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इस्केमिया/रिप्रफ्यूजन के एक पोर्सिन मॉडल में रीढ़ की हड्डी माइक्रोपरफ्यूजन का वास्तविक समय मूल्यांकन

Published: December 10, 2020 doi: 10.3791/62047
Automatic Translation
1, 1, 2, 3, 1, 4, 1, 5, 1, 6, 6, 1
1Department of Anesthesiology, Center of Anesthesiology and Intensive Care Medicine, University Medical Center Hamburg-Eppendorf, 2University Department for Vascular Surgery and Department of Operative Medicine, Medical University of Innsbruck, 3Department of Medical Biometry and Epidemiology, University Medical Center Hamburg-Eppendorf, 4Department of Vascular Medicine, University Heart and Vascular Center Hamburg (UHZ), 5Department of Cardiology, Rostock University Medical Center, 6University Department for Cardiac Surgery, Heart Center Leipzig

Summary

रीढ़ की हड्डी की चोट में रीढ़ की हड्डी माइक्रोसर्कुलेशन अहम भूमिका निभाता है। अधिकांश विधियां रीढ़ की हड्डी के माइक्रोसर्कुलेशन के वास्तविक समय के आकलन की अनुमति नहीं देती हैं, जो माइक्रोसर्कुलेशन-लक्षित उपचारों के विकास के लिए आवश्यक है। यहां, हम इस्केमिया/रिफ्यूजन के एक बड़े पशु मॉडल में लेजर-डॉप्लर-फ्लो सुई जांच का उपयोग करके एक प्रोटोकॉल का प्रस्ताव करते हैं ।

Abstract

रीढ़ की हड्डी की चोट महाधमनी मरम्मत की एक विनाशकारी जटिलता है। रीढ़ की हड्डी की चोट की रोकथाम और उपचार के लिए विकास के बावजूद, इसकी घटना अभी भी काफी अधिक है और इसलिए, रोगी परिणाम को प्रभावित करती है। माइक्रोसर्कुलेशन ऊतक परफ्यूजन और ऑक्सीजन आपूर्ति में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है और अक्सर मैक्रोहेमोडायनामिक्स से अलग होता है। इस प्रकार, माइक्रोसर्कुलेशन-लक्षित उपचारों के विकास और रीढ़ की हड्डी माइक्रोसर्कुलेशन के संबंध में मौजूदा दृष्टिकोणों के मूल्यांकन के लिए रीढ़ की हड्डी माइक्रोसर्कुलेशन का प्रत्यक्ष मूल्यांकन आवश्यक है। हालांकि, अधिकांश तरीके रीढ़ की हड्डी के माइक्रोसर्कुलेशन का वास्तविक समय मूल्यांकन प्रदान नहीं करते हैं। इस अध्ययन का उद्देश्य लेजर-डॉप्लर सुई जांच सीधे रीढ़ की हड्डी में डाला का उपयोग कर वास्तविक समय रीढ़ की हड्डी माइक्रोसिरकुलेटरी मूल्यांकन के लिए एक मानकीकृत प्रोटोकॉल का वर्णन करने के लिए है । हमने रीढ़ की हड्डी के माइक्रोसर्कुलेशन को खराब करने के लिए इस्केमिया/रिफ्यूजन के एक पोर्सिन मॉडल का इस्तेमाल किया । इसके अलावा फ्लोरोसेंट माइक्रोस्फीयर इंजेक्शन तकनीक का इस्तेमाल किया गया। प्रारंभ में, जानवरों को एनेस्थेटाइज्ड और यांत्रिक रूप से हवादार किया गया था। इसके बाद लेजर-डॉप्लर सुई जांच प्रविष्टि किया गया, जिसके बाद सेरेब्रोस्पाइनल द्रव जल निकासी का स्थान लिया गया। महाधमनी क्रॉस-क्लैंपिंग करने के लिए उतरते महाधमनी के जोखिम के लिए एक औसत स्टर्नोटॉमी का प्रदर्शन किया गया था। इस्केमिया/रिफ्यूजन को कुल ४८ मिनट के लिए सुपरा-सीलिएक महाधमनी क्रॉस-क्लैंपिंग द्वारा प्रेरित किया गया था, जिसके बाद रिफ्यूजन और हीमोडायनामिक स्थिरीकरण हुआ । लेजर-डॉप्लर फ्लक्स को मैक्रोमेडायनामिक मूल्यांकन के समानांतर किया गया था। इसके अलावा, एक स्थिर सेरेब्रोस्पाइनल दबाव बनाए रखने के लिए स्वचालित सेरेब्रोस्पाइनल द्रव जल निकासी का उपयोग किया गया था। प्रोटोकॉल पूरा होने के बाद जानवरों की बलि दी गई और हिस्टोपैथोलॉजिकल और माइक्रोस्फीयर एनालिसिस के लिए रीढ़ की हड्डी काटी गई । प्रोटोकॉल लेजर-डॉप्लर जांच का उपयोग कर रीढ़ की हड्डी माइक्रोपरफ्यूजन माप की व्यवहार्यता का पता चलता है और इस्केमिया के दौरान एक उल्लेखनीय कमी के साथ-साथ रिफ्यूजन के बाद वसूली से पता चलता है । परिणाम फ्लोरोसेंट माइक्रोस्फीयर मूल्यांकन के लिए तुलनीय व्यवहार दिखाया । अंत में, यह नया प्रोटोकॉल इस्केमिया/रिफ्यूजन स्थितियों में वास्तविक समय रीढ़ की हड्डी माइक्रोप्रफ्यूजन मूल्यांकन का उपयोग करके भविष्य के अध्ययनों के लिए एक उपयोगी बड़ा पशु मॉडल प्रदान कर सकता है ।

Introduction

इस्केमिया/रिप्रफ्यूजन (एससीआई) द्वारा प्रेरित रीढ़ की हड्डी की चोट कम परिणाम 1 ,2,3,4से जुड़ी महाधमनी मरम्मत की सबसे विनाशकारी जटिलताओं में से एक है । एससीआई के लिए वर्तमान रोकथाम और उपचार विकल्पों में मैक्रोहेमोडायनामिक मापदंडों का अनुकूलन और रीढ़ की हड्डी के परफ्यूजन दबाव2,5,6, 6,7, 8,9में सुधार करने के लिए सेरेब्रोस्पाइनल द्रव दबाव (सीएसपी) का सामान्यीकरण शामिल है। इन युद्धाभ्यास के कार्यान्वयन के बावजूद, एससीआई की घटना अभी भी महाधमनी मरम्मत10,11, 12 की जटिलता के आधार पर 2% और31%के बीच है।

हाल ही में, माइक्रोसर्कुलेशन ने13,14पर ध्यान दिया है। माइक्रोसर्कुलेशन सेलुलर ऑक्सीजन तेज और मेटाबोलिक एक्सचेंज का क्षेत्र है और इसलिए, अंग समारोह और सेलुलर अखंडता13में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। बिगड़ा सूक्ष्मसिक्यूलैरी रक्त प्रवाह ऊतक इस्केमिया का एक प्रमुख निर्धारक है जो मृत्यु दर 15 ,16,17,18,19से जुड़ा हुआ है । रीढ़ की हड्डी के माइक्रोसर्कुलेशन की हानि कम न्यूरोलॉजिकल कार्य और परिणाम20 , 21,22,23से जुड़ी हुई है । इसलिए, एससीआई के उपचार के लिए माइक्रोपरफ्यूजन का अनुकूलन एक सबसे आशाजनक दृष्टिकोण है। माइक्रोसर्कुलेटरी गड़बड़ी के हठ, मैक्रोसर्कुलेरी अनुकूलन के बावजूद,26,27, 28,29वर्णित किया गया है । हीमोडायनामिक जुटना का यह नुकसान इस्केमिया/रिप्रफ्यूजन सहित विभिन्न स्थितियों में अक्सर होता है, जिसमें प्रत्यक्ष माइक्रोसर्कुलेटरी मूल्यांकन और माइक्रोसर्कुलेशन-लक्षित उपचार26,27,30की आवश्यकता पर बल दिया जाता है ।

अब तक, केवल कुछ अध्ययनों ने रीढ़ की हड्डी के माइक्रोसिरकुलेटरी व्यवहार20,31के वास्तविक समय के आकलन के लिए लेजर-डॉप्लर जांच का उपयोग किया है। मौजूदा अध्ययनों में अक्सर माइक्रोस्फीयर इंजेक्शन तकनीकों का उपयोग किया जाता है, जो आंतरायिक उपयोग और पोस्टमार्टम विश्लेषण32,33तक सीमित होते हैं। माइक्रोस्फीयर इंजेक्शन तकनीक का उपयोग करके विभिन्न मापों की संख्या विभिन्न तरंगदैर्ध्य के साथ माइक्रोस्फीयर की उपलब्धता से सीमित है। इसके अलावा, लेजर-डॉप्लर तकनीकों के विपरीत, माइक्रोपरफ्यूजन का वास्तविक समय मूल्यांकन संभव नहीं है, क्योंकि इस विधि के लिए पोस्टमार्टम ऊतक प्रसंस्करण और विश्लेषण की आवश्यकता है। यहां, हम इस्केमिया/रिप्रफ्यूजन के एक पोर्सिन बड़े पशु मॉडल में रीढ़ की हड्डी माइक्रोसर्कुलेशन के वास्तविक समय के आकलन के लिए एक प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं ।

