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Summary
इस प्रोटोकॉल का उद्देश्य मल्टीपल स्क्लेरोसिस के एक पशु मॉडल में पॉजिट्रॉन उत्सर्जन टोमोग्राफी (पीईटी) इमेजिंग द्वारा वीवो मायलिन परिवर्तन (डिमाइलिनेशन और रेमीलिलिनेशन) में निगरानी करना है।
Abstract
मल्टीपल स्क्लेरोसिस (एमएस) केंद्रीय तंत्रिका तंत्र में एक्सोनल और न्यूरोनल डिजनरेशन और डिमाइलेशन के विस्तार के साथ एक न्यूरोइंफ्लैमेटरी बीमारी है, जिससे एमएस प्रगति के दौरान मोटर डिस्फंक्शन, मानसिक विकलांगता और संज्ञानात्मक हानि होती है। पॉजिट्रॉन उत्सर्जन टोमोग्राफी (पीईटी) एक इमेजिंग तकनीक है जो वीवो सेलुलर और आणविक परिवर्तनों में मात्रा निर्धारित करने में सक्षम है।
अक्षुण्ण myelin के लिए आत्मीयता के साथ रेडियोट्रेस समय के साथ myelin सामग्री परिवर्तन के वीवो इमेजिंग में इस्तेमाल किया जा सकता है। मायलिन सामग्री में वृद्धि या कमी का पता लगाना संभव है, इसका क्या मतलब है कि यह इमेजिंग तकनीक केंद्रीय तंत्रिका तंत्र की जनसांख्यिकी और पुनर्मीलन प्रक्रियाओं का पता लगा सकती है। इस प्रोटोकॉल में हम प्रदर्शित करते हैं कि लिसोलेसिथिन चूहा मॉडल में मायलिन परिवर्तनों का पता लगाने के लिए पीईटी इमेजिंग का उपयोग कैसे करें, जो फोकल डेमिलिनेशन घाव (स्टीरियोटैक्टिक इंजेक्शन द्वारा प्रेरित) (यानी, मल्टीपल स्क्लेरोसिस रोग का एक मॉडल) का एक मॉडल है। 11 सी-पीआईबी पीईटी इमेजिंग बेसलाइन पर किया गया था, और 1 सप्ताह और 4 सप्ताह के बाद लिसोलिथिन के स्टीरियोटैक्सिक इंजेक्शन 1% सही स्ट्राटम (4 माइक्रोन) और चूहे के मस्तिष्क के कॉर्पस कैलोसम (3 माइक्रोन) में, फोकल डेमियोलेशन (इंजेक्शन साइट 1 सप्ताह के बाद) और पुनर्मीलिपन प्रक्रिया (इंजेक्शन साइट) की मात्रा की अनुमति देता है।
मायलिन पीईटी इमेजिंग मायलिन सामग्री में वीवो परिवर्तनों में निगरानी के लिए एक दिलचस्प उपकरण है जो रोग प्रगति और चिकित्सीय प्रतिक्रिया की निगरानी के लिए उपयोगी हो सकता है।
Introduction
मल्टीपल स्क्लेरोसिस (एमएस) एक न्यूरोइंफ्लैमेटरी बीमारी है जो केंद्रीय तंत्रिका तंत्र को प्रभावित करती है, सूजन, डिमाइलेशन और एक्सोनल लॉस1की विशेषता है। इस बीमारी का पूर्वानुमान उपचार में प्रगति के साथ भी परिवर्तनीय है, और यह युवा लोगों में न्यूरोलॉजिकल घाटे के सबसे आम कारणों में से एक है1। एमएस का निदान नैदानिक अभिव्यक्ति के मानदंडों और चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग (एमआरआई)2,3द्वारा विशिष्ट घावों के दृश्य पर आधारित है।
पॉजिट्रॉन उत्सर्जन टोमोग्राफी (पीईटी) एमएस प्रगति और चिकित्सीय प्रभावों की वीवो निगरानी में एक उपयोगी उपकरण हो सकता है। कार्बन-11 (11 सी-पीआईबी) के साथ लेबल किए गए पिट्सबर्ग यौगिक बी रेडियोट्रेसर(पीआईबी)का व्यापक रूप से β-एमिलॉयड सजीले टुकड़े को निर्धारित करने के लिए उपयोग किया जाता है; हालांकि, पिछले दशक में, यह myelin सामग्री की मात्रा निर्धारित करने और गतिशील demyelination और remyelination4,5,6दिखाने के लिए अध्ययन किया गया है ।
विभिन्न एमिलॉयड पीईटी ट्रेसर(11सी-पीआईबी, 18एफ-फ्लोर्बेटाबेन,18एफ-फ्लोर्बेटापीर, 18एफ-फ्लूटमेटामोल) का उपयोग मायलिन को निर्धारित करने और रोग प्रगति और चिकित्सीय प्रतिक्रिया के बारे में महत्वपूर्ण जानकारी प्रदान करने के लिए किया जा सकता है, जिससे न्यूरोइंफ्लेमेशन के हस्तक्षेप के बिना, डेमिएलेशन और रेमाइलेशन प्रक्रियाओं की पहचान की अनुमति दी जा सकती है, जो पारंपरिक चुंबकीय अनुनाद छवियों (एमआरआई)7के साथ हो सकती है । एमिलॉयड पीईटी इमेजिंग ने गैर-सक्रिय रोगियों की तुलना में सक्रिय एमएस रोगियों में कम ट्रेसर तेज दिखाया, जिसे सक्रिय रोगियों में शुरुआती सफेद पदार्थ क्षति द्वारा समझाया जा सकता है8। लोअर एमिलॉयड ट्रेसर तेज भी एक अनुवर्ती अध्ययन में संज्ञानात्मक गिरावट के साथ जुड़ा हुआ था, इस तकनीक को बीमारी और नैदानिक परिणामों9के रोगविज्ञान का अध्ययन करने के लिए एक मूल्यवान उपकरण होने के लिए दिखा रहा था।
लिसोलेसिसिथिन (एलपीसी) चूहा मॉडल मल्टीपल स्क्लेरोसिस का एक रासायनिक प्रेरित मॉडल है, जहां इंजेक्शन टॉक्सिन, एलपीसी, मैक्रोफेज की एक उच्च प्रतिक्रिया को प्रेरित करता है जिसके परिणामस्वरूप सूजन में वृद्धि होती है और नतीजतन, डिमाइलेशन10,11। लगभग 4 हफ्तों में डिमाइलेशन तेजी से उलट जाता है, जो कृंतक में डिमाइलेशन और पुनर्जंमीकरण प्रक्रियाओं के मूल्यांकन के लिए यह एक अच्छा मॉडल बनाता है। इस मॉडल को पहले से ही पीईटी इमेजिंग का उपयोग करके मूल्यांकन किया गया है, अच्छे परिणाम और पोस्टमार्टम निबंध12के साथ संबंध के साथ ।
