Summary
여기에서는 침술 실험 중 쥐를 효과적으로 고정시키기 위해 쥐 재킷을 사용하여 개선된 현탁액 고정 방법을 제시합니다. 또한, 이 고정 장치의 구조와 적용, 전기 침술 요법에서의 활용에 대한 지침 및 평가가 설명됩니다.
Abstract
기초 실험 침술 연구에서 쥐는 일반적으로 실험실 동물로 사용됩니다. 그러나 고정된 자세를 유지하기는 어렵습니다. 전기 침술 시술 중에는 쥐를 적절하게 고정시키는 것이 필수적입니다. 현재 쥐 고정은 마취 고정, 고플랫폼 고정, 바인딩 고정, 자체 제작 쥐 코트로 고정 등 다양한 방법이 사용되고 있습니다. 그러나 이러한 방법에는 한계가 있어 실험의 효율성과 조작성에 어느 정도 영향을 미칠 수 있습니다. 이 프로토콜은 쥐 옷을 사용하여 쥐를 매달고 고정하는 방법을 소개합니다. 첫째, 쥐는 자신의 체형에 맞는 쥐 재킷을 입고, 어둠과 굴을 파는 것을 선호합니다. 바늘 수술은 쥐가 쥐 옷을 입은 후에 수행 할 수 있습니다. 매달려 있을 때 쥐는 팔다리가 움직일 수 없기 때문에 비교적 가만히 있습니다. 이 고정 방법은 경제적이고 사용자 친화적인 이점을 제공할 뿐만 아니라 쥐를 편안하고 편안한 자세로 안정적이고 안정적으로 고정할 수 있도록 합니다. 또한 시간 소비, 실험 공간 및 인력 자원을 효과적으로 최소화합니다. 또한 이 방법은 쥐의 침술에 사용되는 대부분의 경혈을 노출할 수 있습니다. 이 기사에서는 주로 특별히 설계된 쥐 재킷, 높은 고정 랙 및 연결 구조를 포함하는 장치의 구성에 중점을 둡니다. 또한, 쥐 전기 침술 절차에서 쥐 의류 기반 현탁액 고정 방법의 적용을 입증하기 위해 예시적인 예가 제시될 것입니다.
Introduction
침술은 질병을 예방하고 치료하기 위해 특정 경혈이나 다른 위치에 침을 꿰는 것이 특징인 전통적인 치료법입니다. 전기침술은 선모침과 전기자극1을 병행하여 관련 파라미터를 조절하여 자극량을 정밀하게 조절할 수 있어침술치료의 표준화2를 촉진한다. 최근 몇 년 동안 전기침술의 기전에 대한 연구가 계속 확대되고 심화되고 있으며3,4 이로 인해 전기침술의 기전을 연구하는 연구가 매년 증가하고 있다5.
전기 침술에 대한 기초 연구에서 쥐는 가장 일반적으로 사용되는 동물입니다. 전기 침술 치료 중에는 원활한 시술을 위해 시술자는 가만히 있어야 합니다. 인간을 대상으로 한 임상시험과 달리 동물 실험에 사용되는 작은 동물은 15-30분 동안 긴 전기 침술 시술을 받는 동안 의식적으로 명령을 따를 수 없습니다. 이로 인해 연구자들은 안정적이고 신뢰할 수 있는 고정을 달성해야 하는 주요 과제를 안고 있습니다. 부적절한 고정은 동물에게 불안, 우울증, 공포와 같은 부정적인 감정을 유발할 수 있으며,이는 쥐의 부상 위험과 실험 인원의 물릴 가능성을 증가시킬 뿐만 아니라 연구 결과의 안정성과 설득력에도 영향을 미친다.
이전 연구에서 연구자들은 침술이나 전기침술 수술 전에 마취 고정(anethesia fixation)7, 높은 플랫폼 고정(high platform fixation)8, 결합 고정(binding fixation)6,9 또는 쥐털 고정(rat coat fixation)10을 자주 사용했다. 그러나, 마취가 신체11 및 뇌기능12에 미치는 영향을 감안할 때, 그리고 임상적 사례에서 의식이 있는 환자에게 침술을 시행한다는 점을 고려할 때, 마취는 연구 결과에 어느 정도 영향을 미칠 수 있다. 따라서 마취 고정에 비해 깨어 있는 상태에서 쥐를 편안하게 고정하는 것이 더 나은 선택입니다.