यह अध्ययन एक बड़ी पशु परियोजना का हिस्सा था जो इस्केमिया/रिसर्जन में माइक्रोसर्कुलेशन पर क्रिस्टलॉयड्स बनाम कोलॉयड के प्रभाव की तुलना करने के साथ-साथ रीढ़ की हड्डी के माइक्रोपरफ्यूजन पर तरल पदार्थ बनाम वासोप्रेसर के प्रभावों पर एक अन्वेषणात्मक यादृच्छिक अध्ययन की तुलना करता है । फ्लो प्रोब 2-पॉइंट कैलिब्रेशन के साथ-साथ प्रेशर-टिप कैथेटर कैलिब्रेशन को पहले३४बताया गया है । रिपोर्ट किए गए प्रोटोकॉल के अलावा, फ्लोरोसेंट माइक्रोस्फीयर का उपयोग रीढ़ की हड्डी के माइक्रोपरफ्यूजन के माप के लिए किया गया था, जैसा कि पहले वर्णित किया गया था, प्रत्येक जानवर के लिए रीढ़ की हड्डी के ऊतकों के 12 नमूनों का उपयोग करके, नमूनों के साथ 1-6 ऊपरी रीढ़ की हड्डी का प्रतिनिधित्व करते हैं और 7-12 निचले रीढ़ की हड्डी35, 36का प्रतिनिधित्व करते हैं। लेजर-डॉप्लर रिकॉर्डिंग और मैक्रोहेमोडायनामिक मूल्यांकन के पूरा होने के बाद प्रत्येक माप चरण के लिए माइक्रोस्फीयर इंजेक्शन किया गया था। हिस्टोपैथोलॉजिकल मूल्यांकन क्लेनमैन-स्कोर का उपयोग करके किया गया था जैसा कि पहले37वर्णित था।

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Protocol

इस अध्ययन को सरकारी आयोग ने हैम्बर्ग शहर (रेफरेंस-नंबर 60/17) के जानवरों की देखभाल और उपयोग पर मंजूरी दी थी । जानवरों को ' गाइड फॉर द केयर एंड यूज ऑफ लेबोरेटरी एनिमल्स ' (एनआईएच प्रकाशन संख्या 86-23, संशोधित २०११) के साथ-साथ फेल्साए सिफारिशों और प्रयोगों के अनुपालन में देखभाल प्राप्त हुई, जो आने वाले दिशा-निर्देशों24, 25के अनुसार किए गए थे । यह अध्ययन एक तीव्र परीक्षण था, और प्रोटोकॉल के अंत में सभी जानवरों को इच्छामृत्यु दी गई थी।

नोट: अध्ययन ६ ३ महीने पुराने पुरुष और मादा सूअरों (जर्मन Landrace) लगभग ४० किलो वजन में किया गया था । जानवरों को प्रयोगों से कम से 7 दिन पहले पशु देखभाल सुविधाओं के लिए लाया गया था और पशु कल्याण सिफारिशों के अनुसार रखे गए थे । पशुओं को भोजन और पानी विज्ञापन लिबिटम प्रदान किया गया था, और उनके स्वास्थ्य की स्थिति का नियमित रूप से जिम्मेदार पशुचिकित्सा द्वारा मूल्यांकन किया गया था । प्रयोगों से पहले 12 घंटे के उपवास का समय रखा गया था । पूरी प्रायोगिक प्रक्रिया और पशुओं की हैंडलिंग जिम्मेदार पशुचिकित्सा द्वारा निगरानी की गई थी।

1. संज्ञाहरण प्रेरण और संज्ञाहरण के रखरखाव

  1. संज्ञाहरण प्रेरण और संज्ञाहरण के रखरखाव के लिए, जानवरों को प्रीमेडिकेट करें और एंडोट्रेक्टियल इंटुबेशन करने के लिए नसों में इंजेक्शन के बाद नसों में इंजेक्शन का उपयोग करके उन्हें गहराई से बेहोश करें। इसके बाद, एक अतिरिक्त ओपिओइड बोलस इंजेक्शन के साथ पूरित निरंतर ओपिओइड एप्लिकेशन के साथ अस्थिर संज्ञाहरण एजेंट के संयोजन का उपयोग करके संज्ञाहरण को प्रेरित और बनाए रखें।
  2. केटामाइन 20 एमजीकिलोग्राम -1,अज़ापेरोन 4 मिलीग्राम-1,और मिडाजोलम 0.1 मिलीग्राम-1 के इंट्रामस्क्युलर इंजेक्शन को प्रीमेडिएशन और सेडेशन के लिए करें।
  3. कान की नस में एक शिराकार कैथेटर रखें, उचित निर्धारण सुरक्षित करें, और नमकीन के 10 एमएल के तेजी से आवेदन द्वारा कार्यक्षमता का आकलन करें।
  4. गर्मी के नुकसान को रोकने के लिए एक वार्मिंग कंबल पर एक रीढ़ की स्थिति में जानवर रखें।
  5. जानवरों के कार्डियो-पल्मोनरी स्थिति की निगरानी करने के लिए इलेक्ट्रोकार्डियोग्राफी (ईसीजी) और पल्स ऑक्सीमेट्री के साथ बुनियादी निगरानी स्थापित करें, और इसे बुनियादी निगरानी हार्डवेयर से जोड़ें।
  6. प्रेग्नेंसी के लिए सुअर के आकार के मुखौटे के माध्यम से ऑक्सीजन के15 एल मिन-1 को प्रशासित करें।
  7. यदि आवश्यक हो तो 0.1 मिलीग्राम-1 ऑफ 1% प्रोपोफोल के नसों में बोलीं, और एंडोट्रेक्याल इंटुबेशन करें।
  8. अंत ज्वारीय कैपनोग्राफी और ऑस्क्यूलेशन के साथ सही प्लेसमेंट सुरक्षित करें, पनकुरोनियम के 0.1 मिलीग्राम•किलो-1 का प्रशासन करें, और एंडोट्रेक् सील ट्यूब का उचित निर्धारण सुनिश्चित करें।
  9. 10 mL·kg-1 बॉडीवेट-1, 10 सीएमएच2 ओ का सकारात्मक अंत-समाप्तिदबाव,और एनेस्थीसिया मशीन का उपयोग करके0.3के प्रेरित ऑक्सीजन (FiO 2) का एक अंश का उपयोग करके वॉल्यूम-नियंत्रित वेंटिलेशन स्थापित करें। 35-45 एमएमएचजी के अंत-समाप्ति कार्बन डाइऑक्साइड तनाव (ईटीको2)को बनाए रखने के लिए वेंटिलेटर आवृत्ति को समायोजित करें।
  10. एक गैस्ट्रिक ट्यूब पेश करें, गैस्ट्रिक तरल पदार्थों का सक्शन करें, ट्यूब को ठीक करें, और इसे संग्रह बैग से कनेक्ट करें। संज्ञाहरण के दौरान आंखों के सूखापन को रोकने के लिए जानवर की आंखों को सावधानी से बंद करें।
  11. फेन्टनाइल (10 μgg-1·h-1)और सेवोफ्लुरन (3.0% एक्सपायर्ड एकाग्रता, वाष्प द्वारावितरित)के निरंतर अर्क द्वारा संज्ञाहरण बनाए रखें। सर्जिकल उत्तेजना के चरणों पर विशेष ध्यान देने, पूरे प्रोटोकॉल के दौरान किसी भी आंदोलनों की अनुपस्थिति के साथ-साथ महत्वपूर्ण संकेतों और वेंटिलेशन मापदंडों के सावधानीपूर्वक अवलोकन के साथ-साथ संज्ञाहरण का पर्याप्त स्तर सुनिश्चित करें। दर्द या संकट का कोई संकेत होने पर फेन्टनाइल (50 माइक्रोन) की अतिरिक्त बोलस खुराक दें।
    नोट: पूरी प्रक्रिया के दौरान पशु संज्ञाहरण में अनुभवी शोधकर्ताओं की उपस्थिति सुनिश्चित करें, और उचित संज्ञाहरण सुरक्षित करने के लिए एक अनुभवी पशुचिकित्सा द्वारा पर्यवेक्षण का उपयोग करें।
  12. संज्ञाहरण, शल्य चिकित्सा तैयारी और प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल के निष्पादन के दौरान तरल पदार्थ के नुकसान की भरपाई के लिए10एमएलजी -1 ·एच-1 संतुलित क्रिस्टलॉइड की आधारभूत जलसेक दर का प्रशासन करें। गर्मी के नुकसान को रोकने के लिए गर्म तरल पदार्थ का उपयोग करें।
  13. साबुन के पानी का उपयोग करके सुअर की त्वचा को धीरे-धीरे साफ करें। त्वचा संदूषण को कम करने के लिए पोविडोन-आयोडीन युक्त त्वचा कीटाणुशोधन समाधान का उपयोग करें। सर्जिकल तैयारी के लिए बाँझ दस्ताने का उपयोग करें। एंटीमाइक्रोबियल प्रोफिलैक्सिस के रूप में 300 मिलीग्राम क्लिंडामाइसिन लगाएं, और 6 घंटे के बाद खुराक दोहराएं।

