Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- ללא גירויים חושיים, תנועת C. elegans היא בדרך כלל קדימה ומופרעת על ידי היפוכים ופניות - תמרוני ארגון מחדש אקראיים שגורמים לשינוי כיוון. C. elegans הם electroreceptive. כלומר, הם יכולים לחוש שדות חשמליים.
כדי להתבונן בצורה מדויקת יותר בתנועה של התולעת, הנח את החיה במכשיר מיקרופלואידי והחל שדה חשמלי DC. הפוך את כיוון השדה, והתולעת תפנה לכיוון ההפוך - לכיוון הקתודה. החל זרם לסירוגין, AC, והתולעת תעצור. השינוי המתחלף בכיוון השדה מציף את מערכות הנוירו-מוטור של התולעת, וכתוצאה מכך התנחם מחדש את שדה DC, והתולעת תחדש את התנועה קדימה לכיוון הקתודה.
בפרוטוקול הדוגמה הבא, נראה התקנה המדגימה מבחני אלקטרוטקסיס במכשיר מיקרופלואידי.
- התחל שלב זה על ידי הצבת המיקרו-ערוץ שזה עתה הורכב על שלב xy-movable של מיקרוסקופ עם מצלמה רכובה המחוברת לצג.
לאחר אישור כי ההתנגדות של המיקרו-ערוץ היא סביב 0.6 מגה-אוהם, לחבר את צינור היציאה של המיקרו-ערוץ למזרק חד פעמי.
כאשר צינורות המפרצון והשקע מתמלאים, לנתק את המזרק הידרו-סטטי לתפעל את הזרימה על ידי התאמת הגובה היחסי של הצינור למקם תולעת במרכז התעלה.
-אם אי פעם לא נהיה בטוחים אם הזרימה היא באמת אפס, נוכל לגרום להיפוך בתנועת התולעת על ידי שינוי הקוטביות של השדה החשמלי ולאחר מכן הערכת המהירות הליניארית של התולעת כשהיא מסתובבת.
- עכשיו, להגדיר את אספקת החשמל למתח המתאים. הפעל את האות החשמלי, ולאפשר דקה אחת של חשיפה מראש לתולעת להתאקלם לשדה, שבמהלכו התולעת צריכה להתחיל לנוע לכיוון הקתודה.
בסיום הניסוי, מוציאים את כל הנוזלים והתולעים מהתעלה.