그러나, 마취되지 않은 상태에서, 다양한 고정 방법들은 또한 각각의 한계를 가지고 있는데, 여기에는 쥐의 털이 쥐의 털을 덮는 것에 의한 제한된 경혈 노출(10), 수술을 수행하기 위해 적어도 두 명의 개체가 필요하거나(13), 조절이 불가능한 고정기 크기(14), 또는 강제된 자세(6)에 있는 쥐의 스트레스 상태를 포함한다. 이러한 기술적 문제를 해결하기 위해 우리는 쥐 몸의 대부분의 부분에서 침술 조작에 적합한 쥐 재킷과 고정 랙을 설계했습니다. 이것은 연구자들이 쥐에 대한 침술 절차를 효율적으로 수행하는 데 도움이 될 수 있습니다.
이 프로토콜의 근거는 다음과 같습니다: 첫째, 쥐의 재킷에 있는 닫힌 모자는 쥐의 자연적인 어둠과 굴을 파는 성향을 이용하여 활동 범위를 제한합니다. 둘째, 쥐의 팔다리 관절 근처에 있는 묶인 밧줄은 물리적 압박 억제 기능을 제공하여 쥐의 움직임에 일정한 제한을 가합니다. 그러나 쥐는 재킷을 입은 상태에서도 여전히 수평으로 점프하고 움직일 수 있습니다. 마지막으로, 쥐는 매달렸을 때 고정된 힘 지점 없이는 땅에 닿을 수 없기 때문에 쥐 재킷에 서스펜션 고정 장치를 추가하여 움직임을 더욱 제한하고 바늘 고정을 보장했습니다. 고정 장치의 구성은 그림 1에 나와 있습니다.
그림 1: 랫 재킷과 서스펜션 고정의 개략도. (A) 평평하게 본 쥐 재킷의 일반적인 모습. (B) 쥐 재킷의 3차원 보기. (C) 머리와 허리의 경혈 근처를 절개한 특수 맞춤 쥐 재킷. (D) 여러 마리의 쥐가 동시에 높은 선반에 매달려 있는 그림. 1 : 직물 전체보기; 2 : 앞다리 출구; 3 : 뒷다리 출구; 4 : 밧줄을 묶습니다 ; 5 : 봉합 후 형성된 공동; 6: 머리 경혈을 노출시키기 위한 절개; 7 : 등과 허리 경혈을 노출시키는 절개. 8: 봉합 위치. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
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Protocol
본 연구에서 쥐를 대상으로 실시한 모든 절차는 중화인민공화국에서 공식적으로 채택한 실험동물 복지 및 윤리 검토 지침(2018)과 National Academies Press15의 Guide for the Care and Use of Laboratory Animals를 준수했다. 이 프로토콜은 세 가지 주요 단계로 구성됩니다. 첫째, 쥐 재킷은 무게가 다른 쥐의 개별 체형에 따라 맞춤 제작되고 장착됩니다. 다음으로, 침술 조작은 표준 절차에 따라 수행됩니다. 마지막으로, 쥐는 재킷에 매달려 있고 바늘은 같은 그룹 내의 쥐 사이에서 동시 개입의 필요성을 수용하기 위해 제자리에 남아 있습니다.
1. 사전 니들링 준비
- 랫 재킷 생산
- 재킷을 만들기 전에 쥐의 무게를 측정하고 체형을 측정하십시오. 다양한 체중의 쥐에 대한 이 프로토콜의 적합성을 확인하기 위해 그림 2와 같이 a에서 f까지의 측정을 포함하는 신체 치수의 독립적인 측정을 위해 220g, 300g, 400g 및 520g의 쥐를 선택합니다.
참고: 쥐의 신체 비율과 해당 재킷 크기 사이의 상관 관계는 그림 2에도 나와 있습니다. 다른 무게의 쥐에 대한 적절한 신체 길이 매개변수는 표 1에 기록되어 있습니다. - 두껍고 어두운 천의 직사각형 조각을 잘라 쥐 재킷을 만듭니다. 쥐 복부의 가장 두꺼운 부분 주위를 측정한 둘레와 동일한 너비를 펼친 천을 사용하십시오. 천의 길이는 쥐의 코끝에서 꼬리 밑부분까지의 거리와 같습니다( 그림 2 참조).
- 천을 반으로 접고 왼쪽 상단 모서리를 약 45°-65° 각도로 잘라 오른쪽 사다리꼴을 만듭니다( 그림 3A 참조).
