Summary
यहां, हम एक्यूपंक्चर प्रयोगों के दौरान चूहों को प्रभावी ढंग से गतिहीन करने के लिए एक चूहा जैकेट का उपयोग करके एक बेहतर निलंबन निर्धारण विधि प्रस्तुत करते हैं। इसके अलावा, इस निर्धारण तंत्र की संरचना और अनुप्रयोग, साथ ही इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर चिकित्सा में इसके उपयोग के लिए निर्देश और मूल्यांकन, स्पष्ट है।
Abstract
बुनियादी प्रयोगात्मक एक्यूपंक्चर अनुसंधान में, चूहों को आमतौर पर प्रयोगशाला जानवरों के रूप में उपयोग किया जाता है। हालांकि, उनके लिए एक निश्चित मुद्रा बनाए रखना मुश्किल है। इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर प्रक्रियाओं के दौरान, चूहों का उचित स्थिरीकरण आवश्यक है। चूहे के निर्धारण के विभिन्न तरीकों का वर्तमान में उपयोग किया जाता है, जिसमें संज्ञाहरण निर्धारण, उच्च-मंच निर्धारण, बाध्यकारी निर्धारण और स्व-निर्मित चूहा कोट के साथ निर्धारण शामिल हैं। हालांकि, इन विधियों की अपनी सीमाएं हैं, जो कुछ हद तक प्रयोग की दक्षता और संचालन को प्रभावित कर सकती हैं। यह प्रोटोकॉल चूहे के कपड़ों का उपयोग करके चूहों को निलंबित करने और ठीक करने की एक विधि का परिचय देता है। सबसे पहले, चूहों को चूहे की जैकेट के साथ कपड़े पहनाए जाते हैं जो उनके शरीर के आकार से मेल खाते हैं, अंधेरे और बिलों के लिए उनकी प्राथमिकता का लाभ उठाते हैं। चूहों के चूहे के कपड़े पहनने के बाद आवश्यक ऑपरेशन किया जा सकता है। निलंबित होने पर, चूहे अपेक्षाकृत स्थिर होते हैं, क्योंकि उनके अंग हिल नहीं सकते हैं। यह निर्धारण विधि न केवल किफायती और उपयोगकर्ता के अनुकूल लाभ प्रदान करती है, बल्कि आराम से आराम की स्थिति में चूहों का एक स्थिर और विश्वसनीय निर्धारण भी सुनिश्चित करती है। यह प्रभावी रूप से समय की खपत, प्रयोगात्मक स्थान और जनशक्ति संसाधनों को भी कम करता है। इसके अतिरिक्त, यह विधि चूहों में एक्यूपंक्चर के लिए उपयोग किए जाने वाले अधिकांश एक्यूपॉइंट के जोखिम की अनुमति देती है। यह लेख मुख्य रूप से डिवाइस की संरचना पर केंद्रित है, जिसमें एक विशेष रूप से डिज़ाइन किया गया चूहा जैकेट, एक ऊंचा निर्धारण रैक और उनकी कनेक्टिंग संरचनाएं शामिल हैं। इसके अतिरिक्त, चूहे इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर प्रक्रियाओं में चूहे के कपड़े-आधारित निलंबन निर्धारण विधि के आवेदन को प्रदर्शित करने के लिए एक उदाहरण प्रस्तुत किया जाएगा।
Introduction
एक्यूपंक्चर एक पारंपरिक चिकित्सा है जो बीमारियों को रोकने और उनका इलाज करने के लिए विशिष्ट एक्यूपॉइंट या अन्य पदों पर आवश्यकता की विशेषता है। इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर विद्युत उत्तेजना1 के साथ फिलिफॉर्म सुइयों को जोड़ता है, जो प्रासंगिक मापदंडों को समायोजित करके उत्तेजना की मात्रा पर सटीक नियंत्रण की अनुमति देता है, एक्यूपंक्चर उपचार2 के मानकीकरण को बढ़ावा देता है। हाल के वर्षों में, इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर के तंत्र पर शोध ने3,4 का विस्तार और गहरा करना जारी रखा है, जिसके कारण इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर5 के तंत्र पर ध्यान केंद्रित करने वाले अध्ययनों में वार्षिक वृद्धि हुई है।
इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर पर बुनियादी शोध में, चूहे सबसे अधिक इस्तेमाल किए जाने वाले जानवर हैं। इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर उपचार के दौरान, प्राप्तकर्ता को एक सुचारू प्रक्रिया सुनिश्चित करने के लिए स्थिर रहना चाहिए। मानव विषयों के साथ नैदानिक परीक्षणों के विपरीत, पशु प्रयोगों में उपयोग किए जाने वाले छोटे जानवर 15-30 मिनट लंबी इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर प्रक्रियाओं के दौरान सचेत रूप से आदेशों का पालन नहीं कर सकते हैं। यह शोधकर्ताओं को स्थिर और विश्वसनीय निर्धारण प्राप्त करने की प्राथमिक चुनौती के साथ प्रस्तुत करता है। अनुचितनिर्धारण से जानवरों में चिंता, अवसाद और भय जैसी नकारात्मक भावनाएं हो सकती हैं, जो न केवल चूहों के लिए चोट का खतरा बढ़ाती हैं और प्रयोगात्मक कर्मियों के लिए काटने की संभावना होती है, बल्कि अनुसंधान परिणामों की स्थिरता और प्रेरकता को भी प्रभावित करती है।
