Summary
Detta protokoll beskriver en juvenil svinmodell av ortotopisk vänster lungallotransplantation utformad för användning med ESLP-forskning. Fokus ligger på anestesi- och operationstekniker samt kritiska moment och felsökning.
Abstract
Lungtransplantation är den bästa behandlingen för lungsjukdom i slutstadiet, med över 4 600 lungtransplantationer som utförs över hela världen årligen. Lungtransplantationer begränsas dock av brist på tillgängliga donerade organ. Som sådan finns det hög dödlighet på väntelistan. Ex situ lungperfusion (ESLP) har ökat utnyttjandegraden av donatorlungor i vissa centra med 15-20 %. ESLP har använts som en metod för att bedöma och rekonditionera marginaldonatorlungor och har visat acceptabla kort- och långsiktiga resultat efter transplantation av ECD-lungor (extended criteria donor). Transplantationsmodeller för stora djur (in vivo) krävs för att validera pågående in vitro-forskningsresultat . Anatomiska och fysiologiska skillnader mellan människor och grisar innebär betydande tekniska och anestetiska utmaningar. En transplantationsmodell som är lätt reproducerbar skulle möjliggöra in vivo-validering av nuvarande ESLP-strategier och preklinisk utvärdering av olika interventioner som är utformade för att förbättra donatorns lungfunktion. Detta protokoll beskriver en svinmodell av ortotopisk allotransplantation av vänster lunga. Detta inkluderar anestesi- och kirurgiska tekniker, en anpassad kirurgisk checklista, felsökning, modifieringar och fördelarna och begränsningarna med tillvägagångssättet.
Introduction
Lungtransplantation är den främsta långtidsbehandlingen för lungsjukdom i slutstadiet. Över 4 600 lungtransplantationer utförs årligen över hela världen1. Lungtransplantation har dock för närvarande betydande begränsningar. För det första fortsätter behovet av organ att överskugga tillgängliga donatorer. Trots att antalet lungtransplantationer har ökat varje år sedan 2012 på grund av de kombinerade effekterna av att fler kandidater listas för transplantation, en ökning av antalet donatorer och förbättrad användning av återvunna organ, har dödligheten på väntelistan för transplantation inte minskat nämnvärt. Problem med organkvaliteten utgör en annan stor begränsning, med rapporterade organanvändningsgrader så låga som 20%-30%3,4,5. Slutligen är trenderna i de postoperativa resultaten av lungtransplantation mindre än tillfredsställande, med långsiktiga transplantat- och patientresultat som fortfarande släpar efter andra solida organtransplantationer2.
En ny teknik, ex situ lungperfusion (ESLP), har potential att mildra dessa begränsningar. ESLP har i allt högre grad använts som en metod för att bedöma och rekonditionera marginaldonatorlungor och har visat acceptabla kort- och långsiktiga resultat efter transplantation av ECD-lungor 6,7,8,9,10. Följaktligen har ESLP ökat utnyttjandegraden i vissa centra med 15%-20%6,7,8,9,10,11.
Korrekt ESLP-forskning kräver validering in vivo av in vitro-fynd. Det finns dock begränsad litteratur om modeller för lungtransplantation av svin för ESLP12,13,14,15. Dessutom ger tillgänglig litteratur otillräckliga detaljer om anestesibehandling av Yorkshiregrisar för lungtransplantation, som kan vara mycket instabil hemodynamiskt12,13,14,15. Att etablera en lätt reproducerbar modell skulle möjliggöra in vivo-validering av nuvarande ESLP-strategier och preklinisk utvärdering av olika interventioner för att minska lungischemi-reperfusionsskador. Syftet med denna studie är att beskriva en grismodell av ortotopisk vänsterlungallotransplantation för användning med ESLP. Protokollet innehåller beskrivningar av anestesi- och kirurgiska tekniker, en anpassad kirurgisk checklista och detaljer om felsökningsupplevelsen och protokolländringar. Begränsningarna och fördelarna med transplantationsmodellen för vänster lungsvin har också diskuterats i detta arbete. Detta manuskript beskriver inte tillvaratagandet av svinlungor hos 35-50 kg Yorkshiregrisar, och det täcker inte heller etableringen och avslutandet av ESLP. Detta protokoll behandlar endast mottagartransplantationsoperationen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alla procedurer utfördes i enlighet med riktlinjerna från Canadian Council on Animal Care och guiden för vård och användning av försöksdjur. Protokollen godkändes av den institutionella djurvårdskommittén vid University of Alberta. Detta protokoll har tillämpats på unga Yorkshire-svin av honkön mellan 35-50 kg. Grisar är patogenfria, livsmedelsklassade exemplar. De köps in från Swine Research and Technology Centre i Edmonton, AB, Kanada (https://srtc.ualberta.ca). Alla personer som var involverade i ESLP-procedurer hade fått ordentlig biosäkerhetsutbildning.
1. Preoperativa preparat och anestesi
OBS: Grisar fastar över natten före operation under högst 12 timmar.
- Administrera intramuskulära injektioner av ketamin (20 mg/kg) och atropin (0,05 mg/kg) som premedicinering för mottagande gris i operationssalen.
- Placera grisen på rygg på ett uppvärmt operationsbord för att upprätthålla normotermi och fortsätt med maskinduktion.
- Titrera syrgasflödet i enlighet med djurets vikt och anestesisystemet.
OBS: Syrgasflödet bör vara 20-40 ml/kg. - Administrera isofluran vid 4%-5% och reducera till 3% efter 1-2 min.
- Utvärdera anestesidjupet, se till att grisen inte har någon abstinensreflex som svar på en skadlig stimulans. Upprepa var 5:e minut.
OBS: Om en smärtreaktion föreligger, öka procentandelen isofluran administrering tills lämpligt anestesidjup uppnås. Se steg 10 i detta avsnitt för mer information om underhållssmärtlindring med ketamin och hydromorfon. Inga förlamade personer administreras. Detta gör det möjligt att bedöma en abstinensreflex. En nypa i näsan används som ett skadligt stimulus. - Intubera grisen när rätt anestesidjup har bekräftats. Använd ett anpassat 10-tums laryngoskop med platt blad och endotrakealtuber i storlek 9 eller 10 för grisar 40-50 kg.
- Placera en pulsoximetersond på tungan (föredras) eller örat och rikta in dig på en syremättnad över 90 %.
OBS: Temperaturen övervakas via en nässond. En värmedyna används för att upprätthålla normotermi. - För att bibehålla anestesin, justera syrgasflödet (20-40 ml/kg) och inhalationsgashastigheten (1%-3%).
- Håll ventilatorinställningarna på en andningsfrekvens på 12-30 andetag/min, TV på 6-10 ml/kg, PEEP på 5 cm H 2 O och topptryck på 20 cm H2O.
