Summary
Aort kapak darlığının (AVS) altında yatan patolojik mekanizmaları anlamak ve terapötik girişimlerin etkinliğini değerlendirmek için uygun bir hayvan modeline ihtiyaç vardır. Mevcut protokol, in vivo olarak doğrudan balon yaralanması yoluyla AVS tavşan modelini geliştirmek için yeni bir prosedürü açıklamaktadır.
Abstract
Hayvan modelleri, hastalıklı insan aort kapaklarının güvenilir kaynaklarına erişim eksikliği nedeniyle aort kapak darlığının (AVS) altında yatan patolojik mekanizmaları anlamak için önemli bir araç olarak ortaya çıkmaktadır. Çeşitli hayvan modelleri arasında, AVS tavşan modelleri, büyük hayvan çalışmalarında en yaygın kullanılanlardan biridir. Bununla birlikte, geleneksel AVS tavşan modelleri, aort kapağında önemli darlıklara neden olmak için uzun süreli bir diyet takviyesi ve genetik manipülasyon gerektirir ve bu da deneysel çalışmalarda kullanımlarını sınırlar. Bu sınırlamaları ele almak için, aort kapağına doğrudan balon yaralanması ile stenozun indüklendiği yeni bir AVS tavşan modeli önerilmiştir. Mevcut protokol, hazırlık, cerrahi prosedür ve ameliyat sonrası bakım için adım adım prosedürlerle Yeni Zelanda beyaz (NZW) tavşanlarında AVS'yi indüklemek için başarılı bir tekniği tanımlamaktadır. Bu basit ve tekrarlanabilir model, AVS'nin başlangıcını ve ilerlemesini incelemek için umut verici bir yaklaşım sunar ve hastalığın altında yatan patolojik mekanizmaları araştırmak için değerli bir araç sağlar.
Introduction
Aort darlığının (AS) ilerlemesi ile ilişkili hastalıklı insan aort kapaklarının güvenilir kaynaklarına erişim eksikliği nedeniyle, uygun hayvan modellerinin kullanılmasının aort kapak darlığının (AVS) altında yatan patolojik mekanizmaların daha iyi anlaşılmasına katkıda bulunabileceği giderek daha fazla kabul görmektedir. AVS'yi incelemek için çeşitli hayvan modelleri arasında, tavşanlar en yaygın kullanılan büyük hayvan AVS modellerinden biridir ve AVS tavşan modeli, kolesterol / D2 vitamini takviyesi veya genetik manipülasyon 1,2,3,4 yoluyla indüklenir.
Tavşan AVS modelleri, AVS'nin gelişimi ve ilerlemesi hakkında önemli bilgiler sağlamış olsa da, ön deneylerimizde görüldüğü gibi, AVS'yi tutarlı ve tekrarlanabilir bir şekilde indüklemek hala zor olmaya devam etmektedir.
Diyete bağlı ve genetik olarak duyarlı hayvan modellerine ek olarak, farelerde doğrudan mekanik yaralanma yoluyla yeni bir AVS modeli oluşturulmuştur 5,6. Mekanik yaralanma modeli, aort darlığını başarılı bir şekilde indükler ve vahşi tip farelerde basit ve tekrarlanabilir bir AVS modelini temsil eder. Bildiğimiz kadarıyla, tavşan modellerinde mekanik bir yaralanmanın aort kapağı üzerindeki etkilerini inceleyen daha önce yapılmış bir çalışma yoktur. Bu nedenle, bu çalışma, aort kapağına doğrudan balon yaralanması yoluyla erkek Yeni Zelanda beyaz tavşanlarında AVS'yi indüklemek için yeni bir prosedür sunmaktadır ve bu da kapak aort darlığının durumunu doğru bir şekilde taklit edebilir. Bu protokol, tekrarlanabilir AVS tavşan modellerini indüklemek için yararlı olan preparat, cerrahi prosedür ve ameliyat sonrası bakımın adım adım açıklamalarını içerir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Tüm hayvan araştırma prosedürleri, Kore Katolik Üniversitesi Tıp Fakültesi'ndeki Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi (IACUC) tarafından sağlanan Laboratuvar Hayvanları Refahı Yasası, Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Kılavuzu ve Hayvan Deneyleri için Kılavuz ve Politikalar uyarınca onaylanmış ve gerçekleştirilmiştir (onay numarası: CUMC-2021-0176-05). Bu çalışmada, standart koşullar altında ayrı kafeslerde tutulan 3.5-4.0 kg ağırlığındaki 3 aylık erkek Yeni Zelanda beyaz (NZW) tavşanları kullanılmıştır. Tavşanlar ya normal bir diyetle ya da 50.000 U D2 vitamini ile desteklenmiş% 0.5 kolesterolle zenginleştirilmiş bir diyetle beslendi (Malzeme Tablosuna bakınız). AVS tavşan modelinin indüksiyonu için deneysel tasarım ve analiz yöntemleri Şekil 1'de gösterilmektedir.