पिछले अध्ययनों में, शोधकर्ताओं ने अक्सर एक्यूपंक्चर या इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर संचालन से पहले संज्ञाहरण निर्धारण7, उच्च मंच निर्धारण8, बाइंडिंग निर्धारण6,9, या चूहा कोट निर्धारण10 का उपयोग किया है। हालांकि, शरीर11 और मस्तिष्क समारोह12 पर संज्ञाहरण के प्रभाव ों को देखते हुए, और यह देखते हुए कि नैदानिक मामलों में जागरूक रोगियों पर एक्यूपंक्चर किया जाता है, संज्ञाहरण कुछ हद तक अनुसंधान परिणामों को प्रभावित कर सकता है। इसलिए, संज्ञाहरण निर्धारण की तुलना में, जागृत अवस्था में चूहों का आरामदायक निर्धारण एक बेहतर विकल्प है।
हालांकि, गैर-एनेस्थेटाइज्ड अवस्था में, विभिन्न निर्धारण विधियों में भी अपनी संबंधित सीमाएं होती हैं, जिनमें चूहोंपर चूहे के कोट के कवरेज के कारण प्रतिबंधित एक्यूपॉइंट एक्सपोजर, ऑपरेशन13 करने के लिए कम से कम दो व्यक्तियों की आवश्यकता, गैर-समायोज्य फिक्सेटर आकार14, या मजबूर स्थिति में चूहों की तनावग्रस्त स्थितिशामिल है।. इन तकनीकी मुद्दों को संबोधित करने के लिए, हमने चूहे के शरीर के अधिकांश हिस्सों में एक्यूपंक्चर हेरफेर के लिए उपयुक्त एक चूहा जैकेट और एक निर्धारण रैक तैयार किया। यह शोधकर्ताओं को चूहों के साथ एक्यूपंक्चर प्रक्रियाओं को कुशलतापूर्वक करने में मदद कर सकता है।
इस प्रोटोकॉल के लिए तर्क इस प्रकार है: सबसे पहले, चूहे की जैकेट पर बंद हेडगियर अंधेरे और बिलों के लिए चूहों के प्राकृतिक झुकाव का लाभ उठाता है, इस प्रकार उनकी गतिविधियों की सीमा को सीमित करता है। दूसरे, चूहों के अंगों के जोड़ों के पास बाध्यकारी रस्सियां शारीरिक संपीड़न संयम प्रदान करती हैं, जिससे उनके आंदोलनों पर कुछ सीमाएं लागू होती हैं। हालांकि, चूहे अभी भी जैकेट पहनने के दौरान क्षैतिज रूप से कूदने और स्थानांतरित करने में सक्षम हैं। अंत में, चूंकि चूहे निलंबित होने पर एक निश्चित बल बिंदु के बिना जमीन को छू नहीं सकते हैं, इसलिए हमने चूहे की जैकेट में एक निलंबन निर्धारण उपकरण जोड़ा, जिससे उनके आंदोलनों को और प्रतिबंधित किया गया और सुई प्रतिधारण सुनिश्चित किया गया। निर्धारण डिवाइस की संरचना चित्रा 1 में दिखाया गया है।
चित्र 1: चूहे जैकेट और निलंबन निर्धारण का योजनाबद्ध आरेख। (ए) एक सपाट दृश्य में चूहे जैकेट की सामान्य उपस्थिति। (बी) चूहे जैकेट का त्रि-आयामी दृश्य। (सी) सिर और पीछे की कमर पर एक्यूपॉइंट के पास चीरा के साथ विशेष रूप से तैयार किया गया चूहा जैकेट। (डी) ऊंचे रैक पर एक साथ निलंबित कई चूहों का चित्रण। 1: कपड़े समग्र दृश्य; 2: फोरलिम्ब आउटलेट; 3: हिंद अंग का निकास; 4: रस्सी बांधना; 5: ट्यूरिंग के बाद गुहा का गठन; 6: सिर के एक्यूपॉइंट को उजागर करने के लिए चीरा; 7: पीठ और कमर के एक्यूपॉइंट को उजागर करने के लिए चीरा। 8: सीवन स्थिति। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
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Protocol
इस अध्ययन में चूहों पर आयोजित सभी प्रक्रियाओं ने प्रयोगशाला पशु कल्याण और नैतिकता समीक्षा दिशानिर्देशों (2018) के लिए राष्ट्रीय मानक का पालन किया, जिसे आधिकारिक तौर पर पीपुल्स रिपब्लिक ऑफ चाइना द्वारा अपनाया गया था और राष्ट्रीय अकादमियों प्रेस15 से प्रयोगशाला जानवरों की देखभाल और उपयोग के लिए गाइड। यह प्रोटोकॉल तीन मुख्य चरणों से बना है। सबसे पहले, चूहे की जैकेट को अलग-अलग वजन वाले चूहों के व्यक्तिगत शरीर के आकार के आधार पर तैयार और फिट किया जाता है। इसके बाद, मानक प्रक्रियाओं का पालन करते हुए एक्यूपंक्चर हेरफेर किया जाता है। अंत में, चूहों को उनके जैकेट में निलंबित कर दिया जाता है, जबकि सुइयों को एक ही समूह के भीतर चूहों के बीच एक साथ हस्तक्षेप की आवश्यकता को समायोजित करने के लिए रखा जाता है।
1. पूर्व-आवश्यक तैयारी
- चूहे जैकेट का उत्पादन
- चूहों को तौलें और उनकी जैकेट बनाने से पहले उनके शरीर के आकार को मापें। अलग-अलग वजन के चूहों के लिए इस प्रोटोकॉल की उपयुक्तता को सत्यापित करने के लिए, 220 ग्राम, 300 ग्राम, 400 ग्राम और 520 ग्राम वजन वाले चूहों को उनके शारीरिक आयामों के स्वतंत्र माप के लिए चुनें, जिसमें ए से एफ तक माप शामिल हैं, जैसा कि चित्र 2 में दर्शाया गया है।
नोट: चूहों के शारीरिक अनुपात और उनके संबंधित जैकेट आकार के बीच सहसंबंध भी चित्रा 2 में प्रस्तुत किया गया है। विभिन्न वजन के चूहों के लिए प्रासंगिक शरीर की लंबाई पैरामीटर तालिका 1 में दर्ज किए गए हैं। - चूहे की जैकेट बनाने के लिए मोटे, गहरे कपड़े का एक आयताकार टुकड़ा काटें। चूहे के पेट के सबसे मोटे हिस्से के चारों ओर मापी गई परिधि के बराबर खुली चौड़ाई वाले कपड़े का उपयोग करें। कपड़े की लंबाई चूहे की नाक की नोक से उसकी पूंछ के आधार तक की दूरी के बराबर है ( चित्र 2 देखें)।