- 왼쪽의 양면을 면사로 단단히 꿰매십시오. 지침은 그림 1B 및 그림 3B를 참조하십시오.
- 쥐의 상지와 하지가 통과할 수 있도록 천의 양쪽에 하나씩 두 개의 작은 구멍을 자릅니다( 그림 3C 참조). 두 가지 사이의 거리는 쥐 재킷의 위쪽 구멍 사이의 간격을 결정합니다. 두 가지 사이의 거리는 쥐 재킷의 아래쪽 구멍 사이의 간격을 결정합니다.
- 쥐의 겨드랑이와 장골 앞쪽 사이의 세로 거리를 사용하여 쥐 재킷의 위쪽과 아래쪽 구멍 사이의 간격으로 사용합니다. 어깨 관절의 둘레를 사용하여 쥐 재킷의 위쪽 구멍 둘레를 결정합니다. 랫 재킷의 아래쪽 구멍 둘레는 고관절 둘레를 사용합니다.
- 각 구멍 옆에 긴 헝겊 끈을 꿰매어 쥐를 고정하기 위해 재킷의 개구부 끝에서 몸체를 단단히 감쌀 수 있습니다.
- 재킷을 만들기 전에 쥐의 무게를 측정하고 체형을 측정하십시오. 다양한 체중의 쥐에 대한 이 프로토콜의 적합성을 확인하기 위해 그림 2와 같이 a에서 f까지의 측정을 포함하는 신체 치수의 독립적인 측정을 위해 220g, 300g, 400g 및 520g의 쥐를 선택합니다.
- 쥐 재킷 착용 방법
- 쥐에게 재킷을 입히기 전에 장갑을 착용하십시오. 한 손으로 테이블을 잡고 쥐 재킷의 중간과 뒷부분을 잡고 시작합니다. 다른 한 손으로는 먹이 케이지에서 쥐의 꼬리를 잡고 재킷 안에 부드럽게 넣습니다.
- 쥐가 앞으로 나아갈 때 머리가 재킷의 헤드기어에 닿습니다. 이때 양손을 사용하여 재킷의 구멍에서 왼쪽과 오른쪽 상지를 조심스럽게 잡아당깁니다.
- 재킷의 구멍 끝에서 묶는 밧줄을 잡고 왼쪽에서 오른쪽으로 교차하여 쥐의 몸통에 단단히 감습니다. 트렁크의 반대쪽에 단단히 묶어 제대로 고정하십시오. 쥐의 상지를 구속한 후 동일한 절차를 반복하여 하체를 고정합니다.
- 재킷 구멍에서 팔다리를 꺼낼 때 쥐의 발톱에 물리거나 긁히지 않도록 예방 조치를 취하십시오. 밧줄의 조임이 적절하게 조정되었는지, 즉 쥐의 국소 사지 허혈 및 저산소증을 유발할 정도로 너무 조이지 않고 너무 느슨하지 않아 쥐가 쉽게 탈출할 수 있는지 확인하십시오( 비디오 1 참조).
- 고정 랙 및 S 자형 철제 후크
- 고정 랙은 2개의 무거운 철제 트레이(길이 24cm, 폭 12cm, 높이 2cm)와 각 트레이에 단단히 용접된 철제 기둥(길이 60cm)으로 구성됩니다. 고정된 높이에서 조정 및 유지할 수 있는 나사 연결 구조를 사용하여 두 개의 철 기둥에 동일한 높이의 단단한 철 스틱(길이 145cm)을 고정합니다( 그림 4A 참조).
- 재킷을 입은 쥐를 쇠막대기에 연결하려면 S자형 후크(직경 11cm)를 사용합니다. 후크의 한쪽 끝을 재킷의 스트랩에 감고 다른 쪽 끝은 철봉에 매달아 놓습니다. 두 개의 S자형 후크를 사용하여 쥐를 막대기에 고정합니다. 전체 구조는 그림 1D 및 그림 4B 를 참조하십시오.