2. जांच प्लेसमेंट

  1. जानवर को सही पार्श्व स्थिति में रखें, और कशेरुकी के बीच की जगह को चौड़ा करने के लिए जानवर की पीठ को फ्लेक्स करें।
  2. शल्य चिकित्सा से स्पिनस प्रक्रियाओं और कशेरुकी मेहराब(चित्रा 1 ए)की तैयारी के लिए पैरावर्टेब्रल क्षेत्र का पर्दाफाश करें।
  3. दो कशेरुकी मेहराब(चित्रा 1B)के बीच 1/2 वक्षीय कशेरुका (Th) 13/14 या काठ कशेरुका (एल) 1/2 के स्तर पर रीढ़ की हड्डी में एक संवहनी 14 जी परिधीय नस कैथेटर पैराडेडियन रखें ।
  4. सुई निकालें, नस कैथेटर(चित्रा 1C)पर लेजर/डॉप्लर सुई जांच डालें, और नामित हार्ड और सॉफ्टवेयर के लिए कनेक्शन के द्वारा संकेत की गुणवत्ता का परीक्षण करें । सुनिश्चित करें कि मध्यम पल्सटिलिटी के साथ एक स्थिर संकेत है।
  5. सीवन(चित्रा 1डी)के साथ जांच को सावधानीपूर्वक ठीक करें और जांच की अव्यवस्था या गुत्थी को रोकने के लिए पैडिंग का उपयोग करें।
  6. सेरेब्रोस्पाइनल दबाव को मापने और नियंत्रित करने के लिए सेरेब्रोस्पाइनल द्रव जल निकासी के पर्क्यूटेनेस प्लेसमेंट के लिए, एल 4/5 या एल 5/6 के स्तर की पहचान करें, त्वचा और चमड़े के नीचे की जगह को परिचयकर्ता सुई के साथ पंचर करें, और इनले सुई को हटा दें।
  7. सुई पर खारा से भरी सिरिंज रखें, और तरल पदार्थ से भरी सिरिंज पर लगातार दबाव के साथ सुई को ध्यान से पेश करें।
  8. एक बार प्रतिरोध की हानि एपीड्यूरल स्थिति के लिए सबूत के रूप में महसूस किया जाता है, फिर से इनले सुई परिचय, और डुरा मेटर पंचर और इनले सुई को दूर करने के लिए सुई 2-3 मिमी आगे परिचय।
  9. स्पष्ट शराब के तेजी से टपकाव से इंट्राथेकल स्थिति का सत्यापन करें। 20 सेमी गहराई तक जल निकासी का परिचय दें, लुएर-लॉक एडाप्टर संलग्न करें, और शराब की सावधानीपूर्वक आकांक्षा द्वारा स्थिति को सत्यापित करें।
  10. सींचरों के साथ जल निकासी को सावधानी से ठीक करें, और इसे सेरेब्रोस्पाइनल द्रव जल निकासी प्रणाली से जोड़ें।
  11. बाएं कान के पीछे खोपड़ी का पर्दाफाश करें, और ध्यान से 6 मिमी ड्रिल अटैचमेंट का उपयोग करके त्वचा के ड्रिल होल ट्रेपनेशन का प्रदर्शन करें।
  12. मस्तिष्क में सीधे एक दूसरे लेजर डॉप्लर जांच का परिचय दें। सावधानी से टांके के साथ जांच को ठीक करें, और नामित हार्ड और सॉफ्टवेयर के संबंध में सिग्नल की गुणवत्ता का परीक्षण करें। फिर, सुनिश्चित करें कि मध्यम पल्सटिलिटी के साथ एक स्थिर संकेत है।
  13. सभी जांच डिस्कनेक्ट करें, ध्यान से जानवर को एक रीढ़ की स्थिति में रखें, अप्रभावित जांच स्थिति सुनिश्चित करें। सुनिश्चित करें कि कम से कम 4-5 शोधकर्ता इस पैंतरेबाज़ी करते हैं।
  14. जांच को फिर से कनेक्ट करें, और सिग्नल की गुणवत्ता को फिर से जांचें।
  15. लेजर-डॉप्लर हार्डवेयर के आउटपुट चैनलों को एम्पलीफायर और सिंक्रोनिक एक्विजिशन हार्डवेयर और सॉफ्टवेयर से कनेक्ट करें ताकि मैक्रोमेयनामिक संकेतों के साथ एक साथ लेजर/डॉप्लर फ्लक्स को एक साथ रिकॉर्ड किया जा सके ।
  16. 2-पॉइंट अंशांकन के साथ यूनिट (पीयू) के अनुसार कैलिब्रेट फ्लक्स।
    1. मेनू खोलने और एनालॉग आउटपुट सेटिंग का चयन करने के लिए प्रेस एंटर करें।
    2. सिंक्रोनिक अधिग्रहण सॉफ्टवेयर के साथ उपयोग के लिए 2-बिंदु अंशांकन के साथ प्रवाह को कैलिब्रेशन करने के लिए प्रदर्शित रूपांतरण कारक(5.0 V = 1000 पीयू)का उपयोग करें।
    3. पिछले मेनू पर लौटने के लिए रिटर्न चुनें, और माप जारी रखने के लिए माप का चयन करें।
    4. सिंक्रोनिक अधिग्रहण सॉफ्टवेयर खोलें। सेटअप मेनू से सभी इनपुट शून्य चुनें। सभी इनपुट को उपयोग किए गए उपकरणों और जांच से कनेक्ट करें।
    5. फ्लक्स चैनल के ड्रॉपडाउन मेनू पर क्लिक करके फ्लक्सके लिए 2-पॉइंट अंशांकन करें। 2 सूत्री अंशांकन का चयनकरें । इकाइयों को सेट करें- इकाइयों के रूप में बीपीयू का चयन करें और चुनें। प्वाइंट 1 केलिए , सेट 0 वी से 0 बीपीयू। प्वाइंट 2के लिए 5.0 वी से 1000 बीपीयूसेट करें . सभी और नए डेटाके लिए सेट इकाइयों का चयन करें । मेनू को बंद करने के लिए ठीक प्रेस करें।
  17. 10 एमएमएचजी के लक्ष्य दबाव और 20 एमएलएच-1के जल निकासी की मात्रा के साथ निरंतर सेरेब्रोस्पाइनल तरल जल निकासी शुरू करें।

3. कैथेटर प्लेसमेंट

  1. दोनों फीमोरल धमनियों का पर्दाफाश करें।
  2. सही फेमोरल धमनी के डिस्टल हिस्से को लिगेट करें, अस्थायी रूप से एक पोत लूप का उपयोग करके धमनी के समीपस्थ ल्यूमेन को ऑक्सीलेट करें, पॉट्स की कैंची का उपयोग करके पोत का 2 मिमी कट करें, और गाइड तार पेश करें।
  3. गाइड तार को आगे पेश करें, प्रतिरोध मुक्त प्रविष्टि सुनिश्चित करें और तार की किसी भी गुत्थी से बचें; तार के ऊपर कैथेटर परिचय।
  4. टांके के साथ कैथेटर को ठीक करें।
  5. रक्तचाप और ट्रांस-कार्डियोपल्मोनरी मॉनिटरिंग हार्ड-एंड सॉफ्टवेयर के उचित कनेक्शन के बाद रक्त गैस विश्लेषण और धमनी संकेत माप के साथ सत्यापित धमनी रक्त की आकांक्षा द्वारा सही स्थिति सुनिश्चित करें।
  6. बाईं फीमोरल धमनी पर 5 मिमी प्रवाह-जांच रखें, और फ्लोमीटर से कनेक्शन करके सिग्नल की गुणवत्ता का परीक्षण करें।
  7. टांके के साथ दोनों कमर बंद करें।
  8. 8 फादर परिचयकर्ता म्यान के प्लेसमेंट के लिए सही कैरोटिड धमनी के साथ-साथ सही आंतरिक जुगुलर नस का पर्दाफाश करें।
  9. कैथेटर प्लेसमेंट के लिए, 3.2-3.4 में वर्णित के रूप में उसी तरीके से आगे बढ़ें।
  10. कैरोटिड धमनी परिचयकर्ता म्यान के साइड-ल्यूमेन को धमनी दबाव माप के लिए बुनियादी दबाव निगरानी और फेफड़े के थर्मोडिल्यूशन हार्डवेयर से कनेक्ट करें।
  11. आरोही महाधमनी में एक दबाव-टिप कैथेटर पेश करें, और एम्पलीफायर और सिंक्रोनिक अधिग्रहण हार्ड और सॉफ्टवेयर के संबंध में स्थिति को सत्यापित करें।
  12. 20 सेमी गहराई पर हवा के साथ गुब्बारे फुलाने और धीरे से इसे डालने जब तक एक कील दबाव हीमोडायनामिक वक्र में देखा जाता है द्वारा फेफड़े की धमनी में शिरा के माध्यम से एक हंस-Ganz फेफड़े की धमनी कैथेटर रखें । गुब्बारे को डिफ्लेट करें और कैथेटर को 2 सेमी पीछे खींचें। पल्मोनरी धमनी दबाव की संतोषजनक संकेत गुणवत्ता सुनिश्चित करें। थ्रिमिस्टर्स को बेसिक प्रेशर मॉनिटरिंग और पल्मोनरी थर्मोडिल्यूशन हार्डवेयर से कनेक्ट करें।
  13. बाहरी सही जुगुलर नस में दवा प्रशासन और केंद्रीय शिरा दबाव माप के लिए 12 एफआर 5-लुमेन केंद्रीय शिरास कैथेटर के परक्यूटेनियस प्लेसमेंट के लिए सोनोग्राफिक मार्गदर्शन का उपयोग करें। सोनोग्राफिक प्लेसमेंट38 के लिए 6 स्टेप-अप्रोच का उपयोग करें
  14. कैथेटर के डिस्टल ल्यूमेन को ब्लड प्रेशर और ट्रांस-कार्डियोपल्मोनरी मॉनिटरिंग हार्ड और सॉफ्टवेयर से कनेक्ट करें। केंद्रीय शिरीकार कैथेटर के लिए सभी दवाओं और इन्फ्यूजन स्विच करें। एनाल्जेसिक, तरल पदार्थ और कैटेकोलामिन के लिए अलग-अलग ल्यूमेन का उपयोग करें, और वॉल्यूम-लोडिंग चरणों के दौरान कोलॉयड के प्रशासन के लिए बड़े ल्यूमेन को छोड़ दें।