- कपड़े को आधे में मोड़ें और दाएं ट्रेपोज़ॉइड बनाने के लिए लगभग 45 ° -65 ° के कोण पर शीर्ष बाएं कोने को काट दें ( चित्र 3 ए देखें)।
- बाईं ओर के दोनों किनारों को सूती धागे से कसकर सिल लें। मार्गदर्शन के लिए चित्र 1B और चित्र 3B देखें।
- चूहे के ऊपरी और निचले अंगों को गुजरने के लिए कपड़े के प्रत्येक तरफ दो छोटे छेद काटें ( चित्र 3 सी देखें)। दो ऊपरी अंगों के बीच की दूरी चूहे की जैकेट के ऊपरी छेद के बीच की दूरी निर्धारित करती है। दो निचले अंगों के बीच की दूरी चूहे की जैकेट के निचले छेद के बीच की दूरी निर्धारित करती है।
- चूहे की जैकेट के ऊपरी और निचले छेद के बीच की दूरी के रूप में सेवा करने के लिए चूहे के बगल और इलियम के सामने के बीच अनुदैर्ध्य दूरी का उपयोग करें। चूहे के जैकेट में ऊपरी छेद की परिधि निर्धारित करने के लिए कंधे के जोड़ की परिधि का उपयोग करें। चूहे की जैकेट में निचले छेद की परिधि के लिए कूल्हे के जोड़ की परिधि का उपयोग करें।
- प्रत्येक छेद के बगल में, एक लंबा कपड़े का पट्टा सिलें जिसे चूहे को ठीक करने के लिए जैकेट के शुरुआती छोर से शरीर के चारों ओर कसकर लपेटा जा सकता है।
- चूहों को तौलें और उनकी जैकेट बनाने से पहले उनके शरीर के आकार को मापें। अलग-अलग वजन के चूहों के लिए इस प्रोटोकॉल की उपयुक्तता को सत्यापित करने के लिए, 220 ग्राम, 300 ग्राम, 400 ग्राम और 520 ग्राम वजन वाले चूहों को उनके शारीरिक आयामों के स्वतंत्र माप के लिए चुनें, जिसमें ए से एफ तक माप शामिल हैं, जैसा कि चित्र 2 में दर्शाया गया है।
- चूहा जैकेट पहनने की विधि
- जैकेट में चूहे को कपड़े पहनाने के लिए आगे बढ़ने से पहले दस्ताने पहनें। टेबल पर एक हाथ से चूहे की जैकेट के मध्य और पिछले हिस्से को पकड़कर शुरू करें। दूसरे हाथ से, चूहे की पूंछ को उसके फीडिंग पिंजरे से पकड़ें और धीरे से इसे जैकेट में रखें।
- जैसे ही चूहा आगे बढ़ेगा, उसका सिर जैकेट के हेडगियर तक पहुंच जाएगा। इस बिंदु पर, जैकेट में छेद से इसके बाएं और दाएं ऊपरी अंगों को सावधानीपूर्वक खींचने के लिए दोनों हाथों का उपयोग करें।
- जैकेट के शुरुआती छोर से बांधने वाली रस्सी लें, इसे बाएं से दाएं पार करें, और इसे चूहे के ट्रंक के चारों ओर सुरक्षित रूप से लपेटें। उचित निर्धारण सुनिश्चित करने के लिए इसे ट्रंक के विपरीत तरफ कसकर बांधें। चूहे के ऊपरी अंगों के संयम के बाद, उसके निचले अंगों को ठीक करने के लिए उसी प्रक्रिया को दोहराएं।
- जैकेट के छेद से अपने अंगों को बाहर निकालते समय चूहे के पंजे से काटने या खरोंचने से बचने के लिए सावधानी बरतें। सुनिश्चित करें कि रस्सी की जकड़न उचित रूप से समायोजित है, यानी, चूहों में स्थानीय अंग इस्किमिया और हाइपोक्सिया का कारण बनने के लिए बहुत तंग नहीं है, और बहुत ढीला नहीं है, जिससे चूहा आसानी से बच सकता है ( वीडियो 1 देखें)।
- फिक्सेशन रैक और एस-आकार के लोहे के हुक
- निर्धारण रैक में दो भारी लोहे की ट्रे (लंबाई में 24 सेमी, चौड़ाई में 12 सेमी और ऊंचाई में 2 सेमी) और एक लोहे का स्तंभ (लंबाई में 60 सेमी) होता है जो प्रत्येक ट्रे पर मजबूती से वेल्डेड होता है। एक स्क्रू कनेक्शन संरचना का उपयोग करके दो लोहे के स्तंभों पर समान ऊंचाई पर एक ठोस लोहे की छड़ी (लंबाई में 145 सेमी) तय करें जिसे एक निश्चित ऊंचाई पर समायोजित और बनाए रखा जा सकता है ( चित्रा 4 ए देखें)।
- जैकेट पहनने वाले चूहे को लोहे की छड़ी से जोड़ने के लिए, एस-आकार के हुक (व्यास में 11 सेमी) का उपयोग करें। जैकेट पर पट्टा के चारों ओर हुक के एक छोर को लपेटें जबकि दूसरे छोर को लोहे की छड़ी पर लटका दिया जाए। छड़ी पर चूहे को सुरक्षित करने के लिए दो एस-आकार के हुक का उपयोग करें। कृपया समग्र संरचना के लिए चित्रा 1 डी और चित्रा 4 बी देखें।
चित्र 2: चूहे के शरीर के आकार और मिलान चूहे जैकेट आकार का संबंधित आरेख। आरेख में, पैरामीटर ए ऊपरी अंगों और चूहे के ट्रंक के बीच संयुक्त के पीछे अनुप्रस्थ दूरी का प्रतिनिधित्व करता है। इस मान का उपयोग चूहे के जैकेट के ऊपरी अंगों के लिए मर्मज्ञ छेद के बीच रिक्ति माप के रूप में किया जाता है। इसी तरह, पैरामीटर बी पीठ पर अनुप्रस्थ दूरी का प्रतिनिधित्व करता है जहां चूहे के द्विपक्षीय निचले अंग ट्रंक से जुड़ते हैं। यह माप चूहे की जैकेट के निचले अंगों के लिए मर्मज्ञ छेद ों की दूरी निर्धारित करता है। पैरामीटर सी चूहे के पेट के सबसे मोटे हिस्से की परिधि को दर्शाता है, जिसका उपयोग चूहे के जैकेट के कपड़े के लिए चौड़ाई माप के रूप में किया जा सकता है। पैरामीटर डी चूहे के बगल से उसके