그림 2: 쥐의 체형과 일치하는 쥐 재킷 크기의 해당 다이어그램. 다이어그램에서 매개 변수 a는 상지와 쥐의 몸통 사이의 관절 뒤쪽에서 횡 거리를 나타냅니다. 이 값은 쥐 재킷의 상지에 대한 관통 구멍 사이의 간격 측정으로 사용됩니다. 마찬가지로, 매개변수 b는 쥐의 양측 하지가 몸통과 연결되는 등의 가로 거리를 나타냅니다. 이 측정은 쥐 재킷의 하지에 대한 관통 구멍의 간격을 결정합니다. 매개변수 c는 쥐 복부의 가장 두꺼운 부분의 둘레를 의미하며, 이는 쥐의 재킷 직물에 대한 너비 측정으로 사용할 수 있습니다. 매개변수 d는 쥐의 겨드랑이에서 장골 앞쪽까지의 거리를 나타내며 재킷의 위쪽 구멍과 아래쪽 구멍 사이의 세로 거리를 결정합니다. 매개변수 e는 쥐의 코끝에서 꼬리 바닥까지의 세로 거리에 해당하며, 쥐의 재킷 천의 길이 측정 역할을 합니다. 매개변수 f는 상지와 쥐의 몸통을 연결하는 관절의 둘레를 나타내며 상지가 통과하는 구멍의 둘레 역할을 합니다. 매개변수 g는 하지와 쥐의 몸통을 연결하는 관절의 둘레를 나타내며 하지가 통과하는 구멍의 둘레를 결정합니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
| 본체 중량 (g) | 체형 매개변수(cm) | ||||||
| a | b | c | d | e | f | g | |
| 220 | 6.0 | 7.0 | 15.0 | 8.0 | 19.0 | 5.0 | 7.0 |
| 300 | 7.0 | 7.5 | 17.0 | 10.0 | 21.0 | 6.0 | 8.0 |
| 400 | 8.0 | 8.5 | 19.0 | 11.5 | 23.0 | 6.5 | 9.0 |
| 520 | 8.0 | 10.0 | 20.0 | 12.5 | 26.0 | 7.0 | 9.5 |
표 1. 체중이 다른 쥐의 체형 매개변수의 측정 결과.
그림 3: 쥐 재킷의 물리적 모양과 사용법을 보여주는 다이어그램 . (A) 랫 재킷의 평면 외부 모습. 쥐의 재킷 모양은 직각의 사다리꼴과 비슷하며, 왼쪽과 오른쪽에 쥐의 상지와 하지가 통과할 수 있는 별도의 구멍이 있습니다. (B) 쥐 재킷의 펼쳐진 외부 모습. 헤드기어를 닫으면 반밀폐된 구멍이 생성되어 쥐가 들어가도록 유인하는 중요한 구성 요소 역할을 합니다. (C) 재킷을 입은 쥐의 옆모습. 쥐의 팔다리가 옷의 구멍을 통과하면 끈을 몸통의 복부 표면 위로 교차시켜 적절한 장력으로 뒤쪽에 단단히 고정합니다. 이렇게 하면 쥐가 상대적으로 움직이지 않게 됩니다. (D) 쥐 재킷을 입은 쥐의 복부 모습. 재킷의 복부 표면은 쥐의 복부 피부를 노출시켜 복부 지점에서 침술을 위해 편리하게 접근할 수 있도록 합니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
동영상 1: 쥐 재킷 입기. 이 비디오는 재킷에 쥐를 입히는 일반적인 과정을 보여줍니다. 이 비디오를 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.
그림 4: 상승된 고정 랙의 물리적 모양과 사용법을 보여주는 다이어그램. (A) 높은 고정 랙. 이 랙은 주로 각 트레이에 용접된 두 개의 수직 철제 기둥(길이 60cm)과 지면과 평행하게 배치된 긴 수평 철제 막대기(길이 145cm)로 구성됩니다. 나사는 수직 기둥과 같은 높이에 수평 스틱을 고정하는 데 사용됩니다. (B) 고정 랙의 쥐 서스펜션. 쥐 재킷을 입은 쥐는 쥐 당 두 개의 S 자형 후크를 사용하여 고정 랙에 단단히 고정됩니다. (C) 여러 쥐에 대한 동시 전기 침술 치료. 꼬리 움직임으로 인한 잠재적인 간섭을 방지하기 위해 쥐 사이에 쥐의 꼬리 길이와 동일한 적절한 간격을 유지해야 했습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
2. 전기침술 시술
- 일상적인 준비
- 고정 랙을 수평 책상이나 바닥에 놓습니다.