यहां हम lysolecithin चूहा मॉडल में 11सी-PIB के साथ myelin पीईटी इमेजिंग के लिए प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं, इस इमेजिंग तकनीक को myelin सामग्री के वीवो माप में एक उपयोगी उपकरण होने के लिए दिखाते हैं।
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Protocol
सभी प्रक्रियाओं पशु प्रयोग के नियंत्रण के लिए राष्ट्रीय परिषद के दिशा निर्देशों के अनुसार आयोजित किया गया (CONCEA, ब्राजील) और साओ पाउलो विश्वविद्यालय के मेडिकल स्कूल के पशु अनुसंधान के लिए आचार समिति द्वारा अनुमोदित किया गया (CEUA-FMUSP, ब्राजील-प्रोटोकॉल संख्या: 25/15) ।
नोट: इस प्रोटोकॉल में, हम दिखाते हैं कि मल्टीपल स्क्लेरोसिस के एक lysolecithin चूहा मॉडल को कैसे प्रेरित किया जाए और मायलिन पीईटी छवियों को कैसे प्राप्त और विश्लेषण किया जाए।
1. Lysolecithin समाधान तैयारी
- एक विश्लेषणात्मक पैमाने पर एक विश्लेषणात्मक पैमाने पर एक विश्लेषणात्मक पैमाने पर एक विश्लेषणात्मक प्लास्टिक ट्यूब (1.5 मिलीएल) का उपयोग कर (एल-α-Lysophosphatidylcholine) का वजन करें।
- 1% समाधान बनाने के लिए ट्यूब में बाँझ नमकीन जोड़ें (उदाहरण के लिए: 1 मिलीग्राम lysolecithin वजन और नमकीन के १०० μL के साथ भंग) और ट्यूब मिलाते हुए lysolecithin भंग (पक्ष की ओर से मिलाते हुए और ऊपर से नीचे की ओर मोड़ नहीं) ।
- पशु मॉडल प्रेरण शुरू करने से ठीक पहले समाधान तैयार करें (अंतिम तैयार समाधान को स्टॉक न करें)।
2. Lysolecithin चूहा मॉडल - स्टीरियोटैक्सिक सर्जरी
- 220 - 270 ग्राम के बीच वजनी पुरुष विस्टार चूहों का उपयोग करें। सभी प्रक्रियाओं के दौरान दस्ताने और मुखौटा का उपयोग करें।
- एक इंडक्शन बॉक्स का उपयोग करके 100% O2 (1 एल/मिनट) में मिश्रित 5% आइसोफ्लुन के साथ संज्ञाहरण को प्रेरित करें। जांच करें कि क्या जानवर आंदोलन की अनुपस्थिति को देख कर एनेस्थेटाइज्ड है (केवल श्वास देखी जानी चाहिए)।
- एक हीटिंग पैड पर स्टीरियोटैक्सिक उपकरण में जानवर रखें। उपकरण के लिए जानवर की नाक और कान ठीक करें।
नोट: स्टीरियोटैक्सिक सर्जरी करने का विवरण जोवे विज्ञान शिक्षा डेटाबेस में पाया जा सकता है। तंत्रिका विज्ञान। कृंतक स्टीरियोटैक्सिक सर्जरी। जोवे, कैम्ब्रिज, एमए, 2021।- पूरी प्रक्रिया (सर्जरी और छवि अधिग्रहण सहित) के लिए संज्ञाहरण की निगरानी करें। आइसोफ्लुन एकाग्रता को समायोजित करने के लिए, पशु श्वास दर का निरीक्षण करें। एक तेज श्वास दर के लिए उच्च एकाग्रता की आवश्यकता होती है और धीमी श्वास दर के लिए कम संवेदनाहारी एकाग्रता की आवश्यकता होती है।
- एनाल्जेसिक (केटोप्रोफेन - 5 मिलीग्राम/किलो) को संक्षेप में इंजेक्ट करें (नमकीन में दवा को 1 मिलील तक पतला करें, इससे जानवर को हाइड्रेट करने में मदद मिलेगी)।
- निर्जलीकरण से बचाने के लिए जानवर की आंखों में आई क्रीम लगाएं।
- चीरा क्षेत्र को साफ करने के लिए 0.5% क्लोरहेक्सीडीन समाधान का उपयोग करें।
- चीरा के क्षेत्र में लिडोकेन हाइड्रोक्लोराइड 2% के 100 माइक्रोन इंजेक्ट करें।
- खोपड़ी क्षेत्र दाढ़ी।
- इस प्रक्रिया के लिए बाँझ उपकरणों का उपयोग करें।
- एक स्केलपेल का उपयोग करके, खोपड़ी के ऊपर त्वचा में लगभग 2 सेमी का चीरा बनाएं।
- बुलडॉग क्लैंप के साथ खोपड़ी का पर्दाफाश करें।
- 1% हाइड्रोजन पेरोक्सिडेज के साथ खोपड़ी क्षेत्र को साफ करने के लिए एक झाड़ू का उपयोग करें।
- ब्रीग्मा का पता लगाएं और चिह्नित करें (एक स्टीरियोटैक्सिक चूहा मस्तिष्क एटलस ब्रेग्मा को पहचानने में मदद कर सकता है)।
- ब्रेग्मा में हैमिल्टन सिरिंज (μL न्यूरोज सीरिंज) की स्थिति।
- संदर्भ के रूप में ब्रेग्मा और एक स्टीरियोटैक्सिक एटलस का उपयोग करके, निम्नलिखित निर्देशांकों पर हैमिल्टन सिरिंज की स्थिति: एंटेरो-पीछे: -0.30 मिमी, लेटलो-पार्श्व: -3.0 मिमी, और वेंट्रल जब तक यह खोपड़ी की हड्डी को छूता है, और खोपड़ी को चिह्नित करता है और कागज पर निर्देशांक झुकाव नोट करता है।
- चिह्नित समन्वय पर खोपड़ी ड्रिल करें। ड्यूरा मेटर के साथ ध्यान रखें (हानिकारक ड्यूरा मेटर बहुत रक्तस्राव का कारण बन सकता है)।
- लिसोलेसिथिन समाधान (नमकीन में 1%) के 7 माइक्रोल के साथ हैमिल्टन सिरिंज भरें। सिरिंज में अधिक मात्रा रखी जा सकती है, लेकिन केवल 7 माइक्रोन इंजेक्ट किया जाएगा (मात्रा को सही ढंग से मापने के लिए सिरिंज से बुलबुले निकालें)।