इलियम के सामने की दूरी का प्रतिनिधित्व करता है, जो जैकेट के ऊपरी और निचले छेद के बीच अनुदैर्ध्य दूरी निर्धारित करता है। पैरामीटर ई चूहे की नाक की नोक से उसकी पूंछ के आधार तक अनुदैर्ध्य दूरी से मेल खाता है, जो चूहे के जैकेट कपड़े के लिए लंबाई माप के रूप में कार्य करता है। पैरामीटर एफ ऊपरी अंग और चूहे के ट्रंक को जोड़ने वाले आर्टिक्यूलेशन की परिधि को दर्शाता है, जो छेद की परिधि के रूप में कार्य करता है जिसके माध्यम से ऊपरी अंग गुजरते हैं। पैरामीटर जी निचले अंगों और चूहे के ट्रंक को जोड़ने वाले जोड़ की परिधि का प्रतिनिधित्व करता है, उस छेद की परिधि का निर्धारण करता है जिसके माध्यम से निचले अंग गुजरते हैं। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
| शरीर का वजन (जी) | शरीर के आकार पैरामीटर (सेमी) | ||||||
| एक | जन्म | के आसपास | d | ई | स्त्री-विषयक | ग्राम | |
| 220 | 6.0 | 7.0 | 15.0 | 8.0 | 19.0 | 5.0 | 7.0 |
| 300 | 7.0 | 7.5 | 17.0 | 10.0 | 21.0 | 6.0 | 8.0 |
| 400 | 8.0 | 8.5 | 19.0 | 11.5 | 23.0 | 6.5 | 9.0 |
| 520 | 8.0 | 10.0 | 20.0 | 12.5 | 26.0 | 7.0 | 9.5 |
तालिका 1. विभिन्न शरीर के वजन के साथ चूहों के शरीर के आकार मापदंडों के माप परिणाम।
चित्र 3: चूहे की जैकेट की शारीरिक उपस्थिति और उपयोग को दर्शाने वाला आरेख। (ए) चूहे जैकेट का विमान बाहरी दृश्य। चूहे की जैकेट का आकार एक दाएं कोण वाले ट्रेपोज़ॉइड जैसा दिखता है, जिसमें चूहे के ऊपरी और निचले अंगों को गुजरने के लिए बाईं और दाईं ओर अलग-अलग उद्घाटन होते हैं। (बी) चूहे की जैकेट का बाहरी दृश्य। हेडगियर के बंद होने से एक अर्ध-बंद गुहा बनती है, जो चूहों को प्रवेश करने के लिए लुभाने के लिए एक महत्वपूर्ण घटक के रूप में कार्य करती है। (सी) जैकेट के साथ कपड़े पहने हुए चूहे का साइड व्यू। एक बार जब चूहे के अंग कपड़ों में उद्घाटन से गुजरते हैं, तो पट्टियों को ट्रंक की उदर सतह पर पार किया जाता है और उचित तनाव के साथ सुरक्षित रूप से पीछे की ओर बांधा जाता है। यह सुनिश्चित करता है कि चूहा अपेक्षाकृत स्थिर है। (डी) चूहे की जैकेट के साथ कपड़े पहने हुए चूहे का पेट का दृश्य। जैकेट की उदर सतह चूहे के पेट की त्वचा को उजागर करती है, जिससे उदर बिंदुओं पर एक्यूपंक्चर के लिए सुविधाजनक पहुंच संभव हो जाती है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
वीडियो 1: चूहे की जैकेट पहनना। इस वीडियो में जैकेट में चूहे को कपड़े पहनाने की एक विशिष्ट प्रक्रिया दिखाई गई है। कृपया इस वीडियो को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें।
चित्रा 4: ऊंचा निर्धारण रैक की शारीरिक उपस्थिति और उपयोग को दर्शाने वाला आरेख। (ए) ऊंचा निर्धारण रैक। इस रैक में मुख्य रूप से दो ऊर्ध्वाधर लोहे के स्तंभ (लंबाई में 60 सेमी) होते हैं, जो प्रत्येक ट्रे से जुड़े होते हैं, साथ ही जमीन के समानांतर रखी गई एक लंबी क्षैतिज लोहे की छड़ी (लंबाई में 145 सेमी) होती है। ऊर्ध्वाधर स्तंभों के समान ऊंचाई पर क्षैतिज छड़ी को सुरक्षित करने के लिए स्क्रू का उपयोग किया जाता है। (बी) निर्धारण रैक पर चूहा निलंबन। चूहे की जैकेट पहनने वाले चूहों को प्रति चूहे दो एस-आकार के हुक का उपयोग करके निर्धारण रैक पर सुरक्षित रूप से बांधा जाता है। (सी) कई चूहों में एक साथ इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर उपचार। पूंछ आंदोलन से उत्पन्न किसी भी संभावित हस्तक्षेप को रोकने के लिए, चूहों के बीच उचित अंतर बनाए रखना आवश्यक था, जो चूहे की पूंछ की लंबाई के बराबर था। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
2. इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर प्रक्रिया
- नियमित तैयारी
- फिक्सेशन रैक को क्षैतिज डेस्कटॉप या ग्राउंड पर रखें।
- आवश्यक प्रक्रिया से पहले, पूर्ण एक्सपोजर सुनिश्चित करने के लिए इलेक्ट्रिक शेवर का उपयोग करके एक्यूपॉइंट के चारों ओर फर को हटा दें। जब पंचर किया जाने वाला एक्यूपॉइंट चूहे के पेट पर स्थित होता है, जैसे कि गुआनयुआन (सीवी 4, नाभि से लगभग 25 मिमी नीचे), पेट के एक्यूपॉइंट को उजागर करने के लिए चूहे के कपड़ों की चौड़ाई को उचित रूप से छोटा करें।
- पेट की मध्य रेखा पर अंतराल से एक्यूपॉइंट का पता लगाएं जो चूहे की जैकेट द्वारा कवर नहीं किया गया है ( चित्रा 3 डी देखें) और फिर सुई इंजेक्ट करें।
- जब पंचर किए जाने वाले एक्यूपॉइंट चूहे के सिर पर होते हैं, जैसे कि बैहुई (जीवी 20, पार्श्विका हड्डी के बीच में स्थित), जीवी 20 के आसपास की त्वचा को पूरी तरह से उजागर करने के लिए सिर पर इसी स्थिति में एक छोटा सा चीरा लगाएं ( चित्रा 1 सी देखें)।