- 바늘을 꿰매는 시술을 하기 전에 전기 면도기를 사용하여 경혈 주변의 털을 제거하여 완전히 노출되도록 합니다. 관위안(CV4, 배꼽 아래 약 25mm)과 같이 쥐의 복부에 구멍을 뚫을 경혈이 있는 경우 쥐옷의 너비를 적절하게 줄여 복부 경혈을 노출시킵니다.
- 쥐 재킷으로 덮이지 않은 복부 정중선의 틈에서 경혈을 찾은 다음( 그림 3D 참조) 바늘을 주입합니다.
- 바이후이(GV20, 정수리골 중앙에 위치)와 같이 쥐의 머리에 경혈을 찔러 넣으면 머리의 해당 위치를 작게 절개하여 GV20 주위의 피부가 완전히 노출됩니다( 그림 1C 참조).
- 상지의 Neiguan (앞다리 안쪽, 요골과 척골 봉합사 사이, 손목 관절에서 약 3mm 떨어진 곳)이나 하지의 Zusanli (ST36, 무릎 관절의 후방 측면, 비골 머리 아래 약 2mm)와 같은 쥐의 팔다리에 경혈을 할 때, 경혈이 명백히 노출되어 있기 때문에 한 손은 팔다리를 고정하는 데 도움을 주고 다른 손은 침술 수술을 직접 수행할 수 있습니다.
- 경혈이 Shenshu(BL23, 제2요추 아래, 등 정중선에서 6mm 간격)와 같이 쥐의 등이나 허리에 있는 경우 쥐의 재킷 중앙에 약 2cm 너비의 구멍을 잘라 해당 부위의 피부를 완전히 노출시킵니다( 그림 1C 참조).
- 쥐에게 재킷을 입힌다. 알코올 면봉으로 경혈 부위 피부를 소독 한 후 침 시술을 시작합니다.
- 니들링 기술: 경혈을 정확하게 찾습니다. 멸균 일회용 침(0.16mm x 7mm)을 쥐의 경혈에 적절한 깊이로 삽입합니다.
- 전기 침술 수술
- 수평 철봉에 전극선을 감습니다. 이 단계는 전기 침술 클립에 작용하는 중력으로 인해 바늘이 빠질 위험을 줄입니다. 그런 다음 전극선의 끝을 바늘 손잡이에 단단히 부착합니다.
- 전원을 켜고 적절한 주파수, 전류 및 시간 매개변수를 선택합니다. 이 실험에서 파라미터는 2Hz, 1mA 및 15분으로 설정되었습니다. 매개변수가 조정되면 전기 침술 치료 과정을 시작합니다(비디오 2 및 비디오 3 참조).
- 쥐에 대한 동시 전기 침술: 치료 중에 S자형 갈고리를 사용하여 같은 그룹의 쥐를 쇠막대기에 함께 매달고 동시에 전기 침술 개입을 받도록 합니다.
- 알림: 쇠막대기는 튼튼해야 할 뿐만 아니라 한 무리의 쥐를 동시에 치료할 수 있을 만큼 충분히 길어야 합니다. 이 실험에서는 쥐들 사이에 적절한 간격을 두고 간섭을 하지 않으면서 3-4마리의 쥐를 동시에 치료할 수 있습니다( 그림 4C 참조).
- 전기 침술 치료 중 쥐 반응 관찰: 수술을 완료하는 데 필요한 인원 수, 쥐를 고정하는 데 걸리는 시간, 전기 침술 치료 중 쥐의 반응, 수술 중 떨어진 바늘의 수, 수술 중 발생할 수 있는 우발적 사망과 같은 요인을 기반으로 쥐의 전기 침술에 대한 이 고정 방법의 적합성을 평가합니다.
- 바늘 제거
- 미리 설정된 시간이 완료되면 전기 침술 장치가 자동으로 꺼집니다. 바늘 손잡이에 연결된 작은 클립을 제거하고 쥐의 피부 아래에서 침을 조심스럽게 제거하면 전기 침 치료 과정이 완료됩니다.
- 끈을 풀고 쥐 재킷의 머리 덮개를 들어 올린 다음 쥐를 우리 위에 놓습니다. 그러면 쥐는 자유롭게 재킷에서 벗어나 독립적으로 케이지에 들어갈 수 있습니다( 비디오 4 참조).
동영상 2. 요추 부위의 침 경혈. 이 비디오는 재킷을 입은 쥐의 옷차림, 허리의 경혈에 침 바늘을 삽입하는 것, 그리고 전기 침술 장치의 후속 연결을 포함하는 포괄적이고 일관된 절차를 보여줍니다. 이 비디오를 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.