- दवा इंजेक्शन शुरू करने के लिए पिछले निर्देशांक पर हैमिल्टन सिरिंज की स्थिति (कुल 7 माइक्रोन 3 अलग वेंट्रल स्टीरियोटैक्टिक निर्देशांक में)। पहले नोट किए गए निर्देशांक को ध्यान में रखते हुए, हैमिल्टन सिरिंज को वेंट्रल समन्वय-5.0 मिमी तक कम करें।
- बहुत धीरे-धीरे lysolecithin समाधान (1 μL/10 मिनट) के 2 μL इंजेक्ट करें। 3 मिनट रुको।
- सुई को अगले वेंट्रल स्टीरियोटैक्सिक समन्वय (-4.2 मिमी) तक ले जाएं और धीरे-धीरे 2μL lysolecithin समाधान (1 μL/10 मिनट) इंजेक्ट करें। 3 मिनट रुको।
- तीसरे वेंट्रल समन्वय -3.0 मिमी (3 μL lysolecithin समाधान - 1 μL/
- 5 मिनट रुको और फिर मस्तिष्क से हैमिल्टन सिरिंज निकालें।
- त्वचा को सीवन करें।
- स्टीरियोटाटिक उपकरण से जानवर को हटा दें और जानवर को जगाने की अनुमति दें।
- जानवर को घर के पिंजरे में लौटाें, असुविधा के संकेतों की जांच करने के लिए जानवर को अकेला रखें और पर्यवेक्षण के तहत।
- सर्जरी के बाद 24 घंटे और 48 घंटे में खारा में पतला चमड़े के नीचे एनाल्जेसिक (केटोप्रोफेन - 5 मिलीग्राम/किलो) इंजेक्ट करें।
3. पीईटी अधिग्रहण
- एक सिरिंज में 11 सी-पीआईबीरेडियोधर्मिता के 7 से 20 MBq ले लो (1 mL चूहों में नसों में इंजेक्शन के लिए अनुमति दी अधिकतम मात्रा है) ।
- इंडक्शन बॉक्स का उपयोग करके 100% O2 (1 एल/मिनट) में मिश्रित 5% आइसोफ्लुन के साथ जानवर को एनेस्थेटाइज करें।
- 11 सी-पीआईबी(ऊपर आइटम 4.1 में परिभाषित रेडियोधर्मिता) को शिश्न नस में इंजेक्ट करें, या चूहे की पूंछ नस (दोनों प्रशासन साइटें ठीक हैं, निर्णय एक व्यक्तिगत विकल्प है। हम केवल सलाह के लिए एक रेट्रो कक्षीय इंजेक्शन का उपयोग नहीं के बाद से स्थान भी ब्याज (मस्तिष्क) के क्षेत्र के करीब है और छवि की गुणवत्ता ख़राब कर सकते हैं ।
नोट: बेसलाइन टाइम पॉइंट का इमेज अधिग्रहण स्टीरियोटैक्सिक इंजेक्शन से पहले किया जाता है और सर्जरी के 1 सप्ताह और 4 सप्ताह बाद अन्य 2 समय अंक होते हैं। - जानवर को जगाने की अनुमति देने के लिए संज्ञाहरण से जानवर को हटा दें (जानवर को गर्म पैड पर तब तक छोड़ दें जब तक कि यह पूरी तरह से जाग न जाए)।
- जानवर को घर के पिंजरे में लौटा दें।
- अगले चरण के लिए 30 मिनट रुको।
- एक इंडक्शन बॉक्स का उपयोग करके 100% O2 (1 एल/मिनट) में मिश्रित 5% आइसोफ्लुन के साथ चूहों को एनेस्थेटाइज करें।
- पीईटी स्कैनर सॉफ्टवेयर खोलें।
- स्कैन और जीटी; पालतू तैयारका चयन करें ।
- पूर्ण प्रमुख अन्वेषक विवरण, अध्ययन आईडी, श्रृंखला आईडी, पशु आईडी, पशु वजन (जी), और अतिरिक्त नोट्स । आगेचुनें ।
नोट: पशुओं के वजन में दशमलव संख्या के लिए डॉट (.) का उपयोग करें। - स्कैनिंग के लिए आरओआई क्षेत्र को संपादित करें (आमतौर पर 3 और 8 के बीच)। यह वह क्षेत्र है जिसे छवि में शामिल किया जाएगा (बिस्तर कवर के संख्या 3 और 8 के बीच के क्षेत्र अंतिम छवि में दिखाई देंगे)।
- पीईटी स्कैनर के एक मानक चूहे के बिस्तर पर एनेस्थेटाइज्ड चूहे की स्थिति और संज्ञाहरण को चालू करें (100% ओ2 में 3% आइसोफ्लुन एक अच्छी शुरुआत है, और फिर संज्ञाहरण दर को आवश्यक रूप में समायोजित किया जाना चाहिए)। संज्ञाहरण को समायोजित करने के लिए, स्कैनर सॉफ्टवेयर के निगरानी डेटा की जांच करने के लिए सत्यापित करें कि जानवर एक निरंतर और धीमी लय में सांस ले रहा है ।
नोट: आइसोफ्लुएंज गैस अतिरिक्त एकत्र करने के लिए सक्रिय कार्बन फिल्टर के साथ मिलकर वैक्यूम पंप चालू करें (यदि पंप उपलब्ध है)। - जानवर की आंखों की रक्षा के लिए आई क्रीम लगाएं।
- पीईटी स्कैनर के अंदर जानवर बिस्तर पुश करें।
- पूर्ण गतिविधि विवरण, गतिविधि अंशांकन समय, आइसोटोप (सी-11), और स्कैन अवधि (20 मिनट)। स्टार्ट स्कैनका चयन करें ।
नोट: एक पालतू चलती बिस्तर संदेश दिखाई देगा, और पशु बिस्तर उपकरण में स्थानांतरित कर देगा और पहले से चयनित आरओआई स्थिति में बंद हो जाएगा। अधिग्रहण का समय गिनती शुरू हो जाएगा और प्रति सेकंड गिनती की संख्या (सीपीएस) दिखाई देगी । - स्कैनर सॉफ्टवेयर में, स्क्रीन के बाईं ओर मॉनिटर टैब पर नेविगेट करें, परिवर्तन थ्रेटिंग पैरामीटर्स चेंज (बीपीएम) की जांच करें।
नोट: एक विंडो पॉप अप होगी, दहलीज पैरामीटर (500) के साथ पूरी होगी। ठीक चुनें। - स्कैन के दौरान जानवर को गर्म करने के लिए तापमान मापदंडों को बदलने के लिए 0% शक्ति पर नेविगेट करें। एक खिड़की पॉप अप होगा; पैरामीटर (80 - 100) को पूरा करें। ठीक चुनें।
नोट: कमरे के तापमान की स्थिति के आधार पर 80 और 100% बिजली के बीच चुनें (अधिक शक्ति, यह गर्म हो जाएगा)। - स्कैन टैब पर वापस नेविगेट करें।