- चूहों के अंगों पर एक्यूपॉइंट्स को एक्यूप्वाइंट करते समय, जैसे कि निचले अंग में नीगुआन (पीसी 6, अग्रभाग के आंतरिक हिस्से में, रेडियल और उल्नार सीवन के बीच कलाई के जोड़ से लगभग 3 मिमी दूर) या निचले अंग में ज़ुसानली (एसटी 36, घुटने के जोड़ के पार्श्व पक्ष पर, फाइबुला सिर से लगभग 2 मिमी नीचे) एक्यूपॉइंट के स्पष्ट जोखिम के कारण, अंग को ठीक करने में सहायता के लिए एक हाथ का उपयोग करें, जबकि दूसरा सीधे एक्यूपंक्चर ऑपरेशन कर सकता है।
- जब एक्यूपॉइंट एक चूहे की पीठ या कमर पर स्थित होता है, जैसे कि शेंशु (बीएल 23, दूसरे काठ की हड्डी के नीचे, पीठ की मध्य रेखा से 6 मिमी अलग), संबंधित साइट की त्वचा को पूरी तरह से उजागर करने के लिए चूहे की जैकेट के केंद्र में लगभग 2 सेमी चौड़ा एक छेद काटें ( चित्र 1 सी देखें)।
- चूहे को जैकेट में कपड़े पहनाएं। अल्कोहल स्वैब के साथ एक्यूपॉइंट की स्थानीय त्वचा को कीटाणुरहित करने के बाद, एक्यूपंक्चर प्रक्रिया शुरू करें।
- नीडलिंग तकनीक: एक्यूपॉइंट का सटीक रूप से पता लगाएं। उचित गहराई पर चूहे के एक्यूपॉइंट में एक बाँझ डिस्पोजेबल एक्यूपंक्चर सुई (0.16 मिमी x 7 मिमी) डालें।
- इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर ऑपरेशन
- क्षैतिज लोहे की छड़ के चारों ओर इलेक्ट्रोड तार लपेटें। यह कदम इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर क्लिप पर कार्य करने वाले गुरुत्वाकर्षण बल के कारण सुई के गिरने के जोखिम को कम करता है। फिर, इलेक्ट्रोड तार के अंत को सुई के हैंडल पर सुरक्षित रूप से संलग्न करें।
- पावर चालू करें और उपयुक्त आवृत्ति, वर्तमान और समय पैरामीटर का चयन करें। इस प्रयोग में, पैरामीटर 2 हर्ट्ज, 1 एमए और 15 मिनट पर सेट किए गए थे। एक बार पैरामीटर समायोजित हो जाने के बाद, इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर उपचार प्रक्रिया शुरू करें (वीडियो 2 और वीडियो 3 देखें)।
- चूहों पर एक साथ इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर: उपचार के दौरान, एस-आकार के हुक का उपयोग करके लोहे की छड़ी पर एक ही समूह में चूहों को एक साथ निलंबित करें और उन्हें एक साथ इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर हस्तक्षेप से गुजरने दें।
- नोट: लोहे की छड़ी न केवल मजबूत होनी चाहिए, बल्कि एक ही समय में चूहों के समूह का इलाज करने के लिए पर्याप्त लंबी होनी चाहिए। इस प्रयोग में, चूहों के बीच उचित अंतराल और कोई हस्तक्षेप सुनिश्चित करते हुए, 3-4 चूहों का एक साथ इलाज किया जा सकता है ( चित्रा 4 सी देखें)।
- इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर उपचार के दौरान चूहे की प्रतिक्रियाओं का अवलोकन: निम्नलिखित कारकों के आधार पर चूहों में इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर के लिए इस निर्धारण विधि की उपयुक्तता का मूल्यांकन करें, जैसे कि ऑपरेशन को पूरा करने के लिए आवश्यक कर्मियों की संख्या, चूहे को ठीक करने में लगने वाला समय, इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर उपचार के दौरान चूहों की प्रतिक्रिया, प्रक्रिया के दौरान गिराई गई सुइयों की संख्या, और ऑपरेशन के दौरान होने वाली कोई भी आकस्मिक मौत।
- सुइयों को हटाना
- एक बार पूर्व-निर्धारित समय पूरा हो जाने के बाद, इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर उपकरण स्वचालित रूप से बंद हो जाएगा। सुई के हैंडल से जुड़ी छोटी क्लिप को हटा दें और चूहे की त्वचा के नीचे से एक्यूपंक्चर सुई को ध्यान से हटा दें, जिससे इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर उपचार प्रक्रिया का निष्कर्ष निकले।
- पट्टियों को ढीला करें, चूहे की जैकेट के सिर के कवर को उठाएं, और चूहे को पिंजरे के ऊपर रखें। चूहा तब जैकेट से खुद को छोड़ने और स्वतंत्र रूप से पिंजरे में प्रवेश करने के लिए स्वतंत्र होगा ( वीडियो 4 देखें)।
वीडियो 2. काठ के क्षेत्र में एक्यूपॉइंट की आवश्यकता। यह वीडियो जैकेट में चूहे की थकावट, कमर पर एक्यूपॉइंट में एक्यूपंक्चर सुइयों के सम्मिलन और इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर तंत्र के बाद के कनेक्शन को शामिल करने वाली व्यापक और सुसंगत प्रक्रिया को प्रदर्शित करता है। कृपया इस वीडियो को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें।