동영상 3. 복부와 하지의 침 경혈. 이 비디오는 재킷을 입은 쥐의 옷차림, 복부와 하지에 위치한 경혈에 침 바늘을 삽입하는 것, 그리고 전기 침술 장치의 후속 연결을 포함하는 포괄적이고 일관된 절차를 보여줍니다. 이 비디오를 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.
동영상 4. 쥐 재킷 제거. 이 비디오는 쥐에게서 재킷을 벗는 관습적인 관행을 보여줍니다. 이 비디오를 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.
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Representative Results
본 실험에서는 총 12마리의 랫트를 전기침 치료 대상으로 선정하였으며, 고정 방법에 따른 래트의 반응을 관찰하였다( 표 2 참조). 12마리의 쥐 중 단 1마리의 쥐만이 15분의 전기침 침 유지 기간 동안 격렬한 투쟁을 보였다. 격렬한 움직임의 결과로 바늘이 중간에 떨어져 전체 쥐 수의 8.33 %를 차지했습니다. 이 결과는 일반적으로 사용되는 고정 방법이 현저한 수준의 안정성과 신뢰성을 나타낸다는 것을 시사합니다. 한 마리의 쥐가 보여준 투쟁에도 불구하고, 그룹의 쥐 대다수는 치료 내내 적절한 바늘 고정을 유지했습니다. 더욱이, 전기 침술 치료를 위해 쥐를 고정시키기 위해 이 방법을 사용한 2개월의 실험 기간 동안 쥐 사망 사례가 기록되지 않았으며, 이는 쥐에 대한 이 고정 방법의 안전성을 시사합니다.
또한, 표 3에서는 이 고정 방법을 문헌 9,10,13,14에 보고된 4개의 다른 방법과 비교하였다. 첫째, 안정성 측면에서, 새로 만들어진 랫 홀더 고정을 사용하는 다섯 번째 방법의 안정성이 약간 떨어지는 것을 제외하고, 다른 방법은 비교적 안전한 고정을 달성했습니다. 시간 측면에서, 이 방법으로 쥐 한 마리를 고정하는 데 필요한 평균 시간은 쥐 코트 스윙 고정 방법보다 짧았습니다. 나머지 방법은 각각의 논문에서 고정에 필요한 시간을 지정하지 않았습니다. 따라서 토론이 제공되지 않습니다. 쥐 한 마리를 고정하는 데 필요한 인원 수로 볼 때, 이 방법과 쥐털 스윙 서스펜션 방법 모두 한 사람만 있으면 작업을 완료할 수 있어 실험 효율이 높아졌다. 그러나 노출된 경혈 범위 측면에서 이 프로토콜에서 특별히 설계된 쥐 재킷은 신체의 대부분의 경혈을 노출하기 위한 요구 사항을 충족할 수 있는 반면 스윙 서스펜션 방식의 쥐 코트는 주로 팔다리를 노출합니다. 고정에 사용되는 재료와 관련하여 이 방법에 필요한 재료는 실험실과 일상적인 환경 모두에서 비교적 쉽게 얻을 수 있습니다. 더욱이, 고정하는 동안 쥐의 자세에 관해서는, 자연스러운 자세가 강제적인 자세보다 분명히 더 편안하다. 전반적으로 이 방법은 쥐 코트 스윙 서스펜션 고정 방법과 유사하지만 쥐 재킷의 원단과 디자인을 개선하여 신체 경혈을 더 많이 노출할 수 있도록 했습니다. 더욱이, 이 프로토콜은 패브릭 스트랩에 매달려 있는 것과 비교하여 더 견고한 강철 파이프를 사용하여 여러 쥐가 고정 랙에서 동시에 전기 침술 치료를 받을 때 개별 쥐가 다른 쥐를 격렬하게 흔들어 발생하는 부작용을 줄입니다. 이를 통해 실험 데이터의 안정성과 신뢰성을 보장할 수 있습니다.