- कॉन्फ़िगरेशन टूल (गियर आइकन) और पूर्ण इंजेक्शन समय, शेष गतिविधि, शेष गतिविधि अंशांकन समय परनेविगेट करें। सेव काचयन करें ।
नोट: एक खिड़की पॉप अप होगा "क्या आपको यकीन है कि आप प्रोटोकॉल मेटाडेटा को संशोधित करना चाहते हैं?" हां - मॉनिटर टैब पर वापस नेविगेट करें (जानवर के श्वसन मापदंडों की जांच करें, और यदि आवश्यक हो, तो आइसोफ्लुन एकाग्रता में वृद्धि या कमी करें - आमतौर पर 100% O2 में 3% पर्याप्त है)।
- जब पीईटी अधिग्रहण समाप्त हो जाता है, तो पालतू जानवर तैयार संदेश स्कैन टैब पर दिखाई देगा, एनिमल बेड से बाहर जाने के लिए एरो आउट आइकन (कॉन्फ़िगरेशन टूल का बायां) चेक करेगा।
- संज्ञाहरण से जानवर निकालें और एक गर्म पैड पर जगाने के लिए अनुमति देते हैं।
- छवि के पुनर्निर्माण केलिए, टैब का पुनर्निर्माण करने के लिए नेविगेट करें।
- स्क्रीन के नीचे बाईं ओर प्लस आइकन की जांच करें, और अध्ययन फ़ाइल का चयन करें जिसे खंगाला जाएगा। आगेचुनें ।
- ऊर्जा संकल्प उपकरण पर नेविगेट करें। एक खिड़की पॉप अप होगा। उपकरण पैरामीटर (मासिक गुणवत्ता नियंत्रण के आधार पर) को ऊर्जा शिखर (केवी) कॉन्फ़िगर करें। बंदका चयन करें ।
नोट: मासिक उपकरण अंशांकन करते समय हर महीने ऊर्जा शिखर बदल सकता है। - अन्य सभी मापदंडों को डिफ़ॉल्ट के रूप में रखें (आइसोमेट्रिक वोक्सल आकार: 400 मिमी; पुनरावृत्तियों की संख्या: 30; ऊर्जा संकल्प: 30%; केवल अंतिम पुनरावृत्ति को बचाएं; अनियंत्रित बाइनरी डेटा रखें) ।
- चेक जोड़ें।
नोट: एक खिड़की पॉप अप होगा "पुनर्निर्माण कतार में जोड़ा गया था और एक बार दूसरों को समाप्त कर दिया है शुरू हो जाएगा." ठीक चुनें। एक फ़ाइल पुनर्निर्माण टैब पर पुनर्निर्माण सूची में दिखाई देगी और स्थिति प्रतीक्षा या% (प्रगति) या समाप्त के रूप में दिखाई देगी।
4. छवि विश्लेषण
नोट: समर्पित छवि विश्लेषण सॉफ़्टवेयर का उपयोग करके छवि विश्लेषण करें। वर्तमान प्रोटोकॉल में प्रदर्शन एक विशिष्ट सॉफ्टवेयर प्रोग्राम का उपयोग करता है, लेकिन यदि यह उपलब्ध नहीं है, तो अन्य विकल्पों का उपयोग किया जा सकता है।
- इसे खोलें और इसे फ्यूज करें।
- स्क्रीन के शीर्ष पर मिलान टैब पर नेविगेट करें।
- स्क्रीन के सही बीच में लोड इनपुट मेनू खोलें और ऑटोडेटेक्ट फ़ाइलों का चयन करें, पीईटी फ़ाइल (DICOM, इंटरफाइल या निफ्टीआई) का चयन करें, चयनित में जोड़ें, संचालन के साथ क्लिक करें, मानक अभिविन्यास के लिए रीओरिएंट, क्लिक लोड और क्लोज करें।
- सत्यापित करें कि क्या स्क्रीन(चूहा)के नीचे पशु प्रजातियां सही हैं।
- स्क्रीन के नीचे दाईं ओर क्रॉप बॉक्स की जांच करें।
- पूरे मस्तिष्क को लेने के लिए पीईटी छवि में पीले बॉक्स आकार को समायोजित करें।
- स्क्रीन के दाईं ओर कठोर बटन पर क्लिक करें। पुष्टि खिड़की पर हांपर क्लिक करें ।
- संदर्भ एटलस खोलने के लिए स्क्रीन के दाईं ओर मस्तिष्क उपकरण पर क्लिक करें। Px चूहा (W.Schiffer) का चयन करें-T2 ।
- शीर्ष दाएं टैब (प्रोसेसिंग स्टेज टैब का चयन करें) से मैच परिणाम चुनें।
- क्लिक करें डेटा रिस्लाइसिंग (टॉप राइट मेन्यू में4 टैब)।
- रोटेट टूल (पीईटी छवि के केंद्र में सफेद आइकन) का उपयोग करके संदर्भ टेम्पलेट के साथ पीईटी छवि को संरेखित करें। 3 शारीरिक विमानों के लिए संरेखण की जांच करें।
- सह-पंजीकरण फ़ाइल (स्क्रीन का दाहिना पक्ष मेनू) सहेजें।
- आउटपुट फॉर्मेट (डीआईकोमोर निफ्टीआई), डायरेक्टरी और फाइल उपसर्ग का चयन करें। क्लिक करें सेव।
नोट: यदि सह-पंजीकृत आउटपुट को निएफटीआई के रूप में सहेजा जाता है तो हेडर छवि की जानकारी खो जाएगी। - स्क्रीन के नीचे VOIs मेनू पर क्लिक करें।
- स्क्रीन के नीचे (वीओआई विंडो के नीचे) टेम्पलेट और जीटी; एटलस पर नेविगेट करें।
- ड्रॉप-डाउन मेनू से पीएक्स रैट (डब्ल्यू शिफर) का चयन करें।
नोट: यदि आपको केवल विशिष्ट वीओआई का विश्लेषण करने की आवश्यकता है तो आप केवल रुचि के मस्तिष्क क्षेत्रों का चयन कर सकते हैं। यदि आप मस्तिष्क एटलस के सभी मस्तिष्क क्षेत्रों चाहते हैं, कोई कार्रवाई की जरूरत है । - स्क्रीन के नीचे की रूपरेखा पर क्लिक करें।
नोट: मस्तिष्क क्षेत्रों के वीओआई वीओआई विंडो में दिखाई देंगे। - मैन्युअल रूप से घाव साइट और कॉन्ट्रालेट्रल मस्तिष्क गोलार्द्ध क्षेत्र(11 सी-पीआईबीकम तेज क्षेत्र और कॉन्ट्रालेट्रल मस्तिष्क गोलार्द्ध, क्रमशः) में वीओआई बनाएं।
- 11 सी-PIBकम तेज के साथ पीईटी छवि के क्षेत्र में क्लिक करें ।