OBS: En standard övertrycksventilator av IVA-typ används för att skapa ett slutet system för anestesi och ventilation. Vitala värden övervakas kontinuerligt och registreras med 15 minuters intervall. ABG dras var 15-60:e minut, beroende på djurets stabilitet. Även om TV-apparater är inriktade på så högt som 10 ml/kg, uppnås 6-8 ml/kg. Figur 1 ger en schematisk översikt över undertrycksventilationen (NPV)-ESLP för transplantationsprotokollet som tillämpas i laboratoriet. - Raka, tvätta och förbered snittstället aseptiskt med povidonjod.
OBS: Efter sedering med Ketamin/Atropin innebär den smärtstillande regimen administrering av 3 mg/kg Ketamin IV var 1 timme (intervall 1-3 mg/kg beroende på patientparametrar) och Hydromorfon 0,05 mg/kg IM var 2:a timme via en perifert insatt intravenös slang i en ven i örat. Längre tid mellan doserna resulterar i genombrottssmärtrespons, såsom förhöjd hjärtfrekvens och onormala andningsmönster/magmuskelrörelser.
2. Införande av centrala venösa och arteriella slangar
- Sätt in en central slang för administrering av vätska och heparin.
OBS: Total intravenös vätskeadministrering beräknas till 1 ml/kg/h, och vätskebolusar administreras PRN för att upprätthålla en MAP >60 mmHg. Central linje används också för att administrera steroider, antibiotika, vasopressorer, och inotroper. Se figur 2A för linjepositionering.- Förbered huden med en povidonjodförberedande lösning och låt torka helt. Använd diatermi för att göra ett 5-8 cm mittlinjesnitt centrerat över luftstrupen och sträcka sig kranialt från bröstbensskåran.
- Dela upp skinnet och underhudsfettet med hjälp av bränneri.
- Dela mittlinjen mellan bandmusklerna och dela sedan bindvävslagren för att identifiera vänster eller höger halspulsådern intravaskulärt bunt lateralt om luftstrupen.
- Få proximal och distal kontroll av halsvenen med hjälp av silkesband (storlek 2-0) som kärlöglor.
- Knyt det kraniala omslutande bandet och dra det uppåt på det proximala bandet för att kontrollera blodflödet.
- Gör ett litet snitt i venen med en Metzenbaum-sax (se materialtabell) för att få plats med en tvåports, 7 Fr mittlinje (~1/3 av kärlets omkrets).
- Släpp samtidigt spänningen på den proximala kärlöglan, kanylera venen och knyt sedan ner för att säkra kanylen i venen på ett djup av 10 cm.
- Spola slangen med heparin, anslut till en intravenös slang med 0,9 % normal koksaltlösning och administrera vätska om grisen är intravaskulärt utarmad på grund av uttorkning.
OBS: Heparin låser alla oanvända portar. - Administrera 500 mg metylprednison och 1 g cefazolin IV.
- Följ samma tekniker för att kanylera den gemensamma halspulsådern med hjälp av en 7 Fr artärslang för korrekt blodtryckshantering.
3. Anskaffning av vänster lunga
- Placera grisen i ett höger sidoläge.
- Utför en vänster anterolateral torakotomi (Figur 2).
- Förbered huden med en povidonjodförberedande lösning och låt torka helt. Markera torakotomisnittet (20 cm) med följande landmärken: använd palpation för att identifiera spetsen på vänster skulderblad; På samma sätt kan du identifiera xiphoid-processen som är underlägsen bröstbenet med palpation. Anslut de två som visas i figur 2B.
- Injicera totalt 10 ml 0,25 % bupivakain i snittlinjen och två revbensutrymmen ovanför och under snittet.
- Använd diatermi för att dissekera huden, subkutana lager och muskellager. Latissimus dorsi måste delas. Identifiera revbenet omedelbart under snittet och bränn ovanpå revbenet för att exponera de interkostala musklerna samtidigt som du undviker det interkostala neurovaskulära knippet.
- Använd en mygghemostat för att punktera de interkostala musklerna omedelbart ovanför revbenet och känn sedan inuti bröstet för sammanväxningar med ett finger. Tryck bort lungan med hjälp av ett Yankauer-sug eller finger (se materialtabell) när du bränner längs revbenets övre kant för att förlänga torakotomin.
- Förläng torakotomin anteriort tills 1 tum från bröstbenet. Förläng torakotomin bakåt till paraspinalmusklerna.
- Sätt i en Cooley sternal retractor (se materialtabell) för att öppna torakotomin brett (10 cm) (Figur 2C). Dra tillbaka lungan för att exponera den vänstra hemi-azygota venen (Figur 2D).
- Dissekera den vänstra hemiazygosvenen med Metzenbaum-sax och en fin Lauer. Omslut kärlet med silkesband och ligera och transektera det sedan (Figur 2E). Håll en sidenslips på den proximala stumpen för ökad kontroll.
OBS: Lauer är en rätvinklig klämma eller en celiakiklämma som används för vävnadsdissektion. - Dissekera vänster lungartär (PA) och vänster lungvener (PV). Omslut venerna i silkesband för kontroll (Figur 2F).
OBS: De överlägsna PV:erna är mycket små och suturligerade vid sina grenpunkter eller gemensamma bål, beroende på den individuella anatomin. Den vänstra huvudstamsbronken ligger djupt till PA och LA (vänster förmak), så ibland kan den inte dissekeras lätt förrän artären och venerna har klämts fast och transekterats (Figur 2G). - Administrera 5000 enheter heparin IV 5 minuter innan du klämmer fast PA.
OBS: Heparin 5000 enheter IV administreras också 5 min innan PA lossas. För varje timme därefter administreras 1000 enheter intravenöst heparin. - Clamp PA (DeBakey cross-clamp), vänster nedre lungven (Satinsky clamp) och vänster bronk (Spoon Potts clamp) individuellt (se materialtabell). Minska tidalvolymerna till 5 ml/kg när den vänstra bronken är fastspänd.
- Transekt PA, vänster nedre lungven och vänster bronk. Lämna minst 0,5 cm vävnadsmanschett att sy. Dela det vänstra nedre lungligamentet och ta bort den vänstra lungan.
OBS: Den vänstra lungan kan kasseras eller behållas för kontrollhistologi.
4. Avslutning av ESLP, delning av vänster lunga och spolning med elektrolytlösning
- Clamp ventilationsslangen vid maximal inandning, avsluta perfusion och ventilation och koppla bort lungorna från ESLP-enheten.
- Väg lungorna för att bestämma mängden ödembildning.
OBS: Ödem är vävnadssvullnad på grund av ansamling av överflödig vätska. - Ta en vävnadsbiopsi av tillbehörloben, dela den i tre lika stora bitar och placera en bit i var och en av följande: gel för optimal skärtemperatur (OCT), formalin och snap freeze i flytande kväve.
