Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 20 seconds.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- تحت مجهر تشريح وفي وسائل الإعلام المكملة للمصل، قم بإزالة الجهاز التناسلي من كل ذبابة مع ملقط. أولا، قم بإزالة أجزاء من الجهاز الهضمي التي قد تكون رافقت الجهاز التناسلي. لعزل الغدد الملحقة والقناة القذفية، وإزالة الخصيتين، ومصباح القذف، والتشجير. اغسل الأنسجة لمدة دقيقة إلى دقيقتين في PBS لإزالة المصل.
لتعريض الخلايا داخل الغدد لمحلول الانفصال، عقد مركز كل غدة مع ملقط وشريحة من خلال الغدة مع زوج من ملقط حاد. إزالة الجزء القريب من الغدة والقناة القذفية لتترك وراءها نهاية البعيدة من الغدد التي تحتوي على مجموعة نادرة من الخلايا الثانوية المسؤولة عن إفراز البروتينات المشاركة في التزاوج.
- قبل البدء في الإجراء، وقطع ولهب الجولة، واسعة 200 نصائح ميكرولتر للتعامل مع الغدد، وتمرير فتح تلميح من نصائح متعددة 1000 ميكرولتر بالقرب من لهب لمدة تقل عن ثانية واحدة لتضييق الفتحات.
مسح الزوج الغدة التبعي من جميع الأنسجة الأخرى، بما في ذلك الخصيتين ولمبة القذف، ونقل الغدد الملحقة إلى لوحة زجاجية تحتوي على مصل مكمل متوسط في درجة حرارة الغرفة.
باستخدام زوج ثان من ملقط، وقطع الأنسجة مع طرف حاد لفصل المنطقة القريبة من الغدة الملحقة والقناة القذفية من جزء من الغدة التي تحتوي على خلايا ثانوية.