- नई वीओआई और जीटी, ओके काचयन करें ।
नोट: एक स्प्रेडशीट दिखाई देगा - स्क्रीन के बीच के हिस्से में क्षेत्र आइकन पर नेविगेट करें (वीओआई विंडो के बाईं ओर)
नोट: एक स्प्रेडशीट दिखाई देगी। - वीओआई नाम चुनें: घाव और आवेदन का चयन करें।
नोट: सह-पंजीकृत छवि में एक गोला दिखाई देगा। - घाव क्षेत्र में क्षेत्र संरेखित करें और सभी शारीरिक विमानों के लिए वीओआई को समायोजित करें।
- बंद क्लिक करें (स्प्रेडशीट के नीचे भाग में) ।
- घाव वीओआई (वीओआई सूची से) का चयन करें।
- VOI मिररिंग ऑपरेशंस आइकन (VOIs विंडो के शीर्ष दाईं ओर) पर नेविगेट करें और क्लोन और मिरर लेफ्ट/राइटका चयन करें ।
- वीओआई सूची विंडो के शीर्ष पर चयनित वीओआई सांख्यिकी की गणना करने के लिए नेविगेट करें। आउटपुट डेटा (वीओआई स्टैटिस्टिक्स आइकन के दाईं ओर) चुनने के लिए गणना किए जाने वाले आंकड़ों को चुनने के लिए नेविगेट करें। आमतौर पर myelin सामग्री के लिए VOIs, औसत, एसडी, न्यूनतम, मैक्स के समूह के लिए आंकड़े देखें।
नोट: एक स्प्रेडशीट दिखाई देगी। डिफॉल्ट सेटिंग डाटा यूनिट केबीक्यू/सीसी है । स्प्रेडशीट (वीओआई स्टैटिस्टिक्स) के बाएं शीर्ष पर आप एसयूवी (मानकीकृत तेज मूल्य) के रूप में डेटा यूनिट की जांच कर सकते हैं। यदि आपने स्कैनर सॉफ्टवेयर में रेडियोट्रेसर प्रशासन और छवि अधिग्रहण विवरण को सही ढंग से पूरा किया है, जैसा कि पहले वर्णित है, एसयूवी डेटा की गणना पीएमओडी सॉफ्टवेयर द्वारा स्वचालित रूप से की जाएगी, यदि नहीं, तो आप विवरण संपादित कर सकते हैं। - सिस्टम लोकल नंबर प्रारूप का उपयोग करके कॉपीकरने के लिए नेविगेट करें।
नोट: यदि सभी आंकड़ों को आउटपुट के रूप में कॉपी करने के लिए चुना जाता है (स्क्रीन के दाईं चोटी पर आइकन देखें) सत्यापित करें। जिस डेटा की कॉपी की जाएगी, वह चयनित डेटा यूनिट पर निर्भर करता है। - आउटपुट डेटा को नोटपैड या स्प्रेडशीट में चिपकाएं।
नोट: संख्याओं के बीच डॉट और कॉमा प्रतीकों के लिए सॉफ्टवेयर सेटिंग्स के साथ ध्यान रखें। यह भाषा विन्यास के बीच अलग हो सकता है। - अध्ययन के नाम और विवरण के साथ फ़ाइल को सहेजें।
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Representative Results
चित्रा 1 समय के साथ myelin परिवर्तन के साथ उदाहरण 11सी-PIB पीईटी छवियों से पता चलता है । बेसलाइन स्कैन में, माइलिन सामग्री में कोई अंतर नहीं देखा जा सकता है (यानी, कोई डिमाइलेशन मौजूद नहीं है)। 1 सप्ताह की समय-बिंदु छवि में, सफेद तीर द्वारा इंगित फोकल डेमीलिनेटेड घाव (सही गोलार्द्ध में) देखना संभव है। छवियों को 3 शारीरिक विमानों (कोरोनल, अक्षीय और सगितिटल) में प्रस्तुत किया जाता है और उन सभी में डिमीलिनेटेड घाव की पहचान करना संभव है। 1 सप्ताह की छवि इंजेक्शन साइट पर एक अच्छी तरह से सीमित घाव का चित्रण है, जो सही मॉडल प्रेरण और छवि का पता लगाने का प्रतिनिधित्व करती है। 4 सप्ताह की छवि में, अब कोई घाव दिखाई नहीं दे रहा है, यह दर्शाता है कि रेमाइलेशन हुआ है और मायलिन सामग्री सामान्य (या इसके करीब) पर वापस आ गई है।
प्रतिनिधि रेखांकन 3 अलग-अलग समय बिंदुओं में 4 जानवरों की छवियों की मात्रा दिखाते हैं। पहला ग्राफ घाव (मैनुअल वीओआई) के मात्राकरण से अधिक फोकल माइलिन परिवर्तनों का प्रदर्शन करने वाले कॉन्ट्रालेटरल साइड अनुपात तक परिणाम दिखाता है, जहां lysolecithin इंजेक्शन किया गया था। दूसरा ग्राफ एक ही मात्रा को दर्शाता है, लेकिन स्ट्राटम (कॉन्ट्रालेटरल अनुपात में इंजेक्ट किए गए स्ट्राटम) और इस मामले में अंतर सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण नहीं है, जिसे छोटे नमूने के आकार से समझाया जा सकता है और क्योंकि वीओआई बड़ा है और रेडियोधर्मिता एकाग्रता को न केवल मापा जाता है जहां lysolecithin इंजेक्ट किया गया था।
समूहों के बीच मतभेदों का विश्लेषण क्रुस्कल वालिस परीक्षण द्वारा किया गया था, जिसके बाद कई तुलनाओं के लिए डन का परीक्षण किया गया था और परिणाम एसडी ± मतलब के रूप में प्रस्तुत किए जाते हैं। घाव वीओआई में (एच = 7.063; पी = 0.017), 1 सप्ताह की छवि में, ट्रेसर तेज अनुपात (0.90±0.07) बेसलाइन (1.07±0.06) से 16% कम था, सांख्यिकीय महत्व (पी = 0.024) के साथ। 4 सप्ताह की छवि (1.01±0.06) में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं पाया गया।
स्ट्रेटम में, कोई सांख्यिकीय अंतर नहीं पाया गया (एच = 1.412; पी = 0.5393) । छवियों के लिए तेज अनुपात बेसलाइन के लिए 1.07±0.07, 1 सप्ताह के लिए 1.02±0.07, और 4 सप्ताह के लिए 1.01±0.08 थे।