4. सर्जिकल तैयारी

  1. एक मिनी लेप्रोटॉमी प्रदर्शन करें, मूत्राशय को जुटाने, मूत्र जल निकासी के लिए एक फोले कैथेटर डालें, खारा के साथ गुब्बारा फुलाएं, और थैली टांके के साथ कैथेटर को ठीक करें।
  2. कैथेटर को एमएल में मूत्र की मात्रा प्रदर्शित करने वाले मूत्र संग्रह बैग से कनेक्ट करें।
  3. फियो2 से 1.0 तक बढ़ाएं, और नसों के साथ 0.1 मिलीग्राम-1 पैनक्यूरोनियम को फिर से प्रशासित करें।
  4. उरोस्थि के लिए नीचे prepping के लिए इलेक्ट्रोकेटर का उपयोग करके एक औसत स्टर्नोटॉमी प्रदर्शन करें। धीरे-धीरे आसपास के ऊतकों से उरोस्थि को काटना। चोटों को रोकने के लिए एक सेक के रेट्रोस्टर्नल प्लेसमेंट प्रदर्शन करते हैं।
  5. वेंटिलेशन बंद करो और एक दोलन आरी के साथ हड्डी विभाजित। वेंटिलेशन जारी रखें और FiO2 से 0.3 को कम करें। रक्तस्राव को कम करने के लिए इलेक्ट्रोकेटरी का उपयोग करें, और हड्डी मोम के साथ उरोस्थि को सील करें।
  6. ध्यान से बाएं फेफड़े के शीर्ष को जुटाने, और शल्य चिकित्सा जोखिम की सुविधा के लिए डायाफ्राम के बाएं पार्श्व भाग विभाजित।
  7. बाएं फेफड़े के कोमल रिऐक्शन द्वारा सीलिएक ट्रंक के लिए उतरते महाधमनी समीपस्थ का पर्दाफाश करें, अविचलित वेंटिलेशन सुनिश्चित करें और बाएं फेफड़े(चित्रा 2A)के आघात से बचें और आसपास के ऊतकों(चित्रा 2B)को विभाजित करें। यदि हेमोडायनामिक स्थिरीकरण की आवश्यकता है तो 7 एमएलजी-1 हाइड्रोक्सीथिल स्टार्च कोलॉयड का प्रशासन करें।
  8. उचित एक्सपोजर(चित्रा 2C)सुनिश्चित करने के लिए उतरते महाधमनी के चारों ओर एक ओवरहोल्ड रखें।
  9. उतरते वक्ष महाधमनी(चित्रा 2 डी)के आसपास एक प्रवाह जांच संलग्न करें । प्रवाह मॉड्यूल और सिंक्रोनिक अधिग्रहण हार्ड और सॉफ्टवेयर के संबंध में उचित संकेत गुणवत्ता सुनिश्चित करें। यदि आवश्यक हो तो सिग्नल की गुणवत्ता में सुधार करने के लिए संपर्क जेल का उपयोग करें।
  10. उतरते महाधमनी के चारों ओर एक पोत पाश संलग्न करें, प्रवाह जांच के लिए डिस्टल महाधमनी क्रॉस क्लैंपिंग के क्षेत्र को चिह्नित करने के लिए।

5. मूल्यांकन और डेटा अधिग्रहण

  1. सही अलिंद स्तर पर रखे तरल पदार्थ से भरी लाइनों का उपयोग करके सभी कैथेटर और स्तर कैथेटर शून्य करें।
  2. सुई ईसीजी इलेक्ट्रोड रखें और उन्हें सिंक्रोनिक अधिग्रहण हार्ड और सॉफ्टवेयर से कनेक्ट करें।
  3. ट्रांस-कार्डियोपल्मोनरी थर्मोडिल्यूशन के साथ-साथ महाधमनी प्रवाह और दबाव माप का आकलन पहले ३४वर्णित किया गया है ।
  4. पल्मोनरी धमनी थर्मोडिल्यूशन का उपयोग करके कार्डियक आउटपुट मापन के लिए, 10 एमएल ठंडे खारा के साथ 3 इंजेक्शन करें, और बुनियादी निगरानी हार्डवेयर द्वारा प्रदर्शित मतलब मूल्य पर ध्यान दें।
  5. बस स्टार्ट दबाकरलेजर-डॉप्लर सॉफ्टवेयर शुरू करें, और एम 0 से एम 5के रूप में चरणों को ध्यान से लेबल करके प्रत्येक माप चरण के लिए एक निशान निर्धारित करें।

6. प्रायोगिक प्रोटोकॉल

  1. बेसलाइन माप (M0) प्रदर्शन करते हैं।
  2. 7 एमएल किलो -1 हाइड्रोक्सीथिल स्टार्च कोलॉयड केवॉल्यूम-लोडिंग चरणों का उपयोग करके हीमोडायनामिक अनुकूलन करें। दबाव वाले इन्फ्यूजन का उपयोग करके प्रत्येक वॉल्यूम-लोडिंग चरण को 5 मिनट से अधिक करें। प्रत्येक वॉल्यूम-लोडिंग चरण के पूरा होने के बाद, संतुलन के लिए 5 मिनट की अनुमति दें। कार्डियक आउटपुट में वृद्धि होने तक वॉल्यूम लोडिंग शुरू <15% है।
  3. हीमोडायनामिक अनुकूलन के पूरा होने के बाद माप (एम 1) दोहराएं।
  4. चिह्नित क्षेत्र में महाधमनी क्लैंप रखकर कुल ४८ मिनट के सुपरा-सीलिएक महाधमनी क्रॉस-क्लैंपिंग के लिए इस्केमिया/रिफ्यूजन को प्रेरित करें ।
  5. अध्ययन प्रोटोकॉल के दौरान जानवरों के अस्तित्व में सुधार करने के लिए 1-, 2-, 5-, 10-, और 30-मिनट अंतराल के आरोही क्रम में महाधमनी क्लैंपिंग लागू करें।
  6. अधिकतम 5 मिनट के बाद या फेमोरल धमनी प्रवाह के सामान्यीकरण के बाद प्रत्येक अंतराल के बाद महाधमनी क्रॉस-क्लैंपिंग जारी रखें।
  7. 100 एमएमएचजी मतलब धमनी दबाव के रक्तचाप में वृद्धि को रोकने के लिए अवर वेना > कावा का मैनुअल प्रवाह करें।
  8. क्लैंपिंग चरण के दौरान नोरेपिनेफ्रीन या एपिनेफ्रीन के बोलस इंजेक्शन का प्रशासन करें, यदि आवश्यक हो, तो 40 एमएमएचजी से नीचे मतलब धमनी दबाव में कमी को रोकने के लिए।
  9. रिफ्यूजन (M2) से पहले 30-न्यूनतम क्लैंपिंग अंतराल के अंत में माप दोहराएं।
  10. धीरे-धीरे हेमोडायनामिक स्थिरता सुनिश्चित करने के लिए क्लैंप खोलें। यदि रक्तचाप बहुत जल्दी गिरता है और स्थिरीकरण की अनुमति देता है तो क्लैंप बंद करें।
  11. हाइड्रोक्सीथिल स्टार्च कॉलोइड के 7 एमएलजी-1 के साथ-साथ स्थिरीकरण के लिए 10-20 माइक्रोग्राम के नोरेपिनफ्रीन और/या एपिनेफ्रीन के अतिरिक्त बोलस इंजेक्शन का प्रशासन करें । पीएच 7.1 सेनीचे गिरता है, तो 8.4% सोडियम बाइकार्बोनेट के 2 एमएल किलो -1 प्रशासन। नॉर्मोकैप्निया सुनिश्चित करने के लिए श्वसन दर का उचित समायोजन सुनिश्चित करें।
  12. रिफ्यूजन (एम 3) के बाद माप 1 घंटे दोहराएं।
  13. 6.2 के तहत वर्णित हेमोडायनामिक अनुकूलन दोहराएं, और दोहराएं माप (M4)।
  14. इस्केमिया/रिप्रफ्यूजन (M5) के शामिल होने के बाद अंतिम माप 4.5 घंटे करें।

7. इच्छामृत्यु

  1. वेंट्रिकुलर फिब्रिलेशन और एसिस्टोल को प्रेरित करने के लिए इच्छामृत्यु के लिए नसों के साथ पोटेशियम क्लोराइड के 40 mmol प्रशासन।
  2. वेंटिलेशन समाप्त करें और सभी कैथेटर को हटा दें।

