Drosophila Courtship Conditioning: Eine Methode, um Lernen und Gedächtnis in Fliegen zu testen

-Zuerst, isolieren Einzelne naive, oder unmated, Drosophila melanogastor Männchen. Dann, um die Männchen zu konditionieren, Das Männchen zeigt typische Balzverhalten wie Orientierung an ihr, folgen ihr herum, tippen sie mit einem Vorderbein, und ausstrecken und vibrieren seinen Flügel, um die Balz zu produzieren. Er kann auch versuchen, lecken und Paarung. Egal die Bemühungen, das Weibchen bleibt nicht-empfänglich, und das Männchen erlebt eine Ablehnung. So lernt er nicht, eine weibliche.

Um das Gedächtnis des Mannes zu testen, lassen Sie ihn ruhen, und dann setzen Sie ihn zu einem anderen gepaarten Weibchen. Der ausgebildete Mann wird nicht versuchen, diese Fliege zu hofieren, weil er die Erinnerung an vergangene Ablehnung behält. Im Beispielprotokoll werden wir sehen, wie Fliegen während der Trainings- und Testphasen eines Balzkonditionierungstests für kurz- und langfristige Gedächtnisbeurteilung behandelt werden.

- Beginnen Sie mit der Anästhesisierung aller Erwachsenen aus den vier Tage alten Paarungsdateien. Trennen Sie die Geschlechter, und übertragen Sie einzelne vorsamten Weibchen in jeden der 12 Brunnen einer Reihe eines Wohnblocks. Dann, mit einem Aspirator und keine Anästhesie, entfernen Sie die naiven Männchen aus ihren Hausbrunnen und übertragen sie in die Brunnen mit den prämated Weibchen. Wiederholen Sie diesen Prozess in der zweiten Reihe, um 12 weitere Paare einzurichten.

Um lernen oder Kurzzeitgedächtnis zu testen, führen Sie dieses Setup im Morgengrauen durch und lassen Sie die Trainingszeit für eine Stunde dauern. Um das Langzeitgedächtnis zu testen, richten Sie die Paare vier Stunden vor der subjektiven Morgendämmerung ein und lassen Sie das Training acht Stunden dauern.

- Für das Lernen und Gedächtnis hergestellt werden, ist es wichtig, dass die Männchen nicht zu kopulieren, so regelmäßig überprüfen Sie die Paare während der Trainingszeit, um sicherzustellen, dass die Männchen abgelehnt werden.

Wenn die Trainingszeit vorbei ist, entfernen Sie vorsichtig die Männchen aus den Brunnen mit einem Aspirator, nicht Kohlendioxid-Anästhesie. Laden Sie die Männchen in einen neuen Gehäuseblock. Für das Lernexperiment, sofort testen Sie die Männchen nach dem Training, ohne Eine Ruhezeit. Für die Kurzzeitgedächtnis-Experiment, lassen Sie die Männchen eine Stunde Ruhe vor Beginn der Testphase. Für die langfristige Gedächtnisexperiment, ruhen die Männchen bis zum folgenden Anbruch subjektiv.

Um sich auf die Testphase des Experiments vorzubereiten, beantragen Sie prämated Weibchen und übertragen sie zu einem neuen normalen Lebensmittel abscheulich. Lassen Sie mindestens eine Stunde für die Fliegen von der Anästhesie zu erholen. Als nächstes bereiten Sie die Test-Setup. Achten Sie darauf, die Videorecorder bereit, Aktivitäten in den Balz Arenen aufzuzeichnen.

Um den Test zu starten, verwenden Sie sanfte sehnende, um einen Testmännchen aus dem Wohnblock in die Balzarena zu übertragen, wobei die Trennwände geschlossen sind. Bewegen Sie die Einstiegslöcher zwischen den Arenen, bis alle 18 Arenen mit einzelnen Männchen beladen sind. Dann, mit der gleichen Technik, übertragen Sie einzelne prämated Weibchen zu jeder der 18 Arenen, aber auf die gegenüberliegende Seite der Trennwände. Jetzt, sorgfältig kippen Sie die Balz Arena, und legen Sie es unter der Videokamera mit den Brunnenöffnungen nach unten in Richtung der weißen Bankoberfläche. Dann entfernen Sie die Trennwände und starten Sie die Videoaufzeichnung. Wenn das Experiment vorbei ist, entfernen Sie die Fliegen mit einem Vakuum aus den Arenen und belüften Sie die Balzkammern für mindestens 10 Minuten, bevor sie wiederverwendet werden.