Un test de chimiotaxie amélioré pour l’identification rapide des chimioattractifs rhizobactériens dans les exsudats racinaires

Huiwen Jiao; Cheng Lyu; Weihui Xu; Wenjing Chen; Yunlong Hu; Zhigang Wang

doi:10.3791/63249

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Article de méthode

Un test de chimiotaxie amélioré pour l’identification rapide des chimioattractifs rhizobactériens dans les exsudats racinaires

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DOI :

10.3791/63249

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25 mars 2022

Huiwen Jiao¹^,² , Cheng Lyu³ , Weihui Xu¹^,² , Wenjing Chen¹^,² , Yunlong Hu¹^,² , Zhigang Wang¹^,²

¹School of Life Science and Agriculture Forestry, Qiqihar University, ²Heilongjiang Provincial Technology Innovation Center of Agromicrobial Preparation Industrialization, ³School of Foreign Languages, Qiqihar University

Dans cet article

Résumé

Ici, nous présentons un protocole de test de chimiotaxie amélioré. L’objectif de ce protocole est de réduire les étapes et les coûts des méthodes traditionnelles de chimiotaxie bactérienne et de servir de ressource précieuse pour comprendre les interactions plantes-microbes.

Résumé

L’identification de la chimiotaxie est très importante pour la recherche et l’application des bactéries favorisant la croissance de la rhizosphère. Nous avons établi une méthode simple pour identifier rapidement les chimioattractifs qui pourraient induire le mouvement chimiotactique des bactéries favorisant la croissance de la rhizosphère sur des lames de verre stériles par des étapes simples. Une solution bactérienne (_OD600 = 0,5) et une solution aqueuse chimioattractante stérile ont été ajoutées goutte à goutte sur la lame de verre à un intervalle de 1 cm. Une boucle d’inoculation a été utilisée pour connecter la solution aqueuse chimioattractante à la solution bactérienne. La glissière a été maintenue à température ambiante pendant 20 minutes sur le banc propre. Enfin, la solution aqueuse chimioattractante a été collectée pour le comptage bactérien et l’observation microscopique. Dans cette étude, grâce à de multiples comparaisons de résultats expérimentaux, la méthode a surmonté de multiples lacunes des méthodes traditionnelles de chimiotaxie bactérienne. La méthode a réduit l’erreur de comptage des plaques et raccourci le cycle expérimental. Pour l’identification des substances chimioattractantes, cette nouvelle méthode permet d’économiser 2-3 jours par rapport à la méthode traditionnelle. De plus, cette méthode permet à tout chercheur de compléter systématiquement une expérience de chimiotaxie bactérienne en 1-2 jours. Le protocole peut être considéré comme une ressource précieuse pour comprendre les interactions plantes-microbes.

Introduction

La chimiotaxie est importante pour la colonisation des rhizobactéries favorisant la croissance des plantes (PGPR) sur les racines et pour comprendre les interactions plantes-microbes1. Une classe de composés de faible poids moléculaire (chimioattractifs) dans les exsudats racinaires des plantes induit le mouvement chimiotactique du PGPR vers la ^{rhizosphère2}. L’acide malique, l’acide citrique et d’autres composants des exsudats racinaires stimulent la chimiotaxie des souches de Bacillus3. Par exemple, le glucose, l’acide citrique et l’acide fumarique dans les exsudats de racines de maïs re....