तीसरा ग्राफ (नीचे पंक्ति, बाएं ग्राफ) कॉन्ट्रालेट्रल स्ट्राटम (गैर-इंजेक्शन पक्ष) का मात्राकरण प्रस्तुत करता है। इस ग्राफ में यह देखना संभव है कि समय बिंदुओं के बीच कोई अंतर (पी = 9397) नहीं था, जिसका अर्थ है कि इंजेक्शन पक्ष में भिन्नता माइलिन परिवर्तनों के कारण है और समय के साथ ट्रेसर तेज भिन्नता के कारण नहीं है।
अंतिम ग्राफ, नीचे सही में, जानवरों में इंजेक्शन साइट (घाव VOI) की मात्रा से पता चलता है, जहां मॉडल अच्छी तरह से प्रेरित नहीं था (शायद तेजी से lysolecithin इंजेक्शन, गलत स्टीरियोटैक्सिक हेरफेर, और/ इस मामले में, कम तेज 1 सप्ताह के समय बिंदु में नहीं देखा जाता है, जिसका अर्थ है कि कोई डिमिटेशन प्रक्रिया नहीं हुई है, और 4 सप्ताह में कम तेज बाद में डिमाइलेशन प्रक्रिया या ऊतक क्षति से संबंधित हो सकता है, दोनों स्थितियां खराब पशु मॉडल प्रेरण से संबंधित हैं। इस ग्राफ को प्रोटोकॉल में जोड़ा गया था ताकि परिणामों की उपस्थिति का उदाहरण दिया जा सके जब पशु प्रेरण अच्छी तरह से प्रदर्शन नहीं किया जाता है और शुरू से अंत तक प्रोटोकॉल के प्रत्येक चरण के महत्व पर जोर देता है। 1.06.0.05, 1.02±0.14, और बेसलाइन, 1 सप्ताह, और 4 सप्ताह पीईटी छवियों के लिए 0.96±±0.10 के तेज अनुपात के साथ ट्रेसर तेज (एच = 2.745, पी = 0.267) में कोई अंतर नहीं है।
चित्रा 2 परिणामों के लिए और अधिक जानकारी कहते हैं, जहां चित्रा 2A विवरण जहां मैनुअल VOI खींचा गया था, एमआरआई टेम्पलेट संदर्भ और चित्रा 2B के आधार पर लक्सोल तेजी से नीले धुंधला (लक्सोल तेजी से नीले धुंधला प्रोटोकॉल के बारे में विवरण के लिए, डी पाउला Faria एट अल13)इंजेक्शन पक्ष से और गैर इंजेक्शन पक्ष से 7 दिन बाद स्टीरियोटैक्सिक इंजेक्शन ।
चित्रा 1:उदाहरण 11 सी-पीआईबीपीईटी छवियां बेसलाइन, 1 सप्ताह और स्टीरियोटैक्टिक इंजेक्शन के 4 सप्ताह बाद की छवियां दिखाती हैं। आंकड़े के नीचे ग्राफ विभिन्न समय बिंदुओं पर ट्रेसर तेज (एन = 4) के मात्राकरण का प्रतिनिधित्व करते हैं। पहले दो रेखांकन इंजेक्शन पक्ष में एक अच्छी तरह से प्रेरित मॉडल (यानी, lysolecithin इंजेक्शन के बाद घाव पेश चूहों) में स्ट्रेटम में तेज अनुपात का प्रतिनिधित्व करते हैं। तीसरा ग्राफ (नीचे बाएं) गैर इंजेक्शन स्ट्राटम (नकारात्मक नियंत्रण) की मात्रा से पता चलता है, और अंतिम ग्राफ (नीचे सही) जानवरों के इंजेक्शन साइट पर 11 सी-PIBतेज का प्रतिनिधित्व करता है कि demyelinated घाव (बुरी तरह से प्रेरित मॉडल) पेश नहीं किया । परिणाम mean±SD के रूप में प्रस्तुत कर रहे हैं । कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।
चित्रा 2:घाव स्थान विवरण। A)1 सप्ताह के बाद स्टीरियोटैक्टिक इंजेक्शन पर एमआरआई टेम्पलेट (कॉर्पस कैलोसम और स्ट्राटम का क्षेत्र) के आधार पर इंजेक्शन साइड (धराशायी रेखा) और गैर-इंजेक्टेड साइड (सफेद रेखा) का उदाहरण वीओआई। B)लक्सोल तेजी से नीले रंग की गैर इंजेक्शन पक्ष की तुलना में इंजेक्शन गोलार्द्ध में demyelination दिखा धुंधला (शीर्ष: 40x आवर्धन, नीचे: 100x आवर्धन) । कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।
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Discussion
मल्टीपल स्क्लेरोसिस का अध्ययन करने के लिए लिसोलेसिथिन मॉडल का उपयोग करने का सबसे बड़ा लाभ डिमाइलिनेशन (लगभग 1 सप्ताह) और रेमाइलेशन (लगभग 4 सप्ताह) के लिए14होने के लिए तेजी से समय रेखा है। इस मॉडल को चूहों15में भी प्रेरित किया जा सकता है, हालांकि, चूहों की तुलना में चूहे के मस्तिष्क के बड़े आकार के कारण वीवो पीईटी इमेजिंग में चूहों में शामिल होना अधिक लाभप्रद है।
इंडक्शन मॉडल का पहला कदम बेहद सतर्क रहना है । इस मॉडल को2014 में डी पाउला फरिया एट अल द्वारा मायलिन पीईटी इमेजिंग के लिए मान्य किया गया था और यह दिखाया गया था कि मस्तिष्क के अंदर lysolecithin इंजेक्शन की गति एक अच्छी तरह से प्रेरित मॉडल के लिए महत्वपूर्ण है। इंजेक्शन बहुत धीरे-धीरे किया जाना चाहिए, ऊतक क्षति से बचने के तरीके के रूप में प्रत्येक 10 मिनट में 1 माइक्रोल। lysolecithin समाधान भी स्टीरियोटाैक्टिक इंजेक्शन के रूप में एक ही दिन पर तैयार किया जाना चाहिए, अधिमानतः सर्जरी प्रक्रिया शुरू करने से पहले । यदि मॉडल का उपयोग किसी शोध समूह में पहली बार किया जाएगा, तो हम अनुशंसा करते हैं कि पीईटी इमेजिंग द्वारा किसी भी माइलिन क्वांटिफिकेशन को करने से पहले मॉडल को मान्य किया जाना चाहिए। सत्यापन के लिए myelin धुंधला द्वारा पोस्टमार्टम ऊतक विश्लेषण शामिल करने की जरूरत है, उदाहरण के लिए: लक्सोल फास्ट ब्लू हिस्टोलॉजी, जैसा कि चित्रा 2में दिखाया गया है, और मायलिन बेसिक प्रोटीन (एमपीबी) इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री, वीवो विश्लेषण में उपयोग किए जाने वाले विभिन्न समय बिंदुओं में। परिणाम अनुभाग में हमने रेडियोट्रेसर तेज का एक परिमाण दिखाया जहां घाव प्रेरण अच्छी तरह से सफल नहीं हुआ था और इसलिए, 11 सी-पीआईबीपीईटी इमेजिंग द्वारा मतभेदों का पता नहीं लगाया गया था।
