习反向/相反的范式。如图 4B所示，斑马鱼最初进入鱼缸的无回报侧，如歧视比率在逆转第1天的初始跟踪中低于偶然性所示。然而，到 R1 结束时，性能增加到大于偶然性，这一结果在 R2 和 R3 上保持不变，在 R3 上观察到的歧视比率得分最高。综合起来，这些数据表明，天真的实验动物能够解决歧视问题，尽管最初的行为是在8周前获得的，在行为课之间没有任何额外的训练。
3 室选择范式也可用于疾病并发症的检查。在我们的高血糖斑马鱼研究中，如前所述，在4周或8周的高血糖后，对逆转进行了测试。高血糖是用替代浸入式协议诱导的（麦卡锡等人，2020年-这个问题），因此训练每隔一天进行一次，在斑马鱼在测试溶液24小时后几天进行。在收购期间，培训日对歧视比率（F （2，239） = 4.457，p = 0.012; 图5A），A1的比率明显低于A3（p = 0.010），表明鱼随着时间的推移提高了他们的选择精度。在逆转期间，治疗有显著的主要效果（F （2， 326） = 3.057， p = 0.048）， 但没有其他重要的主要影响或互动 （培训日： （F （2， 326） = 1.602， p = 0.203）; 培训日 x 治疗： （F （4， 326） = 0.661， p = 0.620）; 图5A）。与水处理动物（p = 0.037）相比，葡萄糖处理动物的反应显著减少，但没有其他显著差异（控制诉曼尼托：p = 0.387;曼尼托尔诉葡萄糖：p = 0.524），表明葡萄糖特异性作用。经过8周的高血糖，在购置培训（F （2，263） = 2.909， p = 0.056; 图5B）。然而，这两个训练日都有显著的主要影响（F （2， 189） = 4.721， p = 0.010） 和治疗 （F （2， 189） = 7.940， p = 0.000） 反转， 但没有显著的互动 （培训日 * 治疗 = F （4， 189） = 0.869， p = 0.484） 。随后最不显著的差异 （LSD） 对对比较确定了 R1 和 R3 （p = 0.022） 和 R2 和 R3 之间的显著差异 （p = 0.003）。LSD对比还显示，水处理组与葡萄糖和曼尼托处理组（水诉曼尼托：p = 0.008;水诉葡萄糖：0.000）;然而，葡萄糖和曼尼托组之间没有显著差异（p = 0.265），这表明这些差异的歧视比率可能是由于渗透效应。
图1：三室选择测试室和行为设置。（A） 3 室示意图。实验动物被限制在中央起始室2分钟，然后允许进入坦克的两侧在试验开始。为此，两个隔板的上半部分都凸起，为鱼进入任一选择舱创造了一个10厘米的空间。 （B，E） 适应是使用米色背景和浅滩的特异性作为奖励进行的。 （C，F） 收购使用选择室的黑白背景进行：奖励只位于房间的一侧。 （G） 使用选择隔间上的黑白背景进行反转：奖励仅在会议厅的另一侧提供（与收购相比）。 （H） 淹没在一个选择舱中的浅滩坦克的近距离图像。 请单击此处查看此图的较大版本。
图2：个别适应过程中的延迟和标记试验次数。（A） 选择第一决定的延迟。 （B） 完成个体适应的总时间。 （C） 左右两侧的条目数量没有不同，表明在开始收购之前没有固有的侧偏好。我们还报告在个别适应期间的标记试验总数。值报告为平均± SEM. 请单击此处查看此数字的较大版本。
图3：在三个收购日中，所有鱼类和高性能鱼类中高性能鱼类的百分比和初始选择延迟。（A） 高性能鱼从中央腔室移到室内的奖励侧，在每个获取日（A1/A3）的8次试验中，至少有6次。 （B） 在三天的购置培训（A+A3）中，总体初始选择延迟减少;高性能鱼 （C） 也很明显。值报告为平均± SEM. 请单击此处查看此数字的较大版本。
图4：收购和逆转试验期间的歧视表现。（A） 在 8 周后反转学习期间，在获取日 （A1+A+3） 和 （B） 期间，鱼的歧视比率（奖励试验/奖励 + 非回归试验）。还评估了3天（R1-R3）。对于这两项任务，每条鱼必须完成8次试验，结果以两个试验块（2、4、6、8）的形式呈现。收购和逆转期间的正确反应随时间而增加，在反转过程中观察到更快的反应，表明鱼学习和记住了任务。值报告为 SEM ±平均值。虚线代表机会。 请单击此处查看此图的较大版本。