1. Operasyon için hazırlık
- Operasyonun başında tüm tıbbi ve cerrahi aletlerin ( Malzeme Tablosuna bakınız) sterilize edildiğinden emin olun.
- Aşağıdaki adımları izleyerek dilatasyon balonu kateter setini hazırlayın.
- Tuzlu su ve piyasada bulunan kontrast madde (1:1) karışımı ile doldurulmuş in-deflasyon cihazını balon kateterin luer kilit kısmına bağlayın (bkz.
- Balonu şişirme solüsyonu ile doldurun ve balon kateterindeki havayı alın.
NOT: Bu çalışma için, şişirme çözeltisi %0.9 salin ile %30 iyodiksanolden oluşmuştur (bkz. - Balon lümenini şişirme solüsyonuyla temizleyerek uygun balon şişirmeyi doğrulayın.
2. Aort kapak yaralanması için cerrahi prosedür
- Hayvanı uyuşturmak için intramüsküler tiletamin ve zolazepam (15 mg / kg) ve ksilazin (5 mg / kg) enjeksiyonu uygulayın (Malzeme Tablosuna bakınız).
NOT: Anestezi uygulanmadan önce, tavşanlara anestezik öncesi antikolinerjik ajan olarak deri altı glikopirrolat enjeksiyonu (0.05 mg / kg) ile ön muamele edildi. Yeterli anestezi seviyesi, ayak parmağı sıkışmasına yanıt eksikliği ve sabit bir solunum hızı dahil olmak üzere bir dizi kriter ile belirlendi. - Marjinal auriküler veline 24 G intravenöz (IV) kateter yerleştirin ve heparinize salin (100 U / kg heparin) ile bir infüzyon seti bağlayın.
- Oksijen doygunluk sinyali (SpO2), sıcaklık ve kan basıncı gibi hayati belirtileri sürekli olarak izlemek için tavşanı çok parametreli bir veteriner monitörüne (Malzeme Tablosuna bakın) bağlayın.
NOT: SpO 2 izleme için SpO2 sensörünü tavşanın diline takın. Sıcaklık izleme için, probu tavşanın rektumuna yerleştirin. Kan basıncı izleme için manşeti ön ayağa yerleştirin. - Tavşanı C kollu floroskopi ile donatılmış bir ameliyat masasına sırtüstü pozisyonda yerleştirin (bkz . Malzeme Tablosu) ve hayvan saç kesme makineleri kullanarak ventral boyun bölgesindeki tüyleri alın (Şekil 2A).
- Kesi bölgesini iyotla sterilize edin ve tavşanı cerrahi havlularla örtün.
- Tavşanın kalbini C kolu görüntüsünün ortasına yerleştirin.
NOT: Tüm araştırmacılar, C-kol kılavuzluğundaki ameliyatı gerçekleştirirken radyasyona maruz kalmayı azaltmak için termolüminesan dozimetreler (TLD'ler) takılı koruyucu giysiler giymelidir.- C kolunu açın ve kardiyak görüntüleme için floroskopik modu seçin.
- Kalbin görüntüleme alanının merkezinde olduğundan emin olmak için tavşanın konumunu ayarlayın.
- Boyun derisinde yaklaşık 3 cm'lik uzunlamasına bir kesi yapın ve fasya ve yağ dokusunu kesmek için cerrahi makas kullanın.