Det här steget följs vanligtvis i författarens labb. Proverna lagras sedan för framtida analys: OCT- och snapfrysta prover förvaras i en frys på -80 °C, och formalinlagrade prover placeras i en ordentligt försluten behållare och förvaras i kylskåp med 4 °C. Närmare uppgifter om det specifika ESLP-protokollet och vävnadsanalysen finns på annan plats16. - Dela vänster donatorlunga från höger lunga. Lämna 1 cm donator PA, 1 cm donator bronk och lämplig donator LA-manschett (~0.5 cm omkrets) för att sy till mottagaren LA (Figur 2H). Lämna vänster underlägsen PV och vänster överlägsen PV i kontinuitet med donatorns LA-vägg för att underlätta senare anastomoser.
- Väg vänster lunga.
- Donatorn lämnade PA med hjälp av en droppsugare ansluten till en IV-slang och spolade 500 ml extracellulär, lågkalium, dextranbaserad elektrolytkonserveringslösning antegrad genom lungkärlen. Fäst kanylen i PA med ett sidenband under spolningen och släpp när spolningen är klar.
OBS: Stegen som nämns gäller den specifika ESLP-enheten som används för detta arbete och kanske inte är direkt tillämpliga på andra enheter.
5. Transplantation av vänster lunga
- För in donatorlungan i mottagarens bröstkorg, med början i den nedre loben. Tvinga inte lungan på plats.
OBS: Den nedre bröstkorgen kan behöva lyftas uppåt för att rymma donatorlungan genom att dra åt sternalretraktorn. Helst ska mottagaren vara några kilo större än donatorn för att underlätta en storleksmatchning. - Utför bronkialanastomosen först med 4-0 prolen på en TF-nål (Figur 2I).
OBS: En igång, end-to-end anastomos fungerar bra. Klipp bort överflödig längd från de två anastomotiska ändarna innan du syr för att undvika veck orsakade av överflödig vävnad. - Utför LA-anastomosen andra med 6-0 prolene på BV-1-nålar med hjälp av en löpande, end-to-end-anastomos. Återigen, trimma överflödig vävnad för att undvika veck.
OBS: LA är spröd och drar nytta av den lilla BV-1-nålen. Horisontella bett på donatorn kan krävas för att köpa tillräcklig vävnad och korrigera den storleksskillnad som orsakas av att donatorns IPV och SPV sys fast i mottagarens IPV/LA-öppning. - Inkorporera donatorns SPV i inferior PV- och LA-anastomos för att tillåta venöst dränage i vänster övre lunglob (Figur 2J).
OBS: Grenen överlägsna lungvener (SPV) är mindre än 0.5 cm i diameter. Den vanliga SPV-bålen är varierande i längd och är inte rutinmässigt närvarande, vilket gör direkt anastomos mellan donator- och mottagar-SPV till ett dåligt alternativ. - Komplettera PA-anastomosen med 6-0 prolen på BV-1-nålar med hjälp av en löpande, end-to-end-anastomos. Återigen, trimma överflödig vävnad för att undvika veck.
- Ta bort bronkial clamp och öka TV-apparater till mål 10 ml/kg.
- Bekräfta hepariniseringen, administrera ett kaliumskift (40 mg furosemid, 10 enheter insulin, 100 ml 25 % dextroslösning), öppna PA-klämman delvis, avlufta och knyt PA-suturen. Släpp PA clamp helt efter 10 min.
- Under tiden, avlufta LA, knyt suturerna och ta bort LA-klämman.
- Ta en reperfusionsblodgas från den centrala linjen och en reperfusionsvävnadsbiopsi från vänster mittlob.
OBS: För att ta en vävnadsbiopsi, använd en silkesslips i storlek 0 för att omsluta en 1 cm stor del av den mellersta lobens spets, knyt ner för att snärja vävnaden och klipp sedan den isolerade delen med Metzenbaum-sax. Dela biopsin i tre lika stora delar och hantera enligt tidigare beskrivning. - Utför en vänster och höger lungbronkoskopi för att bedöma bronkialanastomosen och suga sekret. Sätt in ett bronkoskop i endotrakealtuben med hjälp av en adapteranslutning.
- Anslut skopet till suget. För in bronkoskopet i vänster bronk. Inspektera bronkialanastomosen (Figur 2N). För kikarsiktet ner i bronkiolerna och sug upp eventuell vätska. Upprepa på höger sida.
OBS: Låt inte syremättnaden sjunka under 90 %. Om mättnaden sjunker under denna nivå, ta bort skopet och låt grisen få några minuters oavbruten ventilation för att återhämta sig.
- Anslut skopet till suget. För in bronkoskopet i vänster bronk. Inspektera bronkialanastomosen (Figur 2N). För kikarsiktet ner i bronkiolerna och sug upp eventuell vätska. Upprepa på höger sida.
- Sätt in ett 20 Fr formbart thoraxdränage (Figur 2L), stäng torakotomin i tre lager (Figur 2M) och lägg grisen på mage så snart de arteriella blodgaserna (ABG) är stabila (Figur 2O).
- Övervaka grisen i liggande ställning i mer än 4 timmar. Utför en ABG-analys var 30:e minut. Administrera 1000 enheter heparin varje timme efter reperfusion.
- Ta ett 10 ml blodprov varje timme för centrifugering och enzymkopplad immunadsorberande analys (ELISA) av inflammatoriska markörer16.
OBS: Centrifugeringsparametrarna beskrivs senare.
- Ta ett 10 ml blodprov varje timme för centrifugering och enzymkopplad immunadsorberande analys (ELISA) av inflammatoriska markörer16.
6. Bedömning av isolerad vänster lunga
- Placera grisen på rygg och förbered bröstbenet igen med hjälp av povidonjodberedningslösning. Utför en mittlinjesternotomi för slutlig isolerad bedömning av vänster lunga (Figur 2P).
- Öppna vänster lungsäck med Metzenbaum-sax och ta en vävnadsbiopsi från vänster nedre lob som tidigare beskrivits (OBS till steg 5.9).
- Öppna tillbehörloben pleura och dissekera den gemensamma venen med Metzenbaum-sax.
OBS: Detta kommer att klämmas fast senare. - Ta ett blodprov från LA-anastomosen med en 21 G nål. Rikta nålen mot vänster lungvener och bort från det gemensamma vänstra förmaket eller tillbehörloben.
- Öppna den högra pleura för att skapa utrymme för de högra hilarklämmorna (se materialförteckning). Dissekera det högra nedre lungligamentet upp till hilum. Se till att en clamp kan placeras runt hilum överlägset, underlägset och främre.
OBS: Detta säkerställer att hilum är ockluderad och all syresättning är beroende av vänster lunga. Den högra lungan kommer inte att ventilera vid denna tidpunkt, vilket bör vara uppenbart genom brist på uppblåsning/deflation med ventilatorandning. Den högra nedre loben kan lyftas ut ur bröstet för att åstadkomma detta. - Clamp tillbehörslobvenen med en DeBakey aortakorsklämma (se materialtabell) för att täppa till eventuell tillbehörslobdränering i LA (Figur 2Q).