图5：利用3室选择行为任务获取和逆转高血糖斑马鱼。（A） 在治疗之前，天真的斑马鱼在三天的行为训练（获取，A1+A3）中获得了3室选择行为任务。A1 和 A3 上的歧视比率存在显著差异，表明发生了学习（p = 0.012）。经过4周的治疗（彩色符号），治疗效果显著（p = 0.048），与水处理动物相比，葡萄糖处理动物的歧视率显著降低（p = 0.037）。 （B） 在另一项实验中，评估了8周高血糖前后的行为。尽管每个收购日业绩稳步增长，但 A1-A3 的歧视比率没有显著差异。然而，经过8周的治疗（彩色符号），治疗的主要效果（p <0.001）和训练日的个人主要效果（p = 0.010）。事后分析显示，水处理组与曼尼托和葡萄糖处理组之间存在显著差异，表明有渗透效应（水诉曼尼托：p = 0.008;水诉葡萄糖：p <0.001）。* 表示显著的主要影响。数据点表示组均值± SEM，具有不同字母的数据点彼此显著不同。虚线代表机会。 请单击此处查看此图的较大版本。
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Discussion
虽然在过去15年中，使用斑马鱼进行的神经科学研究的数量和种类都出现了巨大的增长，但与哺乳动物模型系统11、25、26相比，该物种缺乏行为检测。在这里，我们展示了一个三室选择任务，开发用于啮齿动物可以调整，以评估在斑马鱼视觉歧视学习的获取和逆转。这项任务以活浅滩作为奖励，提供了一个强有力的检测方法，可用于各种研究，研究行为相关的疾病，如糖尿病、阿尔茨海默氏症和痴呆症的高血糖并发症。
此前已经确定，斑马鱼能够学习和存储信息，因为它需要作出生态相关的决定，并在野外生存的必要条件3。我们在一项为期8周的纵向研究中获取和反转数据支持先前的证据，即斑马鱼虽然很小，但能够学习和记住一个简单的歧视任务，斑马鱼也可以抑制先前获得的反应。在长达8周的研究中，强迫奖励的数量减少，歧视率增加，表明鱼在选择正确、有回报的一方方面做得更好，并学会了任务。虽然这些变化并不显著，但我们确实看到，在获得期间，强制奖励审判的数量总体呈下降趋势，歧视率也有所上升。此外，高血糖鱼的三室选择行为任务的结果揭示了测试对研究高血糖条件的研究的适用性，并表明该范式可以与其他实验操作（如药物暴露或突变线）相结合，用于评估对认知的潜在影响。
这项研究的一个重要局限性是，随着时间的推移，我们无法识别单个鱼类，因此必须依靠群平均值来评估数据。开发一种单独跟踪不同治疗组的鱼类的方法，如啮齿动物，可以解决这些问题。为了解决这些差异，我们在收购阶段根据鱼的性能对鱼进行排序，结果发现这是我们方法的意外好处。"高绩效鱼"在每天的训练中得分≥6/8，而得分较低的鱼是"表现较差的鱼"。每天计算时，浅滩奖励组的"高绩效者"数量增加，因此，与鱼奖励治疗相比，第 3 天，此类鱼类的数量显著增加。在所有（"高绩效+低绩效"）鱼类中观察到的选择延迟趋势与仅在"高绩效"组观察到的鱼相似，这表明该组的强烈反应正在推动整体反应。
总之，这些发现表明，斑马鱼的浅滩歧视学习为研究正常和受损的认知功能提供了一个可行的具有成本效益的模型。
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Disclosures
作者没有什么可透露的。
Acknowledgments
我们感谢萨布丽娜·琼斯协助她使啮齿动物三室选择模式适应斑马鱼模型，杰里米·波波维茨和艾莉森·默克在行为收集日、跑步试验、动物护理和水箱设置方面的帮助。特别感谢詹姆斯·福布斯（机械工程师）协助三室选择坦克的设计和施工。
资助：VPC和TLD获得了美国大学艺术与科学学院的联合教师研究支持补助金（FRSG）。CJR 得到了美国大学艺术与科学学院研究生支持的支持。
Materials
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References
- Gitler, A. D., Dhillon, P., Shorter, J. Neurodegenerative disease: models, mechanisms, and a new hope. Disease Models & Mechanisms. 10, 499-502 (2017).