- LCCA'nın yaklaşık 3-3.5 cm'si açığa çıkana kadar kasları dikkatlice ayırarak sol ana karotis arteri (LCCA) ortaya çıkarın (Şekil 2B).
- Kan akışını durdurmak için LCCA'yı açıkta kalan LCCA'nın üstünde ve sonunda 3-0 ipek sütür ( Malzeme Tablosuna bakınız) ile bağlayın.
- LCCA'ya 22 G IV kateter yerleştirin ve IV kateter aracılığıyla sol ventriküle (LV) bir kılavuz tel (0.016 inç, Malzeme Tablosuna bakınız) sokarak kateterin ucunun C-kolunun görüntüleme alanına düzgün bir şekilde yerleştirildiğinden emin olun.
NOT: IV kateteri yerleştirirken, kateterin ilerlemesine izin vermek için aort kapağına inerken ligatür sütürünü dikkatlice gevşetin. - Kılavuz telden ayrılarak IV kateteri geri çekin ve balon kateteri yerleştirmek için kılavuz telin üzerine LCCA'ya bir 4-F kılıf (bkz. Malzeme Tablosu) yerleştirin (Şekil 2C).
NOT: IV kateteri kılıfla değiştirdikten sonra, sıkışan hava kılıf cihazından çıkarılmalıdır. - 8 mm'lik balon kateteri kılavuz telin üzerinden C-kollu floroskopi kılavuzluğunda aort kapağına dikkatlice yerleştirin (Şekil 2D).
- Balon kateter ucunu aort kapağının yaklaşık 1-2 cm distaline yerleştirin ve şişirme solüsyonunu 6 atm'de bir basınç şişirici ile temizleyerek balonu şişirin.
- Balonu LV tepesine ilerletin ve LV çıkışına geri çekin. Bu işlemi beş kez tekrarlayın ve ardından balonu söndürün (Şekil 2E, F).
- Yeterli valf yaralanmasını sağlamak için 2.8-2.9 adımlarını üç kez tekrarlayın.
- Balon kateterini ve kılavuz teli geri çekin. Kılıfı LCCA'dan yavaşça çıkarın ve LCCA'yı hemen aort kapağına inerken dikişle bağlayın.
- Kan pıhtılarını gidermek için kesi bölgesini tuzlu su ile temizleyin ve delinmiş bölgeyi arteriyel kanama açısından inceleyin.
- Kas ve cildi 3-0 emilmeyen bir dikişle kapatın ve yaranın her tarafını iyot ile sterilize edin.
3. Ameliyat sonrası bakım
- İzleme yamalarını ve klipslerini çıkarın ve tavşanı yoğun bakım kuvözünde tutun.
NOT: Ameliyattan sonra tavşanlar yoğun bakım kuvözünde 1 gün boyunca yakından izlendi ve daha sonra bir ev kafesine taşındı. - Ameliyat sonrası ağrıyı 5 mg / kg tramadol ve 3 mg / kg ketoprofen ile yönetin ve deri altı enjeksiyon yoluyla 3 gün boyunca günde iki kez antibiyotik (4 mg / kg gentamisin) uygulayın (bkz.
NOT: Ameliyat sonrası ağrı yönetimi veterinerlik ve IACUC yönergelerine uymalıdır (ör., opioid, NSAID, lokal anestezik veya kombinasyon). - 8 hafta boyunca 50.000 U D2 vitamini (HC + VitD2) ile% 0.5 kolesterolle zenginleştirilmiş bir diyet besleyin.
4. Ekokardiyografi
- 8 haftalık balon yaralanmasından sonra, adım 2.1'de açıklanan prosedürün aynısını kullanarak tavşanı uyuşturun.
- İki boyutlu transtorasik görünümleri kullanarak aort kapaklarını görselleştirin ve kısa eksenli ve uzun eksenli görünümlerde M modu görüntüleri kaydedin.
- Tavşanı bir yankı masasına sırtüstü pozisyonda yerleştirin.
- Göğüs makası ve tüy dökücü krem kullanarak göğüs bölgesini tıraş edin.