8. अंग संचयन

  1. जानवर को प्रवण स्थिति में रखें, और सुई जांच के साथ-साथ जल निकासी को हटा दें।
  2. स्केलपेल और संदंश का उपयोग करके त्वचा चीरा और मांसपेशियों के ऊतकों को हटाने से रीढ़ की हड्डी का पर्दाफाश करें।
  3. दोनों पक्षों पर कशेरुकी आर्क पैरामेडियन को विभाजित करने के लिए एक दोलन देखा का उपयोग करें, और शेष कनेक्शन को ढीला करने के लिए स्पिनी प्रक्रिया को ध्यान से चालू करके कशेरुकी हड्डी के पृष्ठीय हिस्से को हटा दें।
  4. रीढ़ की हड्डी को को ध्यान से कौंडल से कपाल के सिरों तक उठाने के लिए संदंश का उपयोग करें, और रीढ़ की हड्डी को हटाने के लिए रीढ़ की हड्डी की नसों को काटने के लिए स्केलपेल का उपयोग करें।
  5. हिस्टोपैथोलॉजिकल मूल्यांकन या माइक्रोस्फीयर क्वांटिफिकेशन के लिए आगे के उपयोग तक रीढ़ की हड्डी को 4% फॉर्मेलिन में स्टोर करें।

9. सांख्यिकीय विश्लेषण

  1. सांख्यिकीय सॉफ्टवेयर का उपयोग करें।
  2. यदि आवश्यक हो तो हिस्टोग्राम और लॉग-ट्रांसफॉर्म वेरिएबल का निरीक्षण करके सामान्य वितरण सुनिश्चित करें।
  3. विषय निर्भर चर- रीढ़ की हड्डी फ्लक्स, कार्डियक आउटपुट, हृदय गति, स्ट्रोक की मात्रा, सिस्टोलिक धमनी दबाव, मतलब धमनी दबाव, डायस्टोलिक धमनी दबाव, केंद्रीय शिराकार दबाव, प्रणालीगत संवहनी प्रतिरोध - साथ ही ऊपरी और निचले रीढ़ की हड्डी माइक्रोपरफ्यूजन के रूप में फ्लोरोसेंट माइक्रोस्फीयर के साथ मूल्यांकन किया जाता है यदि वांछित - सामान्य रैखिक मिश्रित मॉडल विश्लेषण करने के लिए, नियमित GENLINMIXED का उपयोग करके एक पहचान लिंक फ़ंक्शन के साथ निरंतर डेटा के लिए।
  4. बेसलाइन समायोजन का उपयोग करें।
  5. वेरिएबल बेसलाइन और माप बिंदु के लिए निश्चित प्रभाव के साथ मॉडल निर्दिष्ट करें। जानवरों के भीतर बार-बार उपाय के रूप में माप बिंदु पर विचार करें।
  6. प्रत्येक पैरामीटर के लिए माप बिंदु के लिए निश्चित प्रभावों के पी-मानों की रिपोर्ट करें।
  7. रीढ़ की हड्डी फ्लोरोसेंट माइक्रोस्फीयर विश्लेषण के लिए, क्षेत्रों और मापन बिंदु के बीच बातचीत का मूल्यांकन करने के लिए क्षेत्र और माप बिंदु के बीच निश्चित प्रभाव और बातचीत के रूप में इसके अलावा क्षेत्र (निचली रीढ़ की हड्डी, ऊपरी रीढ़ की हड्डी) का उपयोग करें, और बातचीत के लिए निश्चित प्रभावों के पी-मूल्यों की रिपोर्ट भी करें।
  8. माप बिंदुओं M1-M5 पर सभी निर्भर चर के लिए 95% विश्वास अंतराल (सीआई) के साथ बेसलाइन समायोजित सीमांत साधनों की गणना करें, इसके बाद कम से कम महत्वपूर्ण अंतर परीक्षणों के माध्यम से जोड़ीवार तुलना करें।
  9. मतलब (95% सीआई) के रूप में एक्सप्रेस वेरिएबल्स। मानक विचलन के ± मतलब के रूप में पशु वजन एक्सप्रेस।
  10. वर्तमान असमायोजित पी मान।

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Representative Results

प्रोटोकॉल पूरा होने तक सभी छह जानवर बच गए । जानवरों का वजन 48.2 ± 2.9 किलो था; पांच जानवर नर थे, और एक जानवर मादा था । रीढ़ की हड्डी की सुई जांच प्रविष्टि के साथ-साथ रीढ़ की हड्डी फ्लक्स माप सभी जानवरों में संभव था।

इस्केमिया इंडक्शन के लिए महाधमनी क्रॉस-क्लैंपिंग के साथ-साथ अनकैमिंग और रिफ्यूजन के दौरान सेरेब्रल माइक्रोसिरक्यूलेटरी और मैक्रोहेमोडायनामिक रिकॉर्डिंग के संयोजन में वास्तविक समय की रीढ़ की हड्डी माइक्रोसर्कुलेटरी रिकॉर्डिंग के उदाहरण चित्रा 3 ए, चित्रा 3बीमें दिखाए गए हैं। उतरते महाधमनी प्रवाह के व्यवधान के बाद रीढ़ की हड्डी के प्रवाह में उल्लेखनीय कमी आई, जबकि आरोही महाधमनी में दबाव बढ़ गया(चित्र 3 ए)। रिप्रेफ्यूजन के कारण विपरीत प्रभाव(चित्रा 3B)हो गया।

तालिका 1में मैक्रो-और माइक्रोसर्कुलेटरी मापदंडों का सांख्यिकीय विश्लेषण दिखाया गया है। मिश्रित मॉडल-अनुमानित सीमांत साधन और उनके आत्मविश्वास अंतराल इस्केमिया के दौरान रीढ़ की हड्डी के प्रवाह में उल्लेखनीय कमी का संकेत देते हैं। इसके विपरीत, इस्केमिया के दौरान सेरेब्रल फ्लक्स में स्पष्ट रूप से वृद्धि हुई, जैसा कि अनुमानित सीमांत साधनों और उनके आत्मविश्वास अंतराल द्वारा इंगित किया गया है। यह धमनी दबाव, हृदय गति, और प्रणालीगत संवहनी प्रतिरोध में वृद्धि के साथ था, जबकि हृदय उत्पादन और स्ट्रोक की मात्रा में कमी आई । फ्लोरोसेंट माइक्रोस्फीयर विश्लेषण से निचली रीढ़ की हड्डी में रीढ़ की हड्डी के माइक्रोसर्कुलेटरी रक्त प्रवाह में उल्लेखनीय कमी का पता चला, जबकि ऊपरी रीढ़ की हड्डी में कोई महत्वपूर्ण परिवर्तन नहीं हुआ, जैसा कि अनुमानित सीमांत साधनों और उनके आत्मविश्वास के अंतराल से संकेत मिलता है । रिफ्यूजन के कारण विपरीत प्रभाव पड़ते थे। हालांकि प्रोटोकॉल के अंत में हृदय उत्पादन, स्ट्रोक की मात्रा और धमनी दबाव में और कमी आई थी, लेकिन रीढ़ की हड्डी के प्रवाह के साथ-साथ रीढ़ की हड्डी के माइक्रोसर्कुलेटरी रक्त प्रवाह स्थिर थे।

इस अध्ययन के परिणाम रीढ़ की हड्डी माइक्रोपरफ्यूजन में वास्तविक समय में परिवर्तन का पता लगाने के लिए लेजर/डॉप्लर सुई जांच की क्षमता दिखाते हैं । जैसा कि उम्मीद थी, इस्केमिया के दौरान रीढ़ की हड्डी के माइक्रोसर्कुलेशन में कमी न्यूनतम माइक्रोसर्कुलेटरी फ्लक्स के साथ कठोर थी। रीढ़ की हड्डी के प्रवाह की वसूली रिफ्यूजन के बाद हुई। फ्लोरोसेंट माइक्रोस्फीयर के साथ मूल्यांकन के अनुसार, लोअर स्पाइनल कॉर्ड परफ्यूजन ने एक तुलनीय व्यवहार दिखाया, इस प्रकार विधि का समर्थन किया। जैसा कि उम्मीद थी, ऊपरी रीढ़ की हड्डी परफ्यूजन और सेरेब्रल फ्लक्स ने अलग-अलग व्यवहार दिखाए। हालांकि रीढ़ की हड्डी माइक्रोसर्कुलेशन स्थिर था, मैक्रोसर्कुलेशन प्रोटोकॉल के अंत में गिरावट आई, जिसमें हीमोडायनामिक जुटना का नुकसान दिखा। जबकि उतरते महाधमनी में प्रवाह इस्केमिया के दौरान शून्य था, रिफ्यूजन के कारण महाधमनी प्रवाह की वसूली हुई। हिस्टोपैथोलॉजिकल विश्लेषण से रीढ़ की हड्डी के हल्के परिगलन का पता चला, जिसमें क्लेनमैन-स्कोर के साथ 0 और 2 के बीच निचली रीढ़ की हड्डी के लिए और 0 और 1 के बीच ऊपरी रीढ़ की हड्डी के लिए ।

Figure 1
चित्रा 1-रीढ़ की हड्डी में लेजर/डॉप्लर सुई जांच का स्थान। (ख)नस कैथेटर का उपयोग करके रीढ़ की हड्डी का पंचर। (ग)इनले सुई को हटाने के बाद सुई जांच का सम्मिलन। (घ)सुई जांच का निर्धारण। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें । 

