Дрозофила Кондиционирование ухаживания: метод для проверки обучения и памяти в мухах

-Во-первых, изолировать одного наивного, или unmated, Drosophila меланогастор мужчин. Затем, чтобы состояние мужчин, добавить женщину, которая уже спаривается, и, следовательно, не восприимчивы к ухаживаниям. Самец отображает типичные ухаживания поведения, такие как ориентация к ней, после нее вокруг, нажав ее с передняя рука, и расширение и вибрирует его крыло для производства ухаживания песни.

Чтобы проверить память самца, позвольте ему отдохнуть, а затем подвергнуть его другой брачной женщине. Обученный самец не будет пытаться ухаживать за этой мухой, потому что он сохраняет память о прошлом отказе. В примере протокола мы увидим, как мухи обрабатываются во время тренировок и испытаний этапов ухаживания кондиционирования анализ для краткосрочной и долгосрочной оценки памяти.

- Начните с обезболивания всех взрослых из четырехдневных брачных файлов. Отделяйте полы и перенесите одиноких женщин в каждый из 12 колодцев одного ряда жилого дома. Затем, используя аспиратор и не анестезию, удалите наивных самцов из их домашних колодцев и перенесите их в колодцы, содержащие предварительно сещие самки.

Чтобы проверить обучение или краткой памяти, выполнить эту установку на рассвете, и пусть учебный период идти в течение одного часа. Чтобы проверить долгосрочную память, настроить пары за четыре часа до субъективного рассвета, и пусть обучение продолжаться в течение восьми часов.

- Для того, чтобы обучение и память была установлена, важно, чтобы мужчины не совокупляются, поэтому периодически проверяйте пары во время тренировочного периода, чтобы убедиться, что мужчины отвергаются.

Когда тренировочный период закончился, аккуратно удалите самцов из колодцев с помощью аспиратора, а не анестезии углекислого газа. Загрузите самцов в новый жилой блок. Для учебного эксперимента немедленно проверьте самцов после тренировки, без периода отдыха.

Чтобы подготовиться к тестовому этапу эксперимента, анестезировать предустановку самок и перевести их в новую нормальную пищу мерзкой. Разрешить хотя бы час для мух оправиться от анестезии. Далее подготовьте тестовую установку. Обязательно иметь видеомагнитофоны, готовые записывать активность на ухаживаниях.

Чтобы начать тест, используйте мягкое стремление перенести тест мужчины из жилого квартала в ухаживания арене с разделителями закрыты. Перемещение входных отверстий между аренами до тех пор, пока все 18 арен загружаются с одинокими самцами. Затем, используя ту же технику, перенесите отдельных заранее подобранных самок на каждую из 18 арен, но на противоположную сторону разделителей. Теперь осторожно переверните арену ухаживания и поместите ее под видеокамеру с отверстиями к белой поверхности скамейки. Затем удалите разделители и запустите видеозапись. Когда эксперимент закончен, удалить мух с арен с помощью вакуума и проветрить ухаживания камер, по крайней мере 10 минут, прежде чем они будут повторно использованы.