- Ultrason dönüştürücü jeli (Malzeme Tablosuna bakınız) göğsünüze uygulayın.
- Aort kapağının parasternal uzun eksen görünümünü ve parasternal kısa eksen görünümünü elde etmek için dönüştürücüyü ayarlayın.
- Aort kapağının görüntülerini hem uzun eksen hem de kısa eksen görünümlerinde kaydetmek için M modu görüntülemeyi kullanın ve görüntüleri daha sonra analiz etmek üzere kaydedin.
5. Histolojik analiz
- Ekokardiyografiden sonra, intravenöz potasyum klorür (KCl, 3 g / 20 mL, 1 mL) enjeksiyonu uygulayarak tavşanı ötenazi yapın.
- Göğüs boşluğunu açın, kalbi çıkan aort7 ile toplayın ve fosfat tamponlu salin (PBS) içinde buzun üzerine yerleştirin.
- Kalbi hemen% 4'lük bir paraformaldehit (PFA) çözeltisine daldırın ve bir parafin bloğuna gömün (Malzeme Tablosuna bakınız).
- Parafine gömülü kalp bloğunu bir mikrotom kullanarak 4 μm kalınlığında bölümlere ayırın ve kollajen birikimini ve kapak kalsifikasyonunu değerlendirmek için bölümleri sırasıyla Masson'un trikrom (MT), Alizarin Kırmızısı ve von Kossa (Malzeme Tablosuna bakınız) ile boyayın 8,9.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Aort kapak yaralanmasının neden olduğu tavşan AVS modeli
Tavşan AVS modelini indüklemek için, bu çalışma için 3.5-4.0 kg ağırlığındaki erkek NZW tavşanları kullanıldı. Adım 2'de (Şekil 2) açıklanan cerrahi prosedürlere göre, AVS modeli, mekanik aort kapak dejenerasyonu ve kalsifikasyonu ile sonuçlanan aort kapak yaralanması ile oluşturulmuştur. Kontrol grubu,% 0.5 kolesterolle zenginleştirilmiş bir diyet (yüksek kolesterol, HC) ve diyete bağlı AVS modeli olarak bilinen 50.000 U D2 vitamini (VitD2) ile beslenen tavşanları içeriyordu.
Aort kapağının değerlendirilmesi
Aort kapağındaki yapısal değişiklikleri değerlendirmek için, broşür hareketliliği ve kalınlığı ekokardiyografik kısa eksen ve uzun eksen görünümleri kullanılarak değerlendirildi. Aort kapak yaralanmasından 8 hafta sonra, ekokardiyografi, HC + VitD2 diyeti ile beslenen yaralı tavşanlarda, vahşi tip (WT) tavşanlar ve kapak yaralanması olmadan HC + VitD2 diyeti ile beslenen tavşanlar da dahil olmak üzere kontrol tavşanlarına kıyasla tüberküllerin kalınlaştığını ve hareketin kısıtlandığını ortaya koydu (Şekil 3).
Histolojik analiz
Aort kapağındaki histolojik değişiklikleri değerlendirmek için, tavşanlar aort kapak yaralanmasından 8 hafta sonra sakrifiye edildi ve eksize edilen kalplerle histolojik bir analiz yapıldı (Şekil 4). Şekil 4A'da gösterildiği gibi, Masson's trikrom (MT) ile boyanan aort kapağı, WT ve HC + VitD2 diyetinin neden olduğu gruplara kıyasla yaralı grupta aort kapak tüberküllerinin kalınlığının arttığını gösterdi. Ek olarak, kapak kalsiyum birikintilerinin derecesini karşılaştırmak için, Şekil 4B,C'de gösterildiği gibi Alizarin Kırmızısı boyaması ve von Kossa boyaması yapıldı. HC + VitD2 diyetine bağlı grupta kapak yaprakçıklarında ihmal edilebilir kalsiyum birikintileri görülürken, balonla yaralanan grupta önemli kalsifik birikintiler gözlendi.