- Kläm fast höger hilium och ta följande seriella blodamples från vänster PV-anastomos med en 21 G nål riktad mot vänster lunga: 0 min, 1 min, 2 min, 5 min och 10 min efter clamping.
OBS: Fem samples tas för att övervaka eventuella trender i partialtryck av syre (PaO2) (Figur 2R). PaO2 bör förbli relativt stabil för att representera korrekt vänster lungfunktion. Fem prover ger också en garanti för en kvalitetsbedömning om det finns ett problem med koagulering av några prover eller om ett problem uppstår med ABG-analysen. - Transektera anastomoserna och ta bort vänster lunga. Transektera IVC för att påskynda eutanasi under narkos via blodförgiftning.
OBS: Total anestesitid för mottagargrisen är 8 timmar. - Väg donatorlungan för att bedöma ödembildning och inspektera den för övergripande utseende. Inspektera PA, bronkerna och LA-manschetten för tecken på blodpropp eller annan patologi i donatorlungan och mottagarens mediastinum.
- Kör de slutliga gasanalyserna, centrifugera perfusatproverna och förvara vävnadsbiopsierna enligt beskrivningen (OBS till steg 4.3).
OBS: Centrifugeringsinställningarna är: 112 x g, 9 acceleration, 9 retardation, 4 °C och 15 min varaktighet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Alla resultat är i samband med 4 timmars reperfusion efter 12 timmars NPV-ESLP16. Under lungexplantation finns det flera kliniska resultat att förvänta sig (Figur 3). Vanligtvis förblir grisen hemodynamiskt stabil efter en lyckad explantation av vänster lunga, men kan behöva en lågdosinfusion av fenylefrin (dosintervall: 2-10 mg/timme) på grund av ett vasodilaterande svar på operationen. Hjärtfrekvensen bör vara cirka 100-120 slag per minut, andningsfrekvensen (RR) 8-30 för SpO 2 > 90 %, genomsnittligt artärtryck (MAP) > 60 mmHg, normoterm (38 °C) och tidalvolymer (TV) är inriktade på 5 ml/kg vid ventilation med en lunga med topptryck på 20-24 cm H2O. Vid enlungsventilation halverades ventilationsvolymerna för att skydda vänster lunga från överpumpning. Andningsfrekvensen ökades för att rikta in sig på en fysiologisk koldioxidnivå i sluttidal tid (Figur 3). Figur 3 visar således typiska hemodynamiska och ventilationsparametrar under kritiska punkter i transplantationen.
Under lungimplantat är följande resultat typiska. Den vänstra lungan kommer att ha absorberat vätska under ESLP-körningen och verkar tyngre och större än den utplanterade lungan. Av denna anledning bör mottagaren vara något större än donatorn (2-4 kg), så att bröstkorgen kan rymma den något ödematösa lungan. Lungan kommer att kräva ett lätt tryck för att föras in i bröstet genom torakotomin. Det är lättare att sätta in den nedre loben först, följt av den övre loben. Bronken är en direkt end-to-end-anastomos och bör utföras först. 4-0 prolen på en TF-nål rekommenderas. LA-manschetterna är mycket spröda men inte alltför svåra att sy på grund av vävnadens redundans och smidighet. 6-0 prolene på BV-1 nålar fungerar bra för LA-anastomoserna. PA är den sista anastomosen som utförs. Detta kärl kan lätt slitas sönder med liten dragkraft. Om den går sönder är det möjligt att öppna hjärtsäcken och flytta klämman proximalt mot frisk vävnad för sömnad. Återigen fungerar en 6-0 prolene på BV-1-nålar bra för denna anastomos.
Vid tidpunkten för reperfusion märktes följande trender. När bronkerna lossas och TV-apparaterna ökas tillbaka till 10 ml/kg kommer den vänstra lungan att börja blåsas upp. Även om målet var 10 ml/kg för tidalvolymer, uppnåddes i allmänhet 6-8 ml/kg, vilket uppnås gradvis under de första 2-3 timmarna av reperfusionen, beroende på vilket ESLP-protokoll som används och kvaliteten på den implanterade lungan. I sällsynta fall kan det finnas ett litet luftläckage, och detta kan åtgärdas med ett enkelt stygn på den främre väggen. Den bakre väggen är svårare att reparera och kräver packning. Stora ansträngningar bör göras för att undvika luftläckage från bronkialanastomosen. Vid bronkoskopi verkar den högra lungan normal och den vänstra lungan är vanligtvis ödematös. Suturlinjen inspekteras och cirka 50-100 ml klar vätska sugs ut från luftvägarna. TV:n kommer att sjunka avsevärt under sugning från 300 s till 20 s, så denna åtgärd bör utföras snabbt för att grisen ska kunna återhämta sig. Om arteriell mättnad sjunker under 90 % ska bronkoskopin avslutas och grisen får återhämta sig efter 1-2 minuters ventilation. Den första arteriella blodgasen (ABG) är vanligtvis normal eftersom den högra lungan fungerar bra när den vänstra lungan återhämtar sig.
Den proaktiva administreringen av furosemid, dextros och insulin vid tidpunkten för reperfusion tjänar till att mildra en dramatisk ökning av kalium genom intracellulär förskjutning. Kaliumet kommer förutsägbart att stiga under 60-120 minuters reperfusion (tabell 1). Tabell 1 visar ett urval av ABG under transplantation med 4 timmars reperfusion efter 12 timmars normoterm undertrycksventilation (NPV) ESLP. Cirka två till fyra skift krävs under 4 timmars reperfusion för att hålla kalium < 5 mmol/L. Om trenden är uppåtgående och uppträder som en snabb förändring mellan två gaser som dras med 30 minuters mellanrum är målet K+< 4,5 mmol/L. Skiften inkluderar 40 mg furosemid, 100 ml 25 % dextros (D25) och 10 enheter vanligt insulin administrerat som intravenös injektion via den centrala venkatetern. Ibland kommer grisen att behöva en låg dos dobutamininfusion (1,5-5 μg/kg/min) tillsammans med fenylefrin (2-10 mg/timme) efter 30-60 minuters reperfusion för att behandla ett vasoplegiskt svar som håller på att utvecklas. Det är att föredra att använda fenylefrin i denna situation uteslutande. Dobutamin kan dock vara ett användbart kompletterande inotrop för att upprätthålla ett genomsnittligt artärtryck som är större än 60 mmHg, särskilt om hjärtfrekvensen är bradykardisk.
Vid torakotomistängning och vändning av grisbenägenheten påvisas en förbättring av ventilation och hemodynamik. Modifieringen kan vara drastisk och ske under 5-10 minuter, men ibland tar svaret 1 timme. Tidalvolymerna ökar när trycket/vikten tas bort från den högra lungan och den vänstra lungan fortsätter att ventilera med förbättrad följsamhet och rekrytering. En upprepad bronkoskopi kan utföras ytterligare för att rensa luftvägarna efter en lägesändring. Under de följande 4 timmarna minskar fenylefrinbehovet, TV-apparater närmar sig målet 10 ml/kg och ABG stabiliseras (tabell 1). Som sagt, om man inriktar sig på TV-apparater på 10 ml/kg uppnås vanligtvis TV-apparater i intervallet 6–8 ml/kg (figur 3).