इस तकनीक द्वारा निर्धारित किए जाने वाले घाव पीईटी स्कैनर संकल्प (प्रीक्लीनिकल उपकरणों में लगभग 1 मिमी और नैदानिक उपकरणों में लगभग 5 मिमी) से बड़ा होना चाहिए।
एक बार मॉडल अच्छी तरह से प्रेरित है, इमेजिंग प्रक्रिया अच्छी तरह से योजना बनाई जानी चाहिए, कार्बन के साथ लेबल रेडियोट्रेसर के कारण-11, जो 20 मिनट के एक छोटे से आधा जीवन है । प्रीक्लिनिकल इमेजिंग प्रयोगशाला कर्मियों को सभी आवश्यक सामग्री तैयार करने, संज्ञाहरण प्रणाली को भरने, जांच करने की आवश्यकता है कि क्या सब कुछ ठीक से काम कर रहा है, और प्रयोग के दौरान पूरा किए जाने वाले प्रपत्रों को मुद्रित करें। पीईटी स्कैनर को प्रयोग से पहले सत्यापित भी किया जाना चाहिए, जब उपकरणों में आवश्यक सभी गुणवत्ता नियंत्रण (प्रत्येक देश पर निर्भर) स्कैनर की जांच करने के लिए किया जाना चाहिए अच्छी तरह से काम कर रहा है । इंजेक्शन के लिए ट्रेसर प्राप्त करने के बाद, गतिविधि की माप को सही इंजेक्शन खुराक की गारंटी देने के लिए कैलिब्रेटेड खुराक कैलिब्रेटर में भी मापा जाना चाहिए, और फॉर्म पर लिखी गई जानकारी (सिरिंज में गतिविधि, इंजेक्शन से पहले और बाद में) के साथ-साथ संबंधित समय जब माप किया गया था। स्थापित करें कि कौन सी घड़ी का उपयोग किया जा रहा है, क्योंकि सही समय पीईटी स्कैनर के वर्कस्टेशन पर समय है, छवियों के क्षय सुधार में विचार किया जाएगा, इसलिए, प्रयोग के दौरान उपयोग की जाने वाली किसी भी घड़ियों को स्कैनर वर्कस्टेशन समय पर सिंक्रोनाइज्ड किया जाना चाहिए।
पशु छवि अधिग्रहण के दौरान, तापमान और पशु श्वास की निगरानी की जानी चाहिए और संज्ञाहरण समायोजित, के रूप में आवश्यक है । तापमान स्थान निर्भर है और जानवरों की भलाई के लिए समायोजित किया जाना चाहिए। छवि अधिग्रहण समाप्त होने के बाद, पिंजरे में लौटने से पहले ठीक होने के लिए जानवर को गर्म पैड पर रखना महत्वपूर्ण है।
पीईटी इमेजिंग का उपयोग करके प्रयोगों से विश्वसनीय परिणाम प्राप्त करने के लिए छवि प्रसंस्करण महत्वपूर्ण है। आदर्श यह है कि एनालाइजर पशु समूहों और/या उपचार के बारे में पता नहीं है और वह पहले से ही पीईटी ट्रेसर के साथ पीईटी छवियों में अनुभव है इस तरह से इस्तेमाल के रूप में पीईटी इमेजिंग और एमआरआई टेम्पलेट के बीच सही पंजीकरण की गारंटी के लिए । हमने इस प्रोटोकॉल में पीएमओडी सॉफ्टवेयर का उपयोग किया, लेकिन यदि यह सॉफ़्टवेयर उपलब्ध नहीं है, तो वैकल्पिक छवि क्वांटिफिकेशन सॉफ्टवेयर का उपयोग किया जा सकता है, हालांकि अच्छे मस्तिष्क क्षेत्र परिभाषा और मात्राकरण को प्राप्त करने के लिए ध्यान दिया जाना चाहिए। घाव स्थान की परिभाषा के लिए, यह सुनिश्चित करने के लिए अतिरिक्त देखभाल की जानी चाहिए कि इंजेक्शन साइट खींची गई घाव वीओआई (चूहे मस्तिष्क शरीर रचना विज्ञान का ज्ञान आवश्यक है) के अंदर है।
यह कहना महत्वपूर्ण है कि माइलिन पीईटी इमेजिंग अन्य एमएस पशु मॉडलों में भी किया जा सकता है, अप्रत्याशित घावों को प्रदर्शित करता है, जैसा कि पहले से ही हमारे समूह द्वारा प्रायोगिक ऑटोइम्यून एन्सेफेलोमाइलिटिस (EAE) मार्मोसेट मॉडल5में दिखाया गया है। जैसा कि पहले ही कहा गया है, घाव मात्राकरण में विचार करने के लिए महत्वपूर्ण पैरामीटर पीईटी स्कैनर संकल्प है, जो घावों का पता लगाने की सीमा है जो बहुत छोटे हैं। पीईटी इमेजिंग एमआरआई जैसी अन्य तकनीकों की तुलना में एक खराब रिज़ॉल्यूशन इमेजिंग तकनीक है, हालांकि यह एक अत्यधिक विशिष्ट मोडलि मोडलाई है और, इस वजह से, पीईटी छवियों का मात्राकरण एमआरआई जैसे शारीरिक टेम्पलेट का उपयोग करता है, ब्याज के क्षेत्र को आकर्षित करने में मदद करने के लिए, जैसा कि उपरोक्त प्रोटोकॉल में दिखाया गया है।