- Perry, R. J., Watson, P., Hodges, J. R. The nature and staging of attention dysfunction in early (minimal and mild) Alzheimer's disease: relationship to episodic and semantic memory impairment. Neuropsychologia. 38, 252-271 (2000).
- Gerlai, R. Learning and memory in zebrafish (Danio rerio). Methods in Cell Biology. 134, Elsevier Ltd. (2016).
- Davidson, T. L., et al. The effects of a high-energy diet on hippocampal-dependent discrimination performance and blood-brain barrier integrity differ for diet-induced obese and diet-resistant rats. Physiology and Behavior. 107, 26-33 (2012).
- Yang, M., Silverman, J. L., Crawley, J. N. Automated three-chambered social approach task for mice. Current Protocols in Neuroscience. 56 (1), (2011).
- Remmelink, E., Smit, A. B., Verhage, M., Loos, M. Measuring discrimination- and reversal learning in mouse models within 4 days and without prior food deprivation. Learning and Memory. 23, 660-667 (2016).
- Salas, C., et al. Neuropsychology of learning and memory in teleost fish. Zebrafish. 3, 157-171 (2006).
- Kalueff, A. V., et al. Towards a comprehensive catalog of zebrafish behavior 1.0 and beyond. Zebrafish. 10, 70-86 (2013).
- Luchiaria, A. C., Salajanb, D. C., Gerlai, R. Acute and chronic alcohol administration: Effects on performance of zebrafish in a latent learning task. Behavior Brain Research. 282, 76-83 (2015).
- Fadool, J., Dowling, J. Zebrafish: A model system for the study of eye genetics. Progress in Retinal and Eye Research. 27, 89-110 (2008).
- Fernandes, Y. M., Rampersad, M., Luchiari, A. C., Gerlai, R. Associative learning in the multichamber tank: A new learning paradigm for zebrafish. Behavioural Brain Research. 312, 279-284 (2016).
- Reider, M., Connaughton, V. P. Developmental exposure to methimazole increases anxiety behavior in zebrafish. Behavioral Neuroscience. , (2015).
- Capiotti, K. M., et al. Hyperglycemia induces memory impairment linked to increased acetylcholinesterase activity in zebrafish (Danio rerio). Behavioural Brain Research. 274, 319-325 (2014).
- May, Z., et al.
- Mathur, P., Lau, B., Guo, S. Conditioned place preference behavior in zebrafish. Nature Protocols. 6, 338-345 (2011).
- Guo, S. Linking genes to brain, behavior and neurological diseases: What can we learn from zebrafish. Genes, Brain and Behavior. 3, 63-74 (2004).
- Kily, L. J. M., et al. Gene expression changes in a zebrafish model of drug dependency suggest conservation of neuro-adaptation pathways. Journal of Experimental Biology. 211, 1623-1634 (2008).
- Webb, K. J., et al. Zebrafish reward mutants reveal novel transcripts mediating the behavioral effects of amphetamine. Genome Biology. 10, (2009).
- Clayman, C. L., Malloy, E. J., Kearns, D. N., Connaughton, V. P. Differential behavioral effects of ethanol pre-exposure in male and female zebrafish (Danio rerio). Behavioural Brain Research. 335, 174-184 (2017).
- Ruhl, T., et al. Acute administration of THC impairs spatial but not associative memory function in zebrafish. Psychopharmacology. 231, 3829-3842 (2014).
- Gellermann, L. W. Chance orders of alternating stimuli in visual discrimination experiments. The Pedagogical Seminary and Journal of Genetic Psychology. 42, 206-208 (1933).
- Gleeson, M., Connaughton, V., Arneson, L. S. Induction of hyperglycaemia in zebrafish (Danio rerio) leads to morphological changes in the retina. Acta Diabetologica. 44, 157-163 (2007).
- Connaughton, V. P., Baker, C., Fonde, L., Gerardi, E., Slack, C. Alternate immersion in an external glucose solution differentially affects blood sugar values in older versus younger zebrafish adults. Zebrafish. 13, 87-94 (2016).
- Goldsmith, J. R., Jobin, C. Think small: Zebrafish as a model system of human pathology. Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2012, 817341 (2012).
- Kalueff, A. V., Stewart, A. M., Gerlai, R., Court, P. Zebrafish as an emerging model for studying complex brain disorders. Trends in Pharmacological Sciences. 35, 63-75 (2014).
- Gerlai, R. Associative learning in zebrafish (Danio rerio). Methods in cell biology. 101, 249-270 (2011).