Vid tidpunkten för den slutliga bedömningen av isolerad vänster lunga har ett stabilt beteendemönster observerats. Grisen är mindre tolerant hemodynamiskt i ryggläge för sternotomi och kan behöva ytterligare vasopressorstöd. Undersökning av vänster lunga avslöjar varierande grader av mild hyperemi från ischemisk reperfusionsskada (IRI). Höger lunga ser normal ut. Vid klämning av höger hilum blir grisen sinustakykardisk (120-140 slag per minut) och 100 % av hjärtminutvolymen avleds till vänster lunga. Måltidvattenvolymerna minskas inte vid denna tidpunkt eftersom hela processen tar 10 minuter. Grisen förblir stabil fram till 5 minuter, men hjärtat kan utveckla kammarflimmer mellan 5-10 minuter och manuell hjärtmassage kan behövas för att fortsätta perfusionera vänster lunga. Den vänstra lungan planteras, vägs och anastomoserna inspekteras för öppenhet. Grisen dör snabbt vid tidpunkten för blodförgiftningen, vilket sammanfaller med explantationen av den tidigare transplanterade lungan.
En lyckad transplantation har förutsägbara fynd efter experimentet (tabell 1 och figur 4). Figur 4 visar typiska förändringar i P:F-förhållandet och ödembildning under transplantationsprotokollet. Vanligtvis kommer den vänstra lungan att uppleva en viktökning på cirka 35 % (+/-15 %). Kvarvarande blod i cirkulationen bidrar dock till denna vikt. PF-kvoten sjunker med cirka 100 vid reperfusion eftersom den vänstra lungan inte är omedelbart effektiv vid syresättning, men denna avvikelse förbättras under 2-3 timmar. Vid isolerad bedömning av vänster lunga efter 4 timmar kommer PF-kvoten att förbli stabil eller sjunka något. I allmänhet kommer den isolerade vänstra lunggasen efter 10 minuter att likna den slutliga gasanalysen efter 12 timmars ESLP (tabell 1). Detta är dock helt beroende av vilket ESLP-protokoll som används och omfattningen av IRI som uppstår. En misslyckad transplantation kan orsakas av koagulering av LPA, vilket resulterar i en infarkt lunga som inte syresätts. På samma sätt kan transplantationsoperationens varaktighet påverka kvaliteten på den reperfunderade lungfunktionen. En implantationsoperation bör ta mellan 30-60 minuter. Längre operationer utsätter donatorlungan för skadlig varm ischemisk tid som förvärrar ischemisk reperfusionsskada och kan förvirra resultaten av det experimentella ESLP-protokollet. Det specifika ESLP-protokollet för ett givet experiment kan ge en icke-fungerande lunga som inte syresätts efter transplantation trots uppenbara anastomoser. Sådana isolerade vänsterlunggaser kommer att vara mycket mörka i färgen (syrefattiga) med ett lågt partialtryck av syre (PaO2).
Figur 1: Schematisk bild av protokoll för transplantation av vänster lunga hos svin. Schematisk representation av 12 timmars NPV-ESLP-körning följt av vänster lungtransplantation i en Yorkshiregris. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 2: Foton av protokoll för transplantation av vänster lunga hos svin. (A) Placering av inre halsduk och gemensam halspulsåder. (B) Thorakotomi snitt. (C) Thorakotomi. (D) Vänster hemi-azygot ven. (E) Ligerad vänster hemi-azygot ven. F) Isolering av lungvener. (G) Klämd vänster förmaksmanschett, vänster bronk och vänster lungartär. (H) Vänster donatorlunga med lungvens-, bronkial- och PA-manschetter. (I) Lungartäranastomos. (J) Vänster lunga transplanterad och oklämd. (K) Lungan flyttad. (L) Bröstdränage placerat. (M) Thorakotomi stängning. (N) Bronkial anastomos. O) Gris i bukläge. (P) Sternotomi. (Q) Tillbehörloben fastspänd (höger lunga fastspänd, men visas inte). (R) Blodprov från vänster lungven togs från lungvensanastomos (blödning från tidigare punktionsställe). Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 3: Övervaknings- och ventilationsparametrar för transplantation av vänster lunga hos svin. A) Typiska parametrar för mottagaren före transplantationen. (B) Typiska parametrar vid mottagarens vänstra lungexplantat. (C) Typiska parametrar 4 timmar efter transplantation med vänster lungdonator. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 4: P:F-kvot och viktökning före och efter transplantationen. (A) PaO 2:FiO2-förhållanden under hela transplantationen. (B) Viktökning av vänster lunga under hela transplantationen efter 12 timmars NPV-ESLP. Klicka här för att se en större version av denna figur.
| Arteriell blodgaser (100 % FiO2) | In vivo Mottagare | T0 Reperfusion | T1 Reperfusion | T2 Reperfusion | T3 Reperfusion | T4 Reperfusion | Isolerad förklämning av vänster lunga | Isolerad vänster lunga efter clamp (0 min) | Isolerad vänster lunga efter clamp (1 min) | Isolerad vänster lunga efter clamp (5 min) | Isolerad vänster lunga efter clamp (10 min) |
| Blodgasvärden | |||||||||||
| pH | 7.402 | 7.327 | 7.284 | 7.402 | 7.421 | 7.479 | 7.504 | 7.399 | 7.371 | 7.423 | 7.435 |
| pCO2 (mmHg) | 47.7 | 57.3 | 56.4 | 36.9 | 35.3 | 35.6 | 34.2 | 45.6 | 48.1 | 40.6 | 36.6 |
| pO2 (mmHg) | 299 | 184 | 165 | 355 | 358 | 300 | 327 | 287 | 207 | 335 | 249 |
| Oximetriska värden | |||||||||||
| Hb (g/dl) | 11.2 | 12.5 | 11.3 | 11.6 | 10.3 | - | 17.1 | 11.7 | 13.5 | 16.3 | 13.8 |
| sO2 (%) | 100.1 | 99.2 | 99 | 99.8 | 99.8 | - | 99.9 | 100.2 | 99.7 | 99.8 | 99.9 |
| Elektrolytvärden | |||||||||||
| K+ (mmol/L) | 4.5 | 6.2 | 4.4 | 4 | 4.1 | 4.6 | 5.2 | 5.4 | 5.3 | 6.9 | 7.4 |
| Na+ (mmol/L) | 141 | 143 | 140 | 245 | 145 | 144 | 140 | 141 | 139 | 137 | 136 |
| Ca2+ (mmol/L) | 0.99 | 0.88 | 0.81 | 0.74 | 0.66 | 0.61 | 0.36 | 0.98 | 0.42 | 0.36 | 0.38 |
| Cl- (mmol/L) | 97 | 97 | 95 | 101 | 100 | 96 | 91 | 102 | 94 | 91 | 94 |
| Osm (mmol/kg) | 287 | 287.9 | 293.7 | 292.4 | 297.5 | 293.5 | 284.7 | 287.1 | 282.9 | 278.2 | 277.1 |
| Metabolitvärden | |||||||||||
| Glukos (mmol/L) | 4,2 | 2.7 | 13.4 | 2.8 | 8.3 | 5 | 5.1 | 4.9 | 4.5 | 4.6 | 4.2 |
| Laktat (mmol/L) | 1.2 | 1.3 | 3.8 | 2.5 | 1.3 | 1.2 | 1.4 | 1.8 | 1.4 | 1.9 | 2.7 |
| Syra Bas status | |||||||||||
| HCO-3 (mmol/L) | 29 | 29.1 | 25.9 | 22.4 | 22.5 | 26.1 | 26.7 | 27.6 | 27.1 | 26.1 | 24.1 |
Tabell 1: Blodgasanalys utförd efter transplantation av vänster lunga efter 12 timmars ESLP. Ca+, kalciumjon; Cl-, kloridjon; Hb, hemoglobin; HCO3-, bikarbonatjon; K+, kaliumjon; Na+, natriumjon; Osm, osmolaritet; paCO2, arteriellt partialtryck av koldioxid; PaO2, arteriellt partialtryck av syre; sO2, syremättnad; isolerad vänster lunga pre-clamp, höger hilum öppen; Isolerad vänster lunga efter clamp, 1 min efter höger hilum clamped.