वीडियो 3. पेट और निचले अंग में एक्यूपॉइंट की आवश्यकता। यह वीडियो जैकेट में चूहे की थकावट, पेट और निचले अंग में स्थित एक्यूपॉइंट में एक्यूपंक्चर सुइयों के सम्मिलन और इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर उपकरण के बाद के कनेक्शन को शामिल करने वाली व्यापक और सुसंगत प्रक्रिया को प्रदर्शित करता है। कृपया इस वीडियो को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें।
वीडियो 4. चूहे की जैकेट को हटाना। इस वीडियो में चूहे से जैकेट हटाने की प्रथा को दिखाया गया है। कृपया इस वीडियो को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें।
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Representative Results
इस प्रयोग में, इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर उपचार के लिए कुल 12 चूहों का चयन किया गया था, और निर्धारण विधि के तहत उनकी प्रतिक्रियाओं को देखा गया था (जैसा कि तालिका 2 में दिखाया गया है)। 12 चूहों में से, केवल 1 चूहे ने 15 मिनट इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर सुई प्रतिधारण अवधि के दौरान तीव्र संघर्ष का प्रदर्शन किया। इसकी जोरदार गतिविधियों के परिणामस्वरूप, सुई बीच रास्ते से निकल गई, जो चूहों की कुल संख्या का 8.33% थी। इस परिणाम से पता चलता है कि उपयोग की जाने वाली निर्धारण विधि आम तौर पर स्थिरता और निर्भरता की एक उल्लेखनीय डिग्री प्रदर्शित करती है। एक चूहे द्वारा प्रदर्शित संघर्ष के बावजूद, समूह के अधिकांश चूहों ने पूरे उपचार के दौरान उचित सुई निर्धारण बनाए रखा। इसके अलावा, 2 महीने की प्रयोगात्मक अवधि के दौरान जहां इस विधि को इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर उपचार के लिए चूहों को गतिहीन करने के लिए नियोजित किया गया था, चूहे की मृत्यु दर का कोई उदाहरण दर्ज नहीं किया गया था, जो चूहों के लिए इस निर्धारण विधि की सुरक्षा का सुझाव देता है।
इसके अतिरिक्त, तालिका 3 में, हमने इस निर्धारण विधि की तुलना साहित्य 9,10,13,14 में रिपोर्ट की गई चार अन्य विधियों के साथ की। सबसे पहले, स्थिरता के संदर्भ में, एक नए बनाए गए चूहा धारक निर्धारण का उपयोग करके पांचवीं विधि की थोड़ी हीन स्थिरता के अलावा, अन्य तरीकों ने अपेक्षाकृत सुरक्षित निर्धारण प्राप्त किया। समय के संदर्भ में, इस विधि का उपयोग करके एक चूहे को ठीक करने के लिए आवश्यक औसत समय चूहा कोट स्विंग निर्धारण विधि की तुलना में कम था। शेष विधियों ने अपने संबंधित पत्रों में निर्धारण के लिए आवश्यक समय निर्दिष्ट नहीं किया; इसलिए, कोई चर्चा प्रदान नहीं की जाती है। एक चूहे को ठीक करने के लिए आवश्यक कर्मियों की संख्या के संदर्भ में, इस विधि और चूहा कोट स्विंग सस्पेंशन विधि दोनों को ऑपरेशन पूरा करने के लिए केवल एक व्यक्ति की आवश्यकता होती है, इस प्रकार प्रयोगात्मक दक्षता में वृद्धि होती है। हालांकि, उजागर एक्यूपॉइंट रेंज के संदर्भ में, इस प्रोटोकॉल में विशेष रूप से डिज़ाइन किया गया चूहा जैकेट शरीर पर अधिकांश एक्यूपॉइंट को उजागर करने के लिए आवश्यकताओं को पूरा कर सकता है, जबकि स्विंग सस्पेंशन विधि में चूहा कोट मुख्य रूप से अंगों को उजागर करता है। निर्धारण के लिए उपयोग की जाने वाली सामग्रियों के बारे में, इस विधि के लिए आवश्यक सामग्री प्रयोगशाला और रोजमर्रा की सेटिंग्स दोनों में प्राप्त करना अपेक्षाकृत आसान है। इसके अलावा, निर्धारण के दौरान चूहे की स्थिति के संदर्भ में, प्राकृतिक स्थिति स्पष्ट रूप से मजबूर स्थिति की तुलना में अधिक आरामदायक है। कुल मिलाकर, यह विधि चूहे कोट स्विंग सस्पेंशन निर्धारण विधि के समान है, लेकिन इसने चूहे की जैकेट के कपड़े और डिजाइन में सुधार को लक्षित किया है, जिससे शरीर के एक्यूपॉइंट्स के अधिक जोखिम की अनुमति मिलती है। इसके अलावा, कपड़े के पट्टे पर निलंबित होने की तुलना में, यह प्रोटोकॉल मजबूत स्टील पाइप का उपयोग करता है, जो अन्य चूहों पर व्यक्तिगत चूहों के हिंसक झटकों के कारण होने वाले प्रतिकूल प्रभावों को कम करता है जब कई चूहे एक साथ निर्धारण रैक पर इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर उपचार से गुजर रहे होते हैं। यह प्रयोगात्मक डेटा की स्थिरता और विश्वसनीयता सुनिश्चित करता है।
उपरोक्त कारकों को सामूहिक रूप से ध्यान में रखते हुए, यह दृष्टिकोण चूहों के लिए स्थिरता, दक्षता, सामर्थ्य और सापेक्ष आराम के लाभों को प्रदर्शित करता है, जिससे यह सुई सम्मिलन निर्धारण के लिए एक मूल्यवान विकल्प बन जाता है।