앞서 언급한 요소를 종합적으로 고려할 때 이 접근 방식은 쥐에 대한 안정성, 효율성, 경제성 및 상대적 편안함의 이점을 나타내므로 바늘 삽입 고정에 유용한 옵션이 됩니다.
| 고정 방법 | 고군분투하는 쥐의 수 | 고군분투하는 쥐의 비율(%) | 치료 중 바늘이 떨어지는 쥐의 수 | 치료 중 바늘이 떨어지는 쥐의 비율(%) | 수술 중 사망한 쥐의 수 | 수술 중 사망한 쥐의 비율(%) |
| 재킷 그룹으로 묶인 서스펜션 고정 | 1 | 8.33 | 1 | 8.33 | 0 | 0 |
표 2. 전기 침술 치료 중 고정 쥐의 반응(n=12).
| 일련 번호 | 고정 방법 | 쥐의 고정이 안정 되 고 안심 | 쥐를 고치는 데 필요한 시간 | 쥐를 고치는 데 필요한 인원 수 | 노출될 수 있는 경혈의 위치와 범위 | 고정 장치 또는 재료의 접근성 | 쥐를위한 고정 방법의 편안함 : 자연 또는 강제 위치 | 참조 | |||||||||||||||
| 1 | 우리의 실험에서 재킷과 결합된 서스펜션 고정 | √ | 50-63 초 | 1 | 복부, 머리, 등, 허리, 팔다리 | 쉽게 사용할 수 있습니다. | 자연스러운 위치 | ||||||||||||||||
| 2 | Shu-Mu 경혈 조합을위한 침술 및 뜸을위한 고정 프레임 (경보 지점과 백 이송 지점을 결합한 경혈 선택) | √ | / | / | 머리, 팔다리, 등, 허리 | 고정 프레임은 사용자 정의해야 합니다. | 강제 위치 | 9 | |||||||||||||||
| 3 | 코트로 묶인 흔들리는 쥐의 고정 방법 | √ | 85-93 초 | 1 | 사지 부분 | 쉽게 사용할 수 있습니다. | 자연스러운 위치 | 10 | |||||||||||||||
| 4 | 낡은 그물망 케이지 덮개로 만든 쥐 고정 장치 | √ | / | ≥2 | 경혈의 범위는 제한되지 않습니다 | 쉽게 사용할 수 있습니다. | 강제 위치 | 13 | |||||||||||||||
| 5 | 갓 만든 쥐 홀더 | 고정 후에도 쥐의 앞다리와 뒷다리는 여전히 어느 정도의 이동성을 가지고 있습니다. 또한 쥐의 목 고정 막대의 교차점이 너무 높아 쥐의 질식으로 이어질 수 있는 특정 위험이 있습니다. 너무 낮으면 쥐의 머리 고정이 불안정할 수 있습니다. | / | / | 경혈의 범위는 제한되지 않습니다 | 쥐 홀더는 특별한 사용자 정의가 필요합니다. | 자연스러운 위치 | 14 | |||||||||||||||
표 3. 쥐 침술과 뜸 실험에서 다양한 고정 방법의 비교 결과.
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Discussion
전기 침술은 인지 장애(cognitive impairment)16,17, 심근 손상(myocardial injury)18, 염증성 통증(inflammatory pain)19과 같은 다양한 질병에 좋은 치료 효과가 있는 것으로 나타났다. 그 작용 메커니즘을 이해하기 위해 주로 쥐를 이용한 동물 실험이 수행되었습니다. 시술 중 동물을 고정하는 것은 정확한 결과를 위해 매우 중요합니다. 많은 연구에서 동물 마취 후 전기 침술을 시행했지만, 이 방법은 뇌 기능을 저해하고 실험 정확도를 떨어뜨릴 수 있습니다. 또한, 마취제를 장기간 투여하면 바늘 시술이 길어지고 동물의 폐사 가능성이 높아집니다. 그러나, 보고된 비마취 고정 방법도 한계가 있으며, 이는 표 3에서 주의 깊게 논의되었다.
이 연구는 높은 고정 랙과 함께 맞춤형 쥐 재킷을 도입하는 새로운 프로토콜을 제시합니다. 이 프로토콜의 중요한 측면은 쥐의 체형에 따라 적절한 크기의 쥐 재킷을 만들고 바늘로 꿰맬 경혈의 특정 위치에 따라 추가로 맞춤화하는 것입니다. 쥐 재킷을 맞추는 데 도움이 되는 팁은 어둠과 굴을 파는 쥐의 자연스러운 성향을 활용하여 헤드기어에 들어가도록 하는 것입니다. 쥐의 머리가 고정되면 후속 고정 절차가 훨씬 간단해집니다.