Tilläggsfil 1: Checklista för kirurgisk säkerhet vid transplantation av vänster lunga. Klicka här för att ladda ner den här filen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Flera kritiska kirurgiska steg är involverade i detta protokoll, och felsökning behövs för att säkerställa framgångsrik transplantation och lungbedömning. Juvenila svinlungor är otroligt känsliga jämfört med vuxna mänskliga lungor, så den opererande kirurgen måste vara försiktig när han hanterar svinlungor. Detta gäller särskilt efter en 12 timmars ESLP-behandling eftersom organet kommer att ha tagit på sig vätskevolym och vara mottagligt för skador från överdriven manipulation. Varje otillbörligt tryck kommer att orsaka atelektas eller trauma på den experimentella lungan som kommer att påverka bedömningsresultaten. På samma sätt är kärlstrukturerna mycket känsliga hos den unga grisen. Det är viktigt att undvika vridning av PA-klämman eftersom detta kan orsaka reva eller dissektion av vävnadslagren. En reva i PA kommer att kräva att perikardiet öppnas för att komma åt en mer proximal del av vänster PA som kan anastomoseras till den implanterande lungan. En DeBakey vaskulär klämma har en låg profil som passar bra inom det kirurgiska området, men detta instrument kan orsaka skada på den känsliga PA om kirurgen inte är försiktig. Det är bra att säkra klämman på plats med hjälp av ett sidenband som snäpps fast på draperierna för att förhindra att den lossnar eller vrids. Bronkoskopi av den transplanterade lungan efter lossning av bronkialanastomosen är också kritisk. Det finns ofta vätska i donatorlungans luftvägar efter 12 timmars ESLP och transplantation. Att suga upp denna vätska är avgörande för att säkerställa optimal återhämtning av vänster lungfunktion och därmed bedömning efter 4 timmars reperfusion. Efter bronkoskopi och den första ABG har återkommit med tillfredsställande kaliumnivåer är det viktigt att sätta in ett thoraxdränage, stänga snittet och sätta grisen på mage. Grisens hemodynamik och ventilation är betydligt stabilare i bukläge, med bröstkorgen omräknad. Förhöjt kalium > 5,5 mmol/L i detta skede riskerar bradykarstillestånd och kommer att kräva akut återöppning och manuell hjärtmassage för att stödja perfusion, vilket bäst undviks. På grund av den betydande risken för hyperkalemi och bradykardistopp vid reperfusion är det viktigt att utföra seriella ABG:er som börjar vid reperfusion och återkommer var 30:e minut fram till 4 timmars blodförgiftning. ABG ger viktiga avläsningar av syresättning, partialtryck av koldioxid (PCO2), kalium och glukos. Att övervaka dessa fyra komponenter noga och behandla dem på lämpligt sätt är avgörande för ett lyckat experiment. En kontinuerlig telemetriavläsning är också avgörande för att övervaka toppade T-vågor i samband med hyperkalemi och förväntan på bradykardi. I slutskedet av experimentet är det viktigt att klämma fast höger lunghilum och accessorisk lob innan man tar de slutliga blodproverna från LA-anastomosen. Den högra hilum förser den accessoriska lungloben med blod, och den accessoriska loben dräneras intill den vänstra nedre lungvenen, ofta via en gemensam bål. Höger hilum och tillbehörlob måste klämmas fast separat för att säkerställa att ingen höger lungfunktion bidrar till sample LA-gaser genom blodblandning. Att dra ABG-provet i vänster lunga från PV-anastomosen eller strax bortom den föreslås.
Flera modifieringar har gjorts i detta protokoll tillsammans med betydande felsökning av de beskrivna metoderna. Till en början försökte man utföra implantationen via mediansternotomi; Exponeringen var dock suboptimal på grund av orienteringen av grisens PA, bronk och LA. Tillvägagångssättet utfördes framgångsrikt, men en torakotomi gjordes på efterföljande operationer för att förbättra exponeringen. Detta visade sig vara ett överlägset kirurgiskt tillvägagångssätt ur ett visualiserings- och tekniskt perspektiv. En annan viktig ändring var att utveckla och implementera en checklista för kirurgisk säkerhet/protokoll (tilläggsfil 1). Det fanns en betydande inlärningskurva för alla inblandade teammedlemmar, och dessa experiment är resurskrävande. En checklista togs fram för att vägleda utvecklingen av kommunikations- och dokumentprotokoll (tilläggsfil 1). Checklistan gjorde det möjligt att systematisera och förenkla protokollet för snabbare inlärning. Hepariniseringsprotokollet modifierades också. Två av de tio första transplantationerna som utfördes led av vänster lungischemi på grund av proppbildning i vänster PA. Inledningsvis administrerades 5000 enheter heparin IV 5 minuter före PA-avspänning och ytterligare 5000 enheter administrerades 5 minuter före PA-avspänning. Doseringsfrekvensen ökades till att omfatta 5000 enheter varje timme efter att PA lossnat, och det har inte varit några problem med blödning eller PA-koagulering sedan detta tillvägagångssätt antogs. En strategi som använder mindre heparin utvecklades för att kontrollera kostnaderna, med en dos på 5000 enheter IV heparin 5 min före PA-avspänning och 5 min före partiell PA-avspänning. Detta följs av 1000 enhet IV heparinbolusar varje timme under resten av fallet. Det fanns ingen tillgång till ACT-analys, vilket skulle vara det mest exakta sättet att få tillgång till adekvat heparinisering.