| निर्धारण विधि | संघर्षरत चूहों की संख्या | संघर्षरत चूहों का प्रतिशत (%) | उपचार के दौरान सुई गिरने वाले चूहों की संख्या | उपचार के दौरान सुई गिरने वाले चूहों का प्रतिशत (%) | ऑपरेशन के दौरान मरने वाले चूहों की संख्या | ऑपरेशन के दौरान चूहों का प्रतिशत (%) मर गया। |
| निलंबन निर्धारण जैकेट समूह के साथ बंधा हुआ है। | 1 | 8.33 | 1 | 8.33 | 0 | 0 |
तालिका 2. इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर उपचार के दौरान निश्चित चूहों की प्रतिक्रिया (एन = 12)।
| क्रम संख्या | निर्धारण विधि | क्या चूहों का निर्धारण स्थिर और सुरक्षित है | चूहे को ठीक करने के लिए आवश्यक समय | एक चूहे को ठीक करने के लिए आवश्यक कर्मियों की संख्या | एक्यूपॉइंट्स का स्थान और सीमा जिसे उजागर किया जा सकता है | फिक्स्चर या सामग्री की पहुंच | चूहों के लिए निश्चित तरीकों का आराम: प्राकृतिक या मजबूर स्थिति | संदर्भ | |||||||||||||||
| 1 | हमारे प्रयोग में जैकेट के साथ बंधे निलंबन निर्धारण। | √ | 50-63 s | 1 | पेट, सिर, पीठ और कमर, अंग | आसानी से उपलब्ध | प्राकृतिक स्थिति | ||||||||||||||||
| 2 | शू-मु एक्यूपॉइंट संयोजन के लिए एक्यूपंक्चर और मोक्सीबसेशन के लिए एक निर्धारण फ्रेम (एक एक्यूपॉइंट चयन जो बैक ट्रांसपोर्ट पॉइंट के साथ अलार्म पॉइंट को जोड़ता है)। | √ | / | / | सिर, अंग, पीठ और कमर | निर्धारण फ्रेम को अनुकूलित करने की आवश्यकता है | मजबूर स्थिति | 9 | |||||||||||||||
| 3 | कोट से बंधे चूहों को झूलने की निर्धारण विधि | √ | 85-93 s | 1 | अंग के हिस्से | आसानी से उपलब्ध | प्राकृतिक स्थिति | 10 | |||||||||||||||
| 4 | एक पुराने जाली पिंजरे के आवरण से बना चूहा ठीक करने वाला उपकरण | √ | / | ≥2 | एक्यूपॉइंट की सीमा सीमित नहीं है। | आसानी से उपलब्ध | मजबूर स्थिति | 13 | |||||||||||||||
| 5 | एक नव-निर्मित चूहा धारक | निर्धारण के बाद, चूहों के सामने और पीछे के अंगों में अभी भी गतिशीलता की एक निश्चित डिग्री है। इसके अलावा, एक निश्चित जोखिम है कि चूहों में गर्दन फिक्सिंग रॉड का चौराहे बिंदु बहुत अधिक हो सकता है, जिससे चूहों में घुटन हो सकती है। यदि यह बहुत कम है, तो चूहों का सिर फिक्सिंग अस्थिर हो सकता है। | / | / | एक्यूपॉइंट की सीमा सीमित नहीं है। | चूहा धारक को विशेष अनुकूलन की आवश्यकता होती है | प्राकृतिक स्थिति | 14 | |||||||||||||||
तालिका 3. चूहे एक्यूपंक्चर और मोक्सीबसेशन प्रयोग में विभिन्न निर्धारण विधियों के तुलनात्मक परिणाम।
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Discussion
इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर को विभिन्न बीमारियों जैसे संज्ञानात्मक हानि16,17, मायोकार्डियल चोट 18 और सूजनदर्द 19 पर अच्छे चिकित्सीय प्रभाव दिखाए गए हैं। इसकी क्रिया के तंत्र को समझने के लिए, मुख्य रूप से चूहों का उपयोग करके पशु प्रयोग किए गए हैं। प्रक्रियाओं के दौरान जानवरों का निर्धारण सटीक परिणामों के लिए महत्वपूर्ण है। जबकि कई अध्ययनों ने पशु संज्ञाहरण के बाद इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर को प्रशासित किया है, यह अभ्यास मस्तिष्क समारोह में बाधा डाल सकता है और प्रयोगात्मक सटीकता से समझौता कर सकता है। इसके अलावा, संज्ञाहरण का दीर्घकालिक प्रशासन आवश्यक प्रक्रिया को लंबा करता है और जानवरों के लिए मृत्यु दर की संभावना को बढ़ाता है। हालांकि, रिपोर्ट किए गए गैर-एनेस्थेटिक निर्धारण विधियों की भी सीमाएं हैं, जिन पर तालिका 3 में सावधानीपूर्वक चर्चा की गई है।
यह अध्ययन एक नया प्रोटोकॉल प्रस्तुत करता है जो एक उन्नत निर्धारण रैक के साथ संयोजन में एक कस्टम-निर्मित चूहा जैकेट का परिचय देता है। इस प्रोटोकॉल के महत्वपूर्ण पहलू में चूहों के शरीर के आकार के आधार पर उचित आकार के साथ चूहे जैकेट बनाना और सुई लगाए जाने वाले एक्यूपॉइंट के विशिष्ट स्थान के अनुसार उन्हें और अनुकूलित करना शामिल है। चूहे की जैकेट को फिट करने के लिए एक उपयोगी टिप यह है कि अंधेरे के लिए चूहे के प्राकृतिक झुकाव का उपयोग किया जाए और उसे हेडगियर में प्रवेश करने के लिए प्रोत्साहित किया जाए। एक बार जब चूहे का सिर सुरक्षित हो जाता है, तो बाद की निर्धारण प्रक्रियाएं बहुत सरल हो जाती हैं।