Şekil 1: Deneysel zaman çizelgesinin şeması. Erkek Yeni Zelanda beyaz (NZW) tavşanlarında (3.5-4.0 kg) aort kapağında doğrudan balon yaralanması ile aort kapak darlığının bir tavşan modeli oluşturuldu, ardından yüksek kolesterol / D2 vitamini diyeti (% 0.5 kolesterolle zenginleştirilmiş diyet + 50.000 U D2 vitamini; HC + VitD2) 8 hafta boyunca. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 2: Ameliyat prosedürünün ana hatları. (A) Anestezi altında, tavşan ameliyat masasına sırtüstü pozisyonda yerleştirildi. (B) Sol ana karotis arter (LCCA), cilt ve kaslar dikkatlice ayrılarak ortaya çıkarıldı. (C) 4-F kılıf ve kılavuz tel LCCA'ya yerleştirildi. Kırmızı ok: kılıf; Sarı ok: kılavuz tel. (D) Balon kateter, kılavuz tel üzerinden aort kapağına sokuldu. Kırmızı ok: balon kateter. (E,F) Balon kateter C-kollu floroskopi eşliğinde şişirildi ve sol ventrikül apeksi ile çıkışı arasında ilerletildi/geri çekildi. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 3: Aort kapak darlığının ekokardiyografik analizi. Ekokardiyogramda uzun eksen (üst paneller) ve kısa eksen (orta paneller) görüntülerinin temsili görüntüleri ve WT (n = 3), HC + VitD2 diyeti (n = 3) ve kapak yaralanması (n = 3) ile HC + VitD2 diyetinde kapak darlığı derecesinin (alt paneller) şematik diyagramı (n = 3) grupları. Noktalı daire: aort kapağı; Kırmızı ok ucu: kalınlaştırılmış broşürler. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 4: Aort kapaklarının histolojik analizi. (A) Masson'un trikrom, (B) Alizarin Kırmızısı ve (C) von Kossa'nın WT, HC + VitD2 diyeti ve HC + VitD2 diyeti ile kapak yaralanması gruplarında boyanmasının temsili görüntüleri. Mavi ok ucu: kalınlaştırılmış broşürler; Kırmızı ok ucu: kireçlenmiş broşürler. Ölçek çubukları = 1 mm. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Hayvan AVS modelleri, AVS'nin başlatılması ve ilerlemesi de dahil olmak üzere AVS'nin patolojik yönlerini incelemek için yaygın olarak kullanılır. Bu protokol, aort kapağına doğrudan balon yaralanması ile indüklenen yeni bir tavşan AVS modelini tanıtmaktadır. Bu çalışmada, aort kapak yaralanması modelinde belirgin yaprakçık kalınlaşması ve kalsifikasyon görülmüştür. Diyet takviyesi ile indüklenen hafif AVS modeliyle karşılaştırıldığında, doğrudan balon yaralanması modelindeki aort kapağı seçici olarak yaralandı, bu da kalınlaşmış tüberküllere ve kısıtlı hareketin yanı sıra kalınlaşmış ve kalsifiye yaprakçıklara yol açtı. Bu sonuçlar AVS10,11'in genel özellikleri ile tutarlıdır.
Diyet takviyesi ve genetik manipülasyon ile indüklenen yaygın olarak kullanılan AVS tavşan modellerinin deneysel çalışmalarda çeşitli sınırlamaları vardır12,13,14. Tavşan modellerinde önemli darlıkların gelişmesi genellikle farelere göre daha uzun bir beslenme süresi gerektirir ve bu da önemli iltihaplanma ve karaciğer toksisitesine neden olabilir. Ek olarak, bu modellerde hiperkolesterolemik diyetler ve VitD2 gibi diyet takviyesi her zaman tutarlı ve önemli kapak darlığına neden olmaz. Buna karşılık, bu protokolde tarif edilen doğrudan balon yaralanması, ameliyat edilen aort kapak broşürlerinde mekanik hasara neden olabilir, böylece spesifik olarak tekrarlanabilir bir yeniden şekillenme tepkisine neden olabilir. Ayrıca, bu protokol, yaralanma yoğunluğunu ayarlayarak AVS'nin ciddiyetinin manipüle edilmesine izin verir. Bildiğimiz kadarıyla, tavşan modellerinde mekanik yaralanmanın aort kapağı üzerindeki etkisi ilk kez in vivo olarak doğrulanmıştır.
