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連絡先を介して可視化の土壌微生物スライド法と顕微鏡
 

連絡先を介して可視化の土壌微生物スライド法と顕微鏡

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様々 な生物と土壌中の無機成分との関係は土壌の変化と環境のストレスを理解することが重要ですが、直接可視化することがなく解明することはできません。

土壌は、非常に複雑なシステムは、何百万もの多様な生物の生息地です。直接植物の根の周りの土壌の地域は特に、根圏と呼ばれる、植物の根が直接影響を受ける生物のユニークな配列が含まれています。

根圏の非生物的、または非生物学的コンポーネントには、土壌のテクスチャに貢献する無機の粒子サイズと形状に至るまでが含まれます。植物残渣、ルーツ、有機物、微生物、生物、または生物学的部分が含まれます。

土壌の変化に影響を与える要因を理解するために、環境ストレスを予測する、このビデオは根圏土壌の生物的・非生物的構成要素の直接可視化を示します。

微生物は土壌毛穴内にある水の中に存在する傾向があります。細菌は、最も単純な最も豊富な生物、土壌、および球菌、桿菌と糸状の形態と呼ばれる棒と呼ばれる球を含む多くの形態であります。

カビ、酵母などの真菌種は、土で 2 番目の最も豊富な生物です。彼らは仕事を分解し有機物をリサイクルします。微視的な糸状菌類が視覚的に異なる他の微生物から胞子を解放する長く、枝分かれした菌糸を所有しているようです。

これらの生物間の関係の観察はチャレンジです接触スライド アッセイを使用して達成することができます。このメソッドは、ガラス スライドを土に数日間水没と生物と土壌粒子のスライド表面に吸着することによって実行されます。

表面のスミアを防ぐために角度では、スライドが削除されます。微生物は酢酸で固定、ローズ ベンガル染色顕微鏡を介して可視化を有効にします。

スライドの試金技術の背後にある原理を理解すると、後は研究室でプロセスを見ています。

まず、庭の表土を収集し、研究室に土を転送します。2 別容器に土壌の 150 グラムの重量を量る。1 つのコンテナーの有機体の急速な拡散を促進する栄養素に変更されます治療のサンプルとしてラベルを貼ってください。変更されないコントロールとその他のラベルを付けます。

土壌の含水率のこのコレクションの決定ビデオで示したテクニックを用いた土壌中の水分を計算します。この計算に基づいて、乾燥重量ベースで、土壌中の水の量を決定します。今 15% 土壌水分を与えるに追加する必要があります水の量を計算します。これはフィールドの容量で微生物の成長に最適な水分をもたらします。

蒸留水、メスシリンダーを使用しての計算の量を測定します。各コンテナーに水の計算量を注ぐ。土の以前に決定された乾燥重量に基づいて、質量、乾燥重量ベースを使用して最終的な土壌のグルコース濃度 1% を達成するために必要なブドウ糖の量を計算します。このグルコース量の重さし、治療のコンテナーのみを追加します。

硝酸アンモニウムの 200 mg の重量を量るし、治療のコンテナーのみを追加します。硝酸アンモニウム態窒素は、土壌微生物の窒素栄養源として提供しています。コンテナーに土、グルコースと硝酸アンモニウムの混合物を混ぜます。

次に、4 つのクリーンな顕微鏡スライドのラベル: 治療として 2 つと 2 つのコントロールとして。処理土壌コンテナーに 2 つの治療スライドを挿入します。土壌表面上公開される各スライドのセクションを残すし、2 つのスライドの間にギャップがあることを確認します。

同じ方法で土壌コンテナー コントロールに 2 つの制御スライドを挿入します。プラスチック製のラップとカップをカバー、ゴムバンドで固定します。空気の転送を許可するが、まだ余分な蒸発を防ぐためにプラスチック製のラップの数回を穿刺します。

最後に、両方のコップの重さ、自分の体重を記録し、7 日間室温で指定された領域にそれらをインキュベートします。

7 日間培養後土のカップを秤量することにより土壌の水分を計算します。重量が水の蒸発により失われているかどうかを判断し、必要であれば水を交換します。

コンテナーから、プラスチック製のラップ、傾斜した位置に、各スライドを押しながら撤退してスライドの上面が邪魔で土から 2 つのスライドを取り外します。

優しく大きな土壌粒子を除去するスライドをタップします。少し湿らせたペーパー タオルで、スライドの下面を拭きます。ヒューム フードに室温で乾燥させます。一度乾燥、鉗子、スライドをピックアップし、1 〜 3 分用酢酸に没頭します。

過剰な酸を除去する蒸留水の穏やかな流れとスライドの上部をすすいでください。すべてのスライドには、この手順を繰り返します。乾燥空気にスライドを許可します。

余分な染料をキャッチするためのコンテナーで、染色ラックにスライドをサポートします。フェノール ローズ ベンガルの染料で各スライドの表面を覆う優しくスポイトを使用して。世話を濡れているスライドを保つために必要に応じてより多くの染料を追加する 5 〜 10 分のためにスライドを許可します。優しく余分な染色を削除する水スライドをすすいで、室温で乾燥するスライドを許可します。

油浸対物レンズを用いた光顕微鏡のスライドを確認します。処理土でお越しの際にもより多くの土壌微生物。

典型的な土壌試料中の真菌や細菌の有機体の間の空間的相互作用を視覚化することができます簡単に。土粒子は、褐色の不規則な図形を表示します。

真菌は、放線菌は、細い糸状の菌糸を表示中に太い糸状の菌糸を表示します。

小さい球菌または塊、土粒子や糸状菌の菌糸を裏地で通常のロッド形状として細菌があります。

土壌から有機体の直接分離土壌と環境の特性を理解することが重要です。

昆虫病原性線虫が寄生昆虫ラウンドワーム顕微鏡です。間接触スライド アッセイには表示されません、彼らは、この例で示すように、収集した土壌試料から分離できます。

まず、線虫が目視検査から識別される昆虫を使用して土に餌を付けた。線虫は、湿った、暗い環境に死んだ昆虫を置き、周囲の水を移行する線虫をできるように死んだ昆虫の餌から分離しました。線虫、水から収集され分析します。

糸状菌は、土壌の健康栄養塩循環の役割のために不可欠です。この例では分離と土壌糸状菌の観測を行った。

土壌試料は、水で希釈され、滅菌ローズ ベンガル ストレプトマイシン寒天を別に追加。ストレプトマイシンは細菌の増殖を防ぐし、真菌の成長を有効に。真菌のコロニーはカウントされ、粘着テープを使用してスライド ガラスにマウントされています。菌類は、光学顕微鏡をイメージしました。

土壌微生物は自然土、死んだ植物や生物などのコンポーネントに分割します。この例で示すように、生分解性、生分解性プラスチック フィルムの植民地化、検討しました。

菌類は、数ヶ月間土に埋もれてプラスチック フィルムから分離された.菌は、プラスチック フィルム上の成長は個別にテスト、されました。プラスチック フィルム次いで, 成長メディアなしで選択した真菌ひずみ、菌によるプラスチックの直接分解を観察するために。

土壌微生物の定性用スライド アッセイをゼウスの紹介を見てきただけ。今接触スライドを準備し、土壌微生物を視覚化する方法を理解する必要があります。見てくれてありがとう!

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