Avklämningen av PA modifierades också från en plötslig avklämning till ett tillvägagångssätt som gradvis återinför fullt flöde till den transplanterade lungan under 10 minuter. Den vänstra underlägsna PV- och LA-manschetten förblir fastspänd vid PA-lossning för att möjliggöra antegrad avluftning. Fullt PA-flöde gav ett betydande tryck på de känsliga LA-suturlinjerna och ett betydande tryck i lungkärlen, vilket verkade skadligt. Långvarig PA-lossning möjliggör antegrad avluftning av LA med en gradvis ökning av flödet i motsats till plötslig lossning och en plötslig ökning av flödet. Långvarig lossning skyddar suturlinjerna och lungendotelet från plötslig tryckökning. Även med ESLP bidrar en ischemisk förolämpning mot den transplanterade lungan och celldöd till en betydande frisättning av kalium i grisens cirkulation efter ischemisk reperfusion. För att hantera hyperkalemi proaktivt modifierades protokollet för att i förebyggande syfte skifta kalium vid tidpunkten för reperfusion genom administrering av furosemid 40 mg IV, 100 ml 25 % dextros (D25) och 10 enheter vanligt insulin. Detta bibehåller målkalium på ABG inom den första timmen av reperfusion, och grisen kan säkert proderas tidigare i experimentet, vilket hjälper till med transplantatfunktionen. Ur ett hemodynamiskt perspektiv är protokollet modifierat för att använda fenylefrin som det dominerande vasopressorstödet. Vasopressin visade sig vara mindre effektivt. En låg dos dropp av dobutamin kördes ibland för att öka hjärtminutvolymen, tillsammans med en fenylefrininfusion för att upprätthålla blodtrycket. Ändå används dobutamin sparsamt på grund av dess arytmogen egenskaper. Slutligen modifierades bedömningen av den isolerade vänstra lungan. Efter att ha klämt fast höger lunga höjd, drogs LA-gaserna initialt från LA:s kropp efter att ha lyft hjärtcephalad; dock gav gasblandning från tillbehörlobsdräneringen till LA falskt höga PaO 2-avläsningar. Nu dras proverna distalt om LA-anastomoslinjen efter att ha klämt fast höger lunga och tillbehörloben individuellt. Dessa prover tas vid 0, 1, 2, 5 och 10 minuter efter klämning av höger hilum och är en mer exakt representation av den isolerade vänstra lungfunktionen. Manuell hjärtmassage kan behövas mellan 5-10 minuter. Den senaste protokollförbättringen avser anastomoserna i den övre lungvenen (SPV). Till en början var mottagarens SPV:er översydda på grund av deras lilla kaliber och benägenhet att koagulera. Ändå drabbades donatorns övre lob ibland av trängsel eftersom kollateraldräneringen varierade och var otillräcklig mellan grisarna. För att råda bot på detta inkorporerades donatorns SPV och IPV i mottagarens IPV/LA-anastomos, vilket eliminerade alla problem med venöst dränage och lungstockning. Detta protokoll kommer att fortsätta att dra nytta av ytterligare modifieringar i takt med att erfarenheten växer.
Det finns flera begränsningar med denna metod för transplantation av vänster lunga. Modellen har endast utvärderats med en 4-timmarsperiod, som endast tar hänsyn till den transplanterade lungfunktionen under den akuta postoperativa perioden efter 12 timmars ESLP. Detta protokoll utformades med djurets återhämtning i åtanke; Det har dock ännu inte testats i den egenskapen. Den tekniska operationen kräver stor kirurgisk skicklighet och kräver en utbildad kirurg eller mycket självständig kirurgisk praktikant för att utföra. Det finns många möjligheter för dödliga fel att inträffa som skulle äventyra hela experimentet, och korrekt kirurgisk teknik behövs för att undvika eller korrigera sådana faror. Den enda riktiga bedömningen av den transplanterade lungan sker i slutet av reperfusionen. Den naturliga högra lungan är kapabel att tillgodose grisens syrebehov och producera tillfredsställande ABG. När den högra lungan är helt fastklämd vid hilum, hindras den från att ta emot färskt syre, färsk syrefattig blodtillförsel och syresatt bloddränering. Detta är ett avgörande ögonblick för att bestämma den transplanterade vänstra lungfunktionen eftersom 100 % av hjärtminutvolymen omdirigeras till den transplanterade lungan, som blir ensam ansvarig för systemisk syresättning.
Det finns flera fördelar med denna metod när det gäller befintliga/alternativa metoder. Efter att ha granskat litteraturen12,13,14,15 är denna metod den mest detaljerade och reproducerbara efter en initial inlärningskurva på 1 eller 2 grisar i händerna på en junior hjärtkirurgpraktikant eller fullt kvalificerad kirurg. Operationen är enkel; Grisens hemodynamik (inklusive dess känslighet för dödliga arytmier) skapar dock en inlärningsmöjlighet för dem som är vana vid att operera vuxna människor, som är mer robusta ur ett kardiopulmonellt perspektiv. Metoderna för isolerad funktionsbedömning av vänster lunga är, även om de är korta, enkla att utföra och mycket reproducerbara. I synnerhet ger denna metod mer information om anestesihantering än vad som för närvarande finns tillgängligt i litteraturen.
In vivo-transplantation är avgörande för ESLP- och lungtransplantationsforskning. ESLP är den mest avgörande utvecklingen inom lungtransplantation sedan introduktionen av läkemedel mot avstötning, och vissa centra har redan dragit nytta av den ökade organutnyttjandegraden som denna teknik ger 6,7,8,9,10,11,12. Ytterligare framsteg inom detta forskningsområde behövs för att minska dödligheten på väntelistan och öka tillgängligheten till ESLP-plattformar. In vitro-analys med ESLP drar nytta av in vivo-bedömning och bekräftelse av en stordjursmodell. Stora djurmodeller som bekräftar in vitro-fynd är ofta nödvändiga för godkännande av kliniska prövningar för utvecklingslaboratorier. Denna metod ger en tillförlitlig och relativt enkel transplantationsmetod för laboratorier som utför ESLP-forskning.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
DHF har patent på Ex situ organperfusionsteknik och metoder. DHF och JN är grundare och större aktieägare i Tevosol, Inc.