Bu avantajlara rağmen, bu protokolün tutarlı ve tekrarlanabilir AVS modellerini indüklemede sınırlamaları vardır. İlk olarak, cerrahi prosedür hayvan modelleriyle çok fazla cerrahi deneyim gerektirir. İkinci olarak, yaralanma yoğunluğu ve diyet takviyesi süresi gibi AVS şiddetini optimize etmek için ayrıntılı koşullar oluşturmak gerekir. Üçüncüsü, bu protokol, balon yaralanmasının tek başına aort kapak darlığı üzerindeki etkileri hakkında bilgi sağlama yeteneği bakımından sınırlıdır, çünkü bu çalışma sadece kolesterol açısından zenginleştirilmiş bir diyetle birlikte balon yaralanmasının etkilerini araştırmıştır. Kolesterol açısından zenginleştirilmiş bir diyet olmadan balon yaralanması alan bir grubu dahil etmek bilgilendirici olacaktır ve gelecekteki çalışmalar için bunu dikkate alacağız. Bununla birlikte, bu çalışma, tavşan modelinde aort kapağında doğrudan balon yaralanması için yeni bir protokol göstermektedir, bu da AVS'nin altında yatan patolojik mekanizmaları incelemek için yararlıdır ve potansiyel olarak terapötik seçenekler geliştirmek için kullanılabilir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Yazarların bu çalışma ile beyan edecekleri herhangi bir çıkar çatışması yoktur.
Acknowledgments
Bu çalışma, Kore hükümeti (MSIT) (No. 2020R1A4A3079570), Eğitim Bakanlığı (No. 2021R1I1A1A01051425) ve Kore Cumhuriyeti Ticaret, Sanayi ve Enerji Bakanlığı tarafından finanse edilen Endüstriyel Stratejik Teknoloji Geliştirme Programı (No. 20014873) tarafından finanse edilen Kore Ulusal Araştırma Vakfı (NRF) hibesi ile desteklenmiştir.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 3-0 Silk suture | AILEE | SK312 | |
| 4% paraformaldehyde(PFA) | Intron | IBS-BP031-2 | |
| Alizarin red Solution | Millpore | TMS-008-C | |
| ASAHI SION BLUE | ASAHI | Guide wire | |
| Back Table Cover | Yuhan kimberly | 80101-30 | |
| Balloon In-deflation Device | Demax Medical | DID30s | |
| Bionet Veterinary monitor | BIONET | BM3 VET | |
| C-Arm | SIEMENS Healthcare GmbH | Cios alpha | |
| Certified Rabbit Diet | Purina | 5322 | 4.7% Hydrogenated Coconut Oil, 0.5% Cholesterol, & 1% Molasse |
| Curadle Smart Incubator | Autoelex | CS-CV206 | Intensive Care Unit (ICU) |
| Ergocalciferol | Sigma-aldrich | E5750 | Vitamin D2 |
| Fechtner conjunctiva forceps titanium | WORLD PRECISSION Instrument | WP1820 | |
| Forceps | HEBU | HB203 | |
| Gentamicin | Shin Poong | ||
| Glycopyrrolate | SamChunDang | ||
| Greenflex NS | DAI HAN PHARM | Normal saline 500 mL | |
| Hematoxylin solution | Sigma-aldrich | HT1079-1 SET | |
| Heparin | JW pharmaceutical | 25,000 U | |
| Infusion set for single use | SWOON MEDICAL | ||
| Iodine | Green pharmaceutical | ||
| Iodixanol | GE Healthcare | Visipaque | Inflation solution (contrast agent) |
| IV catheter 22 G | BD | 382423 | |
| IV catheter 24 G | BD | 382412 | |
| Ketoprofen | SamChunDang | ||
| Luer-Lok syringe 10 mL | Becton Dickinson Medical | ||
| Luer-Lok syringe 3 mL | Becton Dickinson Medical | ||
| Microscope | OLYMPUS | SZ61 | |
| Microtome | ThermoFisher Scientific | HM 325 | |
| MT stain kit | Sigma-aldrich | HT15-1kt | |
| Needel holder | Solco | 009-1304 | |
| Needle Holder with Lock and Suture | JEUNGDO BIO & PLANT | H-1222-18 | |
| Paraffin | LK LABKOREA | H06-660-107 | |