Figure 2
चित्रा 2: उतरते महाधमनी और प्रवाह जांच और पोत पाश के प्लेसमेंट का एक्सपोजर । (क)बाएं फेफड़े के शीर्ष को जुटाने और डायाफ्राम के बाएं-पार्श्व भाग को विभाजित करने के बाद उतरते महाधमनी का एक्सपोजर । (ख)सर्जिकल एक्सपोजर के लिए आसपास के ऊतकों का विभाजन। (ग)उचित परिपत्र एक्सपोजर को सुरक्षित करने के लिए उतरते महाधमनी के चारों ओर ओवरहोल्ड का प्लेसमेंट । (घ)अवतरण जांच के साथ-साथ उतरते महाधमनी के चारों ओर पोत पाश का स्थान । कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 3
चित्र 3:इस्केमिया के साथ-साथ रिफ्यूजन के दौरान माइक्रोसिक्यूमेंटरी और मैक्रोहेमोडायनामिक संकेतों की नमूना रिकॉर्डिंग। ईसीजी के नमूना रिकॉर्डिंग, आरोही महाधमनी में दबाव के रूप में एक माइक्रोटिप कैथेटर का उपयोग कर मापा, उतरते महाधमनी में प्रवाह के रूप में एक अल्ट्रासोनिक प्रवाह जांच, रीढ़ की हड्डी के रूप में के रूप में अच्छी तरह से मस्तिष्क माइक्रोसर्कुलेटरी प्रवाह का उपयोग कर मापा के रूप में लेजर/डॉप्लर सुई जांच का उपयोग कर मापा । (ए)इस्केमिया इंडक्शन के दौरान सुपरा-सीलिएक महाधमनी क्रॉस क्लैंपिंग द्वारा 50 एस नमूना। (ख)महाधमनी क्रॉस-क्लैंप के कोमल पुनः खोलने से रिफ्यूजन प्रेरण के दौरान 20 एस नमूना। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें । 

एम 1 M2 एम 3 एम 4 M5
रीढ़ की हड्डी फ्लक्स 61.35 (41.96-89.70) 6.78 (4.63-9.91) 58.97 (40.33-86.22) 66.05 (45.17-96.57) 59.09 (40.41-86.40)
मुख्य प्रभाव माप बिंदु: पी < 0.001 जोड़ीवार तुलना M1 पी < 0.001 पी = 0.878 पी = 0.777 पी = 0.886
सेरेब्रल फ्लक्स 41.12 (28.17-60.04) 71.73 (49.13-104.73) 60.34 (41.33-88.10) 59.91 (36.93-78.71) 49.82 (34.12-72.74)
मुख्य प्रभाव माप बिंदु: पी = 0.023 जोड़ीवार तुलना M1 पी = 0.001 पी = 0.045 पी = 0.173 पी = 0.341
रीढ़ की हड्डी माइक्रोपरफ्यूजन (ml/min/g) ऊपरी रीढ़ की हड्डी 0.071 (0.058-0.087) 0.063 (0.052-0.078) 0.088 (0.072-0.11) 0.082 (0.067-0.100) 0.083 (0.068-0.102)
जोड़ीवार तुलना M1 पी = 0.420 पी = 0.146 पी = 0.344 पी = 0.281
मुख्य प्रभाव माप बिंदु: पी < 0.001
निचली रीढ़ की हड्डी 0.079 (0.065-0.097) 0.031 (0.026-0.039) 0.111 (0.090-0.136) 0.089 (0.073-0.110) 0.105 (0.086-0.129)
इंटरैक्शन मेजरमेंट प्वाइंट · रीढ़ की हड्डी क्षेत्र: पी < 0.001 जोड़ीवार तुलना M1 पी < 0.001 पी = 0.021 पी = 0.400 पी = 0.051
कार्डियक आउटपुट (l/min) 4.15 (3.69-4.61) 3.13 (2.67-3.60) 3.30 (2.84-3.76) 3.67 (3.20-4.13) 2.67 (2.00-2.93)
मुख्य प्रभाव माप बिंदु:: पी < 0.001 जोड़ीवार तुलना M1 पी < 0.001 पी = 0.007 पी = 0.125 पी < 0.001
हृदय गति (बीपीएम) 74.42 (53.70-95.15) 131.09 (110.36-151.82) 88.92 (68.19-109.65) 80.62 (59.89-101.35) 99.38 (78.65-120.11)
मुख्य प्रभाव माप बिंदु: पी = 0.002 जोड़ीवार तुलना M1 पी < 0.001 पी = 0.314 पी = 0.666 पी = 0.092
स्ट्रोक की मात्रा (एमएल) 55.50 (49.20-61.81) 25.33 (19.03-31.64) 37.00 (30.69-43.31) 45.33 (39.03-51.64) 27.17 (20.86-33.47)
मुख्य प्रभाव माप बिंदु: पी < 0.001 जोड़ीवार तुलना M1 पी < 0.001 पी < 0.001 पी = 0.004 पी < 0.001
सिस्टोलिक धमनी दबाव आरोही महाधमनी (एमएमएचजी) 94.36 (85.20-103.52) 122.05 (112.89-131.20) 76.72 (67.56-85.88) 88.36 (79.20-97.52) 73.36 (64.20-82.52)
मुख्य प्रभाव माप बिंदु: पी < 0.001 जोड़ीवार तुलना M1 पी < 0.001 पी = 0.006 पी = 0.321 पी = 0.002
मतलब धमनी दबाव आरोही महाधमनी (mmHg) 78.18 (68.68-87.67) 107.29 (97.80-116.78) 59.08 (49.58-68.57) 70.38 (60.89-79.87) 58.35 (48.85-67.84)
मुख्य प्रभाव माप बिंदु: पी < 0.001 जोड़ीवार तुलना M1 पी < 0.001 पी = 0.005 पी = 0.217 पी = 0.004
डायस्टोलिक धमनी दबाव आरोही महाधमनी (mmHg) 59.20 (49.41-69.00) 93.76 (83.97-103.56) 45.18 (35.38-54.98) 52.48 (42.69-62.28) 45.33 (35.54-55.13)
मुख्य प्रभाव माप बिंदु: पी < 0.001 जोड़ीवार तुलना M1 पी < 0.001 पी = 0.038 पी = 0.302 पी = 0.040
प्रणालीगत संवहनी प्रतिरोध (डाइन एक्स सेकंड एक्स सेमी-5) 1421.13 (1236.94-1632.74) 208089.94 (181128.10-239085.87) 1335.36 (1162.29-1534.21) 1412.62 (1229.54-1622.97) 1807.46 (1573.21-2076.60)
मुख्य प्रभाव माप बिंदु: पी < 0.001 जोड़ीवार तुलना M1 पी < 0.001 पी = 0.407 पी = 0.938 पी = 0.005
फ्लो (l/min) उतरते महाधमनी 3.27 (0.96-5.58) 0 3.27 (0.96-5.58) 3.54 (1.23-5.85) 4.54 (2.32-6.85)
मुख्य प्रभाव माप बिंदु: पी = 0.003 जोड़ीवार तुलना M1 पी = 0.998 पी = 0.844 पी = 0.381

तालिका 1: प्रोटोकॉल के दौरान हीमोडायनामिक मापदंडों में परिवर्तन। मान 95% विश्वास अंतराल के साथ बेसलाइन-समायोजित अनुमानित सीमांत साधनों के रूप में दिए जाते हैं। माप बिंदु के मुख्य प्रभावों के एफ-परीक्षणों के असमायोजित पी-मूल्य प्रत्येक पैरामीटर के साथ-साथ ऊपरी और निचले रीढ़ की हड्डी माइक्रोपरफ्यूजन के लिए क्षेत्र और माप बिंदु के बीच बातचीत प्रभाव के लिए दिए जाते हैं। एम1 के साथ व्यक्तिगत मापने वाले बिंदुओं की जोड़ीवार तुलना के असमायोजित पी-मूल्य भी प्रस्तुत किए जाते हैं। माप अंक हैं: M1 = हेमोडायनामिक अनुकूलन पूर्व इस्केमिया/reperfusion, M2 = इस्केमिया के दौरान, M3 = 1 h repersion के बाद M4 = इस्केमिया/रिप्रेरण के बाद हेमोडायनामिक अनुकूलन, M5 = 4.5 h इस्केमिया/रिपरफ्यूजन के प्रेरण के बाद।

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Discussion

रीढ़ की हड्डी के इस्केमिया से प्रेरित सीआई महाधमनी की मरम्मत की एक बड़ी जटिलता है , जिसमें रोगी के परिणाम पर जबरदस्त प्रभाव पड़ता है1,2,3,4 ,10,11,12. एससीआई को रोकने और इलाज करने के लिए माइक्रोसर्कुलेशन-लक्षित उपचार सबसे आशाजनक हैं। प्रोटोकॉल वास्तविक समय रीढ़ की हड्डी माइक्रोसर्कुलेटरी मूल्यांकन के लिए एक प्रजनन विधि प्रदान करता है और इस्केमिया/रिफ्यूजन स्थितियों के तहत रीढ़ की हड्डी माइक्रोसर्कुलेशन पर उपन्यास चिकित्सीय दृष्टिकोण के प्रभावों का मूल्यांकन करने की क्षमता प्रदान करता है ।

इस प्रायोगिक मॉडल में कुछ महत्वपूर्ण पद्धतिगत कदम हैं। जानवरों के नुकसान को रोकने के लिए, शोधकर्ताओं को एनेस्थिसियोलॉजिक तकनीकों (सेरेब्रोस्पाइनल फ्लूइड ड्रेनेज प्रविष्टि, सोनोग्राफिक वैस्कुलर एक्सेस और महाधमनी एक्सपोजर, महाधमनी क्रॉस-क्लैंपिंग, और रिफ्यूजन के दौरान हेमोडायनामिक थेरेपी) के साथ-साथ सर्जिकल तकनीकों (स्टर्नोटॉमी, पोत एक्सपोजर, उतरते हुए महाधमनी के सर्जिकल एक्सपोजर) में अनुभव किया जाना चाहिए। रीढ़ की हड्डी सुई जांच के सम्मिलन अनुभव, शरीर रचना विज्ञान के गहन ज्ञान, और ध्वनि तकनीकी कौशल की आवश्यकता है। हालांकि, हमारे अनुभव में, सीखने की अवस्था काफी खड़ी है, और सबसे अनुभवी शोधकर्ताओं ने एक कम समय में सफलता प्राप्त करेंगे, हालांकि कई प्रयास रीढ़ की हड्डी की चोटों है कि कार्यप्रणाली को प्रभावित कर सकता है रोकने से बचा जाना चाहिए ।