적응 훈련 후, 쥐는 이 기술을 사용하는 동안 최소한의 불편함을 보여주었습니다. 직물, S자형 후크, 철제 스틱 및 기타 재료와 같은 필요한 장비 재료는 쉽게 접근할 수 있고 비용 효율적이므로 실험 비용을 줄일 수 있습니다. 또 다른 장점은 쥐의 크기에 따라 쥐 재킷 스트랩의 조임을 조정할 수 있어 유연하고 제어할 수 있다는 것입니다. 전체 고정 작업은 한 사람이 독립적으로 완료할 수 있으며, 장치의 높은 구성을 통해 연구원은 작은 동물 그룹을 동시에 치료할 수 있으므로 실험 효율성이 크게 향상되고 전체 실험에 소요되는 시간이 단축되며 동일한 동물 그룹 간의 불일치가 최소화됩니다. 또한 높은 플랫폼은 평평한 지면에 직접 배치할 수 있으므로 테이블이 필요하지 않아 공간 활용을 최적화합니다. 또한, 이러한 디자인은 기니피그와 같은 다른 실험 동물에 사용하기 위해 수정 및 확장될 수 있으며, 또한 뜸 처리에 효과적으로 사용될 수 있습니다.
이 접근 방식의 한 가지 잠재적인 제약은 연구원이 기술에 대한 높은 수준의 숙련도를 보유해야 할 뿐만 아니라 각 쥐의 몸 길이와 팔다리 간격에 맞는 다양한 치수의 쥐 재킷을 만들어야 한다는 것입니다. 또한 일부 쥐는 쥐 재킷 및 서스펜션 고정에 처음 노출될 때 경미한 불편함과 스트레스를 경험할 수 있습니다. 따라서 전기 침술 치료를 받는 쥐를 위한 적응 훈련을 구현하는 것이 필수적입니다. 또한, 시술 중에 이러한 쥐를 조심스럽게 다루어야 하며, 동요하거나 순응하지 않는 경우 부드러운 쓰다듬기를 사용하여 진정시키고 진정시키는 것이 중요합니다. 불가피한 스트레스가 쥐의 신체 상태 및 행동 실험에 미치는 영향을 최소화하기 위해 대조군(빈 대조군 및 모델 대조군 포함)도 전기침술 치료군과 동시에 동일한 양의 취급, 쥐 재킷 바인딩 및 상승 고정을 받아야 한다는 점에 주목할 가치가 있습니다. 전기 침 치료를 받지 않더라도.
요약하면, 이 고정 방법은 쥐를 고정하기 위한 편리하고 효과적인 옵션을 제공하여 안정적이고 원활한 침술 수술 및 바늘 유지 과정에 대한 신뢰할 수 있는 보장을 보장합니다.
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Disclosures
모든 저자는 잠재적인 이해 상충이 없다고 선언했습니다.
Acknowledgments
저자는 이 논문에서 그림 2를 만드는 데 사용된 자료(공인 라이선스 ID: URUUO5699e)를 제공해 준 Home for Researchers의 Figdraw 과학 연구 도면 플랫폼에 감사를 표합니다. 이 연구는 중국 국립 자연 과학 재단 (81873380, 82074566), 후베이 성 자연 과학 재단 (2022CFCO43) 및 중국 전통 의학 관리국의 국가 유명 중국 의학 유산 스튜디오 건설 프로젝트 ([2022] No.5, [2022] No.75)의 보조금을 지원받았습니다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 75% alcohol | Shandong Lircon medical technology co., ltd | 2002-0059 | Disinfection |
| acupuncture needles | Beijing Luo ya shan chuan medical equipment co., Ltd. | needling | |
| Adult Sprague-Dawley (SD) rats | Liaoning Changsheng biotechnology co., Ltd. | SCXK 2020-0001 | The recipient subjected to fixation |
| an elevated fixation rack | Taizhou shiai instruments and equipments for scientific and teaching research Co., ltd | / | Fix rats |
| Hans electronic acupuncture apparatus | Beijing Huayun Ante Science and Technology Co. Ltd. | HANS-200A | electroacupuncture |
| Medical cotton ball | Jiangsu Misawa Medical Supplies Co., Ltd. | 20172142357 | Disinfection |
| Pet electric clipper | Fenghua Xikou Lubao Knives & Scissors Electrical Appliance Factory | / | Shave the hair of rats |
| Tweezers | Qingdao Schultz Biotechnology Co., ltd | Pinch cotton balls |
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