| PBS | Gibco | 10010-023 | |
| Potassium chloride 40 | Daihan Pharm | KCl | |
| Prelude Ideal Hydrophilic Sheath | MERIT MEDICAL | PID4F11018SS | Sheath 4F |
| PTA Balloon Dilatation catheter | Boston Scientific | H749-3903280208-0 | Balloon catheter 8.0 mm |
| Rompun | Elanco | Xylaxine | |
| sterile Gauze | DAE HAN Medical | 10 cm x 20 cm | |
| Surgical Gloves | Ansell | Ansell | |
| Surgical Gown | Yuhan kimberly | 90002-02 | |
| Surgical Scissors | Nopa, Germany | AC020/16 | |
| Surgical Tape | 3M micopore | 1530-1 | |
| Syringe 1 mL | Shin Chang Medical | ||
| Syringe 10 mL | Shin Chang Medical | ||
| Tissue cassette | Scilav korea | Cas3003 | |
| Transducer gel | SUNGHEUNG | SH102 | |
| Tridol | Yuhan Corp. | Tramadol HCl | |
| Ultrasound system | Philps | Affiniti 50 | |
| Von Kossa stain kit | Abcam | ab105689 | |
| Zoletil 50 | Virbac korea | Tiletamine & zolazepam |
References
- Aliev, G., Burnstock, G. Watanabe rabbits with heritable hypercholesterolaemia: A model of atherosclerosis. Histology and Histopathology. 13 (3), 797-817 (1998).
- Cimini, M., Boughner, D. R., Ronald, J. A., Aldington, L., Rogers, K. A. Development of aortic valve sclerosis in a rabbit model of atherosclerosis: An immunohistochemical and histological study. Journal of Heart Valve Disease. 14 (3), 365-375 (2005).
- Drolet, M. C., Couet, J., Arsenault, M. Development of aortic valve sclerosis or stenosis in rabbits: role of cholesterol and calcium. Journal of Heart Valve Disease. 17 (4), 381-387 (2008).
- Sider, K. L., Blaser, M. C., Simmons, C. A. Animal models of calcific aortic valve disease. International Journal of Inflammation. 2011, 364310 (2011).
- Honda, S., et al. A novel mouse model of aortic valve stenosis induced by direct wire injury. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 34 (2), 270-278 (2014).
- Niepmann, S. T., et al. Graded murine wire-induced aortic valve stenosis model mimics human functional and morphological disease phenotype. Clinical Research in Cardiology. 108 (8), 847-856 (2019).
- Robbins, N., Thompson, A., Mann, A., Blomkalns, A. L. Isolation and excision of murine aorta; A versatile technique in the study of cardiovascular disease. Journal of Visualized Experiments. (93), e52172 (2014).
- Wirrig, E. E., Gomez, M. V., Hinton, R. B., Yutzey, K. E. COX2 inhibition reduces aortic valve calcification in vivo. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 35 (4), 938-947 (2015).
- Jung, S. H., et al. Spatiotemporal dynamics of macrophage heterogeneity and a potential function of Trem2(hi) macrophages in infarcted hearts. Nature Communications. 13 (1), 4580 (2022).
- Freeman, R. V., Otto, C. M. Spectrum of calcific aortic valve disease: Pathogenesis, disease progression, and treatment strategies. Circulation. 111 (24), 3316-3326 (2005).
- Lindman, B. R., et al.
- Cuniberti, L. A., et al. Development of mild aortic valve stenosis in a rabbit model of hypertension. Journal of the American College of Cardiology. 47 (11), 2303-2309 (2006).
- Marechaux, S., et al. Identification of tissue factor in experimental aortic valve sclerosis. Cardiovascular Pathology. 18 (2), 67-76 (2009).
- Hara, T., et al. Progression of calcific aortic valve sclerosis in WHHLMI rabbits. Atherosclerosis. 273, 8-14 (2018).
