Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- C. elegans vücudu boyunca sinüzoidal dalgalar üreterek yan hareket eder.. Dalgalar baştan kuyruğa yayıldığında hayvan ileri yönde hareket eder.. Ters yönde, sinüzoidal dalgalar kuyruktan başa yayıldığında solucan geriye doğru hareket eder.
Geri dönüşler olarak bilinen geriye doğru hareket kısadır ve ya kendiliğinden meydana gelir ya da duyusal bir uyaran tarafından tetiklenir, örneğin solucanın ön kısmına hafif bir dokunuş. Ön dokunma alışkanlığı testini gerçekleştirmek için, istenen gelişim aşamasının önceden senkronize edilmiş solucanlarını unseedED NGM plakalarında izole edin.
Sterilize edilmiş ince bir saç kullanarak, vücudun ön kısmına yumuşak bir dokunuş gerçekleştirin. Bu, solucanın ters çevirme yaptığı bir kaçış tepkisi ortaya çıkarır. Solucanın iyileşmesi ve dokunuşu tekrar etmesi için 10 saniyelik bir uyaran aralığına izin verin. İlişkisel olmayan bir öğrenme biçimi olan alışkanlığı değerlendirmek için, bir geri dönüş gözlenene kadar dokunma sayısını kaydedin.
Örnek protokolde, ön dokunma alışkanlığı tahlilinin bir gösterimini göreceğiz.
- İlk olarak, yaklaşık 10 senkronize genç yetişkin solucanı yeni unseedED NGM plakalarına aktarmak için ateş steril 30-gauge platin tel çekme kullanımı. Solucanları yeni tabağa alışmaları için beş dakika boyunca bozulmadan bırakın. Daha sonra, ahşap bir şiş veya kürdanın ucuna bağlı bir kaş kılını% 70 etanol içine daldırarak sterilize edin.
Temiz, tüy bırakmayan bir doku ile silin ve etanollerin buharlaşması için bir dakika bekleyin. Kaş kıllarını kullanarak solucanın kafasına hafifçe dokunun. Solucanın iyileşmesini sağlamak için dokunuşlar arasında 10 saniye izin vererek dokunuşları tekrarlayın.
Solucan artık geriye doğru hareket edene kadar 10 saniyelik uyaran aralıklarına izin vererek dokunmaya devam edin.
- Dokunuşlar arasında 10 saniyelik bir aralığa izin vermek önemlidir, çünkü bu hayvan iyileşme süresine izin verir ve tutarlı alışkanlık davranışı tahlilleri elde edilmesine yardımcı olur.