Acknowledgments
Forskningen finansieras på uppdrag av Stiftelsen Akademiska sjukhuset.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| ABL 800 FLEX Blood Gas Analyzer | Radiometer | 989-963 | |
| Adult-Pediatric Electrostatic Filter HME - Small | Covidien | 352/5877 | |
| Allison Lung Retractor | Pilling | 341679 | |
| Arterial Filter | SORIN GROUP | 01706/03 | |
| Backhaus Towel Clamp | Pilling | 454300 | |
| Bovine Serum Albumin | MP biomedicals | 218057791 | |
| Biomedicus Pump | Maquet | BPX-80 | |
| Bronchoscope | |||
| Cable Ties – White 12” | HUASU International | HS4830001 | |
| Calcium Chloride | Fisher Scientific | C69-500G | |
| Cooley Sternal Retractor | Pilling | 341162 | |
| CUSHING Gutschdressing Forceps | Pilling | 466200 | |
| Debakey-Metzenbaum Dissecting | Pilling | 342202 | |
| Scissors | Pilling | 342202 | |
| DeBakey Peripheral Vascular Clamp | Pilling | 353535 | |
| Debakey Straight Vascular Tissue Forceps | Pilling | 351808 | |
| D-glucose | Sigma-Aldrich | G5767-500G | |
| Drop sucker | |||
| Endotracheal Tube 9.0mm CUFD | Mallinckrodt | 9590E | |
| Flow Transducer | BIO-PROBE | TX 40 | |
| Infusion Pump | Baxter | AS50 | |
| Inspire 7 M Hollow Fiber Membrane Oxygenator | SORIN GROUP | K190690 | |
| Intercept Tubing Connector 3/8" x 1/2" | Medtronic | 6013 | |
| Intercept Tubing 1/4" x 1/16" x 8' | Medtronic | 3108 | |
| Intercept Tubing 3/8" x 3/32" x 6' | Medtronic | 3506 | |
| Laryngoscope | N/A | N/A | Custom-made with 10-inch blade |
| Metzenbaum Dissecting Scissors | Pilling | 460420 | |
| Medical Carbon Dioxide Tank | Praxair | 5823115 | |
| Medical Oxygen Tank | Praxair | 2014408 | |
| Medical Nitrogen Tank | Praxair | NI M-K | |
| Mosquito Clamp | Pilling | 181816 | |
| Harken Auricle Clamp | |||
| Organ Chamber | Tevosol | ||
| PlasmaLyte A | Baxter | TB2544 | |
| Poole Suction Tube | Pilling | 162212 | |
| Potassium Phosphate | Fischer Scientific | P285-500G | |
| PERFADEX Plus | XVIVO | 19811 | |
| Satinsky Clamp | Pilling | 354002 | |
| Scale | TANITA | KD4063611 | |
| Silicon Support Membrane | Tevosol | ||
| Sodium Bicarbonate | Sigma-Aldrich | 792519-1KG | |
| Sodium Chloride 0.9% | Baxter | JB1324 | |
| Sorin XTRA Cell Saver | SORIN GROUP | 75221 | |
| Sternal Saw | Stryker | 6207 | |
| Surgical Electrocautery Device | Kls Martin | ME411 | |
| TruWave Pressure Transducer | Edwards | VSYPX272 | |
| Two-Lumen Central Venous Catheter 7fr X2 | Arrowg+ard | CS-12702-E | |
| Vorse Tubing Clamp | Pilling | 351377 | |
| Willauer-Deaver Retractor | Pilling | 341720 | |
| Yankauer Suction Tube | Pilling | 162300 | |
| 0 ETHIBOND Green 1X36" Endo Loop 0 | ETHICON | D8573 | |
| 0 PDS II CP-1 2x27” | ETHICON | Z467H | |
| 1 VICRYL MO-4 1x18” | ETHICON | J702D | |
| 2-0 SILK Black 12" x 18" Strands | ETHICON | SA77G | |
| 4-0 PROLENE Blue TF 1x24” | ETHICON | 8204H | |
| 6-0 PROLENE Blue BV 2x30” | ETHICON | M8776 | |
| 21-Gauge Needle |
References
- Chambers, D. C., et al. The international thoracic organ transplant registry of the international society for heart and lung transplantation: Thirty-fifth adult lung and heart-lung transplant report-2018; focus theme: Multiorgan transplantation. The Journal of Heart and Lung Transplantation: The Official Publication of the International Society for Heart Transplantation. 37 (10), 1169-1183 (2018).
- Valapour, M., et al. OPTN/SRTR 2017 annual data report: Lung. American Journal of Transplantation: Official Journal of the American Society of Transplantation and the American Society of Transplant Surgeons. 19, Suppl 2 404-484 (2019).
- Klein, A. S., et al. Organ donation and utilization in the united states, 1999-2008. American Journal of Transplantation: Official Journal of the American Society of Transplantation and the American Society of Transplant Surgeons. 10 (4), Pt 2 973-986 (2010).
- Kotecha, S., et al. Continued successful evolution of extended criteria donor lungs for transplantation. The Annals of Thoracic Surgery. 104 (5), 1702-1709 (2017).
- Singh, E., et al. Sequence of refusals for donor quality, organ utilization, and survival after lung transplantation. The Journal of Heart and Lung Transplantation. 38 (1), 35-42 (2019).
- Cypel, M., et al. Normothermic ex vivo lung perfusion in clinical lung transplantation. The New England Journal of Medicine. 364 (15), 1431-1440 (2011).
- Wallinder, A., et al. Early results in transplantation of initially rejected donor lungs after ex vivo lung perfusion: A case-control study. European Journal of Cardio-Thoracic Surgery: Official Journal of the European Association for Cardio-Thoracic Surgery. 45 (1), 40-44 (2014).
- Sage, E., et al. Lung transplantation from initially rejected donors after ex vivo lung reconditioning: The french experience. European Journal of Cardio-Thoracic Surgery: Official Journal of the European Association for Cardio-Thoracic Surgery. 46 (5), 794-799 (2014).
- Valenza, F., et al. Extracorporeal lung perfusion and ventilation to improve donor lung function and increase the number of organs available for transplantation. Transplantation Proceedings. 44 (7), 1826-1829 (2012).
- Fildes, J. E., et al. Clinical outcome of patients transplanted with marginal donor lungs via ex vivo lung perfusion compared to standard lung transplantation. Transplantation. 99 (5), 1078-1083 (2015).
- Cypel, M., et al. Experience with the first 50 ex vivo lung perfusions in clinical transplantation. The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 144 (5), 1200-1206 (2012).
- Clark, S. C., et al. A new porcine model of reperfusion injury after lung transplantation. Laboratory Animals. 33, 135-142 (1999).
- Karimi, A., et al. Technical pearls for swine lung transplantation. Journal of Surgical Research. 171, 107-111 (2011).
- Kruger, M., et al. Porcine pulmonary auto-transplantation for ex vivo therapy as a model for new treatment strategies. Interactive CardioVascular and Thoracic Surgery. 23, 358-366 (2016).
- Mariscal, A., et al. Pig lung transplant survival model. Nature Protocols. 13, 1814-1828 (2018).
- Aboelnazar, N. S., et al. Negative pressure ventilation decreases inflammation and lung edema during normothermic ex vivo lung perfusion. The Journal of Heart and Lung Transplantation: The Official Publication of the International Society for Heart Transplantation. 37 (4), 520-530 (2018).