एक और महत्वपूर्ण कदम रीढ़ की हड्डी की सुई की जांच के अव्यवस्था या क्षति को रोकने के लिए सही पार्श्व से रीढ़ की स्थिति में परिवर्तन है । इस पैंतरेबाज़ी के लिए, 4-5 व्यक्तियों की सिफारिश की जाती है, सम्मिलन स्थल की उचित पैडिंग आवश्यक है, और जांच को विस्थापित करने के लिए सावधानीपूर्वक सावधानी बरती जानी चाहिए। उतरते महाधमनी के एक्सपोजर के रूप में अच्छी तरह से कुछ महत्वपूर्ण कदम की आवश्यकता है । बाएं फेफड़े के शीर्ष को सर्जिकल क्षेत्र को बेनकाब करने के लिए बाएं फेफड़ों के कोमल रिऐक्शन की अनुमति देने के लिए जुटाया जाना चाहिए। इसके अलावा, जोखिम को सुविधाजनक बनाने के लिए डायाफ्राम के बाएं-पार्श्व भाग को विच्छेदित किया जाना चाहिए। महाधमनी तैयारी के दौरान, सर्जरी करने वाले शोधकर्ताओं और पर्याप्त कार्डियोपल्मोनरी स्थिरता सुनिश्चित करने के लिए संज्ञाहरण और हेमोडायनामिक प्रबंधन प्रदान करने वालों के बीच इष्टतम संचार की आवश्यकता है। महाधमनी क्रॉस-क्लैंपिंग के दौरान, अवर वेना कावा के मैनुअल संपीड़न को शिरा रिटर्न को कम करने की सिफारिश की जाती है। इस पैंतरेबाज़ी के बिना, गंभीर आँख बढ़ जाती है कि हानिकारक मायोकार्डियल चोट39,40के लिए नेतृत्व कर सकते हैं हो सकता है।

रिफ्यूजन को तरल पदार्थ, वासोप्रेसर और इनोट्रोप्स के साथ सावधानी से किया जाना चाहिए। रिफ्यूजन के दौरान, नाटकीय परिवर्तन होते हैं जो गंभीर हाइपोटेंशन, कार्डियक आर्रिथमियास और संचार विफलता41का कारण बन सकते हैं। हालांकि, हीमोडायनामिक व्यवहार का सतर्क अवलोकन, हस्तक्षेपों की त्वरित शुरुआत, साथ ही इस महत्वपूर्ण चरण के दौरान संरचित और सौम्य प्रदर्शन का उपयोग जानवरों के नुकसान को रोक सकता है। इसके अलावा, महाधमनी क्रॉस-क्लैंपिंग के आरोही अंतराल का उपयोग, पुनर्जनन में सुधार करने के लिए समय अवधि के बाद, जैसा कि प्रोटोकॉल में उपयोग किया जाता है, इस्कीमिक प्री-कंडीशनिंग प्रभाव को प्रेरित करता है जो रिफ्यूजन42, 43के दौरान हीमोडायनामिकस्थिरताको बढ़ाता है।

यह मॉडल मैक्रोसर्कुलेटरी मूल्यांकन के अलावा रीढ़ की हड्डी के माइक्रोसर्कुलेशन की निगरानी करने की क्षमता प्रदान करता है। उच्च जोखिम वाली सर्जरी और गंभीर रूप से बीमार रोगियों में अक्सर देखे जाने वाले हेमोडायनामिक जुटना के नुकसान के कारण, रीढ़ की हड्डी के माइक्रोसर्कुलेशन का प्रत्यक्ष मूल्यांकन आवश्यक है13,30। उपभाषी माइक्रोसर्कुलेशन का उपयोग अक्सर ब्याज44के अंग में प्रत्यक्ष माइक्रोसर्कुलेटरी मूल्यांकन को प्रतिस्थापित करने के लिए किया जाता है । हालांकि, सबलिंगुअल माइक्रोसर्कुलेशन और महत्वपूर्ण अंगों के बीच वियोजन दिखाया गया है, जो रीढ़ की हड्डी में प्रत्यक्ष सूक्ष्मसर्कुलेटरी मूल्यांकन के मूल्य पर जोर देता है, जैसा कि प्रायोगिक मॉडल45में उपयोग किया जाता है। अंत में, मॉडल फ्लोरोसेंट माइक्रोस्फीयर मूल्यांकन की तुलना में रीढ़ की हड्डी के रक्त प्रवाह की वास्तविक समय निगरानी का लाभ है, जो आंतरायिक उपयोग और पोस्टमार्टम विश्लेषण४६द्वारा सीमित है । वास्तविक समय के आकलन का प्रभाव सबसे अच्छा देखा जा सकता है जब इस्केमिया के दौरान उदाहरण रिकॉर्डिंग के साथ-साथ रिफ्यूजन प्रेरण को देखते हुए, रीढ़ की हड्डी के माइक्रोपरफ्यूजन में तेजी से परिवर्तन दिखा। हालांकि, यह माना जाना चाहिए कि रीढ़ की हड्डी में लेजर-डॉप्लर जांच प्रविष्टि छोटे, लेकिन काफी, रीढ़ की हड्डी की चोटों के लिए नेतृत्व कर सकते हैं ।

चूंकि रीढ़ की हड्डी की अखंडता संभवतः हीमोडायनामिक मापदंडों को प्रभावित कर सकती है, इसलिए यह विधि का नुकसान हो सकता है। हालांकि, रीढ़ की हड्डी के माइक्रोपरफ्यूजन का आकलन करने के लिए लेजर-डॉप्लर तकनीकों का उपयोग पहले47,48, 49,50का उपयोग किया गया है। इसके अलावा, हालांकि हमने जांच प्रविष्टि के बाद हीमोडायनामिक परिवर्तनों का पालन नहीं किया, लेकिन हम इस विधि से प्रेरित हीमोडायनामिक प्रभावों से इंकार नहीं कर सके। यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि माइक्रोस्फीयर इंजेक्शन के उपयोग से हीमोडायनामिक परिवर्तन भी प्रेरित हो सकते हैं, हालांकि, बड़ेजानवरोंमें मामूली महत्व का होगा। इसके अलावा, संवेदी या मोटर फ़ंक्शन जांच प्रविष्टि से प्रभावित हो सकता है और इसलिए, संवेदी या मोटर-पैदा संभावित मूल्यांकन का उपयोग लेजर-डॉप्लर मूल्यांकन के संयोजन में सावधानी के साथ किया जाना चाहिए।

इस संबंध में, माइक्रोस्फीयर इंजेक्शन तकनीक लाभप्रद हो सकती है। इसके अलावा, तकनीकों का उपयोग पुराने परीक्षणों के लिए नहीं किया जाना चाहिए; हालांकि, यह माइक्रोस्फीयर इंजेक्शन के लिए भी सही है, जो तीव्र परीक्षणों तक सीमित हैं क्योंकि वे पोस्टमार्टम ऊतक विश्लेषण पर निर्भर हैं। लेजर-डॉप्लर तकनीकों का उपयोग करने वाले अधिकांश अध्ययन छोटे जानवरों में किए गए थे47,48,49,50 यहां, हम सूअरों में उपयोग के लिए एक तकनीक का वर्णन करते हैं, एक बड़े पशु मॉडल के रूप में, जो नैदानिक अध्ययन में अनुवाद की सुविधा प्रदान कर सकता है। पैरामेडियन-शुरू करने की तकनीक सूअरों में बड़ी स्पिनी प्रक्रियाओं की समस्या पर काबू पा जाती है, जो रीढ़ की हड्डी की जांच के उचित प्लेसमेंट को जटिल बना देती है। इसके अलावा, तकनीक का लाभ यह है कि डुमिनेक्टॉमी या ड्यूरा ऊतक को हटाने की आवश्यकता नहीं है, शराब के लगातार नुकसान को रोकती है। चूंकि सेरेब्रोस्पाइनल द्रव दबाव का रीढ़ की हड्डी परफ्यूजन32पर जबरदस्त प्रभाव पड़ता है, इसलिए मॉडल में रीढ़ की हड्डी माइक्रोपरफ्यूजन के अलावा सेरेब्रोस्पाइनल द्रव दबाव को मापने और अनुकूलित करने का लाभ है और भविष्य की परियोजनाओं में रीरेब्रोस्पाइनल तरल पदार्थ के दबाव के प्रभाव को दूर करेगा।

