고립 된 토끼 폐 제제는 폐 연구에서 금 표준 도구입니다. 이 간행물은 기도 반응성, 폐 보존 및 폐 이식 및 폐 부종의 전임상 연구에 관여하는 생리적 및 병리학 적 메커니즘의 연구를 위해 개발 된 기술을 설명하는 것을 목표로합니다.
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이 논문에서
요약
초록
고립 된 폐 관류 시스템은 폐 연구에서 널리 사용되어 미세 및 거시적으로 폐의 내부 작동을 해명하는 데 기여했습니다. 이 기술은 순환 물질 과 흡입 또는 perfused 물질의 효과 사이의 상호 작용을 포함하여 대사 활동 과 호흡 기능을 측정하여 폐 생리학 및 병리학의 특성화에 유용합니다. 시험관 내 방법은 조직의 슬라이스 및 배양을 포함하지만, 고립 된 전 생체 폐 관류 시스템은 환기 및 관류를 재현하면서 지속적인 생리 적 기능의 연구를 가능하게하는 완전한 기능성 기관과 함께 작동 할 수 있습니다. 그러나 중앙 내분과 림프 배수의 부재의 효과는 여전히 완전히 평가되어야한다는 점에 유의해야합니다. 이 프로토콜은 실험 실험실 동물로부터 폐와 심장의 수술 추출 및 캐니언화에 이어 분리된 폐 장치의 조립을 설명하고 데이터의 관류 기술 및 신호 처리를 표시하는 것을 목표로 합니다. 격리된 폐의 평균 생존가능성은 5-8h 사이입니다. 이 기간 동안 폐 모세관 투과성이 증가하여 부종과 폐 손상을 유발합니다. 보존된 폐 조직의 기능은 시간이 지남에 따라 폐 부종의 정도를 결정하는 데 사용되는 모세관 여과 계수(Kfc)에 의해 측정됩니다.
서론
브로디와 딕슨은 1903년 전 생체폐 관류 시스템을 처음 설명했다. 그 이후로 폐의 생리학, 약리학, 독성학 및 생화학을 연구하기위한 금 표준 도구가되었습니다2,3. 이 기술은 폐 이식의 생존가능성을 평가하고 히스타민, 아라키도니아산 대사산물 및 물질 P와 같은 염증 성 중재자의 효과뿐만 아니라 기관지 수축, 천자 수축 및 폐 적 부종과 같은 폐 현상 동안의 상호 작용을 결정하는 일관되고 재현 가능한 방법을 제공합니다. 고립 된 폐 시스템은 일반 순환에서 생물 발생 아민의 제거에 폐의 중요한 역할을 공개하는 중요한 기술이었다4,5. 또한, 시스템은 폐 계면 활성제6의 생화학을 평가하는 데 사용되었습니다6. 지난 수십 년 동안, 전 생체 폐 관류 시스템은 폐 이식 연구를위한 이상적인 플랫폼이되었다7. 2001년 Stig Steen의 한 팀은 19세 기증자의 폐를 재조정하기 위해 이 시스템을 사용하여 전 생체 폐 ....
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프로토콜
토끼 모델의 고립 된 관류 시스템은 Instituto Nacional 드 Enfermedades 호흡증선의 기관지 과잉 반응 연구소에서 널리 사용되었습니다. 이 프로토콜에는 대략 무게가 2.5-3kg인 뉴질랜드 토끼가 포함됩니다. 모든 동물은 실험실 동물에 대한 공식 멕시코 지침 (NOM 062-ZOO-1999)과 실험실 동물의 관리 및 사용에 대한 가이드 (8 판, 2011)에 따라 표준 vivarium 조건 및 광고 리비툼 공급에 보관되었습니다. 이 프로토콜에 제시된 모든 동물 절차 및 동물 관리 방법은 이전에 Instituto Nacional 드 Enfermedades Respiratorias의 윤리위원회에 의해 승인되었습니다.
참고: 고립된 폐 관류 시스템의 준비는 마취 하에 그리고 안락사를 통해 동물의 의도적인 죽음을 관련시킵니다.
1. 장비 및 장치의 준비.
- 장비 배치:
- 토끼의 무게에 따라 크기가 있는 수술테이블을 설정합니다.
- 강철 기둥에 인공 흉부 덮개를 장착하고 유리 챔버 아래에 유리 챔버와 측면에 롤러 펌프가있는 인공 호흡기를 장착합니다.
- 커버가 기관장 캐뉼라를 기관지와 ....
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결과
고립 된 폐 관류 시스템은 생검에 대한 장기 조작, 관류에서 샘플 수집 및 생리 적 매개 변수의 실시간 데이터 수집을 허용합니다. 고립 된 시스템은 다른 기능과 폐 현상을 포함 하는 많은 가설을 테스트 하는 데 사용할 수 있습니다., 신진 대사와 효소 활동에서 부 종 형성 및 폐 이식에 대 한 보존 기간.
도 1은 환기 시스템 및 계산된 데이터 수집과 함께 완전히 조립된 절연 폐 관류 시스템의 다이어그램을 표시합니다. 시스템의 관류 성분은 난투가 지속적으로 고립 된 폐를 통해 흐르는 것을 보장합니다. 폐 동맥은 유입 관류를 제공하기 위해 캔투, 난투 유출은 심장의 왼쪽 아트리움을 캐너레이션에 의해 제공됩니다. 난투는 롤러 펌프를 사용하여 전달되어 열교환기를 통과한 다음 거품 트랩을 통해 폐 동맥으로, 그리고 마지막으로 폐 혈관 침대로 전달됩니다. 시스템의 환기 성분은 환기 매체가 기관 캐뉼라를 통해 직접 폐렴구균계의 단부를 지.......
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토론
이 연구는 폐 생리학 연구에서 필수적인 기술인 고립된 폐 관류 시스템의 일반적인 견해를 표시합니다. 고립 된 폐 관류 시스템은 그것의 사용에 있는 다재다능성의 큰 정도를 제공하고 가설의 넓은 범위의 시험에서 관련있는 몇몇 매개변수의 평가를 허용합니다15. 고립 된 폐 시스템은 지난 10 년 동안 장기 별 평가를위한 관련성을 더욱 확립하고 중년 줄기 세포16 및 CRISPR / Cas9 게놈 엔지니어링17과 관련된 최첨단 기술과 새로운 치료법의 확장으로 유용성을 확장한 전 세계적으로 존재합니다. 현재 전 생체 폐 관류 연구 영역은 항 염증 전략, 환기 손상 관리 및 예방, 항 거부 치료 및 폐 부종 성능15를 광범위하게 다룹니다.
올바른 데이터 회수를 보장하기 위해서는 장치의 적절한 조립이 필요합.......
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공개 사항
저자는 이해 상충을 선언하지 않습니다.
감사의 글
저자는 이 원고를 쓰는 베티나 소머 세르반테스 박사와 키치아 엘레나 라라 사폰트가 일러스트레이션을 지원해 준 것에 대해 감사를 표하고 싶습니다.
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참고문헌
- Dixon, W. E. Contributions to the physiology of the lungs: Part I. The bronchial muscles, their innervation, and the action of drugs upon them. The Journal of Physiology. 29 (2), 97-173 (1903).
- Nelson, K., et al.
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