अनुकूली प्रशिक्षण के बाद, चूहों ने इस तकनीक का उपयोग करते समय न्यूनतम असुविधा का प्रदर्शन किया। आवश्यक उपकरण सामग्री, जैसे कपड़े, एस-आकार के हुक, लोहे की छड़ें, और अन्य सामग्री, आसानी से सुलभ और लागत प्रभावी हैं, जिससे प्रयोगात्मक खर्चों में कमी की सुविधा मिलती है। एक और लाभ यह है कि चूहे जैकेट पट्टियों की जकड़न को चूहे के आकार के अनुसार समायोजित किया जा सकता है, जिससे यह लचीला और नियंत्रणीय हो जाता है। पूरे निर्धारण ऑपरेशन को एक व्यक्ति द्वारा स्वतंत्र रूप से पूरा किया जा सकता है, और डिवाइस का ऊंचा विन्यास शोधकर्ताओं को एक साथ छोटे जानवरों के एक समूह का इलाज करने की अनुमति देता है, जिससे प्रयोगात्मक दक्षता में काफी सुधार होता है, पूरे प्रयोग पर खर्च किए गए समय को कम किया जाता है, और जानवरों के एक ही समूह के बीच विसंगतियों को कम किया जाता है। इसके अलावा, ऊंचा मंच एक तालिका की आवश्यकता को कम करता है, क्योंकि इसे सीधे स्तर की जमीन पर तैनात किया जा सकता है, जिससे स्थानिक उपयोग का अनुकूलन होता है। इसके अलावा, इन डिजाइनों को अन्य प्रयोगात्मक जानवरों, जैसे गिनी सूअरों में उपयोग के लिए संशोधित और विस्तारित किया जा सकता है, और मोक्सीबसेशन उपचार में भी प्रभावी ढंग से नियोजित किया जा सकता है।
इस दृष्टिकोण की एक संभावित बाधा शोधकर्ताओं के लिए तकनीक में उच्च स्तर की प्रवीणता रखने की आवश्यकता है, साथ ही प्रत्येक चूहे के शरीर की लंबाई और अंग अंतराल के अनुरूप अलग-अलग आयामों के चूहा जैकेट बनाने की आवश्यकता है। इसके अतिरिक्त, यह अपरिहार्य है कि कुछ चूहों को चूहे की जैकेट और निलंबन निर्धारण के प्रारंभिक संपर्क पर हल्की असुविधा और तनाव का अनुभव हो सकता है। नतीजतन, इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर उपचार से गुजरने वाले चूहों के लिए अनुकूली प्रशिक्षण को लागू करना अनिवार्य हो जाता है। इसके अलावा, प्रक्रिया के दौरान सावधानी के साथ इन चूहों को संभालना अनिवार्य है, आंदोलन या गैर-अनुपालन के उदाहरणों में उन्हें शांत करने और शांत करने के लिए कोमल स्ट्रोकिंग का उपयोग करना। यह ध्यान देने योग्य है कि चूहों की शारीरिक स्थिति और व्यवहार संबंधी प्रयोगों पर अपरिहार्य तनाव के प्रभाव को कम करने के लिए, नियंत्रण समूह (एक रिक्त नियंत्रण समूह और एक मॉडल नियंत्रण समूह सहित) को भी इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर उपचार समूह के समान समय में हैंडलिंग, चूहा जैकेट बाइंडिंग और ऊंचा निर्धारण से गुजरना चाहिए। भले ही वे इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर उपचार प्राप्त नहीं कर रहे हों।
सारांश में, यह निर्धारण विधि हमें चूहों को स्थिर करने के लिए एक सुविधाजनक और प्रभावी विकल्प प्रदान करती है, जो स्थिर और चिकनी एक्यूपंक्चर ऑपरेशन और सुई प्रतिधारण प्रक्रिया के लिए एक विश्वसनीय गारंटी सुनिश्चित करती है।
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Disclosures
सभी लेखकों ने हितों के किसी संभावित टकराव की घोषणा नहीं की है।
Acknowledgments
लेखक अधिकृत लाइसेंस आईडी के साथ इस पेपर में चित्रा 2 बनाने के लिए उपयोग की जाने वाली सामग्री प्रदान करने के लिए शोधकर्ताओं के लिए होम के फिग्ड्रा वैज्ञानिक अनुसंधान ड्राइंग प्लेटफॉर्म के प्रति अपना आभार व्यक्त करना चाहते हैं: यूरुयूओ 5699ई। इस काम को चीन के राष्ट्रीय प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (81873380, 82074566), हुबेई प्रांत के प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (2022 सीएफसीओ 43), और पारंपरिक चीनी चिकित्सा के राष्ट्रीय प्रशासन के राष्ट्रीय प्रसिद्ध पारंपरिक चीनी चिकित्सा विरासत स्टूडियो निर्माण परियोजना ([2022] नंबर 5, [2022] नंबर 75) द्वारा प्रदान किए गए अनुदान से समर्थन मिला है।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 75% alcohol | Shandong Lircon medical technology co., ltd | 2002-0059 | Disinfection |
| acupuncture needles | Beijing Luo ya shan chuan medical equipment co., Ltd. | needling | |
| Adult Sprague-Dawley (SD) rats | Liaoning Changsheng biotechnology co., Ltd. | SCXK 2020-0001 | The recipient subjected to fixation |
| an elevated fixation rack | Taizhou shiai instruments and equipments for scientific and teaching research Co., ltd | / | Fix rats |
| Hans electronic acupuncture apparatus | Beijing Huayun Ante Science and Technology Co. Ltd. | HANS-200A | electroacupuncture |
| Medical cotton ball | Jiangsu Misawa Medical Supplies Co., Ltd. | 20172142357 | Disinfection |
| Pet electric clipper | Fenghua Xikou Lubao Knives & Scissors Electrical Appliance Factory | / | Shave the hair of rats |
| Tweezers | Qingdao Schultz Biotechnology Co., ltd | Pinch cotton balls |
References
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