प्रोटोकॉल की कुछ सीमाएं हैं जिनका उल्लेख किया जाना चाहिए । रीढ़ की हड्डी के प्रवाह के निरपेक्ष मूल्यों सटीक जांच की स्थिति और बड़े रीढ़ की हड्डी के जहाजों की निकटता में अंतर के कारण जानवरों के बीच काफी अलग है । इसलिए, मूल्यों की तुलना करते समय बेसलाइन समायोजन किया जाना चाहिए। हालांकि, माप बिंदुओं के बीच अंतर-व्यक्तिगत मतभेद अत्यधिक सुसंगत होते हैं जब तक प्रोटोकॉल के दौरान सुई जांच के आंदोलनों से बचने के लिए सावधानीपूर्वक सावधानी बरती जाती है। इसके अलावा, इस अध्ययन को लेजर-डॉप्लर और फ्लोरोसेंट माइक्रोस्फीयर विधियों के बीच तुलना अध्ययन के रूप में डिजाइन नहीं किया गया था। जानवरों की संख्या को देखते हुए, हमने इन दो तरीकों के बीच सहसंबंध विश्लेषण नहीं किया।

हालांकि दोनों तरीकों ने दोनों के लिए रिफ्यूजन के बाद इस्केमिया और वसूली के दौरान महत्वपूर्ण कटौती के साथ एक तुलनीय व्यवहार दिखाया, लेकिन भविष्य में ठीक से डिजाइन किए गए अध्ययनों का उपयोग करके तरीकों की तुलना को संबोधित किया जाना चाहिए। फिर भी, माइक्रोस्फीयर का उपयोग ऊपरी और निचले रीढ़ की हड्डी माइक्रोपरफ्यूजन के लिए विभिन्न व्यवहारों का मूल्यांकन अतिरिक्त रूप से सक्षम करता है। इसके अलावा, हिस्टोपैथोलॉजिकल विश्लेषण से पता चला कि रीढ़ की हड्डी के अन्य मॉडलों की तुलना में केवल मध्यम रीढ़ की हड्डी का परिगलन37है। इस्केमिया की अवधि को लंबा करने के साथ-साथ प्री-कंडीशनिंग उपायों को छोड़ने से अधिक गंभीर परिवर्तन हो सकते हैं जो कुछ शोधकर्ताओं द्वारा वांछित हो सकते हैं। यद्यपि हमने केवल हल्के हिस्टोपैथोलॉजिकल परिवर्तनों का मूल्यांकन किया है, लेकिन यह इस्केमिया की लंबी अवधि के साथ अलग हो सकता है। इस संबंध में, प्रोटोकॉल की समाप्ति से पहले इस्केमिया/रिप्रेरण के बाद लंबी अवधि में भी अधिक गंभीर हिस्टोपैथोलॉजिकल परिवर्तन हो सकते हैं । हालांकि, प्रोटोकॉल ने अतिरिक्त या यहां तक कि निरंतर इनोट्रोप या वासोप्रेसर आवेदन की आवश्यकता के बिना रिफ्यूजन के एक घंटे बाद हीमोडायनामिक स्थिरता को सक्षम किया।

विभिन्न हीमोडायनामिक हस्तक्षेपों के मूल्यांकन के लिए, यह मॉडल इष्टतम स्थितियां प्रदान करता है। यद्यपि हमने हीमोडायनामिक हस्तक्षेप के उदाहरण के रूप में द्रव अनुकूलन का उपयोग किया, लेकिन इस विधि के साथ अन्य दृष्टिकोणों का मूल्यांकन किया जा सकता है। हालांकि यह प्रोटोकॉल इस्केमिया/रिप्रफ्यूजन के मॉडल में माइक्रोसिर्कुलेटरी मूल्यांकन प्रदान करता है, लेकिन इस्केमिया की अवधि रिप्रफ्यूजन से पहले इस्केमिया के दौरान चिकित्सीय दृष्टिकोणों के मूल्यांकन को सीमित करती है । इसके अलावा, इस्केमिया के दौरान, हेमोडायनामिक परिवर्तनों में भिन्नता हुई (उदाहरण के लिए, उच्च रक्तचाप, हाइपोटेंशन, टैचिकार्डिया, ब्रैडकार्डिया, साथ ही कार्डियक आर्रिथिमिया)। इस चरण के दौरान मैन्युअल प्रवाह ऑक्क्यूज़ेशन हेमोडायनामिक चर को और प्रभावित करता है। इसलिए, रिफ्यूजन से पहले इस्केमिया के दौरान चिकित्सीय दृष्टिकोणों के मूल्यांकन के लिए प्रोटोकॉल की सिफारिश नहीं की जाती है। हालांकि, इस प्रोटोकॉल में वर्णित अन्य प्रायोगिक सेटिंग्स, जैसे कि एम्बोलाइजेशन या लिगेशन तकनीकों का उपयोग, रीढ़ की हड्डी लेजर/डॉप्लर सुई जांच मूल्यांकन के साथ जोड़ा जा सकता है ।

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Disclosures

कॉन्स्टैंटिन जे .C ट्रेप्टे को मैकेट द्वारा व्याख्यान के लिए मानद पुरस्कार मिला है। अन्य सभी लेखक हितों के टकराव की घोषणा नहीं करते हैं । इस अध्ययन को यूरोपियन सोसायटी ऑफ एनेस्थिसियोलॉजी यंग अन्वेषक स्टार्ट-अप ग्रांट 2018 द्वारा समर्थित किया गया था।

Acknowledgments

लेखक लीना ब्रिक्स, वी.M डी, इंस्टीट्यूट ऑफ एनिमल रिसर्च, हनोवर मेडिकल स्कूल के साथ-साथ श्रीमती जट्टा डैमन, रिसर्च एनिमल केयर की सुविधा, यूनिवर्सिटी मेडिकल सेंटर हैम्बर्ग-एप्पेंडोर्फ, जर्मनी को पूर्व और पेरिऑपरेटिव एनिमल केयर और एनिमल हैंडलिंग पर उनकी तकनीकी सहायता प्रदान करने के लिए धन्यवाद देना चाहते हैं । लेखक आगे डॉ डेनियल मंज़ोनी, वैस्कुलर सर्जरी विभाग, होपिटल किर्चबर्ग, लक्जमबर्ग को उनकी तकनीकी सहायता के लिए धन्यवाद देना चाहेंगे ।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
CardioMed Flowmeter Medistim AS, Oslo, Norway CM4000 Flowmeter for Flow-Probe Femoral Artery
CardioMed Flow-Probe, 5mm Medistim AS, Oslo, Norway PS100051 Flow-Probe Femoral Artery
COnfidence probe,  Transonic Systems Inc., Ithaca, NY, USA MA16PAU Flow-Probe Aorta
16 mm liners
DIVA Sevoflurane Vapor Dräger Medical, Lübeck, Germany Vapor
Hotline Level 1 Fluid Warmer Smiths Medical Germany GmbH, Grasbrunn, Germany HL-90-DE-230 Fluid Warmer
Infinity Delta Dräger Medical, Lübeck, Germany Basic Monitoring Hardware
Infinity Hemo Dräger Medical, Lübeck, Germany Basic Pressure Monitoring and Pulmonary Thermodilution Hardware
LabChart Pro ADInstruments Ltd., Oxford, UK v8.1.16 Synchronic Laser-Doppler, Blood Pressure, ECG and Blood-Flow Aquisition Software
LiquoGuard 7 Möller Medical GmbH, Fulda, Germany Cerebrospinal Fluid Drainage System
Millar Micro-Tip Pressure Catheter (5F, Single, Curved, 120cm, PU/WD) ADInstruments Ltd., Oxford, UK SPR-350 Pressure-Tip Catheter Aorta
moor VMS LDF moor Instruments, Devon, UK Designated Laser-Doppler Hardware
moor VMS Research Software moor Instruments, Devon, UK Designated Laser-Doppler Software
Perivascular Flow Module Transonic Systems Inc., Ithaca, NY, USA TS 420 Flow-Module for Flow-Probe Aorta
PiCCO 2, Science Version Getinge AB, Göteborg, Sweden v. 6.0 Blood Pressure and Transcardiopulmonary Monitoring Hard- and Software
PiCCO 5 Fr. 20cm Getinge AB, Göteborg, Sweden Thermistor-tipped Arterial Line 
PowerLab ADInstruments Ltd., Oxford, UK PL 3516 Synchronic Laser-Doppler, Blood Pressure, ECG and Blood-Flow Aquisition Hardware
QuadBridgeAmp ADInstruments Ltd., Oxford, UK FE 224 Four Channel Bridge Amplifier for Laser-Doppler and Invasive Blood Pressure Aquisition
Silverline Spiegelberg, Hamburg, Germany ELD33.010.02 Cerebrospinal Fluid Drainage
SPSS statistical software package  IBM SPSS Statistics Inc., Armonk, New York, USA v. 27 Statistical Software
Twinwarm Warming System Moeck & Moeck GmbH, Hamburg, Germany 12TW921DE Warming System
Universal II Warming Blanket Moeck & Moeck GmbH, Hamburg, Germany 906 Warming Blanket
VP 3 Probe, 8mm length (individually manufactured) moor Instruments, Devon, UK Laser-Doppler Probe
Zeus Dräger Medical, Lübeck, Germany Anesthesia Machine

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इस्केमिया/रिप्रफ्यूजन के एक पोर्सिन मॉडल में रीढ़ की हड्डी माइक्रोपरफ्यूजन का वास्तविक समय मूल्यांकन
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Behem, C. R., Friedheim, T., Wipper, S. H., Pinnschmidt, H. O., Graessler, M. F., Gaeth, C., Holthusen, H., Rapp, A., Suntrop, T., Haunschild, J., Etz, C. D., Trepte, C. J. C. Real-Time Assessment of Spinal Cord Microperfusion in a Porcine Model of Ischemia/Reperfusion. J. Vis. Exp. (166), e62047, doi:10.3791/62047 (2020).

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