हालांकि वीओआई की मैनुअल ड्राइंग ऑपरेटर निर्भर है, यह एलपीसी पशु मॉडल के लिए सबसे अच्छा विकल्प है, क्योंकि घाव जानवरों के बीच परिवर्तनीय हो सकता है। मात्राकरण प्रक्रिया में पूर्वाग्रह को कम करने के लिए, एक दर्पण वीओआई करना महत्वपूर्ण है, जैसा कि प्रोटोकॉल में बताया गया है, जो एक ही क्षेत्र में होगा और इंजेक्शन पक्ष के समान आकार का होगा। एमआरआई टेम्पलेट में वीओआई को आकर्षित करते समय स्टीरियोटैक्सिक निर्देशांक करना भी महत्वपूर्ण है ताकि यह गारंटी दी जा सके कि सही मस्तिष्क क्षेत्र पर विचार किया जाता है। डेमीलिनेटेड क्षेत्र की पहचान करने के लिए एक गाइड के रूप में माइलिन धुंधला का उपयोग करना भी ड्राइंग में मदद कर सकता है, जैसा कि डी पाउला फरिया12में समझाया गया है।
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Disclosures
कोई नहीं।
Acknowledgments
β क्यूब उपकरण (मोलेक्यूब्स एनवी, बेल्जियम) को साओ पाउलो रिसर्च फाउंडेशन, एफएपीईएसपी-ब्राजील (#2018/15167-1) द्वारा समर्थित किया गया था। LES FAPESP से पीएचडी छात्र छात्रवृत्ति है-ब्राजील (#2019/15654-2) ।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Analytical Balance | Marte | AUWZZOD | max: 220 g- min: 1 mg |
| Anestesia vaporizer | Nanitech | 15800 | |
| Beta-cube | Molecubes | ||
| Bulldog clamp | Stoelting | 5212043P | |
| clorexidine | Rioquimica | 0.5%/100 mL | |
| Cotton swabs | johnson e johnson | ||
| Dose calibrator | Capintech | ||
| Drill | Kinzo powertools | 352901 | Model Q0M-DC3C |
| Eppendorf tube | Eppendorf | 30125150 | 1.5 mL |
| Eye lubricant | ADVFARMA | 30049099 | vaseline 15 g (pharmaceutical purity) |
| Fine forceps | Stoelting | 52102-38P | |
| Gloves | Descarpack | 212101 | 6.5 size |
| Heating pad | Softhear | ||
| Injection Syringe | Hamilton | 80314 | 10µ, 32ga, model 701 |
| Insuline syringe | BD | 328328 | 1 mL insulin syringes with needle |
| Isoflurane | Cristália | 410525 | 100 mL , concentration 1 mL/1 mL |
| Ketoprofen or other analgesic | Sanofi | 100 mg/2 mL | |
| lidocaine | Hipolabor | 1.1343.0102.001-5 | 2%/20mL |
| L-α-Lysophosphatidylcholine from egg yolk | Sigma-aldrich | L-4129 | 25 mg - ≥99%, Type I, powder |
| Needle holder | Stoelting | 5212290P | |
| Oxygen | White Martins | 7782-44-7 | Compressed gas |
| PMOD software | PMOD technologies | Version 4.1 | module fuse it |
| Rat anesthesia mask | KOPF | Model 906 | |
| Saline | Farmace | 0543325/ 14-8 | 0.9% sodium chloride for injection, 10 mL |
| Scapel blades | Stoelting | 52173-10 | |
| Scapel handles | Stoelting | 52171P | |
| Scissor | Stoelting | 52136-50P | |
| Semi-analytical Balance | Quimis | BK-3000 | max:3,100 g; min:0.2 g |
| shaver | Mega profissional | AT200 model | |
| Stereotactic Apparatus | KOPF | Nodel 900 | |
| Universal holder with needle support | KOPF | Model 1772-F1 | Hamilton support for 5 and 10 µL |
References
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न्यूरोसाइंस अंक 168 11सी-पीआईबी पीईटी इमेजिंग मायलिन मल्टीपल स्क्लेरोसिस मॉलिक्यूलर इमेजिंग ग्लिसोलेिथिन चूहा मॉडल वीओआई विश्लेषणErratum
Formal Correction: Erratum: Positron Emission Tomography Imaging for In Vivo Measuring of Myelin Content in the Lysolecithin Rat Model of Multiple Sclerosis
Posted by JoVE Editors on 02/16/2023.
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An erratum was issued for: Positron Emission Tomography Imaging for In Vivo Measuring of Myelin Content in the Lysolecithin Rat Model of Multiple Sclerosis. The citation was updated.
The citation was updated from:
de Paula Faria, D., Cristiano Real, C., Estessi de Souza, L., Teles Garcez, A., Navarro Marques, F. L., Buchpiguel, C. A. Positron Emission Tomography Imaging for In Vivo Measuring of Myelin Content in the Lysolecithin Rat Model of Multiple Sclerosis. J. Vis. Exp. (168), e62094, doi:10.3791/62094 (2021).
to:
de Paula Faria, D., Real, C.C., Estessi de Souza, L., Teles Garcez, A., Navarro Marques, F. L., Buchpiguel, C. A. Positron Emission Tomography Imaging for In Vivo Measuring of Myelin Content in the Lysolecithin Rat Model of Multiple Sclerosis. J. Vis. Exp. (168), e62094, doi:10.3791/62094 (2021).
